Videos para conteo microbiano

Por: Bonilla Flores Guadalupe Daniela

Una vez que hayan revisado los videos, por favor contesten lo siguiente:

1.- ¿Qué es una UFC?

Unidades Formadoras de Colonias

2.- ¿Cuál es el rango de UFC que debe tener una placa para efectuar un conteo microbiano?

30 a 300 UFC

3.- ¿Qué diferencia existe entre la técnica de conteo en superficie de placa y técnica de vaciado en
placa?

La forma de sembrar:

Superficie en placa Vertido en placa

Agregar 0.1 ml de dilución de muestra en la Se agrega 1 ml en una caja Petri estéril,
caja Petri con el medio sólido y distribuir la después agregar el medio de cultivo fundido a
muestra con un asa. temperatura de 45°C, homogenizar y dejar
solidificar.

4.- Se realiza un conteo microbiano por vaciado en placa y al efectuar el conteo en el cuenta
colonias se obtiene lo siguiente en una placa de dilución 10 -3 :

Cuadr Cantidad de UFC

o
1 1
2 1
3 2
4 1
5 3
6 1
7 5
8 1
9 3
10 3
11 5
12 4
13 1
Total de UFC = 31

Para cm 2< 10 Colonias

31 UFC * 5 = 155 UFC en dilución 10−3 / 1 ml de volumen de siembra

155 UFC ( 100
10 )( 1 )( 1 )
100 10
=155000 UFC de muestra/ 1ml de volumen de siembra

¿Cuál es la cantidad de microorganismos presentes en la dilución 10 -3?

155 UFC/ 1ml de volumen de siembra

¿Cuál es la cantidad de microorganismos presentes en la muestra original?

155000 UFC / 1 ml de volumen de siembra

5.- Al efectuar un conteo microbiano por superficie de placa se obtienen los siguientes resultados:

Dilución UFC
10 -1 47
10 -2 2
10 -3 0

47 UFC ( 101 ) 100 μL de volumen

−1 =
470 UFC
( 1000 μL
de siembra 1 mL ) =(
1 mL de volumen de siembra )
470000 UFC

2 UFC ( 101 ) 100 μL de volumen

−2 =
200UFC
( 1000 μL
de siembra 1 mL ) =(
1 mL de volumen de siembra )
20 0000 UFC

> 300 UFC / 100 μLde volumen de siembra DESCARTAMOS

=
( 1 mL de335
volumen de siembra )
000 UFC

Considerando la metodología para esta técnica, ¿cuántos microorganismos por ml tiene la

muestra?

( 1 mL de335000
volumen de siembra )
UFC

6.- ¿En qué consiste la prueba presuntiva en la técnica de NMP y para qué se hace?

Para clasificar, una reacción negativa excluya la presencia del grupo microbiano y una reacción
positiva indica su posible presencia.

Consiste:

Elegir una bacteria indicadora y en base a esta un medio para crecer esta bacteria.

Inocular 9 tubos con 10 ml de medio: se hacen 3 réplicas de diferente volumen de muestra (10
ml, 1 ml y 0.1 ml) para la muestra de 10 ml se una doble de la concentración del medio.

Incubar 37°C

7.- ¿En qué consiste la prueba confirmativa?

8.- ¿Cómo efectúa la cuenta de microorganismos por NMP?

9.- ¿Cuál sería el resultado de una prueba de NMP con los siguientes resultados para coliformes?

Tubos con 10ml Tubos con 1ml Tubos con 0.1ml

+-+ ++- - - -

10.- ¿Cuáles son los pasos de la técnica de conteo microbiano por filtración de membrana?

11.- ¿Por qué no se pueden evaluar directamente líquidos muy espesos, viscosos o con partículas
en suspensión?

12.- En un conteo por filtración de membrana se obtienen los siguientes resultados:

Dilución UFC
10 -1 35
10 -2 8
10 -3 2

¿Cuántos microorganismos tienen 100ml de la muestra?.

13.- ¿En qué consiste el conteo microbiano por medio de la escala de McFarland?

14.- ¿Cómo se preparan los estándares de McFarland?.