INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA

Práctica 4
“DETERMINACIÓN DE LOS PARÁMETROS
TERMODINÁMICOS DEL EQUILIBRIO DEL ZWITTERION-RODAMINA β
LACTONA”

Grupo 3MM1

Equipo 1

Integrantes del Equipo:

Díaz Olvera Arath Wenceslao
Domínguez Ríos Cesar Uriel
Flores Jasso Yazel Itahí
Sanabria Ruiz Juan José

Nombres de los profesores:

Castillo Ortiz Alberto

Santiago Quintana José Martín

Fecha de entrega 24/04/2023

Objetivos.
● Determinar los valores de ΔH0, ΔS0 y ΔG0 para la reacción de equilibrio de la
Rodamina β lactona-Zwitterion.
● Determinar el efecto de la Temperatura sobre el equilibrio de la Rodamina β lactona-
Zwitterion.
● Determinar el efecto del disolvente sobre el equilibrio de la reacción de la Rodamina
β lactona-Zwitterion.
Resultados.
Experimento 1: Determinación de la longitud de onda de máxima absorción de la
Rodamina β lactona en etanol.
Se puso la muestra de etanol puro para fijar el 0 en el equipo, posteriormente se puso una
celda de 1 cm de grosor y se realizó el barrido, determinando a incrementos de 5 mm las
absorbancias respectivas (la absorbancia es adimensional por lo que no se le ponen
unidades).

Tabla 1. Experimento 1: Datos experimentales

De la tabla se deduce que la longitud de onda a la que se alcanza la máxima absorbancia
es 545 nm.

Experimento 2: Determinación del efecto de la temperatura

Para el experimento número 2 tomamos nota de la temperatura a estado ambiente antes de
dar una baño de agua caliente que nos permitió llevar la temperatura de la muestra a una
temperatura de 45°C aproximadamente, posterior a eso se colocó en la celda del
espectrofotómetro, en donde se registró la temperatura y la absorbancia. Previamente
ajustamos el 0 en la celda blanco del disolvente. En intervalos de 5°C se iba midiendo la
absorbancia conforme la temperatura decaía, como se muestra en la tabla 2.

Tabla 2. Experimento 2: Datos experimentales

Análisis de resultados.

Experimento 1: Determinación de la longitud de onda de máxima absorción de la

Rodamina β lactona en etanol.

Para comprobar que la absorbancia se obtiene a la longitud de onda 545 nm se procede a

hacer la gráfica “Absorbancia vs. Longitud de onda”:
Gráfica 1. Absorbancia en función de la longitud de onda de una solución de Rodamina en etanol 8x10 -6M.

La importancia de encontrar la longitud de onda en la que se da la absorción máxima radica

en que sirve como parámetro de calibración de espectrofotómetro, la ley de Lambert-Beer
establece que la absorbancia es el proporcional al grosor de la celda, la concentración del
soluto a examinar y al coeficiente de extinción molar. Nuestro interés en tomar el valor
máximo de absorbancia posible radica en que entre más grande sea esta medida, más fácil
será detectar un cambio al alterar parámetros de la solución como lo es la temperatura, por
lo que esto contribuirá a que también se puede observar un cambio notable en el valor de la
concentración al variar dichos parámetros.

Experimento 2: Determinación del efecto de la temperatura

Si analizamos la tabla 2 podemos notar que en todas las soluciones se cumple que a mayor
temperatura menor es la absorbancia, debido a que esta tiene una relación directa con la
concentración del Zwitterion de Rodamina (esto se verá más adelante), es decir, conforme
se aumenta la temperatura el equilibrio tiende a que la concentración de Rodamina β
lactona sea mayor, con ello se comprueba lo que dice la teoría, el incremento de
temperatura favorece la formación de lactona.

El valor de la constante dieléctrica de un disolvente está asociado con la capacidad que

éste tiene para disolver moléculas de un soluto a través de la polarización de las mismas.
Se considera que mientras más grande es la constante dieléctrica de un disolvente este es
más polar y en consecuencia es más polarizante.
ε Etanol =25.7
Como ya se mencionó anteriormente, se toma la longitud de onda de máxima absorbancia
cómo 545 nm para el etanol, se obtuvieron los datos de la tabla 2 y con esto se obtiene la
energía libre de Gibbs, la entalpia de reacción y la entropia de reaccion en condiciones
estandar.
Como se indicó en clase y como dice en el manual, sabemos que la absorbancia se puede
obtener mediante la fórmula: A=εdC donde:
4 L
● ε =13 ×1 0 es el coeficiente de extinción molar del Zwitterion
mol cm
● d= 1 cm es el diámetro de la celda
● C es la concentración del Zwitterion
Con esto podemos despejar C y encontrar la concentración de Zwitterion a partir de la
A
absorbancia. [Z ]=C= . Una vez se conoce [Z] sabemos que la suma de esa
εd
concentración con la de la Rodamina β lactona debe de darnos la concentración total de
Rodamina en la solución, que es 8 x 10-6 M, puesto que cada molécula de rodamina es de
tipo Lactona o Zwitterion por lo tanto: [Lactona]=[L]=[Rodamina]-[Z]= 8 x 10 -6 -[Z]. Teniendo
estas 2 concentraciones podemos determinar la constante de equilibrio que será
[Z ]
propiamente: K eq = . El determinar esta constante de equilibrio nos será útil para calcular
[ L]
el cambio de energía libre de Gibbs.
Δ G °=−RTln (K)=ΔH °−TΔS ° (1)

Donde R es la constante del gas ideal, T es la temperatura en Kelvin y K es la constante de

equilibrio. Por otro lado, se puede obtener la energía libre de Gibbs mediante la temperatura
en Kelvin y la entalpía y entropía en condiciones estándar, de las últimas 2 expresiones
podemos obtener la siguiente expresión despejando ln(K):
ΔS ° ΔH ° 1
ln (K)=
R
−
R T ()
1
De lo cual se obtiene una relación lineal entre ln(K) y , cómo podemos calcular K para
T
distintos valores de T y tanto la entropía como la entalpía son constantes entonces
podemos realizar un ajuste lineal para obtener valores experimentales de la ordenada al
origen y la pendiente, términos que podemos igualar con la ecuación anterior para obtener:
Δ S °=bajuste R , ΔH °=−majuste R
Por último, para obtener la energía libre de Gibbs en condiciones estándar se calcula K para
la temperatura de 25°C y se usa en la ecuación (1).

A continuación, se presentan los cálculos para la solución de etanol:

3❑
[ A (T )][ρ(15 ° C)] (0.94007)∗(0.795 g /c m )
A25 ° C =0.94007[Z ]= = −1 −1
=7.30482 ×1 0−6 M
[εd ][ ρ(T )] 4 3
(1 cm)(13 ×1 0 L mol c m )∗(0.787 g/c m )
−6 −7
[ L]=[Rodamina]−[Z ]=8 ×1 0 −7.30482× 10−6=6.9518 ×1 0 M
[Z ] 7.30482 ×1 0−6 M
K= = =10.507732
[ L] 6.9518 × 10−7 M
J J
Δ G °=−8.3145 ∗(25+273.15) K∗ln(10.507732)=−5830.8094
K mol mol
Se procede a calcular las constantes de equilibrio para las diferentes temperaturas se
obtiene la siguiente tabla:
 Experimento 2: Datos de ajuste lineal del Etanol

T (°C) K 1/T Ln(K)

25 10.5077326 0.00335402 2.35211142

30 7.79608857 0.0032987 2.05362214

35 5.78912834 0.00324517 1.75598173

40 3.97998223 0.00319336 1.38127736

45 3.57216148 0.00314317 1.27317087

Tabla 2. Datos para realizar la gráfica de ln(K) vs 1/T y su ajuste lineal para la solución de Etanol 8x10 -6M

Se realiza la gráfica siguiente:

Gráfica 2. Ajuste lineal de la gráfica ln(K) vs 1/T, solución de Rodamina en Etanol 8x10 -6M.

Y el ajuste lineal nos arroja los valores m=5377.36146 (pendiente), b=-15.696431 (ordenada
al origen) y el coeficiente de correlación elevado al cuadrado (r2) nos da 0.967 lo cual es
muy cercano a 1 y significa que el ajuste describe bien el comportamiento de los datos
experimentales (esto se puede comprobar en la memoria de cálculo).

Con estos valores de “m” y “b” tenemos que:

Δ S °=bajuste R=(−15.696431)∗ 8.3145 ( J

K mol )
=−130.507979
J
K mol

Δ H °=−majuste R=−(5377.36146)∗ 8.3145 ( J

K mol )
∗(1 K )=−44710.0719
J
K mol
Nótese que en la entalpía se multiplicó por 1K esto para compensar que las unidades sean
correctas en la ecuación (1) pues al graficar se pierde por completo el sentido de las
unidades.
Parámetros experimentales a
temperatura estándar.

ΔS° -130.507979

ΔH° -44710.0719

[Z] 7.30482E-06

[L] 6.95185E-07

K 10.50773258

ΔG° -5830.80936
Tabla 3. Parámetros de solución a temperatura estándar (25°C).

Conclusiones.
La práctica también permitió observar la importancia de considerar factores externos al
trabajar con una reacción de equilibrio, ya que la temperatura y el disolvente pueden tener
un impacto significativo en la reacción. Estos resultados son consistentes con la literatura
existente sobre la Rodamina β lactona-Zwitterion y las propiedades termodinámicas de las
reacciones de equilibrio.

A partir de los datos obtenidos, se utilizó la ley de Beer para calcular la concentración de la
especie absorbente en cada punto de la curva de absorbancia. Luego, se realizó una
regresión lineal para obtener la constante de equilibrio K para la reacción de la Rodamina β
lactona-Zwitterion. A partir de este valor de K, se calcularon los parámetros termodinámicos
ΔH0, ΔS0 y ΔG0 utilizando las ecuaciones de van't Hoff y de Gibbs-Helmholtz. Además, se
realizaron experimentos a diferentes temperaturas y con un mismo disolvente para
determinar su efecto sobre el equilibrio de la reacción.

Se ha encontrado que la entalpía de la reacción es negativa, lo que indica que la reacción

es exotérmica. La entropía de la reacción es negativa, lo que indica un hay una disminución
en la cantidad de desorden o aleatoriedad en un sistema después de una reacción. La
energía libre de Gibbs también resultó negativa, lo que indica que la reacción es
espontánea.

Bibliografías/Referencias.
● Chang, R. (2017). “Química”. Décimo segunda edición. México; McGraw-Hill.
ISBN: 978-607-15-0307-7. Pp. 239-241, 616-618, 803-804
● Díaz, N. (2017). “Espectrofotometría; espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas”. Facultad de Medicina. Campus Universitario de
Rabanales. Argentina; Córdoba. ISBN: 978-5-4244-5929-0. Pp. 1-8
● Fasoli, H. (1986). “Aplicaciones analítica de la rodamina beta y de otros colorantes
derivados del xanteno y del trifenilmetano”. Tesis Doctoral. FCEN-Universidad de
 Buenos Aires. Argentina; Buenos Aires. ISBN: 978-7-8313-8433-2. Pp.11
● CENGEL Y. & BOLES, M. (2002). “Termodinámica”. 7º edición. México:
McGraw-Hill [consulta: 06 marzo 2021] ISBN: 978-607-15-0743-4 Pp. 430-437, 448.
● LEVINE, N. (2004). “Fisicoquímica”. 5º edición. México: McGraw-Hill [consulta:
17 de marzo del 2021] ISBN: 0-07-253495-8