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Nota:
1. El porcentaje de participación de cada integrante debe ser asignado por el grupo y colocado en un rango de 0% a 100%. La
nota de cada integrante será calculada de acuerdo con el porcentaje de participación y la nota del informe. Por ej.: Si la nota
del informe es 20 y el porcentaje de participación del integrante es del 100%, la nota que le corresponde al integrante es de
20.
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I. INTRODUCCIÓN
El siguiente informe habla sobre la permeabilidad del tejido membrana
citoplasmática (difusión y diálisis). En esta oportunidad veremos una de
las principales funciones de la membrana celular, la cual es proteger a la
célula, y controlar todo lo que sale y entra. Hablaremos acerca de la
difusión, que es básicamente la velocidad con la que las moléculas se
disuelven completamente dependiendo de las temperaturas a las cuales
están sometidas cada tubo de ensayo con azul de metileno. También
hablaremos acerca de la diálisis, que es básicamente la difusión de las
moléculas a través de la membrana semipermeable. Utilizaremos al
buche del pollo como membrana celular, con el cual realizamos distintas
pruebas para determinar la permeabilidad. Finalmente, utilizaremos
reactivos para identificar las biomoléculas.
Fuente: A. ARRAZOLA. (1994). Biología de la membrana celular. Sociedad española de
Nefrología, 14(4), 0-511.
https://www.revistanefrologia.com/es-biologia-membrana-celular--articulo-X0211699594
00663X
Fuente:
http://www.geocities.ws/ciencia_basica_i/ejm_difusion.html
Difusión de moléculas. El movimiento aleatorio de soluto (partículas
disueltas) y solvente (moléculas de agua) dará como resultado una
solución distribuida uniformemente.
DIALISIS
La diálisis es una forma de filtración molecular. Es un proceso que separa
moléculas de acuerdo con su tamaño, mediante el empleo de membranas
semipermeables que contienen poros de dimensiones inferiores a las
macromoleculares. Estos poros permiten que moléculas pequeñas, tales
como las de los disolventes, sales y metabolitos pequeños, se difundan a
través de la membrana pero bloqueen el tránsito de moléculas mayores.
La diálisis se emplea rutinariamente para cambiar el disolvente en el que
se encuentran disueltas las macromoléculas. Una disolución
macromolecular se introduce en el saco de diálisis, que se sumerge en un
volumen relativamente grande de disolvente nuevo. Las moléculas
pequeñas pasan a través de la membrana al fluido externo hasta que se
alcanza el equilibrio, las macromoléculas permanecerán en el interior de
saco de diálisis. El proceso puede repetirse varias veces a fin de sustituir
completamente un sistema disolvente por otro.
Fuente:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20ultrafil
tracion.pdf
Fuente:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20ultrafil
tracion.pdf
III. OBJETIVOS:
● En el laboratorio aprenderemos sobre la permeabilidad de
la membrana citoplasmática (difusión y diálisis).
● Identificar las características de permeabilidad de la membrana
celular.
● Describir mecanismos de difusión y diálisis a nivel molecular.
● Enumerar factores que afectan la velocidad de difusión.
● Desarrollar habilidades en el trabajo de laboratorio.
● Comprender el fundamento de la hemodiálisis por medio de la
experimentación.
● Identificar los factores que afectan la integridad de las membranas.
Fuente:
https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/
168/2018/09/membranas.pdf
IV. MATERIALES
MATERIALES DEL LABORATORIO
● 20 cm de pabilo
● 2 palitos de anticucho
● 1 huevo por todo el laboratorio (para preparar solución de albúmina)
● 4 hojas de afeitar
● 2 buches limpios de pollo
V. PROCEDIMIENTO:
1. Difusión (factor temperatura): En este primer experimento, se
estudiará el movimiento browniano. Se colocará en un beacker
40mL de agua a temperatura ambiente; en el segundo se coloca 40
mil de agua helada y un tercero, 40 mil de agua caliente. En cada
uno de ellos agregamos unas gotas de azul de metileno (tratando de
no agitar mucho el agua). Luego anotamos observaciones pasados
unos 5 minutos.
2. Diálisis #1 (de afuera hacia adentro): En un extremo atar el
buche del pollo con pabilo y en otro extremo añadir con un
embudo 40 mil de solución de almidón al 1%. Luego cierre el
orificio del buche con el pabilo colgándolo de un palito de
anticucho, colocarlo en un beaker que contenga 150 mil de agua
con varias gotas de solución de Lugol hasta que tenga un color
dorado. Esperar 30 minutos para que el buche dentro del
recipiente repose con la solución.
3. Diálisis #2 (de adentro hacia afuera): En un extremo atar el
buche de pollo con hilo pabilo, usando un embudo agregamos 40
mil de Cloruro de Sodio al 30% y 40 mil de solución de albúmina al
0.5%. Luego procedemos a cerrar el extremo que quedó abierto,
mezclar y con ayuda de un palito de madera, colocar en un beaker
que contenga 150 mil de agua destilada. Dejar actuar por 30
minutos. Retirar del beaker y proceder a verter 6 mil de la mezcla
de dentro del buche a un tubo de ensayo y adicionar 4 gotas de
reactivo de biuret. Anotar los cambios de color de cada uno de los
tubos. Además a la solución del beaker añadir 5 gotas de nitrato de
plata (AgNO3) y anotar los cambios de color.
VI. RESULTADOS
EXPERIMENTO # 1 (Difusión - factor temperatura):
● En el tubo de ensayo a 40 °C: Se observa que el azul de metileno
se ha diluido completamente y se observa un color uniforme.
● En el tubo de ensayo a 4 °C: Se observa que el azul de metileno
no se ha diluido completamente, no hay uniformidad, pero si
precipitación.
EXPERIMENTO #2 (Diálisis de afuera hacia adentro):
● Al soltar el líquido que se encontraba en el buche del pollo, se
observa un cambio ligero, un color pálido, no nítido y difícil
de distinguir.
EXPERIMENTO #3 (Diálisis de adentro hacia afuera):
Afuera del buche:
● Podemos deducir que la albumina que extraemos del huevo, no
salió de la membrana del buche del pollo.
● Cuando agregamos 5 gotas de nitrato de plata se observa un
color azul muy claro (bebe).
Dentro del buche:
● En el tubo de ensayo en la parte superficial se puede observar
el color violeta por la presencia de proteínas.
VI. DISCUSIÓN:
EXPERIMENTO # 1 ((Difusión - factor temperatura):
Después de los 5 minutos, se observa una reacción lógica, ya que en el tubo de 4
°C al estar en bajas temperaturas no se ve un color uniforme, sin
embargo, en el tubo de 40 °C al estar en altas temperaturas, se observa un
color uniforme, porque se han disuelto todas las partículas.
EXPERIMENTO # 2 ((Diálisis de afuera hacia adentro):
Después de los 30 minutos se observó que dentro del buche no cambio el
color del almidón (polisacárido). Algunas de las posibilidades por lo que
ocurrió esto pueden ser que el Lugol del medio externo no fue suficiente
para teñirlo. Otra de las posibilidades es que no se condujo una buena
difusión porque había mucho tejido colectivo que impedía el paso del
Lugol hacia el interior del buche. Ya que el Lugol reconoce el almidón y
cambia a color azul.
EXPERIMENTO #3 (Diálisis de afuera hacia adentro):
Al verter 4 gotas de biuret al tubo de ensayo que contenía la mezcla dentro
del buche se aprecia que cambio de color a violeta debido a que reconoce
proteínas (cadenas polipeptídicas cortas), una de estas la albúmina.
También se pudo apreciar que el cloruro de sodio pudo atravesar el
buche, ya que al añadir nitrato de plata en el tubo de ensayo con la
solución exterior del beaker, reconoció al cloruro de sodio ya que es un
ion cambiando a color blanco.
VII. CONCLUSIONES:
● La velocidad de difusión se afecta con la variación de la
temperatura a mayor temperatura el azul de metileno se esparcirá
más rápido y uniformemente, pero cuando la temperatura es muy
baja el azul de metileno no se esparcirá en manera no se diluirá
entonces el líquido se precipitará.
● Célula eucariota animal (membrana semipermeable) tan solo
deja pasar a las moléculas de bajo peso molecular que fueron en
este caso los iones disociados del cloruro de sodio a través de la
gradiente de concentración mediante la diálisis.
● Moléculas que tienen alto peso molecular tale como la albumina
no pueden pasar por la bicapa siendo impermeables a esta. Por lo
tanto no realiza diálisis.
REFERENCIAS:
● A. ARRAZOLA. (1994). Biología de la membrana celular.
Sociedad española de Nefrologia, 14(4), 0-511. Disponible en:
https://www.revistanefrologia.com/es-biologia-membrana-celular--artic
ulo-X021169959400663X
● BIOTEC. (s.f). DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS. Disponible en:
https://www.bioted.es/protocolos/DIFUSION-OSMOSIS.pdf.
● Amorós, Leslie Amaya, Eugenia Errico, Mariana Lambertucci,
Mauro Miers, Jessica Mogro, Ezequiel Quispe, Leonardo Recalt,
Micaela Tocho, Eugenia. (2013). Diálisis y Ultrafiltración.
Bioquimica. Disponible en:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20
ultrafiltracion.pdf
● Miers J, Tocho E, Recalt M. Diálisis y Ultrafiltración
[Internet].Ufq.unq.edu.ar. 2013. Disponible en:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20
ultrafiltracion.pdf
● Pendse S, Singh A, Zawada E. INITIATION OF DYALISIS.
En: Handbook ofdyalisis. 4th ed. New York, 2008: 14-21.
● https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/
168/2018/09/membranas.pdf
RÚBRICA PARA LA EVALUACIÓN DE INFORME DE LABORATORIO
DESEMPEÑO
Puntuación ASPECTO A
EVALUAR LOGRADO (3) EN PROCESO (2) NO LOGRADO (0) TOTAL
Se ajusta completamente al No incluye todos los datos
formato institucional y Se ajusta al formato solicitados y los
1 Caratula y posee toda la información establecido, pero omite presentados están muy
presentación requerida para la datos relevantes de la desordenados. No se ajusta
presentación del informe. presentación al formato de
presentación.
Las fuentes de
información La mayoría de los
excelentemente conceptos están Algunos supuestos están
integradas con el material sustentados. Presentan evidenciados y justificados.
práctico, coherente alguna desconexión en la Las citas se integran de
Introducción
redacción. redacción y no están del modo deficiente, pobre o
1 Muy buen uso de las todo claras respecto a lo débil integración de fuentes
(marco teórico
fuentes secundarias. Lo desarrollado en el secundarias. Redacción
y objetivos de la
presentado argumenta laboratorio. Objetivos insuficiente de objetivos, se
práctica)
totalmente el tema. del experimento omite algunos propósitos
Redacción de los objetivos redactados con pequeñas del laboratorio. Uso no
completamente ajustada al omisiones y errores de adecuado de verbos
desarrollo experimental de redacción
la práctica de laboratorio.
Correcto uso de verbos.
20 Nota