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B0219305 B0219306

Agua Peptonada Bufferada


USO Esterilizar en autoclave a 121° C durante 15 minutos.
Medio de cultivo empleado para el preenriquecimiento de microorga- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
nismos a partir de diferentes muestras. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Es ampliamente utilizado en los protocolos de control higiénico de deslizamiento.
alimentos para la búsqueda de Salmonella spp. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.

FUNDAMENTO ALMACENAMIENTO
Edel y Kampelmacher observaron que las diversas técnicas de con- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
servación de alimentos tales como el calor, la desecación, el uso de Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
conservantes, la alta presión osmótica o las modificaciones de pH
causan problemas en la recuperación de las células dañadas de PROCEDIMIENTO
Salmonella. Siembra
La idea de utilizar un caldo de preenriquecimiento como medio no Materia fecal: a un tubo conteniendo 10 ml de Agua Peptonada
selectivo les permitió una mejor recuperación de Salmonella. Bufferada, agregar 1 gramo o 1 ml de una suspensión de materia
El Agua Peptonada Bufferada mantiene un pH alto durante el pe- fecal o descargar el contenido del hisopo.
ríodo de preenriquecimiento y anula los efectos del daño celular Alimentos: suspender 25 g o agregar 25 ml del alimento en 225 ml
que pueden ocurrir a pH ácido. Esto es particularmente importante de Agua Peptonada Bufferada.
en las muestras de vegetales que tienen una baja capacidad regu-
ladora. También puede ser utilizado para evaluar alimentos de aves Incubación
de corral. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-24 horas.
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente de carbono, nitroge- En el caso de utilizarse para el preenriquecimiento de especies de
no, vitaminas y minerales. El cloruro de sodio mantiene el balance Salmonella, subcultivar en Selenito Cistina Caldo ( ) o en
osmótico y los fosfatos forman un sistema buffer que regulan el pH Tetrationato Caldo Base ( ).
del medio.
En los protocolos de búsqueda de Salmonella spp., subcultivar en INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Selenito Cistina Caldo ( ) y/o en Tetrationato Caldo Base El crecimiento microbiano se observa por la turbidez del medio de
( ).
CONTROL DE CALIDAD
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
Código B0219305: envase x 100 g MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
Código B0219306: envase x 500 g Staphylococcus aureus Satisfactorio
ATCC 6538
FÓRMULA (en gramos por litro) Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio
PEPTONA DE CARNE ....................................................................................................10.0 ATCC 9027
CLORURO DE SODIO ........................................................................................................ 5.0 Salmonella typhimurium Satisfactorio
FOSFATO DISÓDICO............................................................................................................. 3.5 ATCC 14028
FOSFATO MONOPOTÁSICO.......................................................................................... 1.5 Salmonella enteritidis Satisfactorio
pH FINAL: 7.2 ± 0.2 ATCC 13076
Escherichia coli Satisfactorio
ATCC 25922
INSTRUCCIONES Escherichia coli Satisfactorio
Disolver 20 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 ATCC 8739
minutos. Mezclar calentando hasta ebullición durante 1 minuto y
distribuir en recipientes apropiados.

HOJA 1 DE 2
Agua Peptonada Bufferada

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO mismo según reglamentaciones vigentes.


Medio sin inocular Sin cambios
REFERENCIAS
cultivo. - Cruickshank, R. Medical Microbiology, 11th ed., London: Livings-
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS tone LTD, 1968, p.268.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Edel, W., and E.H. Kampelmacher. 1973. Bull. World Health Orga-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- nization, 48: 167-174.
miento. - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
PRECAUCIONES timore, Md.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo. - Grasmick. 1992. In Isenberg (ed.), Clinical microbiology procedu-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado. res handbook, vol. 1. American Society for Microbiology, Washing-
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio- ton, D.C.
ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto. microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani-
pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
blecidas por el laboratorio. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0215205 B0215206

Agua Peptonada
USO ALMACENAMIENTO
Medio utilizado como diluyente y para el enriquecimiento bacteriano a Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
partir de alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

FUNDAMENTO PROCEDIMIENTO
Medio de enriquecimiento no selectivo, en el cual la peptona pro- Siembra
porciona nutrientes necesarios para el desarrollo microbiano y el Directa a partir del material en estudio.
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. Permite recuperar
células de enterobacterias dañadas por procesos fisicoquímicos a Incubación
los que ha sido sometido el alimento. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-48 horas.
Además puede ser utilizado como diluyente de muestras en reem-
plazo de solución fisiológica y como medio base para la fermenta- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
ción de hidratos de carbono. En este último caso se debe adicionar El crecimiento microbiano se observa por turbidez.
el indicador de Andrade y el hidrato de carbono en cuestión en
concentración final al 1%. CONTROL DE CALIDAD

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN MICROORGANISMOS CRECIMIENTO


Código B0215205: envase x 100 g Escherichia coli
Código B0215206: envase x 500 g ATCC 25922 Satisfactorio
Escherichia coli
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 8739 Satisfactorio
Peptona de carne ...................................................................................................10.0. Staphylococcus aureus
Cloruro de sodio ........................................................................................................ 5.0. ATCC 6538 Satisfactorio
pH final: 7.2 ± 0.2 Pseudomonas aeruginosa
ATCC 9027 Satisfactorio
INSTRUCCIONES Salmonella typhimurium
Suspender 15 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar ca- ATCC 14028 Satisfactorio
lentando hasta ebullición durante 1 minuto. Distribuir en recipientes
apropiados. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO Medio sin inocular Sin cambios
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.

HOJA 1 DE 2
Agua Peptonada

Materiales necesarios no provistos - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mismo según reglamentaciones vigentes.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Referencias
- Cruickshank, R. Medical Microbiology, 11th ed., London: Livings-
Precauciones tone LTD, 1968, p.268.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
sivo. maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- timore, Md.
ñado. - Grasmick. 1992. In Isenberg (ed.), Clinical microbiology procedu-
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- res handbook, vol. 1. American Society for Microbiology, Washing-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. ton, D.C.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
to. microbiology, 10th ed. Mosby, Inc. St. Louis, Mo.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Indicaciones al consumidor
establecidas por el laboratorio. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
va apropiadamente.

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Azida Glucosa Caldo


USO Si se realiza el recuento mediante la técnica del Número mas Pro-
Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de enterococos en bable:
aguas, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. Es el mé- - Caldo simple concentración: inocular 1 mililitro de muestra.
todo de elección para el recuento de enterococos mediante la técnica - Caldo doble concentración: inocular 10 mililitros de muestra.
del Número Mas Probable.
Incubación
FUNDAMENTO En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-48 horas.
La tripteína y el extracto de carne son la fuente nutritiva para el
desarrollo bacteriano ya que proveen péptidos, aminoácidos, nitro- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
geno, vitaminas y cofactores. La glucosa es el hidrato de carbono - Positivo: turbidez en el medio de cultivo.
fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y la - Negativo: el medio permanece límpido.
azida sódica inhibe el crecimiento de la flora Gram negativa que
pudiere estar presente en la muestra.
CONTROL DE CALIDAD
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
Código B0220105: envase x 100 g MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
Código B0220106: envase x 500 g Enterococcus faecalis
ATCC 29212 Satisfactorio
FÓRMULA (en gramos por litro) Escherichia coli
Tripteína...................................................................................................................................15.0. ATCC 25922 Inhibido
Extracto de carne...................................................................................................... 4.8.
Glucosa........................................................................................................................................7.5.
Cloruro de sodio...........................................................................................................7.5. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Azida sódica........................................................................................................................... 0.2. Medio sin inocular Sin cambios
pH final: 7.2 ± 0.2
Limitaciones
INSTRUCCIONES El crecimiento microbiano en el medio de cultivo brinda un diag-
Suspender 35 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 nóstico presuntivo. Es necesario realizar pruebas bioquímicas de
minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuente- identificación bacteriana.
mente y hervir 1 minuto hasta disolver completamente. Distribuir en
recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
15 minutos. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO miento.
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
lizamiento. PRECAUCIONES
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusi-
vo.
ALMACENAMIENTO - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. ñado.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio-
ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
PROCEDIMIENTO - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Siembra - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani-
Por inoculación directa del material en estudio. pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta-

HOJA 1 DE 2
Azida Glucosa Caldo

blecidas por el laboratorio. - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva biological Examination., Standard Methods for the Examination of
apropiadamente. Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
mismo según reglamentaciones vigentes. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
REFERENCIAS
- Rothe. 1948. Illinois State Health Department. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
timore, Md.

00

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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B0224105 B0224106

Bacillus cereus Selectivo Agar


(según Mossel)
USO durante 1 minuto hasta disolución completa. Distribuir en recipien-
Medio diagnóstico utilizado para el aislamiento y recuento de Bacillus tes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 mi-
cereus en alimentos. nutos. Enfriar a 50°C y asépticamente agregar 50 ml de emulsión
yema de huevo (Emulsión Yema de Huevo Sin Telurito - REF
FUNDAMENTO B0360261).
Bacillus cereus ha sido implicado en toxoinfecciones alimentarias, Si se desea el aislamiento selectivo de Bacillus cereus, agregar al
particularmente asociado al consumo de arroz contaminado, y tam- medio fundido y enfriado a 50 ºC, el contenido de 1 vial de Bacillus
bién en algunos procesos infecciosos en seres humanos y anima- cereus Suplemento (REF B0360632) reconstituido con 2 ml de
les. agua purificada estéril.
El medio de cultivo, contiene los nutrientes necesarios para el apro- Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.
piado desarrollo bacteriano.
Es diferencial debido a la presencia de manitol. Bacterias fermenta- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
doras de manitol, acidifican el medio produciendo el viraje del indi- Medio de cultivo deshidratado: color rosado salmón, homogéneo,
cador de pH rojo de fenol del rojo al amarillo, mientras las bacterias libre deslizamiento.
que no lo fermentan, producen colonias del color del medio. Medio de cultivo preparado: color amarillo anaranjado.
La adición de emulsión de yema de huevo, mejora el aislamiento
y la esporulación de esta bacteria, además favorece y facilita la ALMACENAMIENTO
visualización de las colonias de Bacillus cereus ya que se produce Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
un halo de precipitación de la lecitina hidrolizada alrededor de las Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
mismas.
Puede lograrse el aislamiento selectivo de Bacillus cereus, inhibien- PROCEDIMIENTO
do el desarrollo de la flora acompañante presente en la muestra, Siembra
por el agregado del suplemento para Bacillus cereus con el que se - Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
obtiene una concentración final de 100 U de Polimixina B por ml - Si se trabaja con muestras de alimentos y se debe hacer recuento
de medio. microbiano, proceder de la siguiente manera:
Homogeneizar 10 g de la muestra en 90 ml de agua peptonada
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN 0.1%. Si es necesario efectuar diluciones.
Código B0224105: envase x 100 g. Inocular una alícuota determinada (ejemplo 0,1 ml) sobre la superfi-
Código B0224106: envase x 500 g. cie del medio de cultivo y esparcirla en toda su superficie.

FÓRMULA (en gramos por litro) Incubación


PEPTONA DE CARNE......................................................................................................10.0 En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 - 48 horas.
EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................... 1.0
MANITOL.......................................................................................................................................10.0 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................10.0 El diagnóstico primario y presuntivo de Bacillus cereus, se basa en
ROJO FENOL....................................................................................................................... 0.025 la morfología y color de la colonia, en la precipitación de la lecitina
AGAR................................................................................................................................................15.0 hidrolizada y en la no fermentación de manitol.
pH FINAL : 7.2 ± 0.2 Bacillus cereus presenta colonias de tamaño aproximado de 5 mm,
rojas, rugosas y secas, con halo de precipitación de la yema de
INSTRUCCIONES huevo sobre fondo rosa-púrpura.
Supender 46,0 g del polvo en 950 ml de agua purificada. Dejar
reposar 5 a 10 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir

HOJA 1 DE 2
Bacillus cereus Selectivo Agar (según Mossel)

CONTROL DE CALIDAD - Bacillus megaterium y Bacillus coagulans son completamente inhi-


bidos en este medio de cultivo.
Corresponde al medio de cultivo suplementado con yema de huevo - Se recomienda la realización de un examen microscópico para eva-
y polimixina B, siguiendo las instrucciones de preparación descrip- luar la presencia de glóbulos de lípidos en las células vegetativas, de-
tas previamente. bido a que es una prueba rápida y confirmatoria de Bacillus cereus.

MICROORGANISMOS CRECIMIENTO COLOR DE PRECIPITADO MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS


LA COLONIA Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Bacillus cereus calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
ATCC 10876 Satisfactorio Rojo + miento.
Staphylococcus aureus
ATCC 6538 Satisfactorio Blanco-Amarillo + PRECAUCIONES
Bacillus subtilis - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusi-
ATCC 6633 Satisfactorio Amarillo - vo.
Proteus mirabilis - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 43071 Inhibido ----- ----- ñado.
Escherichia coli - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio-
ATCC 8739 Inhibido ----- ----- ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta-
Medio sin inocular Sin cambios blecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva
LIMITACIONES apropiadamente.
- No calentar el medio de cultivo luego que se agregó la yema de - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
huevo ya que es termolábil. mismo según reglamentaciones vigentes.
- Las características de las colonias de Bacillus cereus permiten dife-
renciar este microorganismo de Bacillus subtilis y de Bacillus licheni- REFERENCIAS
formis, pero pueden no diferenciar Bacillus cereus de otras especies - Donovan, K.O. 1958. A Selective Medium for Bacillus cereus in
de Bacillus, tales como Bacillus thuringiensis, Bacillus anthracis y Milk. J. Appl. Bact., 21; 100:103.
Bacillus mycoides. En estos casos, será necesario realizar pruebas - Mossel. D.A.A. Koopman, M.J. a Jongerius, E. 1967. Enumeration
bioquímicas adicionales para su identificación. of Bacillus cereus in Foods. Appl. Microbiol., 15; 650:653.
- Staphylococcus aureus, Serratia marcescens y Proteus vulgaris
pueden desarrollar en el medio de cultivo, pero se diferencian de Ba- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
cillus cereus por la forma y el color de la colonia, y porque producen Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
una reacción de aclaramiento sobre la yema de huevo, a diferencia Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
del precipitado que produce Bacillus cereus.
11/2015 - REV .01

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Bacillus cereus Selectivo Agar


USO posar 5 a 10 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir du-
Medio diagnóstico utilizado para el aislamiento y recuento de Bacillus rante 1 minuto hasta completar disolución. Distribuir en recipientes
cereus en alimentos. Conocido también por su sigla en inglés como apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Medio PEMBA (Polymyxin Pyruvate Egg Yolk Mannitol Bromothymol Enfriar a 50°C y asépticamente agregar 50 ml de emulsión yema
Blue Agar). de huevo Emulsión Yema de Huevo Sin Telurito (REF B0360261).
Si se desea el aislamiento selectivo de Bacillus cereus, agregar al
FUNDAMENTO medio fundido y enfriado a 50 ºC, el contenido de 1 vial de Bacillus
Bacillus cereus ha sido implicado en toxoinfecciones alimentarias, cereus Suplemento (REF B0360632) reconstituido con 2 ml de
particularmente asociado al consumo de arroz contaminado, y tam- agua purificada estéril.
bién en algunos procesos infecciosos en seres humanos y anima- Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.
les.
En el medio de cultivo, el contenido de peptona es bajo (0.1%), y la CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
adición de piruvato de sodio y emulsión de yema de huevo mejoran Medio de cultivo deshidratado: color amarillo, homogéneo, libre
el aislamiento y esporulación de esta bacteria. Además la yema de deslizamiento.
huevo permite estudiar la actividad lecitinásica de los microorganis- Medio de cultivo preparado: color verde manzana.
mos. El manitol es el hidrato de carbono fermentable y el azul de
bromotimol es el indicador de pH que es de color azul y vira al color ALMACENAMIENTO
amarillo en medio ácido. Las sales fosfato constituyen el sistema Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
buffer, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
es el agente solidificante.
Puede lograrse el aislamiento selectivo de Bacillus cereus inhibien- PROCEDIMIENTO
do el desarrollo de la flora acompañante presente en la muestra, Siembra
por el agregado del suplemento para Bacillus cereus con el que se - Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
obtiene una concentración final de 100 U de Polimixina B por ml - Si se trabaja con muestras de alimentos y se debe hacer recuento
de medio. microbiano, proceder de la siguiente manera:
Homogeneizar:10 g de la muestra en 90 ml de agua peptonada
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN 0.1%. Si es necesario efectuar diluciones.
Código B0216105: envase x 100 g. Inocular: una alícuota determinada (ejemplo 0,1 ml) sobre la super-
Código B0216106: envase x 500 g. ficie del medio de cultivo y esparcirla en toda su superficie.

FÓRMULA (en gramos por litro) Incubación


Peptona de carne......................................................................................................... 1.0. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 - 48 horas.
Manitol .....................................................................................................................................10.0.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 2.0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Sulfato de magnesio................................................................................................. 0.1. El diagnóstico primario y presuntivo de Bacillus cereus, se basa en
Fosfato disódico............................................................................................................. 2.5. la morfología y color de la colonia, en la precipitación de la lecitina
Fosfato monopotásico.......................................................................................0.25. hidrolizada y en la no fermentación de manitol.
Azul de bromotimol...............................................................................................0.12. Las colonias típicas de Bacillus cereus en este medio son crena-
Piruvato de sodio.......................................................................................................10.0. das, filamentosas de aproximadamente 5 mm de diámetro a las
Agar................................................................................................................................................14.0. 24 horas de incubación, y tienen un color turquesa (peacock blue)
pH final: 7.2 ± 0.2 rodeado por un precipitado de hidrólisis de yema de huevo. A las 48
horas de incubación presentan el color con centro grisáceo.
INSTRUCCIONES
Supender 40 g del polvo en 950 ml de agua purificada. Dejar re-

HOJA 1 DE 2
Bacillus Cereus Selectivo Agar

CONTROL DE CALIDAD bidos en este medio de cultivo.


- Se recomienda la realización de un examen microscópico para eva-
Corresponde al medio de cultivo suplementado con yema de huevo luar la presencia de glóbulos de lípidos en las células vegetativas, de-
y polimixina B, siguiendo las instrucciones de preparación descrip- bido a que es una prueba rápida y confirmatoria de Bacillus cereus.
tas previamente.
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO COLOR DE PRECIPITADO Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
LA COLONIA calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Bacillus cereus miento.
ATCC 10876 Satisfactorio Turquesa +
Staphylococcus aureus PRECAUCIONES
ATCC 6538 Satisfactorio Blanco-Amarillo + - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusi-
Bacillus subtilis vo.
ATCC 6633 Satisfactorio Amarillo - - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Proteus mirabilis ñado.
ATCC 43071 Inhibido ----- ----- - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio-
Escherichia coli ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 8739 Inhibido ----- ----- - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani-
pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO blecidas por el laboratorio.
Medio sin inocular Sin cambios - Las características del producto pueden alterarse si no se conserva
apropiadamente.
LIMITACIONES - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
- No calentar el medio de cultivo luego que se agregó la yema de mismo según reglamentaciones vigentes.
huevo ya que es termolábil.
- Las características de las colonias de Bacillus cereus permiten dife- REFERENCIAS
renciar este microorganismo de Bacillus subtilis y de Bacillus licheni- - Billing, E. And Luckhurst, E.R. 1957. A simplified method for the
formis, pero pueden no diferenciar Bacillus cereus de otras especies preparation of egg yolk media. J. Appl. Bacteriol. 20,90.
de Bacillus, tales como Bacillus thuringiensis, Bacillus anthracis y - Holbrook, R. and Anderson, J.M. 1980. An improved selective and
Bacillus mycoides. En estos casos, será necesario realizar pruebas diagnostic medium for the isolation and enumeration of Bacillus
bioquímicas adicionales para su identificación. cereus in foods. Can. J. Microbiol. 26, 753-759.
- Staphylococcus aureus, Serratia marcescens y Proteus vulgaris - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
pueden desarrollar en el medio de cultivo, pero se diferencian de Ba- Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
cillus cereus por la forma y el color de la colonia, y porque producen
una reacción de aclaramiento sobre la yema de huevo, a diferencia INDICACIONES AL CONSUMIDOR
del precipitado que produce Bacillus cereus. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Bacillus megaterium y Bacillus coagulans son completamente inhi- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
11/2015 - rEv .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

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B0214105 B0214106

Baird Parker Agar Base


USO autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45°-50°C y agre-
Medio de alta especificidad diagnóstica, selectivo y diferencial para el gar 50 ml de emulsión de yema de huevo y 10 ml de la solución de
aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa positiva en alimen- telurito (Emulsión Yema de Huevo con Telurito).
tos y otros materiales de importancia sanitaria. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.

FUNDAMENTO CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO


Medio altamente nutritivo, en el cual la peptona de caseína y el Medio de cultivo deshidratado: color tostado claro, homogéneo, li-
extracto de carne constituyen la fuente de carbono y nitrógeno, el bre deslizamiento.
extracto de levadura aporta vitaminas del complejo B, la glicina y el Medio de cultivo preparado: color ámbar claro (sin el agregado de
piruvato estimulan el crecimiento de los estafilococos. El agar es el yema de huevo).
agente solidificante.
Permite el crecimiento selectivo de estafilococos ya que el telu- ALMACENAMIENTO
rito de potasio y el cloruro de litio inhiben el desarrollo de la flora Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
acompañante presente en la muestra. La yema de huevo permite Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
demostrar la actividad lecitinásica de los microorganismos.
Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro y PROCEDIMIENTO
originan colonias de color grisáceo-negro, y tienen actividad leciti- Siembra
násica, por eso actúan sobre la yema de huevo produciendo un halo - Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
claro alrededor de la colonia. - Si se trabaja con muestras de alimentos y se debe hacer recuento
microbiano, proceder de la siguiente manera:
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Homogeneizar 10 g de la muestra en 90 ml de agua peptonada
Código B0214105: envase x 100 g. 0.1%. Si es necesario efectuar diluciones.
Código B0214106: envase x 500 g. Inocular una alícuota determinada (ejemplo 0,1 ml) sobre la superfi-
cie del medio de cultivo y esparcirla en toda su superficie.
FÓRMULA (en gramos por litro)
PEPTONA DE CASEÍNA................................................................................................10.0. Incubación
EXTRACTO DE CARNE..................................................................................................... 5.0. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 a 48 horas.
EXTRACTO DE LEVADURA.......................................................................................... 1.0.
CLORURO DE LITIO............................................................................................................ 5.0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
GLICINA.......................................................................................................................................12.0. Observar las características de las colonias.
PIRUVATO DE SODIO......................................................................................................10.0. Bacterias que reducen el telurito de potasio: colonias de color
AGAR.................................................................................................................................................17.0. grisáceo-negro.
pH final: 6.8 ± 0.2 Bacterias que no reducen el telurito de potasio: colonias del
color del medio, transparentes.
INSTRUCCIONES Bacterias con actividad lecitinásica: halo claro en el medio de
Suspender 60 g del polvo en 940 ml de agua purificada. Dejar en cultivo alrededor de la colonia. Puede existir también un halo opaco
reposo 5 a 10 minutos. alrededor de la colonia con un halo claro externo.
Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto, hasta Bacterias sin actividad lecitinásica: ausencia de halo claro alre-
disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en dedor de la colonia.

HOJA 1 DE 2
Baird Parker Agar Base
CONTROL DE CALIDAD
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO ACTIVIDAD LECITINÁSICA REDUCCIÓN DE CARACTERÍSTICAS DE LAS COLONIAS
TELURITO DE POTASIO
Staphylococcus Satisfactorio Positiva Positiva Colonias negras con borde incoloro, convexas, rodeadas de una
aureus ATCC 25923 zona opaca, con una zona clara externa.
Staphylococcus Satisfactorio Positiva Positiva Colonias negras con borde incoloro, convexas, rodeadas de una
aureus ATCC 6538 zona opaca, con una zona clara externa.
Staphylococcus epidermidis Regular-Satisfactorio Negativa Positiva Colonias negras, de tamaño irregular. Zona opaca alrededor
ATCC 14990 de la colonia (no hay zona clara).
Escherichia coli Total o parcialmente Negativa Negativa ---
ATCC 25922 Inhibido
Proteus mirabilis Total o parcialmente Negativa Positiva Colonias marrones sin zona clara u opaca alrededor
ATCC 43071 Inhibido

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO REFERENCIAS


Medio sin inocular Sin cambios - Zebovitz, E., Evans, J.B. and Niven, C. F. 1955. Tellurite Glycine
Agar, a selective plating medium for the quantitative detection of
LIMITACIONES coagulase positive staphylococci. J. Bacteriol. 70:686.
- No calentar el medio de cultivo luego que se agregó la yema de - Baird-Parker, A.C. 1962. An improved diagnostic and selecti-
huevo y el telurito de potasio ya que son compuestos termolábiles. ve medium for isolating positive staphylococci. J. Appl. Bacteriol.
- Se pueden encontrar cepas de estafilococos coagulasa positiva no 25(1),12.
lipolíticas, que presentan igual características de colonias pero sin - Baird-Parker, A.C. 1963. A classification of micrococci and sta-
halo claro alrededor de la colonia. phylococci based on physiological and biochemical tests. J. Gen.
- Si bien es un medio selectivo para estafilococos coagulasa positivo, Microbiol., 30, 409.
otros microorganismos pueden desarrollar en el mismo. Es necesario - Baird-Parker, A.C. 1965. The classification of staphylococci and
realizar pruebas bioquímicas de identificación microbiana. micrococci from worldwide sources. J. Gen. Microbiol. 38:383.
- Holbrook, R., Anderson J.M., and Baird Parker, A.C. (1969). The
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS performance of a stable revision of Baird Parker´s medium for isola-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de ting Staphylococcus aureus. J. Appl. Bacteriol., 32 (2), 187.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
miento. maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
more, Md.
PRECAUCIONES - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo. biological Examination., Standard Methods for the Examination of
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
ñado. - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio- tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Productos no Obligatoriamente Estériles.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani- mit Test.
pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta- - European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
blecidas por el laboratorio. Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva ganisms.
apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del INDICACIONES AL CONSUMIDOR
mismo según reglamentaciones vigentes. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
11/2015 - REV .01

Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

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LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0210805 B0210806

BAM con Urea Medio


USO minutos y mezclar calentado hasta ebullición durante 1 a 2 minutos
Medio modificado por Monteverde y cols. para la identificación de en- hasta que se disuelva completamente.
terobacterias, en base a la producción de ácido sulfhídrico, a la pro- Distribuir 4 ml de medio en tubos de hemólisis y esterilizar en auto-
ducción de indol, a la actividad ureásica, a la hidrólisis de lactosa y a clave a 115°C durante 15 minutos.
la movilidad. Dejar solidificar en posición vertical.
Por la rapidez diagnóstica y la disminución de trabajo y materiales, es
un medio útil cuando se analiza un gran número de cepas bacterianas. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color rosado, homogéneo, libre des-
FUNDAMENTO lizamiento.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios Medio de cultivo preparado: color verde amarillento.
para el desarrollo bacteriano, además, es la fuente de triptofano, y
por su contenido en cistina y cisteína es la fuente de azufre, ne- ALMACENAMIENTO
cesaria para la producción de ácido sulfhídrico. La lactosa es el Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
hidrato de carbono fermentable, la urea es el sustrato de la enzima Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ureasa y la fucsina y el azul de timol son los indicadores de pH. El
agar es el agente solidificante y se encuentra en una concentración PROCEDIMIENTO
necesaria para lograr un medio semisólido, adecuado para detec- Siembra
tar movilidad bacteriana que se evidencia por turbidez debido a la Por punción profunda a partir de una colonia pura del microorga-
difusión del crecimiento bacteriano mas allá de la línea de siembra. nismo en estudio.
Las bacterias que fermentan la lactosa acidifican el medio, pro- Luego colocar por encima de la superficie del medio de cultivo y
duciendo un viraje al color anaranjado. Los productos resultantes adherido a la tapa del tubo una tira de papel de filtro estéril y una
del metabolismo de la lactosa, dejan de inhibir la síntesis y la ac- tira de papel de filtro embebida en una solución saturada de suba-
tividad de la enzima triptofanasa, la cual actúa sobre el triptofano, cetato de plomo.
con la consiguiente producción de indol, detectable en los pape-
les reactivos utilizando el reactivo de Erlich (Indol Reactivo REF Incubación
B1550361) o de Kovac´s. En aerobiosis, a 35-37 °C, durante 18-24 horas.
Los microorganismos que hidrolizan la urea, alcalinizan el medio, y Se recomienda incubar un tubo con el medio sin inocular (color
producen el viraje al color azul o azulverdoso. verde amarillento) para comparar los cambios de color.
La producción de ácido sulfhídrico es detectable en los papeles
reactivos embebidos con acetato de plomo. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Metabolismo de lactosa y actividad ureásica:


Código B0210805: envase x 100 g. Se evidencia por el color observado en el medio de cultivo:
Código B0210806: envase x 500 g. - Fermentación de lactosa negativo, ureasa negativo: verde ama-
rillento
FÓRMULA (en gramos por litro) - Fermentación de lactosa positivo, ureasa negativo: amarillo, na-
ranja, rosado, rojo.
- Fermentación de lactosa negativo, ureasa positivo: azul violáceo,
PEPTONA................................................................................................................................................ 20.0 azul verdoso.
LACTOSA................................................................................................................................................. 3.0
UREA........................................................................................................................................................... 10.0 Prueba de Indol:
FUCSINA ÁCIDA............................................................................................................................... 0.037 Agregar a la tira de papel de filtro una gota de Indol Reactivo (REF
AZUL DE TIMOL............................................................................................................................... 0.048 B1550361) y observar el color desarrollado.
INSTRUCCIONES
AGAR........................................................................................................................................................... 3.0 - Positivo: color rosa-rojo.
Suspender
pH final: 36 8.3 ±g0.2 del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 - Negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-

HOJA 1 DE 2
BAM con Urea Medio

amarillento. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-


miento.
Producción de ácido sulfhídrico:
- Positivo: papel de filtro ennegrecido. PRECAUCIONES
- Negativo: ausencia de ennegrecimiento en el papel de filtro. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
Observaciones: la producción de ácido sulfhídrico por algunas de - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado.
las cepas de Proteus spp. se detecta después de 72 horas de in- - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro,
cubación así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Movilidad: - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipu-
- Positiva: presencia de turbidez que se extiende mas allá de la línea larlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad estableci-
de siembra. das por el laboratorio.
- Negativa: solo se observa turbidez en la línea de siembra. - Las características del producto pueden alterarse si no se conserva
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS apropiadamente.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.

CONTROL DE CALIDAD REFERENCIAS


- Monteverde, J.J. 1948. “Medio de cultivo semisólido con lactosa,
MICROORGANISMOS FERMENTACIÓN ACTIVIDAD PRODUCCIÓN PRODUCCIÓN urea y doble indicador para seleccionar salmonelas y shigelas”. La
DE LACTOSA UREÁSICA DE INDOL DE SH2 Semana Médica, (Buenos Aires). 55, 846-848.
Escherichia coli - Monteverde J.J. y A. Fauquer. 1963. “Diagnóstico de Enterobacte-
ATCC 25922 + - + - rias. I. Medio de cultivo para la selección de colonias”. Bol. Especial
Salmonella typhimurium Fac. Agronom. Veter., Univ. Buenos Aires, Nº 3.
ATCC 14028 - - - + - Monteverde, J.J., C.A. Hermida, N. Morán y D.H. Simeone.
Shigella flexneri 1967/68). “B.A.M. Medio para seleccionar colonias de enterobac-
ATCC 12022 - - - - terias”. Rev.Fac. Agr. Y Vet.Buenos Aires 17, 39-47.
Proteus mirabilis - Perez-Miravete A. y M. Cabanas-Cortés. 1969. “Valoración de una
ATCC 43071 - + - + contribución argentina al estudio de Enterobacteriaceae”. Rev.Lat.-
Klebsiella pneumoniae amer.Microbiol.Parasitol. 11, 41-44.
ATCC 700603 + + débil - -
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Medio sin inocular Sin cambios

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SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Bilis Esculina Agar


USO
Medio utilizado para el aislamiento e identificación presuntiva de es- según la preferencia.
treptococos del grupo D.
Incubación
FUNDAMENTO En aerobiosis, a 35-37 °C hasta 72 horas.
Medio de cultivo nutritivo por la presencia de extracto de carne
y peptona de carne que aportan nutrientes para el desarrollo mi- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
crobiano. Los estreptococos del grupo D crecen rápidamente en Positivo: se observa un oscurecimiento o ennegrecimiento del me-
el agar bilis esculina e hidrolizan la esculina, que en presencia de dio de cultivo.
iones hierro forman un compuesto de color verde oliva hasta negro. Negativo: ausencia de oscurecimiento del medio de cultivo.
La bilis de buey inhibe el desarrollo de la flora acompañante. El agar
es el agente solidificante. CONTROL DE CALIDAD

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN MICROORGANISMOS CRECIMIENTO HIDRÓLISIS DE OSCURECIMIENTO


Código B0216205: envase x 100 g. LA ESCULINA
Código B0216206: envase x 500 g. Enterococcus faecalis
ATCC 29212 Satisfactorio + +
FÓRMULA (en gramos por litro) Proteus mirabilis
EXTRACTO DE CARNE ........................................................................................................... 3.0 ATCC 43071 Satisfactorio - -
PEPTONA DE CARNE .............................................................................................................. 5.0 Streptococcus pyogenes
BILIS DE BUEY.................................................................................................................................. 40.0 ATCC 19615 Inhibido --- ---
ESCULINA.............................................................................................................................................. 1.0 Escherichia coli
CITRATO FÉRRICO......................................................................................................................... 0.5 ATCC 25922 Inhibido --- ---
AGAR........................................................................................................................................................... 15.0
pH FINAL: 6.6 ± 0.2
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
INSTRUCCIONES Medio sin inocular Sin cambios
Suspender 64,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
reposar 5 minutos.
Calentar a ebullición hasta su completa disolución. Distribuir en tu- LIMITACIONES
bos u otros recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 -La prueba de la bilis esculina se utilizó originalmente para la iden-
ºC durante 15 minutos. tificación de enterococos. Actualmente se emplea además para la
identificación presuntiva de otros Estreptococos grupo D y también
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO para los generos de Aerococcus y Listeria, ya que todos estos mi-
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- croorganismos pueden tolerar la concentración de bilis presente
lizamiento. en el medio de cultivo e hidrolizar la esculina.
Medio de cultivo preparado: color ámbar oscuro. El medio con es- - Algunos autores han demostrado que el medio es útil para dife-
culina tiene un tinte azulado. renciar el grupo Klebsiella-Enterobacter-Serratia de otras entero-
bacterias. Debido a esto, debe ser utilizada junto con otras pruebas
ALMACENAMIENTO bioquímicas para identificar el género o especie microbianos.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. -Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis, pueden de-
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. sarrollar en este medio de cultivo, originando colonias muy peque-
ñas (menores a 1mm), de color grisáceo, debido a que no hidrolizan
PROCEDIMIENTO la esculina.
Siembra
Por inoculación directa del material en estudio, en tubo o placa,

HOJA 1 DE 2
Bilis Esculina Agar

MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS of human origin by biochemical and physiological tests. Appl. Micro-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de biol., 23 (6), 1131.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Edberg, S. C., S. Pittman and J.M. Singer. 1977. Esculin hydrolysis
miento. by Enterobacteriaceae, J. Clin Microbiol. 6:111
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
PRECAUCIONES maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo. timore, Md.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado. - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, biological Examination., Standard Methods for the Examination of
así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipu- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
larlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad estableci- Washington, D.C.
das por el laboratorio. - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del INDICACIONES AL CONSUMIDOR
mismo según reglamentaciones vigentes. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
REFERENCIAS
- Facklam, R.1972. Recognition of Group D streptococcal species

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Bilis Esculina con Azida Agar


USO FÓRMULA (en gramos por litro)
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento e identificación de AZIDA SÓDICA........................................................................................................................0.15
estreptococos del grupo D. BILIS DE BUEY.......................................................................................................................10.0
CITRATO DE HIERRO Y AMONIO............................................................................ 0.5
FUNDAMENTO CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0
Con el objetivo de lograr un medio mas selectivo, pero que manten- ESCULINA...................................................................................................................................... 1.0
ga la propiedad de permitir un rápido crecimiento de estreptococos EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................... 5.0
grupo D, se modifica la fórmula del medio Bilis Esculina Agar, por PROTEOSA PEPTONA Nº 3........................................................................................... 3.0
el agregado de azida sódica y la disminución de la concentración TRIPTEÍNA ..................................................................................................................................17.0
de bilis. AGAR................................................................................................................................................15.0
En el medio de cultivo, el extracto de carne, la proteosa peptona y pH FINAL: 7.1 ± 0.2
la tripteína, aportan los nutrientes necesarios para el adecuado de-
sarrollo bacteriano. La bilis de buey, inhibe el desarrollo de la flora INSTRUCCIONES
Gram positiva excepto los estreptococos grupo D, y la azida sódica Suspender 56.65 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
inhibe el desarrollo de microorganismos Gram negativos. El citrato 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuente-
de hierro y amonio aporta iones Fe3+, el cloruro de sodio mantiene mente y hervir 1 minuto hasta disolver completamente. Distribuir en
el balance osmótico, y el agar es el agente solidificante. recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante
Los estreptococos del grupo D, crecen rápidamente en el agar bilis 15 minutos.
esculina e hidrolizan la esculina, que en presencia de iones hierro Distribuir en placas de Petri estériles
forman un compuesto de color verde oliva hasta negro.
Además, ha sido recomendado, el agregado a este medio de cultivo, CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
de 6 µg/ml de vancomicina para aislar enterococos resistentes a Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
este antibiótico a partir de muestras altamente contaminadas. El lizamiento.
aislamiento de dichos microorganismos, es particularmente impor- Medio de cultivo preparado: color ámbar oscuro. El medio con es-
tante en medio hospitalario ya que los pacientes deben ser ais- culina tiene un tinte azulado.
lados, restringir sus movimientos dentro del hospital, extender las
medidas de cuidado y el tratamiento con una variedad de agentes ALMACENAMIENTO
antimicrobianos, antes que pueda demostrarse que el paciente este Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
libre de este microorganismo. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN PROCEDIMIENTO


Código B0219705: envase x 100 g. Siembra
Código B0219706: envase x 500 g. En superficie, por inoculación directa del material en estudio, en

HOJA 1 DE 2
Bilis Esculina con Azida Agar
tubo o placa, según la preferencia. miento.

Incubación PRECAUCIONES
En aerobiosis, a 35-37 ºC hasta 72 horas. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Positivo: se observa un oscurecimiento o ennegrecimiento del me- ñado.
dio de cultivo. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Negativo: ausencia de oscurecimiento del medio de cultivo. rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
CONTROL DE CALIDAD to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO HIDRÓLISIS DE OSCURECIMIENTO nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
LA ESCULINA establecidas por el laboratorio.
Enterococcus faecalis - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 29212 Satisfactorio + + va apropiadamente.
Streptococcus pyogenes - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 19615 Inhibido -- -- mismo según reglamentaciones vigentes.
Proteus mirabilis
ATCC 43071 Inhibido -- -- REFERENCIAS
Escherichia coli - Facklam, R.1972. Recognition of Group D streptococcal species
ATCC 25922 Inhibido -- -- of human origin by biochemical and physiological tests. Appl. Micro-
biol., 23 (6), 1131.
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Medio sin inocular Sin cambios timore, Md.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
LIMITACIONES clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- La prueba de la bilis esculina se utilizó originalmente para la iden- Washington, D.C.
tificación de enterococos. Actualmente se emplea además para la - Lopardo H.A., S. Kaufman, L. Lauro, P. Vidal and Buenos Aires
identificación presuntiva de otros Estreptococos grupo D y también Microbiology Network. 1999. One-Day Prevalence Study on Colo-
para los generos de Aerococcus y Listeria, ya que todos estos mi- nization with Vancomycin-Resistant Enterococci (VRE) in Intensive
croorganismos pueden tolerar la concentración de bilis presente Care Units (ICU) of Buenos Aires City.
en el medios de cultivo e hidrolizar la esculina. - Streptococci and Streptococcal Diseases Entering the New Mi-
Debido a esto, debe ser utilizada junto con otras pruebas bioquími- llennium, Proceedings of the XIV Lancefield International Sympo-
cas para identificar el género o especie microbianos. sium on Streptococci and Streptococcal Diseases, Auckland, New
-Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis, pueden de- Zealand.
sarrollar en este medio de cultivo, originando colonias muy peque- - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
ñas (menores a 1mm), de color grisáceo, debido a que no hidrolizan bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
la esculina.
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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Brucella Agar Base


USO INSTRUCCIONES
Al ser adicionado con sangre, es un medio recomendado para el Suspender 43 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
aislamiento y cultivo de Brucella spp. y de microorganismos minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto
aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes, a partir de una para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterili-
gran variedad de muestras clínicas. Permite la observación de las zar por autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
reacciones de hemólisis. Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
FUNDAMENTO enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
La Brucelosis es una zoonosis que puede ser transmitida por con- estériles o en tubos estériles.
tacto directo con animales infectados, o a través de carnes y pro-
ductos lácteos. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
En el medio de cultivo, la tripteína, la peptona de carne y el extracto Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
de levadura, constituyen la fuente de nitrógeno, carbono, aminoá- lizamiento.
cidos, vitaminas, minerales y cofactores necesarios para el creci- Medio de cultivo preparado: color ámbar.
miento de microorganismos. La glucosa es el hidrato de carbono Suplementado con sangre: color rojo cereza.
fermentable, y el bisulfito de sodio favorece el desarrollo microbia-
no. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico del medio y el ALMACENAMIENTO
agar es el agente solidificante. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Puede ser utilizado como medio base para ser suplementado con Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
sangre o con antimicrobianos, lográndose así un medio mas enri-
quecido o selectivo de acuerdo al aditivo. PROCEDIMIENTO
Si se suplementa con sangre ovina (Britasheep) o equina, se pue- Siembra
de preparar “Agar Sangre” y lograr así el crecimiento y observación Por inoculación directa del material en estudio estriando sobre la
de las reacciones hemolíticas de los microorganismos inoculados. superficie del medio de cultivo.
Este medio, puede ser también selectivo, si es suplementado con
antibióticos, ejemplo: Bacitracina 25.000 U/l, Polimixina B 6.000 Incubación
U/l, cicloheximida 100 mg/l. El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, depende-
rán del microorganismo que se quiera recuperar.
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN En general se recomienda:
Código B0219605: envase x 100 g. Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
Código B0219606: envase x 500 g. 18 a 24 horas.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
FÓRMULA (en gramos por litro) fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
TRIPTEÍNA...................................................................................................................................10.0 Importante: en caso de búsqueda de Brucella spp. incubar en at-
PEPTONA DE CARNE......................................................................................................10.0 mósfera con 5 % de CO2, a 35-37 hasta 21 días para informar los
GLUCOSA....................................................................................................................................... 1.0 resultados negativos.
EXTRACTO DE LEVADURA............................................................................................ 2.0
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
BISULFITO DE SODIO......................................................................................................... 0.1 Observar las características de las colonias.
AGAR................................................................................................................................................15.0 Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
pH FINAL: 7.0 ± 0.2 nes de hemólisis:

HOJA 1 DE 2
Brucella Agar Base
Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un con sangre equina pero no en el agar suplementado con sangre
halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido de carnero, y son mal clasificadas como Estreptococos Grupo A al
a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto usar sangre equina.
de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los
microorganismos. MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- miento.
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre-
dedor de la colonia en estudio. PRECAUCIONES
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
CONTROL DE CALIDAD sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO ñado.
Brucella abortus Satisfactorio - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 11192 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Escherichia coli Satisfactorio - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
ATCC 25922 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Staphylococcus aureus Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 25923 establecidas por el laboratorio. Al procesar muestras conteniendo
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Brucella spp., se debe trabajar en laboratorios con nivel 2 y 3 de
ATCC 27853 bioseguridad.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Brucella Agar Base suplementado con 5% de sangre ovina: va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO HEMÓLISIS mismo según reglamentaciones vigentes.
Brucella abortus Satisfactorio
ATCC 11192 -- REFERENCIAS
Streptococcus pyogenes Satisfactorio - Vera. 1971. Health Lab. Sci. 8:176.
ATCC 19615 Beta - Vera and Power. 1980. In Lennette, Balows, Hausler and Truant
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio (ed.), Manual of clinical microbiology, 3rd Ed. American Society for
ATCC 6305 Alfa Microbiology, Washington, D.C.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio - Mac Faddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ATCC 49619 Alfa maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
timore, Md.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Medio sin inocular Sin cambios clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
LIMITACIONES
Las reacciones hemolíticas de una amplia variedad de microorga- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
nismos son diferentes al usar sangre equina respecto al utilizar san- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
gre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estreptococos Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suplementado
10/2019 - REV .02

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Burkholderia cepacia Agar Base


Modificado
USO FÓRMULA (en gramos por litro)
Medio de cultivo basal que con el agregado del suplemento antimi- TRIPTEÍNA...................................................................................................................................10.0
crobiano, permite el aislamiento selectivo de Burkholderia cepacia EXTRACTO DE LEVADURA .......................................................................................... 1.5
a partir de diversos materiales. LACTOSA......................................................................................................................................10.0
Es ampliamente utilizado cuando se procesan muestras respirato- SACAROSA.................................................................................................................................10.0
rias en pacientes con fibrosis quística. CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0
ROJO DE FENOL..............................................................................................................0.008
FUNDAMENTO CRISTAL VIOLETA ........................................................................................................0.0008
Burkholderia cepacia, es un bacilo gram negativo, móvil, oxidasa AGAR................................................................................................................................................15.0
positivo. pH FINAL:7.0 ± 0.2
Se encuentra principalmente en ambientes húmedos y puede per-
manecer y sobrevivir por largo tiempo en aguas, soluciones de REF B0362021: Burkholderia cepacia Suplemento 200.
antisépticos y desinfectantes. El contenido de 1 vial se agrega a 200 ml de medio de cultivo.
Es bien reconocida como patógeno nosocomial, produce infeccio- Fórmula (por vial).
nes relacionadas con equipos contaminados, medicamentos y des-
infectantes. Las infecciones incluyen bacteriemia, particularmente Polimixina B......................................................................................................120000 UI
en pacientes con catéteres centrales permanentes, infecciones del Gentamicina.............................................................................................................. 0.002 g
tracto urinario, artritis séptica, peritonitis e infecciones de tracto Vancomicina..........................................................................................................0.0005 g
respiratorio, siendo su hallazgo muy frecuente en pacientes con
enfermedades genéticas: fibrosis quística y enfermedad granulo- INSTRUCCIONES
matosa crónica. Suspender 10,3 gramos del polvo en 200 ml de agua purificada.
El crecimiento de este microorganismo puede ser dificultoso de ob- Mezclar y llevar a ebullición con agitación frecuente para disolución
servar en medios no selectivos debido a la presencia de flora acom- completa. Esterilizar por autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
pañante, por eso, presenta el medio de cultivo que con- Enfriar el medio a 50 ºC y asépticamente agregar 2 ml del con-
tiene nutrientes para el adecuado desarrollo microbiano y el cual tenido de 1 vial de Burkholderia cepacia Suplemento 200 (REF
con el agregado del suplemento selectivo se logra un crecimiento B0362021) previamente reconstituído con 2,1 ml de agua purifi-
apropiado y una clara visualización de las colonias de Burkholderia cada estéril. Homogeneizar bien y distribuir en placas de Petri es-
cepacia, mientras que se inhibe el desarrollo de microorganismos tériles.
contaminantes presentes en la muestra.
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
Código B0224405: envase x 100 g. lizamiento.
Código B0224406: envase x 500 g. Medio de cultivo preparado: color ámbar rosado.

HOJA 1 DE 2
Burkholderia cepacia Agar Base Modificado

ALMACENAMIENTO MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS


Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
PROCEDIMIENTO
Siembra PRECAUCIONES
Directa, estriando la superficie del medio. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Incubación ñado.
En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 a 72 horas. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Observar el crecimiento microbiano y deterrminar las característi- - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
cas de las colonias nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
CONTROL DE CALIDAD va apropiadamente.
Corresponde al medio de cultivo suplementado con Burkholderia - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
cepacia Suplemento 200. mismo según reglamentaciones vigentes.

MICROORGANISMOS CRECIMIENTO REFERENCIAS


Burkholderia cepacia Colonias pequeñas rosadas rojizas - Murray, P.R., et al. 1995. Manual of Clinical Microbiology, 6th Edi-
ATCC 25608 tion American Society for Microbiology, Washington D.C.
Pseudomonas aeruginosa Inhibido - D.A. Henry, M.E. Campbell, J.J. LiPuma and D.P. Speert. 1997. Iden-
ATCC 9027 tification of Burkholderia cepacia Isolates from Patients with Cystic
Pseudomonas aeruginosa Inhibido Fibrosis and use of a Simple New Selective Medium. Journal of Cli-
ATCC 27853 nical Microbiology, Vol 35, Nº3.
Proteus mirabilis Inhibido - Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Cul-
ATCC 43071 ture Media, M22-A3, Vol 24, Nº 19, 2004. National Committee for
Salmonella typhimurium Inhibido Clinical Laboratory Standards Institute (NCCLS).
ATCC 14028 - Lopez De Volder, M. Agustina; Degrossi, José; Galanternik, Laura;
Escherichia coli Inhibido Messina, M. Tomás; Franco, Mirta. 2009. Comparación de medios
ATCC 25922 de cultivo selectivos para aislamiento del complejo Burkholderia
Staphylococcus aureus Inhibido cepacia, II Congreso Latinoamericano de microbiología de medica-
ATCC 25923 mentos, II Congreso Argentino de Microbiología de Medicamentos,
Klebsiella pneumoniae Inhibido II Simposio Argentino de Microbiología de Cosméticos, CLAMME
ATCC 700603 2009, Buenos Aires-Argentina.

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO INDICACIONES AL CONSUMIDOR


Medio sin inocular Sin cambios Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
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Digerido de Caseína Soya


Polisorbato 20 Caldo
Uso Incubación
Medio de dilución, recomendado por USP XXVII y la Farmacopea Consultar en bibliografía de referencia la metodología adecuada
Nacional Argentina VII Edición para realizar el control higiénico de según el material en estudio.
productos no obligatoriamente estériles.
Interpretación de los resultados
Fundamento El crecimiento microbiano se observa por la presencia de turbidez
Este medio de dilución tiene la propiedad de neutralizar desin- en el medio de cultivo.
fectantes, debido a la presencia de lecitina de soja que neutraliza
compuestos de amonio cuaternario y el agregado de polisorbato CONTROL DE CALIDAD
20 (Tween 20) que es útil para neutralizar compuestos tales como
fenol, formalina, hexaclorofeno. La combinación de la lecitina con MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
el Tween permiten neutralizar etanol.
Escherichia coli
Contenido y composición ATCC 25922 Satisfactorio
Código B0223005: envase x 100 g. Escherichia coli
Código B0223006: envase x 500 g. ATCC 8739 Satisfactorio
Salmonella typhimurium
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 14028 Satisfactorio
Digerido Pancreático de caseína......................................................20.0. Pseudomonas aeruginosa
Lecitina de soya.....................................................................................................................5. ATCC 9027 Satisfactorio
pH final: 7.0 ± 0.2 Staphylococcus aureus
ATCC 6538 Satisfactorio
Instrucciones
Suspender 25 g del polvo en 960 ml de agua purificada. Agre-
gar 40 ml de polisorbato 20 (Tween 20). Dejar reposar 5 minutos. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Calentar agitando frecuentemente y llevar a ebullición para lograr Medio sin inocular Sin cambios
disolución completa. Distribuir en recipientes adecuados. Esterilizar
en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Limitaciones
El producto adquirido no contiene polisorbato 20 y debe ser in-
Características del producto corporado por el usuario tal como se detalla en las instrucciones.
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- Si no se agrega el polisorbato 20 el aspecto del medio de cultivo
lizamiento. preparado y esterilizado es turbio.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Materiales necesarios no provistos
Almacenamiento Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. miento.

Procedimiento Precauciones
Siembra - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Consultar en bibliografía de referencia la metodología adecuada sivo.
según el material en estudio. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-

HOJA 1 DE 2
Digerido de Caseína Soya Polisorbato 20 Caldo

ñado. Referencias
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Productos no Obligatoriamente Estériles.
to. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Limit
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Test.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio. Indicaciones al consumidor
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
va apropiadamente. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.

11/2015 - REV .01

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Cerebro Corazón Infusión Agar


USO
Medio sólido apropiado para el cultivo de bacterias y hongos, inclu- INSTRUCCIONES
yendo los de difícil desarrollo. Disolver 52 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar con
agitación frecuente y llevar a ebullición hasta su disolución total.
FUNDAMENTO Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave du-
Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado rante 15 minutos a 121°C.
desarrollo microbiano. La infusión de cerebro de ternera, la infusión Distribuir en placas de Petri estériles.
de corazón vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitróge- En caso de preparar agar sangre, proceder de la siguiente manera:
no, y vitaminas. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, el agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep)
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el fosfato disódico al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar
otorga capacidad buffer. El agar es el agente solidificante. y distribuir en placas de Petri estériles.
El agar cerebro corazón mantiene los mismos principios que el cal-
do para el cultivo de estreptococos y otras bacterias exigentes. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Puede ser suplementado con sangre ovina desfibrinada estéril o Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
con sangre equina desfibrinada estéril, permitiendo así el desarro- lizamiento.
llo de hongos de difícil crecimiento. Con el agregado de 10% de Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
sangre de caballo desfibrinada, fue utilizado para el crecimiento de Suplementado con sangre: color rojo.
Histoplasma capsulatum y de hongos patógenos.
Por tratarse de un medio que contiene glucosa, no es un agar san- ALMACENAMIENTO
gre apropiado para la observación de reacciones de hemólisis. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Con el agregado de 20 Ul de Penicilina y 40 µg/ml de estreptomi- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
cina, se utiliza este medio para el aislamiento selectivo de hongos
patógenos. PROCEDIMIENTO
Siembra
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Directa, sobre la superficie del medio de cultivo por estría.
Código B0214705: envase x 100 g.
Código B0214706: envase x 500 g. Incubación
El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
FÓRMULA (en gramos por litro) del microorganismo que se quiera recuperar.
INFUSIÓN DE CEREBRO DE TERNERA.................................................. 200.0 En general se recomienda:
INFUSIÓN DE CORAZÓN ........................................................................................ 250.0 Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
PEPTONA.....................................................................................................................................10.0 18 a 24 horas.
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0 Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
GLUCOSA....................................................................................................................................... 2.0 fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
FOSFATO DISÓDICO............................................................................................................. 2.5 Hongos: en aerobiosis, a 20-25 ºC hasta 7 días. Dependiendo del
AGAR ...............................................................................................................................................15.0. hongo puede requerirse mayor tiempo de incubación.
pH FINAL: 7.4 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Cerebro Corazón Infusión Agar

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Observar las características de las colonias. miento.

CONTROL DE CALIDAD PRECAUCIONES


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO sivo.
Escherichia coli Satisfactorio - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 25922 ñado.
Staphylococcus aureus Satisfactorio - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 25923 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Candida albicans Satisfactorio - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 10231 to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Cerebro Corazón Infusión Agar suplementado con 5% de san- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
gre ovina. establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO va apropiadamente.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 19615 mismo según reglamentaciones vigentes.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio
ATCC 6305 REFERENCIAS
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ATCC 49619 maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Trichophyton mentagrophytes Satisfactorio more, Md.
ATCC 9533 - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Washington, D.C.
Medio sin inocular Sin cambios
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
LIMITACIONES Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Este medio puede ser suplementado con sangre pero no es re- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo
comendado para la visualización e interpretación de reacciones de
hemólisis. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de 11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Cerebro Corazón Infusión


USO Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Medio líquido altamente nutritivo que permite el desarrollo de mi- deslizamiento.
croorganismos con escasos requerimientos nutricionales y nutri- Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, sin precipitado.
cionalmente exigentes, aerobios y anaerobios.
ALMACENAMIENTO
FUNDAMENTO Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Su alto valor nutritivo está dado por la infusión de cerebro de ter- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
nera, la infusión de corazón vacuno y la peptona que constituyen
la fuente de carbono, nitrógeno, aminoácidos, péptidos y vitaminas PROCEDIMIENTO
necesarias para el desarrollo de microorganismos. En el medio de Siembra
cultivo, la glucosa es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro Por inoculación directa de la muestra o del microorganismo en es-
de sodio mantiene el balance osmótico y el fosfato disódico otorga tudio.
capacidad buffer.
Esta infusión es apropiada para ser utilizada como base en la pre- Incubación
paración de hemocultivos debido a que pueden desarrollar todas En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18 a 24 horas. Algunos microor-
las especies de estreptococos excepto los tiol y piridoxal depen- ganismos pueden requerir hasta 7 días de incubación.
dientes.
Con el agregado de 20 Ul de Penicilina y 100 µg/ml de amicacina INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
se logra un medio selectivo para el cultivo de hongos patógenos Examinar los tubos para evaluar el crecimiento por turbiedad.
porque estos antimicrobianos inhiben el desarrollo de la flora bac-
teriana que pudiera estar presente en la muestra.
CONTROL DE CALIDAD
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
Código B0214605: envase x 100 g. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
Código B0214606: envase x 500 g. Enterococcus faecalis
ATCC 29212 Satisfactorio
FÓRMULA (en gramos por litro) Staphylococcus aureus
INFUSIÓN DE CEREBRO DE TERNERA.................................................. 200.0 ATCC 25923 Satisfactorio
INFUSIÓN CORAZÓN VACUNO......................................................................... 250.0 Streptococcus pyogenes
PEPTONA.....................................................................................................................................10.0 ATCC 19615 Satisfactorio
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0 Streptococcus pneumoniae
GLUCOSA....................................................................................................................................... 2.0 ATCC 6305 Satisfactorio
FOSFATO DISÓDICO............................................................................................................. 2.5. Streptococcus pneumoniae
pH FINAL: 7.4 ± 0.2 ATCC 49619 Satisfactorio
Candida albicans
INSTRUCCIONES ATCC 10231 Satisfactorio
Suspender 37 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición hasta
disolver completamente. Distribuir en tubos o en otros recipientes CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Medio sin inocular Sin cambios
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO

HOJA 1 DE 2
Cerebro Corazón Infusión

establecidadas por el laboratorio.


MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de va apropiadamente.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
miento. mismo según reglamentaciones vigentes.

PRECAUCIONES REFERENCIAS
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
sivo. maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- timore, Md.
ñado. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Washington, D.C.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
to. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

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Cetrimida Agar Base


USO gar 10 ml de glicerina. Dejar reposar 5 minutos. Calentar agitan-
Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas do frecuentemente y hervir durante 1 minuto para disolución total.
aeruginosa y de otras especies del género. Distribuir en tubos u otros recipientes apropiados y esterilizar en
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor-
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
FUNDAMENTO deslizamiento.
Su formulación permite el crecimiento selectivo de Pseudomonas Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
aeruginosa y estimula la formación de pigmentos. Es éste un me-
dio muy semejante al King A, en el cual la peptona de gelatina ALMACENAMIENTO
aporta los nutrientes para el desarrollo microbiano. el cloruro de Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
magnesio y el sulfato de potasio promueven la formación de pio- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
cianina, pioverdina, piomelanina y fluoresceína de P. aeruginosa.
La cetrimida es un detergente catiónico que actúa como agente PROCEDIMIENTO
inhibidor, libera el nitrógeno y el fósforo de las células de casi toda Siembra
la flora acompañante, aunque inhibe también algunas especies de En superficie, por inoculación directa de la muestra estriando o a
Pseudomonas. El agar es el agente solidificante. partir de un caldo de enriquecimiento por ejemplo Cerebro Corazón
Infusión ( ) o Tripteína Soya Caldo ( ).
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
Código B0211505: envase x 100 g. Incubación:
Código B0211506: envase x 500 g. En aerobiosis, a 35-37 °C durante 24-48 horas.

FÓRMULA (en gramos por litro) INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS


PEPTONA DE GELATINA ............................................................................................20.0 Observar el crecimiento microbiano, las características de las colo-
CLORURO DE MAGNESIO............................................................................................. 1.4 nias y la producción de pigmentos.
SULFATO DE POTASIO.....................................................................................................10.0 La presencia de un color verde-azulado corresponde a producción
CETRIMIDA.................................................................................................................................... 0.3 de piocianina, mientras que un color verde corresponde a la pro-
AGAR................................................................................................................................................13.6. ducción de pioverdina y un color rosa claro, rojizo o marrón oscuro
pH FINAL: 7.2 ± 0.2 corresponde a la producción de piorrubina.
Examinar las placas bajo luz ultravioneta, ya que la producción de
INSTRUCCIONES fluoresceína se observa de color amarillo verdoso brillante que di-
Suspender 45,3 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Agre- funde en el agar a partir del crecimiento microbiano.

HOJA 1 DE 2
Cetrimida Agar Base

CONTROL DE CALIDAD sivo.


- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO COLOR DE LA COLONIA ñado.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo verdoso - azulado - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 27853 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo verdoso - azulado - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 9027 to.
Escherichia coli Inhibido - - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25922 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Staphylococcus aureus Inhibido - establecidas por el laboratorio.
ATCC 25923 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO mismo según reglamentaciones vigentes.
Medio sin inocular Sin cambios
REFERENCIAS
LIMITACIONES - Lowbury and Collins. 1955. J. Clin. Pathol. 8:47.
- Ocasionalmente, algunas cepas de Klebsiella, Enterobacter, Ci- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
trobacter, Proteus, Providencia, Alcaligenes y Aeromonas pueden maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
crecer en el medio de cultivo generando un color amarillo suave more, Md.
en el medio de cultivo. En este caso, al exponer el medio de cultivo - Gilardi. 1991. In Balows, Hausler, Herrmann, Isenberg and Sha-
bajo luz UV no se produce fluorescencia ya que no se corresponde domy (ed.), Manual of clinical microbiology, 5th ed. American Socie-
con el pigmento fluoresceína. ty for Microbiology, Washington, D.C.
- Algunas cepas de Serratia pueden crecer y producir pigmento - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
rosado. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- Estudios de Lowbury y Collins demostraron que las cepas de Washington, D.C.
Pseudomonas aeruginosa pueden perder la emisión de fluorescen- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
cia cuando son sometidas a la acción de la luz ultravioleta si los tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
cultivos fueron dejados a temperatura ambiente durante un período Productos no Obligatoriamente Estériles.
corto de tiempo. La fluorescencia reaparece cuando las placas son - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
incubadas gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Tests. Harmonized Method.
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- organisms. Harmonized Method.
miento.
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
PRECAUCIONES Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
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DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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Christensen Medio
(Urea Agar Base)
USO INSTRUCCIONES
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la ac- Suspender 24 g del polvo en 950 ml de agua purificada. Dejar
tividad ureásica. reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como llición para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y
Proteus spp. otras enterobacterias y estafilococos. esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C
y agregar 50 ml de una solución de urea al 40% previamente es-
FUNDAMENTO terilizada por filtración o cloroformo. Fraccionar en tubos y dejar
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nu- solidificar el medio en pico de flauta con fondo profundo.
trientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
pH. El agar es el agente solidificante. Medio de cultivo deshidratado: color rosa claro, homogéneo, libre
Las bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa libe- deslizamiento.
ran amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos alcalinizan el Medio de cultivo preparado: color amarillo
medio de cultivo haciendo virar el indicador rojo de fenol del color
amarillo al rojo. Almacenamiento
Es recomendado especialmente para la detección de la actividad Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
ureásica en bacterias que hidrolizan lentamente la urea ya que la Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
fermentación de la glucosa presente activa la enzima ureasa mi-
crobiana. Este es el caso de Klebsiella spp., Enterobacter spp y Procedimiento
Citrobacter spp. Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, estriar la
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN superficie del medio en el pico de flauta.
Código B0210905: envase x 100 g. Se recomienda no punzar la capa profunda para controlar el color.
Código B0210906: envase x 500 g.
Incubación
En aerobiosis, a 35-37 ºC, durante 18-24 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro) Los microorganismos que hidrolizan la urea lentamente pueden re-
TRIPTEÍNA...................................................................................................................................... 1.0. querir hasta 72 horas de incubación.
GLUCOSA....................................................................................................................................... 1.0.
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0. Interpretación de los resultados
FOSFATO MONOPOTÁSICO.......................................................................................... 2.0. Microorganismos que hidrolizan la urea: el medio de cultivo es
ROJO DE FENOL.............................................................................................................. 0.012. de color rosado-rojizo.
AGAR................................................................................................................................................15.0. Microorganismos que no hidrolizan la urea: el medio de cultivo
pH final: 6.8 ± 0.2 permanece de color amarillo.

HOJA 1 DE 2
Christensen Medio (Urea Agar Base)

CONTROL DE CALIDAD sivo.


- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
MICROORGANISMOS Crecimiento Color del ñado.
medio - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Proteus mirabilis rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 43071 + Rojo rosado - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Klebsiella pneumoniae to.
ATCC 700603 + Rojo rosado - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Escherichia coli nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 25922 - Amarillo establecidas por el laboratorio.
Salmonella typhimurium - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 14028 - Amarillo va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio sin inocular Sin cambios Referencias
- Christensen. 1946. J. Bacteriol. 52:461.
Limitaciones - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
-Bacterias que hidrolizan lentamente la urea, como ser especies de maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter, viran al color rojo rosado de timore, Md.
todo el medio de cultivo luego de 24 horas de incubación, por eso - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
se recomienda incubar el medio hasta 72 horas. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se Washington, D.C.
descompone facilmente. - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Indicaciones al consumidor
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
miento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
.
Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-

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C.L.D.E. Medio
Uso Instrucciones
Medio indicado para el procesamiento de urocultivos. Es utilizado Suspender 36,2 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
para el aislamiento, recuento e identificación presuntiva de micro- reposar 5 minutos y calentar suavemente agitando por rotación.
organismos, pues permite el desarrollo de la mayoría de los pató- Hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en reci-
genos urinarios y previene el desarrollo invasor de Proteus spp. pientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante
15 minutos.
Fundamento
Es un medio deficiente en electrolitos. Características del producto
En el medio de cultivo, la peptona, el extracto de carne y la tripteí- Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo,
na aportan los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo libre deslizamiento.
bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la L- Medio de cultivo preparado: color verde.
cistina es el agente reductor, el azul de bromotimol es el indicador
de pH y el agar es el agente solidificante. Almacenamiento
La diferenciación de los microorganismos se basa en la utilización Medio de cultivo deshidratado: a 10-35 ºC.
que éstos puedan hacer de la lactosa; las cepas que la fermentan, Medio de cultivo preparado: a 2-8 ºC.
acidifican el medio que vira del verde al amarillo, mientras que los
que no lo hacen, dan colonias incoloras que viran el medio al color Procedimiento
azul. La restricción de electrolitos en el medio impide el desarrollo Siembra
invasor de especies de Proteus, por tal motivo, es un medio ideal Inocular una alícuota de orina en la superficie del medio. Para poder
para el recuento de colonias. realizar recuento de colonias, utilizar ansa calibrada ( ).

Contenido y composición Incubación


Código B0211905: envase x 100 g. En aerobiosis, a 35-37 °C, durante 18-48 horas.
Código B0211906: envase x 500 g.
Interpretación de los resultados
FÓRMULA (en gramos por litro) Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias amarillas.
Peptona........................................................................................................................................ 4.0. Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del
Extracto de carne...................................................................................................... 3.0. color del medio, azuladas.
L-cistina................................................................................................................................. 0.128.
Tripteína...................................................................................................................................... 4.0.
Azul de bromotimol...............................................................................................0.02.
Lactosa......................................................................................................................................10.0.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.3 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
C.L.D.E. Medio

CONTROL DE CALIDAD sivo.


- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Color de las ñado.
colonias - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Escherichia coli rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 25922 Satisfactorio Amarillo - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Klebsiella pneumoniae to.
ATCC 700603 Satisfactorio Amarillo verdoso - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Pseudomonas aeruginosa nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 27853 Satisfactorio Azul verdoso establecidas por el laboratorio.
Proteus mirabilis - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 43071 Satisfactorio Azul verdoso va apropiadamente.
Staphylococcus aureus - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 25923 Satisfactorio Amarillo mismo según reglamentaciones vigentes.
Enterococcus faecalis
ATCC 29212 Satisfactorio Amarillo Referencias
- Benner. 1970. Appl. Microbiol. 19:409.
- Finegold and Martin. 1982. Bailey & Scott’s diagnostic microbiolo-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO gy, 6th ed. The C.V. Mosby Company, St. Louis, Mo.
Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Limitaciones timore, Md.
Este es un medio nutritivo no selectivo, pero debido a la deficiencia - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
de electrolitos algunas cepas de Shigella pueden no crecer en el clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
mismo. Washington, D.C.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo
miento.

Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-

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SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Clostridios Diferencial Agar


Uso Instrucciones
Medio utilizado para el cultivo y recuento de Clostridios sulforre- Suspender 43.3 g del polvo por litro de agua purificada. Mezclar
ductores en alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. bien. Calentar con agitación frecuente y hervir un minuto. Distribuir
en tubos u otros recipientes apropiados y esterilizar 15 minutos a
Fundamento 121 ºC.
El medio de cultivo es altamente nutritivo por la presencia de glu- Es aconsejable usar el mismo día de la preparación.
cosa, tripteína, peptona de carne extracto de carne y extracto de
levadura, los cuales permiten el adecuado desarrollo bacteriano. Características del producto
En esta formulación, el almidón favorece la esporulación de la bac- Medio de cultivo deshidratado: beige oscuro, homogéneo, libre des-
teria, la resazurina es el indicador redox que vira al color rojo a altos lizamiento.
potenciales de oxido-reducción indicando condiciones aeróbicas Medio de cultivo preparado: ámbar oscuro
y la cisteína es el agente reductor. El sulfito de sodio y el citrato
de hierro y amonio constituyen la fuente y el sistema indicador de Almacenamiento
la reducción de sulfito por los clostridios sulforreductores. Por re- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
ducción del sulfito se genera SH2, el cual reacciona con los iones Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Fe3+ y se forma un precipitado de color negro. El agar es el agente
solidificante. Procedimiento
Siembra
Contenido y composición Previo a la inoculación, se recomienda realizar a la muestra un tra-
Código B0220205: envase x 100 g. tamiento térmico a 80 ºC durante 10 minutos. Esto favorecerá la
Código B0220206: envase x 500 g. esporulación de la bacteria y la disminución o eliminación de la flora
competitiva presente.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. Luego, sembrar en placas o en tubos:
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0.
Extracto de carne...................................................................................................... 8.0. Siembra en placas: seguir una de estas 2 técnicas:
Almidón soluble............................................................................................................ 1.0. - En superficie: sembrar hasta 0,1 ml de la muestra directa o de la
Glucosa....................................................................................................................................... 1.0. dilución apropiada y esparcirla en el medio de cultivo.
Extracto de levadura............................................................................................ 1.0. - En profundidad: inocular hasta 1 ml de la muestra directa o de la
Clorhidrato de cisteína...................................................................................... 0.5. dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
Citrato de hierro y amonio............................................................................ 1.0. a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
Sulfito de sodio...........................................................................................................0.75. ción. Dejar solidificar.
Resazurina....................................................................................................................... 0.002.
Agar................................................................................................................................................20.0. En caso de sembrar en tubos, colocar un tapón de parafina estéril
pH final: 7.6 ± 0.2 luego de haber inoculado la muestra.

HOJA 1 DE 2
Clostridios Diferencial Agar

Incubación miento.
En anaerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-72 horas.
Precauciones
Interpretación de los resultados - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Observar las características de las colonias y efectuar el recuento sivo.
microbiano. Los microorganismos productores de SH2 se observan - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
como colonias de color negro. ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
CONTROL DE CALIDAD rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO COLONIAS NEGRAS - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Clostridium perfringens Satisfactorio + nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 13124 establecidas por el laboratorio.
Clostridium sporogenes Satisfactorio + - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 19404 va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO mismo según reglamentaciones vigentes.
Medio sin inocular Sin cambios
Referencias
Limitaciones Weenk, G.H., van den Brink, J.A., Struijk, C.B. and Mossel, D.A.A.
-Otras bacterias pueden producir SH2, por eso se sugiere realizar el 1995. Modified methods for the enumeration of spores of Clostri-
tratamiento térmico para eliminar las formas vegetativas. dium species in dried foods. Int. J. Food Microbiol. 27, 185-200.
-La presencia de color negro es presuntiva de clostridios sulforre- Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
ductores. Es necesario realizar pruebas bioquímicas adicionales de Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
identificación bacteriana.
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Columbia Agar Base


Uso Instrucciones
Medio de cultivo nutritivo utilizado para el crecimiento de diversos Suspender 44 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar
microorganismos. con agitación frecuente y hervir durante un minuto para disolución
Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de micro- total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave
organismos exigentes y la clara visualización de reacciones de he- a 121°C durante 15 minutos.
mólisis. También puede ser utilizado como base para la preparación Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
de agar chocolate. desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- estériles.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Preparación de Agar Chocolate: agregar 5-10 % de sangre ovina
desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
Fundamento enfriado a 45-50 ºC. Calentar a 80 ºC durante 10 minutos mez-
Este medio combina las virtudes de la peptona, la tripteína, el ex- clando frecuentemente. Dejar enfriar a 45-50 ºC y distribuir en pla-
tracto de levadura y el extracto de corazón, que cas de Petri estériles.
favorecen el desarrollo de microorganismos exigentes y la obten-
ción de colonias eugónicas. El almidón incrementa el Características del producto
desarrollo de neisserias y las reacciones de hemólisis de algunos Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
estreptococos. El cloruro de sodio mantiene el balance lizamiento.
osmótico y el agar es el agente solidificante. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Puede ser utilizado como medio base para ser suplementado con Suplementado con sangre ovina: color rojo cereza.
sangre o con antimicrobianos, lográndose así un
un medio mas enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo. Almacenamiento
Si se suplementa con sangre ovina o equina, se puede preparar Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
“Agar Sangre” y lograr así el crecimiento y observación de las reac- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ciones hemolíticas de los microorganismos inoculados o también
se puede preparar “Agar Chocolate” el cual es un medio de culti- Procedimiento
vo adecuado para el crecimiento de microorganismos exigentes Siembra
en sus requerimientos nutricionales como ser Haemophilus spp. y En superficie, estriar directamente el material en estudio.
Neisseria spp.
Para aislar microorganismos Gram positivos en forma selectiva, Incubación
puede agregarse 10 mg de colistina y 15 mg de ácido nalidíxico El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
por litro de medio de cultivo. Este medio suplementado con antibió- del microorganismo que se quiera recuperar.
ticos es conocido como HV o CoNa y se utiliza En general se recomienda:
especialmente para el aislamiento de Gardnerella vaginalis. Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
18 a 24 horas.
Contenido y composición Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Código B0211105: envase x 100 g. fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Código B0211106: envase x 500 g. Bacterias anaerobias: en anaerobiosis, a 35-37 º C durante 24-48
horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0. Interpretación de los resultados
Tripteína...................................................................................................................................10.0. Observar las características de las colonias.
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0. Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Extracto de corazón.............................................................................................. 3.0. nes de hemólisis:
Almidón ..................................................................................................................................... 1.0. Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
Agar................................................................................................................................................15.0. a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
pH final: 7.3 ± 0.2 HOJA 1 DE 2
Columbia Agar Base
de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los CO2 o en anaerobiosis.
microorganismos.
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo Materiales necesarios no provistos
claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre- miento.
dedor de la colonia en estudio.
Precauciones
CONTROL DE CALIDAD - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o
Escherichia coli Satisfactorio dañado.
ATCC 25922 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o de-
Staphylococcus aureus Satisfactorio terioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 25923 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio to.
ATCC 27853 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Clostridium sporogenes Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 19404 establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se con-
Columbia Agar Base suplementado con 5% de sangre ovina serva apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Hemólisis mismo según reglamentaciones vigentes.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta
ATCC 19615 Referencias
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa - Ellner, P.D., Stossel, C.I., Drakeford, E., and Vasi F. 1966. A new
ATCC 6305 culture medium for medical bacteriology. Am. J. Clin. Pathol.,
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa 45:502.
ATCC 49619 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins,
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Baltimore, Md.
Medio sin inocular Sin cambios - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Limitaciones Washington, D.C.
- Las reacciones hemolíticas de una amplia variedad de microor- - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
ganismos son diferentes al usar sangre equina respecto al utilizar gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
sangre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estrepto- Tests. Harmonized Method.
cocos grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suple- - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbio-
mentado con sangre equina pero no en el agar suplementado con logical Examination of Nonsterile products: Tests for Specified
sangre de carnero, y son mal clasificadas como Estreptococos Microorganisms. Harmonized Method.
Grupo A al usar sangre equina.
- La atmósfera de incubación puede influenciar en el tipo de Indicaciones al consumidor
reacción de hemólisis en los estreptococos beta hemolíticos. Para Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
obtener el mejor rendimiento, incubar las placas en atmósfera con Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
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SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0223105 B0223106

DNAsa Agar
Uso
Medio de cultivo utilizado para la detección de enzimas desoxirri- deslizamiento.
bonucleasas. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Es especialmente útil para la diferenciación entre especies de es-
tafilococos, así como para la diferenciación de Serratia spp. de es- Almacenamiento
pecies de Klebsiella y Enterobacter. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Fundamento
En el medio de cultivo, la tripteína es la fuente de nitrógeno, ami- Procedimiento
noácidos, y aporta los nutrientes necesarios para el adecuado de- Siembra
sarrollo bacteriano. A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, sembrar
El ácido desoxirribonucleico (DNA), se encuentra en grado alta- un inóculo denso, ya sea en estría o por la técnica de spot.
mente polimerizado, y es el sustrato de la enzima desoxirribonu-
cleasa (DNAsa), la cual lo hidroliza. El cloruro de sodio mantiene el Incubación
balance osmótico y el agar es el agente solidificante. En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-48 horas.
Este medio de cultivo, permite diferenciar bacterias que poseen la
enzima desoxirribonucleasa de aquellas que no la poseen. Interpretación de los resultados
La presencia de la enzima, se puede detectar mediante el agrega- Observar el crecimiento microbiano y cubrir la placa con de ácido
do de ácido clorhídrico 1N. clorhídrico 1N. Observar dentro de los primeros 5 minutos.
El ácido desoxirribonucleico hidrolizado presenta transparencia, Positivo: halo claro, transparente alrededor del crecimiento bac-
mientras que el ácido desoxirribonucleico polimerizado, precipita y teriano.
torna opacidad al medio de cultivo. Negativo: el medio se observa opaco.

Contenido y composición
Código B0223105: envase x 100 g. CONTROL DE CALIDAD
Código B0223106: envase x 500 g.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Prueba de DNAsa
FÓRMULA (en gramos por litro) Sthaphylococcus aureus
Tripteína...................................................................................................................................20.0. ATCC 6538 Satisfactorio +
Acido desoxirribonucleico.......................................................................... 2.0. Staphylococcus aureus
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. ATCC 25923 Satisfactorio +
Agar................................................................................................................................................15.0. Staphylococcus epidermidis
pH final: 7.3 ± 0.2 ATCC 14990 Satisfactorio -
Klebsiella pneumoniae
Instrucciones ATCC 700603 Satisfactorio -
Suspender 42 gramos del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar Serratia marcescens
reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebulli- ATCC 13880 Satisfactorio +
ción para disolución completa. Distribuir en recipientes apropiados Enterobacter cloacae
y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Distribuir en ATCC 13047 Satisfactorio -
placas de Petri estériles.

Características del producto CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre Medio sin inocular Sin cambios

HOJA 1 DE 2
DNAsa Agar

Limitaciones establecidas por el laboratorio.


Las placas no pueden ser reutilizadas luego del agregado del ácido - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
clorhídrico. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Materiales necesarios no provistos mismo según reglamentaciones vigentes.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Referencias
miento. - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Precauciones timore, Md.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
sivo. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Washington, D.C.
ñado. - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Indicaciones al consumidor
to. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad

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D.R.C.M. Caldo (Caldo Diferencial


y Reforzado para Clostridios)
USO INSTRUCCIONES
Medio utilizado para el cultivo y recuento de anaerobios sulfitorre- Suspender 27.5 gramos en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar
ductores por la técnica del número mas probable (NMP). 5 minutos. Mezclar y llevar a ebullición con agitación frecuente para
Es ampliamente utilizado en el análisis de aguas y alimentos. disolución completa. Distribuir en recipientes apropiados y esterili-
zar por autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Si se desea prepa-
FUNDAMENTO rar caldo en doble concentración, suspender 55 gramos por litro de
El medio de cultivo es altamente nutritivo por la presencia de glu- agua purificada y seguir las instrucciones indicadas previamente.
cosa, tripteína, peptona de carne, extracto de carne y extracto de
levadura, los cuales permiten el adecuado desarrollo bacteriano. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
En esta formulación, el almidón favorece la esporulación de la bac- Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
teria, la resazurina es el indicador redox que vira al color rojo a altos lizamiento.
potenciales de oxido-reducción indicando condiciones aeróbicas y Medio de cultivo preparado: color ámbar rojizo.
la cisteína es el agente reductor. El sulfito de sodio y el citrato de
hierro constituyen la fuente y el sistema indicador de la reducción ALMACENAMIENTO
de sulfito por los clostridios sulforreductores. Por reducción del sul- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
fito se genera SH2, el cual reacciona con los iones Fe3+ y se forma Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
un precipitado de color negro.
PROCEDIMIENTO
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN Siembra
Código B0223805: envase x 100 g. Inocular el medio de cultivo según la técnica del número mas pro-
Código B0223806: envase x 500 g. bable (NMP) y cubrir con una capa de 3 a 5 mm de parafina o
vaselina estéril para favorecer la anaerobiosis.
FÓRMULA (en gramos por litro) Luego, se recomienda realizar un tratamiento térmico a 75 ºC du-
PEPTONA DE CARNE......................................................................................................... 5.0. rante 30 minutos para eliminar el oxigeno disuelto y las formas
TRIPTEÍNA...................................................................................................................................... 5.0. vegetativas.
EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................... 8.0.
EXTRACTO DE LEVADURA .......................................................................................... 1.0. Incubación
ALMIDÓN......................................................................................................................................... 1.0. A 35-37 °C, durante 7 días hasta 4 semanas.
ACETATO DE SODIO ............................................................................................................ 5.0.
GLUCOSA....................................................................................................................................... 1.0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
L-CISTEINA .................................................................................................................................. 0.5. Examinar el color de los tubos. Los microorganismos productores
SULFITO DE SODIO.............................................................................................................. 0.5 de SH2 se observa el medio de color negro.
CITRATO DE HIERRO.......................................................................................................... 0.5. La presencia de color negro es presuntiva de clostridios.
RESAZURINA ..................................................................................................................... 0.002.
pH FINAL: 7.1 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
D.R.C.M. Caldo (Caldo Diferencial y Reforzado para Clostridios)

CONTROL DE CALIDAD PRECAUCIONES


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO ENNEGRECIMIENTO sivo.
Clostridium sporogenes - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 19404 Satisfactorio Positivo ñado.
Clostridium perfringens - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 13124 Satisfactorio Positivo rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Escherichia coli - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 25922 Satisfactorio Negativo to.
Staphylococcus aureus - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25923 Satisfactorio Negativo nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO va apropiadamente.
Medio sin inocular Sin cambios - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
LIMITACIONES
- El crecimiento bacteriano, generalmente se observa a los 3 a 4 REFERENCIAS
días de incubación. Se recomienda dejar los cultivos hasta 4 sema- - Gibbs, B.M., Freame, B. 1965. Methods for the recovery of Clostri-
nas porque algunas cepas presentan esporas que requieren tiempo dia from food. J. Appl. Bact, 28: 95-111.
para comenzar a germinar. - Freame, B., Fitzpatrick, B.W.F. 1972. The use of D.R.C.M for the
- Otras bacterias pueden producir SH2, por eso se sugiere realizar isolation and enumeration of Clostridia from food. In “Isolation of
el tratamiento térmico para eliminar las formas vegetativas. Anaerobes.” Ed Shapton and Board, Academic Press, London, New
- Examinar el color de los tubos. La presencia de color negro es York.
presuntiva de clostridios. Es necesario realizar pruebas bioquímicas - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
adicionales de identificación bacteriana. maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
timore, Md.
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de INDICACIONES AL CONSUMIDOR
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
miento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

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E.C. Medio Modificado


Uso deslizamiento.
Medio de enriquecimiento selectivo que favorece el crecimiento de Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Escherichia coli O157H7 a partir de alimentos.
Almacenamiento
Fundamento Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
En el medio de cultivo, la tripteína es la fuente de péptidos, aminoá- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
cidos y nitrógeno. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable,
las sales fosfato forma un sistema buffer que impide que los ácidos Procedimiento
originados por fermentación de la lactosa afecten el crecimiento Siembra
de microorganismos y el cloruro de sodio mantiene el balance os- Consultar en bibliografía de referencia la metodología apropiada.
mótico. Las sales biliares inhiben el desarrollo de flora Gram posi- En general se pesan 25 gramos de alimento en 225 ml de E.C.
tiva presente en la muestra. Medio Modificado
Su fórmula es bastante similar a la del E.C. Medio ( )
pero se ha reducido el contenido de sales biliares, disminuyendo su Incubación
toxicidad e incrementando el desarrollo de Escherichia coli O157H7. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 horas.
Luego subcultivar en medios selectivos para Escherichia coli O157H7,
Contenido y composición como ser Mac Conkey con Sorbitol Agar ( ).
Código B0222805: envase x 100 g.
Código B0222806: envase x 500 g. Interpretación de los resultados
El crecimiento se observa por turbidez en el medio de cultivo.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Tripteína .................................................................................................................................20.0.
Lactosa ........................................................................................................................................ 5.1. Control de Calidad
Sales biliares Nº 3 ....................................................................................................1.12.
Fosfato dipotásico ..................................................................................................... 4.0. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Características de las
Fosfato monopotásico ......................................................................................... 1.5. colonias en Mac Conkey
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. con Sorbitol Agar
pH final: 6.9 ± 0.2 Escherichia coli O157 H7 Satisfactorio Incoloras
ATCC 700728
Instrucciones Escherichia coli Satisfactorio Rosadas-rojizas con halo de
Suspender 36.7 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar ATCC 25922 precipitación biliar
con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto para Escherichia coli Satisfactorio Rosadas-rojizas con halo de
disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en ATCC 8739 precipitación biliar
autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a temperatura am- Enterococcus faecalis Inhibido ---
biente. ATCC 29212
Se puede aumentar la selectividad por el agregado de 20 mg de
novobiocina por litro de medio de cultivo.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Características del producto Medio sin inocular Sin cambios
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre

HOJA 1 DE 2
E.C. Medio Modificado

Materiales necesarios no provistos - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mismo según reglamentaciones vigentes.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Referencias
- Okrend and Rose. 1989. Isolation and identification of E. coli
Precauciones O157H7 from meat. USDA Food Safety Inspection Service. Rev. 3
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- of Laboratory Communication no. 38. E. coli O157H7. 20 December
sivo. 1989. U.S. Department of Agriculture, Washington, D.C.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- - Okrend, Rose and Bennett. 1990. J. Food Prot. 53:249.
ñado. - Okrend, Rose and Lattuada. 1990. J. Food Prot. 53:941.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - Okrend, Rose and Matner. 1990. J. Food Prot. 53:936.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Hawkins and Orme. 1995. Proc. West. Sec., Amer. Soc. Animal Sci.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- vol. 46. Johnson, Durham, Johnson and MacDonald. 1995. Appl.
to. Environ. Microbiol. 61:386.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Indicaciones al consumidor
establecidas por el laboratorio. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
va apropiadamente.

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E. C. Medio
Uso Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Medio utilizado para el recuento de coliformes totales, coliformes
fecales y Escherichia coli en agua, alimentos y otros materiales. Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Fundamento Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Medio recomendado por Hajna y Perry y por el Standard Methods
for the Examination of Water and Wastewater para el recuento de Procedimiento
coliformes en alimentos. Siembra
En el medio de cultivo la tripteína es la fuente de péptidos, aminoá- Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Pro-
cidos y nitrógeno. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable bable:
y favorece el desarrollo de bacterias coliformes, las sales biliares a.- Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por
inhiben el crecimiento de la flora acompañante Gram positiva, las triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en
sales fosfato constituyen un sistema buffer que impide que los pro- caldo simple concentración.
ductos ácidos originados por la fermentación de lactosa afecten el
crecimiento microbiano y el cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico. Número Volumen de Volumen de Concentración
de tubos la muestra medio del medio
Contenido y composición 3 10 ml 10 ml Doble
Código B0216805: envase x 100 g. 3 1 ml 10 ml Simple
Código B0216806: envase x 500 g. 3 0.1 ml 10 ml Simple

FÓRMULA (en gramos por litro) b - Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efec-
Tripteína...................................................................................................................................20.0. tuar diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución
Lactosa......................................................................................................................................... 5.0. por triplicado en medio de cultivo simple concentración.
Sales biliares N° 3......................................................................................................... 1.9.
Fosfato dipotásico ..................................................................................................... 4.0. Número Dilución de Volumen de Volumen de Concentración
Fosfato monopotásico ......................................................................................... 1.5. de tubos la muestra la muestra medio del medio
Cloruro de sodio ........................................................................................................ 5.0. 3 10-1 1 ml 10 ml Simple
pH final: 6.9 ± 0.2 3 10 -2
1 ml 10 ml Simple
3 10 -3
1 ml 10 ml Simple
Instrucciones
Suspender 37,4 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar Incubación
reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu- Para el recuento de coliformes totales: en aerobiosis, a 35-37 °C
llición para su total disolución. Distribuir en tubos de ensayo que durante 24 - 48 horas.
contengan campanitas de Durham. Esterilizar en autoclave a 121°C Para el análisis de coliformes fecales y Escherichia coli: en aerobio-
durante 15 minutos. sis, a 44,5 - 45,5 °C durante 24 horas.

Características del producto Interpretación de los resultados


Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre Se consideran resultado positivo el crecimiento bacteriano y la pro-
deslizamiento. ducción de gas.

HOJA 1 DE 2
E. C. Medio

Control de Calidad sivo.


- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Producción ñado.
de gas - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Escherichia coli rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 8739 Satisfactorio + - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Escherichia coli to.
ATCC 25922 Satisfactorio + - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Salmonella typhimurium nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 14028 Satisfactorio - establecidas por el laboratorio.
Staphylococcus aureus - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 25923 Inhibido - va apropiadamente.
Enterococcus faecalis - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 29212 Inhibido - mismo según reglamentaciones vigentes.

Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Hajna and Perry. 1943. Am. J. Public Health 33:550.
Medio sin inocular Sin cambios - Marshall (ed.). 1993. Standard methods for the examination of
dairy products, 16th ed. American Public Health Association, Was-
Expresión de Resultados: Para muestras fluidas expresar el NMP hington, D.C.
por 100 ml de muestra, y para muestras sólidas expresarlo por gra- - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
mo de producto. biological Examination., Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
Materiales necesarios no provistos - Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the mi-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de crobiological examination of foods, 4th ed. American Public Health
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Association, Washington, D.C.
miento.
Indicaciones al consumidor
Precauciones Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0210105 B0210106

E.M.B. Agar (con Eosina y Azul


de Metileno)
Uso FÓRMULA (en gramos por litro)
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aisla- Peptona ...................................................................................................................................10.0.
miento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y Lactosa......................................................................................................................................... 5.0.
escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las Sacarosa.................................................................................................................................... 5.0.
especies de la familia Enterobacteriaceae. Fosfato dipotásico ..................................................................................................... 2.0.
Eosina.............................................................................................................................................. 0.4.
Fundamento Azul de metileno....................................................................................................0.065.
El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague Agar ...............................................................................................................................................13.5.
con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aisla- pH final: 7.2 ± 0.2
miento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos
Gram negativos. Instrucciones
Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo Suspender 36 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición hasta
la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, su disolución total. Esterilizar en autoclave 121°C durante 15 minu-
está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejer- tos. Distribuir en placas de Petri estériles.
cen un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias
Gram positivas. El agar es el agente solidificante. Características del producto
Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un Medio de cultivo deshidratado: color púrpura, homogéneo, libre
característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa po- deslizamiento.
seen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las Medio de cultivo preparado: color púrpura vinoso.
que no lo hacen son incoloras. Nota: La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de meti-
También, pueden crecer especies de Candida y se observan como leno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La
colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no
el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo.
crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes,
mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se Almacenamiento
observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus
membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo Procedimiento
de especies de Salmonella y Shigella. Siembra:
En superficie, por estriado directo a partir de la muestra.
Contenido y composición En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
Código B0210105: envase x 100 g.
Código B0210106: envase x 500 g.

HOJA 1 DE 2
E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

Incubación: - Para la identificación de género o especie microbiana se deben


En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24 horas. realizar pruebas bioquímicas adicionales.
- Algunas cepas de Salmonella y Shigella no crecerán en EMB
Interpretación de los resultados Agar.
Microorganismos fermentadores de lactosa y / o sacarosa: - Durante la esterilización el azul de metileno puede precipitar. Es
colonias de color negro azulado o amarronado. Pueden tener centro importante resuspender el precipitado mientras se distribuye en
oscuro y brillo metálico. placas de Petri estériles el medio preparado.
Microorganismos no fermentadores de lactosa y sacarosa: - Conservar el medio preparado en placas a 2-8 ºC y protegido de
colonias del color del medio, incoloras. la luz ya que los indicadores presentes son fotosensibles y pueden
inhibir el desarrollo de algunas especies de Proteus si no se con-
Control de Calidad servan apropiadamente.

Microorganismos Crecimiento Características Materiales necesarios no provistos


de las colonias Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Escherichia coli Satisfactorio Negro azuladas con brillo calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
ATCC 25922 metálico miento.
Escherichia coli Satisfactorio Negro azuladas con brillo
ATCC 8739 metálico Precauciones
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Mucosas confluentes, con - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
ATCC 700603 centro oscuro sivo.
Proteus mirabilis Satisfactorio Incoloras - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 43071 ñado.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incoloras - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 14028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Shigella flexneri Satisfactorio Incoloras - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 12022 to.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Incoloras - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 27853 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Enterococcus faecalis Inhibición parcial Incoloras puntiformes establecidas por el laboratorio.
ATCC 29212 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Candida albicans Inhibición parcial Rosadas puntiformes va apropiadamente.
ATCC 10231 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Staphylococcus aureus Inhibido --- mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 25923
Referencias
- Holt-Harris and Teague. 1916. J. Infect. Dis. 18:596.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Levine. 1918. J. Infect. Dis. 23:43.
Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Limitaciones timore, Md.
- En el caso de los microorganismos fermentadores, no se puede
diferenciar el carbohidrato metabolizado. Indicaciones al consumidor
- Este medio de cultivo es moderadamente inhibitorio ya que las Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
cepas de enterococo y candida pueden desarrollar en el mismo, Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
observándose como colonias de tamaño puntiforme.
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Enriquecimiento para Enterobac-


terias Caldo (según Mossel)
Uso Instrucciones
Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de todas las ente- Suspender 45 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
robacterias a partir de alimentos, productos farmacéuticos y otros sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
materiales de importancia sanitaria. para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y calentar
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de a 100º C durante 30 minutos. Enfriar rápidamente en agua corrien-
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- te. No esterilizar por autoclave.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente).
Características del producto
Fundamento Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogéneo, libre des-
En el medio de cultivo la peptona de gelatina y la glucosa son la lizamiento.
fuente nutritiva para el desarrollo de los microorganismos. La bilis Medio de cultivo preparado: color verde.
de buey y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben
el crecimiento de microorganismos Gram positivos que pudieran Almacenamiento
estar presentes en la muestra en estudio. El fosfato disódico y el Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
fosfato monopotásico forman un sistema buffer, que impide que Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
los productos ácidos originados por la fermentación de la glucosa
afecten el crecimiento de los microorganismos. Procedimiento
Siembra
Contenido y composición Por inoculación directa del material en estudio. Consultar la metodo-
Código B0282405: envase x 100 g. logía apropiada en bibliografía de referencia, ejemplo USP XXXI.
Código B0282406: envase x 500 g.
Incubación
FÓRMULA (en gramos por litro) En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Peptona de gelatina..............................................................................................10.0. Luego subcultivar en alguno de los medios para enterobacterias:
Glucosa....................................................................................................................................... 5.0. Violeta Rojo Bilis Glucosa Agar ( ), Violeta Rojo Bilis Agar
Bilis de buey.......................................................................................................................20.0. ( ).
Verde brillante....................................................................................................... 0.015.
Fosfato disódico............................................................................................................. 8.0. Interpretación de los resultados
Fosfato monopotásico.......................................................................................... 2.0. El crecimiento se observa por turbidez o por viraje del color del
pH final: 7.2 ± 0.2 medio de cultivo al color amarronado o amarillo.

HOJA 1 DE 2
Enriquecimiento para Enterobacterias Caldo (según Mossel)

Control de Calidad - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o


dañado.
Microorganismos Crecimiento Crecimiento en Violeta - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o de-
Rojo Bilis Glucosa Agar terioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Escherichia coli Satisfactorio Colonias rojo púrpura, con halo de - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 8739 precipitación rojizo to.
Escherichia coli Satisfactorio Colonias rojo púrpura, con halo de - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25922 precipitación rojizo nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Salmonella typhimurium Satisfactorio Colonias rojo púrpura, con halo de establecidas por el laboratorio.
ATCC 14028 precipitación rojizo - Las características del producto pueden alterarse si no se con-
Shigella flexneri Satisfactorio Colonias rojo púrpura, con halo de serva apropiadamente.
ATCC 12022 precipitación rojizo - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Proteus mirabilis Satisfactorio Colonias rojo púrpura, con halo de mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 43071 precipitación rojizo
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Colonias incoloras Referencias
ATCC 9027 - Mossel, Vissar and Cornellisen. 1963. J. Appl. Bacteriol. 26:444.
Staphylococcus aureus Inhibido Inhibido - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ATCC 6538 tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Enterococcus faecalis Inhibido Inhibido Productos no Obligatoriamente Estériles.
ATCC 29212 - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Tests. Harmonized Method.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbio-
Medio sin inocular Sin cambios logical Examination of Nonsterile products: Tests for Specified
Microorganisms. Harmonized Method.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.

Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.

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Fenilalanina Agar
USO INSTRUCCIONES
Medio de cultivo utilizado para diferenciar Morganella morganii bio- Suspender 23 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
grupo 1 y 2, Proteus spp. y Providencia spp., de la mayoría de otros sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
miembros de la familia Enterobacteriaceae, en base a la presencia hasta disolución total. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a
de la enzima fenilalanina deaminasa. 121°C durante 15 minutos.
Enfriar y solidificar en posición inclinada para obtener picos de flau-
FUNDAMENTO ta alargados.
En el medio de cultivo, el extracto de levadura aporta los nutrientes
necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
El aminoácido fenilalanina es sometido a la desaminación oxidativa Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
catalizada por la enzima fenilalanina deaminasa (es una flavopro- lizamiento.
teína), para producir ácido fenilpirúvico y amoníaco. La presencia Medio de cultivo preparado: ámbar claro.
del ácido fenilpirúvico se demuestra con el agregado de cloruro
férrico en medio ácido, con el cual se forma un quelato de color ALMACENAMIENTO
verdoso entre el ácido fenil pirúvico y los iones Fe3+. El agar es el Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
agente solidificante. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Además, en este medio se suele poner en evidencia la producción
de pigmentos melánicos, como en el caso de Morganella morganii, PROCEDIMIENTO
Pseudomonas aeruginosa. Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, sembrar un inóculo
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN denso estriando la superficie del medio.
Código B0212705: envase x 100 g.
Código B0212706: envase x 500 g. Incubación
En aerobiosis, a 35-37 °C durante 24 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
EXTRACTO DE LEVADURA............................................................................................ 3.0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
DL-FENILALANINA.............................................................................................................. 2.0. - Agregar 4 a 5 gotas de Fenilalanina Reactivo (REF B1550461).
FOSFATO DISÓDICO........................................................................................................... 1.0. - Rotar el reactivo con suavidad sobre el pico de flauta.
CLORURO DE SODIO........................................................................................................ 5.0. - Observar el color dentro de los primeros 5 minutos.
AGAR...............................................................................................................................................12.0. Positivo: desarrollo de color verde pálido a intenso en el pico de
pH FINAL: 7.3 ± 0.2 flauta y en el líquido de condensación.

HOJA 1 DE 2
Fenilalanina Agar

Negativo: sin cambios de color. El medio permanece amarillo debi- sivo.


do al color del reactivo. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
CONTROL DE CALIDAD - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
MICROORGANISMOS FENILALANINA COLOR DEL PICO DE FLAUTA Y/O - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
DEAMINASA LÍQUIDO DE CONDENSACIÓN to.
Proteus mirabilis Positivo Verde - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 43071 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Morganella morganii Positivo Verde establecidadas por el laboratorio.
ATCC 25830 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Negativo Amarillo va apropiadamente.
ATCC 25922 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Klebsiella pneumoniae Negativo Amarillo mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 700603
REFERENCIAS
- Ewing, Davis and Reavis. 1957. Public Health Lab. 15:153.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Medio sin inocular Sin cambios maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
more, Md.
LIMITACIONES - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
No se recomienda realizar la lectura de la prueba después de los 5 clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
minutos, debido a que disminuye la intensidad del color verde. Washington, D.C.
- MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
miento. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
PRECAUCIONES
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-

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GC Agar Base
Uso Instrucciones
Se utiliza como base nutritiva para la preparación de los medios de - Preparación de GC Agar Base doble concentración:
cultivo: Thayer-Martin Medio (original y modificado) y Chocolate Suspender 8,2 g del polvo en 100 ml de agua purificada. Si a partir
Agar, permitiendo así la recuperación de microorganismos exigen- del medio deshidratado se desea preparar Thayer Medio Modifica-
tes en sus requerimientos culturales, como por ejemplo Neisseria do, es necesario agregar 1 g de agar y 0,3 g de glucosa. Mezclar
gonorrhoeae y Neisseria meningitidis. suavemente. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
para asegurar la disolución completa del medio. Distribuir en reci-
Fundamento pientes apropiados.
Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla
en partes iguales de peptona de carne y peptona de caseína) es - Preparación de solución de hemoglobina 2%:
la fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el Suspender 2 g de hemoglobina en polvo en 100 ml de agua puri-
almidón adsorbe sustancias tóxicas indeseables para el desarrollo ficada de la siguiente manera: mezclar 2 g de hemoglobina con 2
de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman un siste- o 3 ml de agua purificada caliente hasta la formación de una pasta
ma buffer y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El uniforme. Agregar gradualmente y agitando agua purificada hasta
agar es el agente solidificante. completar los 100 ml, quedando así una solución homogénea. Dis-
Este medio de cultivo puede ser utilizado como base y ser suple- tribuir en recipientes apropiados.
mentado con otros nutrientes o con antimicrobianos, lográndose
un medio mas enriquecido o selectivo según el aditivo. En recipientes separados, esterilizar el GC Agar Base y la hemoglo-
Si se le agrega solución de hemoglobina 2% y suplemento es- bina al 2% en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
téril de enriquecimiento Britalex con solvente, se prepara el Agar Enfriar las soluciones estériles a 45-50°C.
Chocolate Enriquecido, en el cual pueden desarrollar especies de
estreptococos, Haemophilus spp. y Neisserias. Luego, según el medio de cultivo que se desee preparar, proceder
Si se desea un medio selectivo para la recuperación de Neisseria de la siguiente manera:
gonorrhoeae y Neisseria meningitidis, se debe agregar además la
mezcla antimicrobiana VCNT constituída por vancomicina, colistina, - Para preparar Chocolate Agar Enriquecido:
nistatina y trimetoprima que inhibe el desarrollo de microorganis- Agregar por cada 100 ml de GC Agar Base doble concentración:
mos Gram positivos y Gram negativos (aún el swarming de Proteus 100 ml de solución de hemoglobina 2% y 2 ml de suplemento Bri-
spp.), y candidas. No tiene efecto inhibitorio en el desarrollo de talex con solvente (B0360021) reconstituido con 2.1 ml de solven-
Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis. te estéril. Agitar suavemente y distribuir en placas de Petri estériles.

Contenido y composición - Para preparar Thayer Martin Medio Modificado:


Código B0215705: envase x 100 g. Agregar por cada 100 ml de GC Agar Base doble concentración:
Código B0215706: envase x 500 g. 100 ml de solución de hemoglobina 2% ( ), 2 ml de su-
plemento Britalex con solvente (B0360021) reconstituido con 2,1
FÓRMULA (en gramos por litro) ml de solvente estéril y 2 ml de suplemento V.C.N.T. con solvente
Pluripeptona....................................................................................................................15.0. (B0360521) reconstituído con 2,1 ml de solvente estéril. Agitar
Almidón ....................................................................................................................................... 1.0. suavemente y distribuir en placas de Petri estériles.
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 4.0.
Fosfato monopotásico.......................................................................................... 1.0. Características del producto
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Agar................................................................................................................................................15.0. deslizamiento.
pH final: 7.2 ± 0.2 Medio de cultivo preparado: color ámbar claro

HOJA 1 DE 2
GC Agar Base

Suplementado con hemoglobina: color marrón oscuro. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio sin inocular Sin cambios
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Materiales necesarios no provistos
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Procedimiento miento.
Siembra
Directa, estriando sobre la superficie del medio de cultivo. Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
Incubación - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán ñado.
del microorganismo que se quiera recuperar. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
En general se recomienda: Bacterias de fácil crecimiento: en aero- rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
biosis, a 35-37 º C durante 18 a 24 horas. - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós- - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
fera con 5-10 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas. nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
Interpretación de los resultados - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Observar las características de las colonias. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
Control de Calidad
Referencias
Chocolate Agar Enriquecido: “GC Agar Base suplementado - Thayer J.D., and Martin J.E. 1966. Improved medium selective for
con Hemoglobina 2% y Britalex”: cultivation of Neisseria gonorrhoeae and Neisseria meningitidis.
Public Health Rep. 81(6), 559.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO - Martin, J.E., Armstrong J.H., and Smith, P.B. 1974. New system for
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Satisfactorio cultivation of Neisseria gonorrhoeae. Appl. Microbiol. 27 (1), 802.
Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Satisfactorio - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Satisfactorio maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 Satisfactorio more, Md.
Haemophilus influenzae ATCC 49247 Satisfactorio - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
Thayer Martin Medio Modificado: “GC Agar Base suplementa- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
do con Hemoglobina 2%, Britalex y VCNT” : clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
De acuerdo al protocolo del CDC el control de calidad del medio Washington, D.C.
Thayer Martin para productores de medios de cultivo el ensayo que - Forbes, Sahm and Weissfeld. Bailey & Scott’s diagnostic microbio-
efectúa Laboratorios Britania, es el siguiente: logy, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
02/2010 - REV .00

MICROORGANISMOS CRECIMIENTO Indicaciones al consumidor


Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 Satisfactorio Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 Inhibición total o parcial Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición total o parcial
Candida albicans ATCC 10231 Inhibición total o parcial
Proteus mirabilis ATCC 43071 Inhibición total o parcial

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Giolitti Cantoni Medio


USO posar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
Caldo de enriquecimiento utilizado para seleccionar y favorecer el llición para disolución total. Distribuir 19 ml en tubos de 20 x 200
aislamiento de Staphylococcus aureus a partir de alimentos. mm y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar
rápidamente y agregar asépticamente a cada tubo 1 ml de Solución
FUNDAMENTO Estéril de Telurito de Potasio al 1% (REF B0360366).
En el medio de cultivo, la tripteína, el extracto de carne y el extracto
de levadura, constituyen la base nutritiva para el desarrollo de mi- Características del producto
croorganismos. El piruvato de sodio y el manitol son estimulantes Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
del desarrollo de estafilococos y ayudan a la detección de estos lizamiento.
microorganismos presentes en la muestra, aún en pequeñas can- Medio de cultivo preparado: color ámbar transparente.
tidades. El cloruro de litio inhibe el crecimiento de bacilos Gram
negativos fermentadores de lactosa, mientras que otras bacterias Almacenamiento
Gram positivas, son inhibidas por el telurito de potasio y la glicina. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Cubriendo la superficie del medio inoculado con una capa de agar Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
o parafina estéril, se evita el crecimiento de micrococos.
El agregado de telurito de potasio favorece la selectividad del me- Procedimiento
dio de cultivo y además le otorga la propiedad de ser diferencial ya Siembra
que los microorganismos que reducen el telurito a teluro, forman Inocular por duplicado, 1 g o 1 ml de la muestra a analizar y alícuo-
en el medio un compuesto de color negro. tas de 1 ml de las diluciones decimales seriadas.
La Federación Internacional de Lechería (IDF) y American Public Si se desea, cubrir cada tubo con una capa de agar fundido estéril
Health Association (APHA), recomiendan el uso de este medio de para crear un medio anaerobio.
cultivo para el enriquecimiento de Staphylococcus aureus en el
análisis de productos lácteos. Incubación
También, fue recomendado por Mossel y col. para la detección de En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18 a 48 horas.
Staphylococcus aureus en leche en polvo y otros alimentos para
niños, así como para el análisis microbiológico de productos cárni- Interpretación de los resultados
cos y huevos deshidratados. La presencia de Staphylococcus aureus se manifiesta por el enne-
grecimiento del medio en el fondo o en toda la columna del tubo,
Contenido y composición debido a la reducción del telurito a teluro.
Código B0215105: envase x 100 g.
Código B0215106: envase x 500 g. CONTROL DE CALIDAD

FÓRMULA (en gramos por litro) Microorganismo Crecimiento Apariencia del medio
Tripteína.............................................................................................................................................. 10.0 Staphylococcus aureus
Extracto de carne.............................................................................................................. 5.0 ATCC 25923 Satisfactorio Ennegrecimiento
Extracto de levadura.................................................................................................... 5.0 Staphyloccus aureus
Cloruro de litio...................................................................................................................... 5.0 ATCC 6538 Satisfactorio Ennegrecimiento
Manitol.................................................................................................................................................. 20.0 Escherichia coli
Cloruro de sodio.................................................................................................................. 5.0 ATCC 25922 Inhibido -
Glicina.................................................................................................................................................... 1.2 Klebsiella pneumoniae
Piruvato de sodio.................................................................................................................. 3.0 ATCC 700603 Inhibido -
pH final: 6.9 ± 0.2

Instrucciones CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Suspender 54,2 g de polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar re- Medio sin inocular Sin cambios

HOJA 1 DE 2
Giolitti Cantoni Medio

Limitaciones to.
Medio de diagnóstico presuntivo. Se puede verificar la presencia de - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Staphylococcus aureus subcultivando los tubos positivos en me- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
dios sólidos: Baird Parker Agar Base ( ) o Manitol Salado establecidas por el laboratorio.
Agar ( ). - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
Materiales necesarios no provistos - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mismo según reglamentaciones vigentes.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Referencias
- Giolitti and Cantoni. 1966. J. Appl. Bacteriol. 29:395.
Precauciones - Mossel, Harrewijn and Elzebroek. 1973. UNICEF.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - International Dairy Federation. 1978. IDF Standard 60A:1978. In-
sivo. ternational Dairy Federation, Brussels, Belgium.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado. Indicaciones al consumidor
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-

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HC Agar Base
USO INSTRUCCIONES
Medio que al ser suplementado con polisorbato 80 (Tween 80), se Suspender 54.5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
usa para la determinación de hongos en productos cosméticos. reposar 5 minutos. Agregar 20 ml de polisorbato 80.
Calentar con agitación frecuente y hervir 1 minuto para disolución
FUNDAMENTO total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave
Medio descripto en 1986 por Mead y O´Neill para el recuento de a 121 ºC durante 15 minutos.
hongos en productos cosméticos. Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Presenta la ventaja de requerir un menor tiempo de incubación
respecto a otros medios utilizados para el mismo fin. En este me- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
dio de cultivo la incubación se realiza durante 3 días a 27,5 ± 0,5 Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
ºC mientras que en otros medios para el cultivo de hongos y leva- lizamiento.
duras la incubación es generalmente entre 5 a 7 días. Medio de cultivo preparado: color ámbar oscuro.
Su formulación es ampliamente nutritiva y provee proteínas, pépti-
dos, aminoácidos, nitrógeno, vitaminas, minerales, iones esenciales ALMACENAMIENTO
e hidratos de carbono para el adecuado desarrollo de hongos fila- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
mentosos y levaduras. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Las sales fosfato constituyen un sistema buffer que mantiene el pH
en un valor cercano al neutro. El carbonato de sodio inactiva bajos PROCEDIMIENTO
niveles de conservantes que son activos a pH levemente ácido. Siembra
El cloranfenicol le otorga selectividad al medio de cultivo debido a Inoculación directa, en superficie.
que inhibe el desarrollo bacteriano que pudiera estar presente en
la muestra y el polisorbato 80 neutraliza conservantes. El agar es Incubación
el agente solidificante. En aerobiosis, a 27.5 ± 0.5 ºC durante 72 horas.

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS


Código B0219405: envase x 100 g. Observar y describir el color y la morfología de las colonias obte-
Código B0219406: envase x 500 g. nidas.

FÓRMULA (en gramos por litro) CONTROL DE CALIDAD


TRIPTEÍNA .................................................................................................................................... 2.5.
PEPTONA DE CARNE......................................................................................................... 2.5. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
EXTRACTO DE LEVADURA............................................................................................ 5.0. Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 Satisfactorio
GLUCOSA....................................................................................................................................20.0. Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 Satisfactorio
FOSFATO DISÓDICO............................................................................................................. 3.5. Candida albicans ATCC 10231 Satisfactorio
FOSFATO MONOPOTÁSICO.......................................................................................... 3.4. Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 Satisfactorio
CLORURO DE AMONIO.................................................................................................... 1.4. Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Inhibición parcial o total
CARBONATO DE SODIO................................................................................................... 1.0.
SULFATO DE MAGNESIO..............................................................................................0.06.
CLORANFENICOL.................................................................................................................. 0.1. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
AGAR................................................................................................................................................15.0. Medio sin inocular Sin cambios
pH FINAL: 7.0 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
HC Agar Base
LIMITACIONES rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- La temperatura de incubación 27.5 ± 0.5 ºC, es crítica para obte- - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ner resultados significativos a las 72 horas. to.
- Los requerimientos nutricionales de los microorganismos varían, - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
por lo cual algunas cepas pueden crecer de manera escasa en este nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
medio. establecidas por el laboratorio.
- Realizar ensayos de identificación adicionales de los microorga- - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
nismos que hayan desarrollado. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS mismo según reglamentaciones vigentes.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- REFERENCIAS
miento. - Mead and O’Neill. 1986. J. Soc. Cosmet. Chem. 37:49.
- Hitchins, Tran and McCarron. 1995. In FDA bacteriological analyti-
PRECAUCIONES cal manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, Md.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
ñado. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-

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Hektoen Entérico Agar


Uso Instrucciones
Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento Suspender 76 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
de Salmonella spp. y Shigella spp. a partir de heces y alimentos. sar de 10 a 15 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir
hasta lograr una disolución completa. No esterilizar en autocla-
Fundamento ve.
En el medio de cultivo la proteosa peptona y el extracto de levadu- Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
ra aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano. La lactosa,
sacarosa y salicina son los hidratos de carbono fermentables. Las Características del producto
sales biliares inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, de Medio de cultivo deshidratado: color púrpura, homogéneo, libre
algunos coliformes y de la mayoría de las cepas de Pseudomonas deslizamiento.
spp. El azul de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores Medio de cultivo preparado: color verde amarronado.
de la fermentación de hidratos de carbono, mientras que el citrato
de hierro actua como indicador de la formación de SH2 a partir del Almacenamiento
tiosulfato debido a que se forma sulfuro de hierro, compuesto de Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
color negro. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el
agente solidificante. Procedimiento
El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibi- Siembra
ción de este microorganismo por las sales biliares está disminuida Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
por la adición de cantidades relativamente elevadas de proteosa Se incrementa la recuperación de patógenos fecales si las heces
peptona y de hidratos de carbono así como la baja toxicidad de los fueron incubadas previamente en caldo de enriquecimiento.
indicadores presentes en el medio de cultivo.
Incubación
Contenido y composición En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18 a 24 horas.
Código B0211005: envase x 100 g. Se logra una mejor diferenciación entre especies de Salmonella y
Código B0211006: envase x 500 g. Shigella al incubar las placas durante 48 horas.

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación de los resultados


Proteosa peptona ...................................................................................................12.0. Se debe determinar la fermentación de lactosa y la producción de
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0. SH2.
Sales biliares...................................................................................................................... 9.0. Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias amarillas
Lactosa......................................................................................................................................12.0. o anaranjadas.
Sacarosa.................................................................................................................................12.0. Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del
Salicina......................................................................................................................................... 2.0. color del medio, verde-azuladas.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Microorganismos productores de SH2: colonias con centro ne-
Tiosulfato de sodio.................................................................................................... 5.0. gro.
Citrato de hierro y amonio............................................................................ 1.5.
Azul de bromotimol...........................................................................................0.065.
Fucsina ácida....................................................................................................................... 0.1.
Agar................................................................................................................................................14.0.
pH final: 7.5 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Hektoen Entérico Agar
Control de Calidad Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
MICROORGANISMOS CARACTERISTICA DE COLONIAS sivo.
Salmonella enteritidis Verde azuladas con o sin centro negro - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 13076 ñado.
Salmonella typhimurium Verde azuladas con o sin centro negro - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 14028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Shigella flexneri Verdes, elevadas, húmedas - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 12022 to.
Shigella sonnei Verdes, elevadas, húmedas - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25931 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Proteus mirabilis Verde azuladas con o sin centro negro establecidas por el laboratorio.
ATCC 43071 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por va apropiadamente.
ATCC 25922 un precipitado biliar - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Klebsiella pneumoniae Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 700603 un precipitado biliar
Enterococcus faecalis Inhibido Referencias
ATCC 29212 - King S. and Metzger W.I. 1967. A new medium for the isolation of
Staphylococcus aureus Inhibido Salmonella and Shigella species. Bact. Proc. Am. Soc.
ATCC 25923 Microbiol., p. 77.
- King S. and Metzger W.I. 1968. A new plating medium for the iso-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO lation of enteric pathogens. I. Hektoen Enteric Agar. Appl. Microbiol.,
Medio sin inocular Sin cambios 16 (4) 577.
- King S. and Metzger W.I. 1968. A new plating medium for the
isolation of enteric pathogens. II. Comparison of Hektoen Agar with
Limitaciones SS and EMB Agar. Appl. Microbiol., 16 (4) 579.
- No autoclavar el medio de cultivo ya que el calentamiento excesi- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
vo puede afectar la composición del mismo. No es necesario este- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
rilizar el medio de cultivo debido al alto efecto inhibitorio del medio more, Md.
frente a la flora Gram positiva. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Las cepas de Proteus pueden no ser inhibidas y crecer como co- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
lonias similares a especies de Salmonella o Shigella. Por eso es ne- Washington, D.C.
cesario realizar pruebas bioquímicas de identificación microbiana.
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
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Hongos y Levaduras Medio


Uso Procedimiento
Medio utilizado para el aislamiento y recuento de hongos y leva- Siembra
duras en alimentos. En superficie: inocular directamente la muestra.
En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su
Fundamento dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
Este medio fue desarrollado por Mossel y colaboradores y propues- a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
to por la Federación Internacional de Lechería F.I.L.-I.D.F. norma N° ción. Dejar solidificar.
94-1980. Es un medio selectivo para el recuento de levaduras y
hongos a partir de una gran variedad de muestras alimenticias. Incubación
Es nutritivo debido a la presencia de extracto de levadura y glu- En aerobiosis, a 20-25 °C, durante 5-7 días o mayor tiempo según
cosa y selectivo por la presencia de cloranfenicol que inhibe el las características de la muestra y el microorganismo que se quiera
crecimiento bacteriano. El agar es el agente solidificante. recuperar.

Contenido y composición Interpretación de los resultados


Código B0215805: envase x 100 g. Observar y describir el color y la morfología de las colonias obte-
Código B0215806: envase x 500 g. nidas.

FÓRMULA (en gramos por litro) Control de Calidad


Instrucciones
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
Glucosa....................................................................................................................................20.0. Aspergillus brasiliensis
Cloranfenicol.................................................................................................................. 0.1. ATCC 16404 Satisfactorio
Agar................................................................................................................................................15.0. Candida albicans
pH final: 6.6 ± 0.2 ATCC 10231 Satisfactorio
Saccharomyces cerevisiae
Suspender 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo- ATCC 9763 Satisfactorio
sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición Trichophyton mentagrophytes
para disolución total ATCC 9533 Satisfactorio
Distribuir en recipientes adecuados. Esterilizar en autoclave duran- Staphylococcus aureus
te 15 minutos a 121°C. ATCC 25923 Inhibido
Distribuir en placas de Petri estériles. Escherichia coli
ATCC 25922 Inhibido
Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
deslizamiento. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro. Medio sin inocular Sin cambios

Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

HOJA 1 DE 2
Hongos y Levaduras Medio

Limitaciones to.
Realizar ensayos de identificación adicionales de los microorganis- - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
mos que hayan desarrollado. nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
Materiales necesarios no provistos - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de va apropiadamente.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
miento. mismo según reglamentaciones vigentes.

Precauciones Referencias
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Norma N° 94-1980. Federación Internacional de Lechería F.I.L.-
sivo. I.D.F.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado. Indicaciones al consumidor
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-

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Kligler Hierro Agar


Uso Instrucciones
Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiología de ali- Suspender 54.8 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
mentos para la diferenciación de enterobacterias, en base a la reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2
fermentación de hidratos de carbono y a la producción de ácido minutos hasta disolución total.
sulfhídrico. Distribuir en tubos, en volumen que ocupe hasta la tercera parte de
los mismos. Esterilizar en autoclave a 121°C por 15 minutos.
Fundamento Enfriar y dejar solidificar en posición inclinada (pico de flauta pro-
En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan fundo).
los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa
y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato Características del producto
de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sul- Medio de cultivo deshidratado: color beige amarillento, homogéneo,
fhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+, los libre deslizamiento.
cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de Medio de cultivo preparado: color rojo.
hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente Almacenamiento
solidificante. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Por fermentación de azúcares se producen ácidos que se detectan Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en
medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidróge- Procedimiento
no el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el Siembra
típico sulfuro de hierro de color negro. A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, con aguja
de inoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo y ex-
Contenido y composición tendiendo sobre la superficie del mismo.
Código B0223405: envase x 100 g.
Código B0223406: envase x 500 g. Incubación
En aerobiosis, a 35-37°C durante 18 a 24 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de carne......................................................................................................13.0. Interpretación de los resultados
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
Lactosa......................................................................................................................................10.0. 1- Superficie alcalina/profundidad ácida (pico rojo/fondo
Tripteína...................................................................................................................................10.0. amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
Glucosa....................................................................................................................................... 1.0. 2- Superficie ácida/Profundidad ácida (pico amarillo/fondo
Citrato de hierro y amonio............................................................................ 0.5. amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, y lactosa.
Tiosulfato de sodio.................................................................................................... 0.3. 3- Superficie alcalina/Profundidad alcalina (pico rojo/fondo
Rojo de fenol.............................................................................................................. 0.025. rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares.
Agar................................................................................................................................................15.0. 4- La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo
pH final: 7.3 ± 0.2 indican que el microorganismo produce gas.
5- El ennegrecimiento del medio indica que el microorganis-
mo produce ácido sulfhídrico.

HOJA 1 DE 2
Kligler Hierro Agar

Control de Calidad - La forma de inoculación de este medio de cultivo depende de la


técnica utilizada por el profesional. Se puede inocular primero el
Microorganismos Superficie/ Producción Producción fondo y luego el pico o de manera opuesta. Esto no afectará los
Profundidad de gas de SH2 resultados.
Escherichia coli A/A + -
ATCC 25922 Materiales necesarios no provistos
Klebsiella pneumoniae A/A + - Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
ATCC 700603 calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Proteus mirabilis K/A - + miento.
ATCC 43071
Salmonella typhimurium K/A - + Precauciones
ATCC 14028 - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Shigella flexneri K/A - - sivo.
ATCC 12022 - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Pseudomonas aeruginosa K/K - - ñado.
ATCC 27853 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
A: reacción ácida (color amarillo) - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
K: reacción alcalina (color rojo) to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Medio sin inocular Sin cambios establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Limitaciones va apropiadamente.
- Los resultados de la prueba deber ser leídos luego de 18 a 24 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
horas de incubación. Si la lectura se efectua a tiempos menores mismo según reglamentaciones vigentes.
pueden existir falsos positivos por la presencia de acidez o la acidez
generada no sea suficiente para producir el viraje del indicador Referencias
rojo de fenol del color rojo al amarillo. Si se lee luego de 24 ho- - Kligler. I. J. 1917. A simple medium for the differentiation of
ras se pueden obtener resultados falsos negativos por consumo members of the thyphoid paratyphoid group. Am. J. Public Health.
de peptonas durante el crecimiento de los microorganismos con la 7:1042.
consecuente alcalinidad del medio de cultivo. - Kligler. I. J. 1918. Modifications of culture media used in the iso-
- Si la generación de SH2 es elevada puede llevar al ennegreci- lation and differentiation of thyphoid, dysentery, and allied bacilli. J.
miento de todo el fondo del medio de cultivo y dificultar la visua- Exp.Med. 28:319.
lización de la acidez producida. Es necesario aclarar que para que - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
se produzca SH2 debe existir un ambiente ácido, por eso si no se maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
observa se debe considerar igualmente acidez positiva. timore, Md.
- Para la siembra utilizar aguja de inoculación. No utilizar ansas de
inoculación ya que pueden llevar a resultados falsos positivos Indicaciones al consumidor
de producción de gas por alteraciones mecánicas del medio de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
cultivo. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
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Lactosado Caldo
Uso
Medio recomendado como prueba presuntiva de la presencia de Procedimiento
bacterias del grupo coliforme en aguas y alimentos. Siembra
También está indicado para el preenriquecimiento no selectivo en Se recomienda consultar bibliografía de referencia.
los protocolos de investigación de Salmonella spp. a partir de ali-
mentos. En general
Para investigar la presencia de bacterias coliformes, si se trata de
Fundamento volúmenes pequeños de muestra (1ml) inocular en caldo simple
Es un medio rico en nutrientes y no contiene inhibidores del creci- concentración y si se trata de volúmenes mayores (10 ml) inocular
miento bacteriano. Permite recuperar células injuriadas, diluye sus- en caldo doble concentración.
tancias tóxicas o inhibitorias y favorece el desarrollo de Salmonella - Cuando se emplea como preenriquecimiento no selectivo en la
con respecto a otras bacterias. El extracto de carne y la peptona búsqueda de Salmonella spp., usualmente se siembran 25 g o 25
son la fuente de carbono y nitrógeno mientras que la lactosa es el ml de muestra en 225 ml de caldo.
hidrato de carbono fermentable. Por la fermentación de la lactosa
se produce ácido y gas (el cual se evidencia al utilizar las campa- Incubación
nas Durham). En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-48 horas.
En el caso de utilizarse para el preenriquecimiento de especies
Contenido y composición de Salmonella, incubar durante 18-24 horas y luego subcultivar
Código B0215505: envase x 100 g. en Selenito Cistina Caldo ( ) o en Tetrationato Caldo
Código B0215506: envase x 500 g. ( ).

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación de los resultados


Extracto de carne...................................................................................................... 3.0. Observar la presencia de turbidez y gas.
Peptona........................................................................................................................................ 5.0.
Lactosa......................................................................................................................................... 5.0. Control de Calidad
pH final: 6.9 ± 0.2
Microorganismos Crecimiento Producción
Instrucciones de gas
Suspender 13 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición Escherichia coli Satisfactorio +
para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados. Si se de- ATCC 25922
be observar la producción de gas, agregar 1 campana de Durham Escherichia coli Satisfactorio +
a cada recipiente conteniendo medio de cultivo. Esterilizar en auto- ATCC 8739
clave a 121 ºC durante 15 minutos. Klebsiella pneumoniae Satisfactorio +
ATCC 700603
Características del producto Salmonella typhimurium Satisfactorio -
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- ATCC 14028
lizamiento. Enterococcus faecalis Satisfactorio -
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, transparente sin pre- ATCC 29212
cipitado.

Almacenamiento CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio sin inocular Sin cambios
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

HOJA 1 DE 2
Lactosado Caldo

Materiales necesarios no provistos va apropiadamente.


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- mismo según reglamentaciones vigentes.
miento.
Referencias
Precauciones - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
sivo. timore, Md.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ñado. tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Productos no Obligatoriamente Estériles.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- mit Test.
to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Indicaciones al consumidor
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
establecidas por el laboratorio. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-

11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Lauril Sulfato Caldo


USO ALMACENAMIENTO
Medio recomendado por A.P.H.A. para detección y recuento de co- Medio de cultivo deshidratado: a 10-35 ºC.
liformes en aguas, aguas residuales y alimentos. Medio de cultivo preparado: a 25-30 ºC.

FUNDAMENTO Nota: en el caso del medio preparado, si se conserva en frío, ge-


Medio rico en nutrientes que permite un rápido desarrollo de los neralmente flocula o forma precipitado mientras que si se conser-
microorganismos fermentadores de la lactosa, aún de las bacterias va entre 25-30 ºC o estufa de incubación a 35-37 ºC permanece
fermentadoras lentos. claro.
La triptosa es la fuente de nitrógeno, vitaminas, minerales y ami-
noácidos, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, PROCEDIMIENTO
las sales de fosfato proveen un sistema buffer, y el cloruro de sodio Siembra
mantiene el balance osmótico Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Pro-
Es un medio selectivo ya que el lauril sulfato de sodio inhibe el bable:
desarrollo de la flora acompañante. a.- Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por
Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas, éste triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en
último se evidencia al utilizar las campanas Durham. caldo simple concentración.

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN NÚMERO VOLUMEN DE LA VOLUMEN DE CONCENTRACIÓN


Código B0217405: envase x 100 g. DE TUBOS MUESTRA MEDIO DEL MEDIO
Código B0217406: envase x 500 g. 3 10 ml 10 ml Doble
3 1 ml 10 ml Simple
FÓRMULA (en gramos por litro) 3 0.1 ml 10 ml Simple
TRIPTOSA....................................................................................................................................20.0.
LACTOSA......................................................................................................................................... 5.0. b. - Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efec-
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0. tuar diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución
LAURIL SULFATO DE SODIO....................................................................................... 0.1. por triplicado en medio de cultivo simple concentración.
FOSFATO DIPOTÁSICO...................................................................................................2.75.
FOSFATO MONOPOTÁSICO.......................................................................................2.75. NÚMERO DILUCIÓN DE VOLUMEN DE VOLUMEN DE CONCENTRACIÓN
pH FINAL: 6.8 ± 0.2 DE TUBOS LA MUESTRA LA MUESTRA MEDIO DEL MEDIO
3 10-1 1 ml 10 ml Simple
INSTRUCCIONES 3 10-2 1 ml 10 ml Simple
Suspender 35,6 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar 3 10-3 1 ml 10 ml Simple
reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
llición hasta la disolución total. Distribuir en tubos conteniendo Incubación
campanas de Durham. Incubar los tubos 18-48 horas a 35-37 °C.
Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO Se consideran resultado positivo el crecimiento bacteriano y la
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- producción de gas.
lizamiento.
Medio de cultivo preparado: ámbar.

HOJA 1 DE 2
Lauril Sulfato Caldo

CONTROL DE CALIDAD PRECAUCIONES


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO PRODUCCIÓN sivo.
DE GAS - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Escherichia coli Satisfactorio + - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 25922 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Escherichia coli Satisfactorio + - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 8739 to.
Enterobacter cloacae Satisfactorio + - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 13047 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Salmonella typhimurium Satisfactorio - establecidas por el laboratorio.
ATCC 14028 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Staphylococcus aureus Inhibido Inhibido va apropiadamente.
ATCC 6538 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
REFERENCIAS
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Medio sin inocular Sin cambios maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
timore, Md.
Expresión de Resultados: - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
Para muestras fluidas expresar el NMP por 100 ml de muestra, y biological Examination., Standard Methods for the Examination of
para muestras sólidas expresarlo por gramo de producto. Water and Wastewater 20th Edition, APHA.

MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS INDICACIONES AL CONSUMIDOR


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.

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Letheen Caldo
Uso Almacenamiento
Medio de cultivo utilizado para determinar el coeficiente de fenol Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
en compuestos catiónicos. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Es recomendado en Official Methods of Analysis de la Association
of Official Analytical Chemists (AOAC) para el análisis de muestras Procedimiento
conteniendo desinfectantes catiónicos. Siembra
Consultar en bibliografía de referencia la metodología adecuada
Fundamento según el material en estudio.
La peptona, el extracto de carne y la lecitina de soya, aportan los
nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. El Incubación
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. Consultar en bibliografía de referencia la metodología adecuada
Este medio de cultivo, tiene la capacidad para neutralizar desin- según el material en estudio.
fectantes, debido a la presencia de lecitina de soya, que además
de ser una fuente nutritiva, neutraliza compuestos de amonio cua- Interpretación de los resultados
ternario. El crecimiento microbiano se observa por la presencia de turbidez.
El agregado de polisorbato 80 (Tween 80), es útil para neutralizar
compuestos tales como fenol, formalina, hexaclorofeno, y la combi- Control de Calidad
nación de la lecitina con el Tween, permiten neutralizar etanol.
Microorganismos Crecimiento
Contenido y composición
Código B0218605: envase x 100 g. Escherichia coli Satisfactorio
Código B0218606: envase x 500 g. ATCC 25922
Escherichia coli Satisfactorio
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 8739
Peptona de carne......................................................................................................10.0. Salmonella typhimurium Satisfactorio
Extracto de carne...................................................................................................... 5.0. ATCC 14028
Lecitina de soJa................................................................................................................ 0.7. Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. ATCC 9027
pH final: 7.0 ± 0.2 Staphylococcus aureus Satisfactorio
ATCC 6538
Instrucciones
Suspender 20,7 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Agregar 5
ml de polisorbato 80 (Tween 80). CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Calentar agitando frecuentemente y llevar a ebullición para lograr Medio sin inocular Sin cambios
disolución completa. Distribuir en recipientes adecuados. Esterilizar
en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Limitaciones
El producto adquirido no contiene polisorbato 80 y debe ser in-
Características del producto corporado por el usuario tal como se detalla en las instrucciones.
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- Si no se agrega el polisorbato 80 el aspecto del medio de cultivo
lizamiento. preparado es turbio.
Medio de cultivo preparado: color ámbar, aspecto límpido-ligera-
mente opalescente.

HOJA 1 DE 2
Letheen Caldo

Materiales necesarios no provistos - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mismo según reglamentaciones vigentes.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Referencias
- Brummer. 1976. Appl. Environ. Microbiol. 32:80.
Precauciones - American Society for Testing Materials, 1991. Standard test me-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- thod for preservatives in water-containing cosmetics,
sivo. E 640-78. Annual Book of ASTM Standards, Philadelphia, PA.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- -Association of Official Analytical Chemists. 1995. Official methods
ñado. of analysis, 16th edition. Association of Official Analytical Chemists,
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Washington, D.C.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Horwitz (ed.). 2000. Official methods of analysis of AOAC Inter-
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- national, 17th edition, volume 1. AOAC International, Gaithersburg,
to. Md.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Indicaciones al consumidor
establecidas por el laboratorio. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
va apropiadamente.

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Levine E.M.B. Agar (con Eosina


y Azul de Metileno)
Uso Instrucciones
Medio adecuado para la búsqueda y diferenciación de bacilos en- Suspender 37,4 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
téricos, a partir de muestras clínicas, alimentos y otros materiales reposar 5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y llevar a
de importancia sanitaria. ebullición hasta disolución total. Distribuir en recipientes apropia-
dos y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar
Fundamento y distribuir en placas de Petri estériles.
La fórmula original de este medio de cultivo, fue modificada por
Levine, quien eliminó la sacarosa e incrementó la concentración Características del producto
de lactosa, logrando así una mejor diferenciación de cepas de Es- Medio de cultivo deshidratado: color púrpura rosado, homogéneo,
cherichia coli. libre deslizamiento.
Es un medio selectivo y diferencial, adecuado para el crecimiento Medio de cultivo preparado: color púrpura vinoso.
de enterobacterias. Nota: La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de meti-
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente nutritiva y la lactosa leno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La
es el hidrato de carbono fermentable. La combinación utilizada de presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no
eosina y azul de metileno, inhibe el desarrollo de microorganismos debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo.
Gram positivos y de bacterias Gram negativas fastidiosas, y tam-
bién, permite diferenciar bacterias fermentadoras y no fermenta- Almacenamiento
doras de lactosa. El agar es el agente solidificante. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Los microorganismos fermentadores de lactosa, originan colonias Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
de color azulado-negro, con brillo metálico o mucosas. Las colo-
nias producidas por microorganismos no fermentadores de lactosa Procedimiento
son incoloras. Siembra
También, pueden crecer especies de Candida y se observan como Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp.
crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, Incubación
mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24 horas.
observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir
aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa Interpretación de los resultados
al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias de color
membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo negro azulado o amarronado. Pueden tener centro oscuro y brillo
de especies de Salmonella y Shigella. metálico.
Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del
Contenido y composición color del medio, incoloras.
Código B0210405: envase x 100 g.
Código B0210406: envase x 500 g.

FÓRMULA (en gramos por litro)


Peptona.....................................................................................................................................10.0
Lactosa......................................................................................................................................10.0
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 2.0
Eosina.............................................................................................................................................. 0.4
Azul de metileno....................................................................................................0.065
Agar................................................................................................................................................15.0
pH final: 7,1 ± 0.2 HOJA 1 DE 2
Levine E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

Control de Calidad la luz ya que los indicadores presentes son fotosensibles y pueden
inhibir el desarrollo de algunas especies de Proteus si no se con-
Microorganismos Crecimiento Características de servan apropiadamente.
las colonias
Materiales necesarios no provistos
Escherichia coli Satisfactorio Negro azuladas con Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
ATCC 25922 brillo metálico calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Escherichia coli Satisfactorio Negro azuladas con miento.
ATCC 8739 brillo metálico
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Mucosas confluentes, Precauciones
ATCC 700603 con centro oscuro - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Proteus mirabilis Satisfactorio Incoloras sivo.
ATCC 43071 - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incoloras dañado.
ATCC 14028 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o de-
Shigella flexneri Satisfactorio Incoloras terioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 12022 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Incoloras to.
ATCC 27853 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Enterococcus faecalis Inhibición parcial Incoloras puntiformes nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 29212 establecidas por el laboratorio.
Candida albicans Inhibición parcial Rosadas puntiformes - Las características del producto pueden alterarse si no se con-
ATCC 10231 serva apropiadamente.
Staphylococcus aureus Inhibido --- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 25923 mismo según reglamentaciones vigentes.

Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Holt-Harris and Teague. 1916. J. Infect. Dis. 18:596.
Medio sin inocular Sin cambios - Levine. 1918. J. Infect. Dis. 23:43.
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Limitaciones maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins,
- Este medio de cultivo es moderadamente inhibitorio ya que las Baltimore, Md.
cepas de enterococo y candida pueden desarrollar en el mismo, - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
observándose como colonias de tamaño puntiforme. tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- Para la identificación de género o especie microbiana se deben Productos no Obligatoriamente Estériles.
realizar pruebas bioquímicas adicionales. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial
- Algunas cepas de Salmonella y Shigella no crecerán en Levine Limit Test.
EMB Agar.
- Durante la esterilización el azul de metileno puede precipitar. Es Indicaciones al consumidor
importante resuspender el precipitado mientras se distribuye en Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
placas de Petri estériles el medio preparado. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Conservar el medio preparado en placas a 2-8 ºC y protegido de
11/2011 - rEV .01

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Lisina Hierro Agar


Uso FÓRMULA (en gramos por litro)
Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, espe- Peptona de gelatina................................................................................................. 5.0.
cialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilación y desami- Extracto de levadura............................................................................................ 3.0.
nación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico. Glucosa....................................................................................................................................... 1.0.
Lisina..............................................................................................................................................10.0.
Fundamento Citrato de hierro y amonio............................................................................ 0.5.
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura apor- Tiosulfato de sodio.................................................................................................0.04.
tan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el Púrpura de bromocresol............................................................................0.02.
hidrato de carbono fermentable y la lisina es el sustrato utilizado Agar................................................................................................................................................15.0.
para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deami- pH final: 6.7 ± 0.2
nasa. El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de sodio son los
indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. El purpura de Instrucciones
bromocresol, es el indicador de pH (su color es amarillo a pH igual Suspender 35 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
o menor a 5.2 y violeta a pH igual o mayor a 6.8) y el agar es el 5 minutos. Calentar agitando con frecuencia y hervir durante un
agente solidificante. minuto hasta la disolución completa. Distribuir en tubos y esterilizar
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el me- en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
dio y provocan el viraje del color púrpura al amarillo. Enfriar y dejar solidificar en posición inclinada (pico de flauta pro-
El ambiente ácido favorece la actividad enzimática decarboxilasa y fundo).
se metaboliza la lisina a cadaverina elevando el pH del medio de
cultivo y tornándolo al color púrpura o violeta. Características del producto
Los microorganismos fermentadores de glucosa que no tienen ac- Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
tividad lisina decarboxilasa, producen un viraje de la totalidad del lizamiento.
medio de cultivo al color amarillo. A las 24 horas de incubación se Medio de cultivo preparado: color púrpura rojizo.
observa el fondo del tubo color amarillo y la superficie de color vio-
leta debido al consumo de las peptonas que producen alcalinidad. Almacenamiento
La generación de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el ennegre- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
cimiento del medio debido a la formación de sulfuro de hierro. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas de Mor-
ganella, desaminan la lisina. Esto produce un ácido alfa-ceto-car- Procedimiento
bónico, el cual con la sal de hierro y bajo la influencia del oxígeno Siembra:
forma un color rojizo en la superficie del medio. A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio y me-
diante el uso de aguja de inoculación, inocular el medio de cultivo,
Contenido y composición picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del mismo.
Código B0210605: envase x 100 g.
Código B0210606: envase x 500 g.

HOJA 1 DE 2
Lisina Hierro Agar

Incubación ganismos que no producen lisina decarboxilasa debido a que la aci-


En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-24 horas. dez del medio puede inhibir su formación. Por eso se recomienda
realizar en paralelo la prueba de TSI Agar ( ).
Interpretación de los resultados
Decarboxilación de la lisina: Materiales necesarios no provistos
Resultado Positivo: superficie alcalina / profundidad alcalina (pi- Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
co violeta / fondo violeta). calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Resultado negativo: superficie alcalina /profundidad ácida (pico miento.
violeta / fondo amarillo).
Precauciones
Desaminación de la lisina: - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Resultado positivo: superficie rojiza / profundidad ácida. Esto sivo.
sucede con cepas del género Proteus, Providencia y algunas de - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Morganella spp. ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Producción de SH2: rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo (espe- - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
cialmente en el límite entre la superficie y profundidad). to.
Resultado negativo: el medio de cultivo permanece sin cambio - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
de color. nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidadas por el laboratorio.
Control de Calidad - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
Microorganismos Descarboxilación Desaminación Producción - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
de lisina de lisina de SH2 mismo según reglamentaciones vigentes.
(fondo) (superficie)
Proteus mirabilis - + - Referencias
ATCC 43071 (color amarillo) (color rojo) - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Salmonella typhimurium + - + maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
ATCC 14028 (color púrpura) (color púrpura) (color negro) more, Md.
Shigella flexneri - - - - Ewing. 1986. Edwards and Ewing’s identification of Enterobac-
ATCC 12022 (color amarillo) (color púrpura) teriaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., Inc., New York,
Klebsiella pneumoniae + - - N.Y.
ATCC 700603 (color púrpura) (color púrpura) - Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s
Escherichia coli + - - Manual™ of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins,
ATCC 25922 (color púrpura) (color púrpura) Baltimore, Md.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Washington, D.C.
Medio sin inocular Sin cambios
Indicaciones al consumidor
Limitaciones Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Las especies de Proteus no ennegrecen el medio de cultivo al pro- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
ducir SH2 . El sulfuro de hierro puede no evidenciarse en microor-
11/2015 - rEv .01

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Listeria, Caldo Base de Enriqueci-


miento Bufferado según FDA
Uso Almacenamiento
Medio de cultivo nutritivo que con el agregado de antimicrobianos, Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
es utilizado para el enriquecimiento selectivo de Listeria spp. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

Fundamento Procedimiento
El medio de cultivo contiene los nutrientes necesarios para el ade- Siembra
cuado desarrollo bacteriano. Las sales de fosfato, forman un siste- Consultar bibliografía de referencia, la metodología apropiada para
ma buffer que evitan cambios bruscos de pH y así se favorece el cada producto a analizar. Generalmente se procesan 25 ml o gra-
desarrollo de Listeria spp. El piruvato de sodio permite recuperar mos de alimento en 225 ml de Caldo de Enriquecimiento Bufferado
células dañadas o injuriadas presentes en la muestra. según FDA.
Si se agrega acriflavina 0,01 g, ácido nalidíxico 0,04 g y ciclohexi-
mida 0,05 g por litro de medio de cultivo, se logra el enriqueci- Incubación
miento selectivo de Listeria spp. En aerobiosis, a 30 ºC durante 48 horas.
Luego subcultivar en Oxford Modificado Agar Base ( )
Contenido y composición y/o en PALCAM Agar Base ( ).
Código B0223705: envase x 100 g.
Código B0223706: envase x 500 g. Interpretación de los resultados
El crecimiento microbiano se observa por la turbidez en el medio
Instrucciones de cultivo.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Tripteína soya caldo.............................................................................................30.0. Control de Calidad
Extracto de levadura............................................................................................ 6.0.
Fosfato monopotásico.......................................................................................1.35. Microorganismos CRECIMIENTO
Fosfato disódico............................................................................................................. 9.6. Listeria monocytogenes
Piruvato de sodio.......................................................................................................1.11. ATCC 19114 Satisfactorio
pH final: 7.3 ± 0.2 Listeria ivanovii
ATCC 19119 Satisfactorio
Suspender 24 g del polvo en 500 ml de agua purificada. Mezclar y
calentar con agitación frecuente. Llevar a ebullición para disolución CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
total. Medio sin inocular Sin cambios
Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121
ºC durante 15 minutos. Limitaciones
Este es un medio de cultivo nutritivo. Para lograr selectividad en el
Características del producto aislamiento de Listeria spp. se deben agregar diferentes antimicro-
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- bianos.
lizamiento.
Medio de cultivo preparado: amarillo ámbar.

HOJA 1 DE 2
Listeria, Caldo Base de Enriquecimiento Bufferado según FDA

Materiales necesarios no provistos - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de va apropiadamente.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
miento. mismo según reglamentaciones vigentes.

Precauciones Referencias
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analyti-
sivo. cal manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, Md.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- - International Dairy Federation. 1995. Milk and milk products - de-
ñado. tection of Listeria monocytogenes.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
to. Indicaciones al consumidor
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
establecidas por el laboratorio.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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Mac Conkey Agar


Uso Instrucciones
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negati- Suspender 50 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
vos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos a partir minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición 1 a
de muestras clínicas, aguas y alimentos. Todas las especies de la 2 minutos hasta disolver completamente. Distribuir en recipientes
familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo. apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Características del producto
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Medio de cultivo deshidratado: color beige rosado, homogéneo, li-
bre deslizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color rojizo púrpura.
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes ne-
cesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de Almacenamiento
carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
de la flora Gram positiva. El agar es el agente solidificante.
Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la Procedimiento
colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo Siembra
neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales En superficie: inocular directamente la muestra por estría.
biliares. En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen co- dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
lonias incoloras. a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
ción. Dejar solidificar.
Contenido y composición
Código B0211405: envase x 100 g. Incubación
Código B0211406: envase x 500 g. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-48 horas.

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación de los resultados


Peptona de carne......................................................................................................... 1.5. Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas-
Peptona de gelatina...............................................................................................17.0. rojizas. Puede observarse halo de precipitación biliar.
Tripteína .................................................................................................................................... 1.5. Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del
Lactosa......................................................................................................................................10.0. color del medio, incoloras.
Mezcla de sales biliares Nº3....................................................................... 1.5.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0.
Rojo neutro.......................................................................................................................0.03.
Cristal violeta............................................................................................................ 0.001
Agar................................................................................................................................................13.5.
pH final: 7.1 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Mac Conkey Agar

Control de Calidad rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.


- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Microorganismos CRECIMIENTO Color Precipitación to.
Biliar - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Escherichia coli Satisfactorio Rosado-rojizo + nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 25922 establecidas por el laboratorio.
Escherichia coli Satisfactorio Rosado-rojizo + - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 8739 va apropiadamente.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Rosado-rojizo + - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 700603 mismo según reglamentaciones vigentes.
S. typhimurium Satisfactorio Incoloro -
ATCC 14028 Referencias
Shigella flexneri Satisfactorio Incoloro - - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ATCC 12022 maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Proteus mirabilis Satisfactorio Incoloro - more, Md.
ATCC 43071 - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
Enterococcus faecalis Inhibido --- --- biological Examination., Standard Methods for the Examination of
ATCC 29212 Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Washington, D.C.
Medio sin inocular Sin cambios - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Materiales necesarios no provistos Productos no Obligatoriamente Estériles.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
miento. Tests. Harmonized Method.
- United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
Precauciones cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- organisms. Harmonized Method.
sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Indicaciones al consumidor
ñado. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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B0214205 B0214206

Mac Conkey Caldo


Uso Características del producto
Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigación presuntiva Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo,
de microorganismos coliformes en aguas, alimentos, productos far- libre deslizamiento.
macéuticos y otros materiales de importancia sanitaria. Medio de cultivo preparado: color púrpura
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Almacenamiento
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente de aminoácidos y de Procedimiento
otros factores de crecimiento, la lactosa es el hidrato de carbono Siembra
fermentable, la bilis de buey estimula el crecimiento de las bacte- Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Pro-
rias coliformes e inhibe a gran parte de la flora gram positiva, y el bable.
púrpura de bromocresol es el indicador de pH. Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por tri-
Los coliformes, son microorganismos que fermentan la lactosa, con plicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo
producción de ácido y gas. Al acidificar el medio, se produce un simple concentración.
viraje del indicador de pH del color púrpura al amarillo.
Número Volumen Volumen de Concentración
Contenido y composición de tubos de la muestra medio del Medio
Código B0214205: envase x 100 g. 3 10 ml 10 ml Doble
Código B0214206: envase x 500 g. 3 1 ml 10 ml Simple
3 0.1 ml 10 ml Simple
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de gelatina..............................................................................................20.0. Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efectuar
Lactosa......................................................................................................................................10.0. diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución por
Púrpura de bromocresol............................................................................0.01. triplicado en medio de cultivo simple concentración.
Bilis de buey.......................................................................................................................... 5.0.
pH final: 7.3 ± 0.2 Número Dilución de Volumen de Volumen de Concentración
de tubos la muestra la muestra medio del medio
3 10-1 1 ml 10 ml Simple
Instrucciones 3 10-2
1 ml 10 ml Simple
Suspender 35 g de polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar 3 10-3
1 ml 10 ml Simple
con agitación frecuente y llevar a ebullición para disolución total.
Distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham. Esterilizar en Incubación
autoclave a 121°C durante 15 minutos. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.

HOJA 1 DE 2
Mac Conkey Caldo

Interpretación de los resultados Precauciones


Positivo: medio de cultivo color amarillo y la producción de gas. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Negativo: ausencia de color amarillo del medio de cultivo y/o sivo.
ausencia de producción de gas. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o
dañado.
Control de Calidad - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o de-
terioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Microorganismos CRECIMIENTO Color del Producción - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
medio de gas to.
Escherichia coli Satisfactorio Amarillo + - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25922 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Escherichia coli Satisfactorio Amarillo + establecidas por el laboratorio.
ATCC 8739 - Las características del producto pueden alterarse si no se con-
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Amarillo + serva apropiadamente.
ATCC 700603 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Salmonella typhimurium Satisfactorio Púrpura - mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 14028
Enterococcus faecalis Inhibido Púrpura - Referencias
ATCC 29212 - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Productos no Obligatoriamente Estériles.
Medio sin inocular Sin cambios - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Expresión de Resultados: para muestras fluidas expresar el NMP Tests. Harmonized Method.
por 100 ml de muestra, y para muestras sólidas expresarlo por - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbio-
gramo de producto. logical Examination of Nonsterile products: Tests for Specified
Microorganisms. Harmonized Method.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Indicaciones al consumidor
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
miento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

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Mac Conkey con Sorbitol Agar


Uso reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
Medio selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Esche- llición hasta disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y
richia coli O157 H7 a partir de heces, alimentos y otros materiales de esterilizar por autoclave a 121°C por 15 minutos.
importancia sanitaria. Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.

Fundamento Características del producto


Escherichia coli O157 H7 es el agente causal del sindrome urémico Medio de cultivo deshidratado: color beige amarronado, homogé-
hemolítico. neo, libre deslizamiento.
Fermenta la lactosa como todas las cepas de Escherichia coli pero Medio de cultivo preparado: color rojizo púrpura
a diferencia de éstas, no fermenta el sorbitol. Los medios de cultivo
que contienen lactosa no permiten diferenciar entre estas cepas Almacenamiento
de Escherichia coli, por eso se ha desarrollado el Mac Conkey con Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Sorbitol Agar, el cual es un medio de cultivo es similar en su for- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
mulación al Agar Mac Conkey (REF. B0211405/06) excepto en
que se ha reemplazado la cantidad de lactosa por igual cantidad de Procedimiento
sorbitol, lográndose así un medio nutritivo, selectivo y diferencial en Siembra
base a la fermentación del sorbitol. Inocular directamente la superficie del medio de cultivo.
Los microorganismos fermentadores de sorbitol crecen observán-
dose como colonias rosadas-rojizas ya que por fermentación del Incubación
sorbitol disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-24 horas.
viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las
colonias, y la precipitación de las sales biliares. Interpretación de los resultados
Los microorganismos no fermentadores de sorbitol desarrollan y Microorganismos fermentadores de sorbitol: colonias rosadas-
se observan como colonias incoloras. rojizas. Puede observarse halo de precipitación biliar.
Escherichia coli O157 H7 no fermenta el sorbitol dando colonias Microorganismos no fermentadores de sorbitol: colonias del
transparentes mientras que la mayoría de las cepas de E. coli fer- color del medio, incoloras.
menta el sorbitol, observándose como colonias rosadas-rojizas.
Control de Calidad
Contenido y composición
Código B0217305: envase x 100 g. Microorganismos CRECIMIENTO Características
Código B0217306: envase x 500 g. de las colonias
Escherichia coli 0157 H7 Satisfactorio Transparentes, incoloras
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 700728
Peptona.....................................................................................................................................20.0. Escherichia coli Satisfactorio Rosadas-rojizas con halo de
Sorbitol...................................................................................................................................10.0. ATCC 25922 precipitación biliar
Sales biliares N° 3......................................................................................................... 1.5. Escherichia coli Satisfactorio Rosadas-rojizas con halo de
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. ATCC 8739 precipitación biliar
Rojo neutro.......................................................................................................................0.03. Staphylococcus aureus Inhibido ---
Cristal violeta............................................................................................................ 0.001. ATCC 25923
Agar................................................................................................................................................15.0. Enterococcus faecalis Inhibido ---
pH final: 7.1 ± 0.2 ATCC 29212

Instrucciones CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Suspender 51,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar Medio sin inocular Sin cambios

HOJA 1 DE 2
Mac Conkey con Sorbitol Agar
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Limitaciones to.
- Por incubación prolongada, mayor a 24 horas las colonias de Es- - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
cherichia coli O157 H7 pueden perder sus características típicas nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
(incoloras). establecidas por el laboratorio.
- Existen otros microorganismos Gram negativos no fermentadores - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
de sorbitol. Por eso es necesario realizar pruebas bioquímicas de va apropiadamente.
identificación bacteriana. - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Referencias
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - March and Ratnam. 1986. J. Clin. Microbiol. 23:869.
miento. - Sanderson, Gay, Hancock, Gay, Fox and Besser. 1995. J. Clin.
Microbiol. 33:2616.
Precauciones - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
sivo. Washington, D.C.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado. Indicaciones al consumidor
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

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Manitol Salado Agar


Uso FÓRMULA (en gramos por litro)
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento Extracto de carne...................................................................................................... 1.0.
y diferenciación de estafilococos a partir de diversas muestras. Peptona de carne......................................................................................................... 5.0.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de Tripteína...................................................................................................................................... 5.0.
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Manitol .....................................................................................................................................10.0.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Cloruro de sodio.......................................................................................................75.0.
Rojo de fenol ............................................................................................................ 0.025.
Fundamento Agar................................................................................................................................................15.0.
En el medio de cultivo, el extracto de carne, la peptona de carne y pH final: 7.4 ± 0.2
la tripteína, constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas
y minerales que promueven el desarrollo microbiano. El manitol es Instrucciones
el hidrato de carbono fermentable. El cloruro de sodio (que se en- Suspender 111 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
cuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el 5 minutos y calentar con agitación frecuente, llevando a ebullición
desarrollo de la flora acompañante, el rojo fenol es el indicador de durante 1 o 2 minutos para disolución total. Distribuir en recipien-
pH y el agar es el agente solidificante. tes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15
Se trata de un medio altamente selectivo por la alta concentración minutos.
salina y diferencial debido a la capacidad de fermentación del ma- Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
nitol por los microorganismos.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de Características del producto
sal y fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica Medio de cultivo deshidratado: color beige rosado, homogéneo, li-
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. bre deslizamiento.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pue- Medio de cultivo preparado: color rojo.
den o no fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se vi- Almacenamiento
sualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
color. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como
colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura. Procedimiento
Este medio de cultivo es recomendado para el aislamiento de es- Siembra
tafilococos patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, Sembrar en superficie un inóculo denso de la muestra por estría.
productos farmacéuticos, cosméticos y otros materiales de impor-
tancia sanitaria. Incubación
También puede utilizarse para el cultivo de especies halófilas de Vi- En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24 hs. Si a las 24 horas las
brio si no se dispone de TCBS Medio ( ) aunque algunas placas presentan resultado negativo, incubar otras 24 horas.
especies pueden no desarrollar. La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la in-
cubación durante 3 días a 32 °C, en aerobiosis.
Contenido y composición
Código B0211805: envase x 100 g. Interpretación de los resultados
Código B0211806: envase x 500 g. Microorganismos fermentadores de manitol: colonias de color

HOJA 1 DE 2
Manitol Salado Agar

amarillo rodeadas o no de un halo amarillo. Precauciones


Microorganismos no fermentadores de manitol: colonias del - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
color del medio, rojas rodeadas o no de halo rojizo-púrpura. sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Control de Calidad ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Microorganismos CRECIMIENTO Color de las colonias rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
y aspecto del medio - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Staphylococcus aureus Satisfactorio Colonias amarillas rodeadas to.
ATCC 25923 de un halo amarillo - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Staphylococcus aureus Satisfactorio Colonias amarillas rodeadas de nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 6538 un halo amarillo establecidas por el laboratorio.
Staphylococcus epidermidis Bueno-Satisfactorio Colonias rojas sin cambio de - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 14990 color del medio va apropiadamente.
Escherichia coli Inhibido --- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 25922 mismo según reglamentaciones vigentes.
Escherichia coli Inhibido ---
ATCC 8739 Referencias
Klebsiella pneumoniae Inhibido --- - Chapman. 1945. J. Bacteriol. 50:201.
ATCC 700603 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO more, Md.
Medio sin inocular Sin cambios - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Limitaciones Washington, D.C.
- Algunas cepas de enterococos pueden crecer en el medio de cul- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
tivo y fermentar el manitol, por eso se debe realizar la prueba de la tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
catalasa y la observación microscópica del extendido coloreado por Productos no Obligatoriamente Estériles.
la técnica de Gram para diferenciar estos géneros bacterianos. - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
- Algunas pocas cepas de Staphylococcus aureus pueden fermen- gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
tar lentamente el manitol. En este caso, incubar las placas 48 ho- Tests. Harmonized Method.
ras. - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
- Para realizar la prueba de la coagulasa se recomienda partir de cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
un inóculo en un medio que no contenga exceso de sal para evitar organisms. Harmonized Method.
interferencias que pudieran existir.
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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MIO Medio
Uso Instrucciones
Medio utilizado en la identificación de miembros de la familia Ente- Suspender 31 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar,
robacteriaceae en base a la movilidad, producción de indol y activi- agitando frecuentemente y llevar a ebullición hasta completa diso-
dad enzimática ornitina decarboxilasa. lución. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121 ºC duran-
te 15 minutos.
Fundamento Enfriar y dejar solidificar en posición vertical.
Medio de cultivo altamente nutritivo por la presencia de extracto de
levadura, peptona y tripteína. Características del producto
La tripteína aporta gran cantidad de triptofano, sustrato de la enzi- Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
ma triptofanasa a partir del cual se forma indol que puede ser reve- deslizamiento.
lado con el reactivo de Ehrlich (Indol Reactivo REF B1550361) o Medio de cultivo preparado: color púrpura ligeramente opalescen-
de Kovac´s por la formación de un compuesto de color rojo. te.
La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es
el sustrato para la detección de la enzima ornitina decarboxilasa, Almacenamiento
el púrpura de bromocresol es el indicador de pH, que en medio Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
alcalino es de color púrpura y en medio ácido es amarillo. El agar Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
es el agente solidificante y a esta concentración le otorga al medio
la propiedad de ser semisólido, condición necesaria para detectar Procedimiento
movilidad, que se evidencia por el enturbiamiento del medio o por Siembra
crecimiento que difunde mas allá de la línea de inoculación del A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, sembrar
microorganismo en estudio. por punción profunda utilizando aguja de inoculación.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el me-
dio de cultivo y producen viraje del color púrpura al amarillo. Las Incubación
condiciones de acidez son favorables para la actividad enzimática En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24 horas.
ornitina decarboxilasa, que actua sobre la ornitina generando pu-
trescina, con la consecuente alcalinización del medio de cultivo y Interpretación de los resultados
viraje al color púrpura Observar la movilidad y el color del medio de cultivo. Luego realizar
la prueba de indol.
Contenido y composición
Código B0216305: envase x 100 g. Movilidad:
Código B0216306: envase x 500 g. Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas allá
de la línea de siembra.
FÓRMULA (en gramos por litro) Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siem-
Glucosa....................................................................................................................................... 1.0. bra.
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0.
Peptona.....................................................................................................................................10.0. Ornitina decarboxilasa:
Tripteína...................................................................................................................................10.0. Resultado positivo: color púrpura.
Clorhidrato de L-ornitina............................................................................... 5.0. Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar
Púrpura de bromocresol............................................................................0.02. un color violáceo en la superficie del medio.
Agar................................................................................................................................................... 2.0.
pH final: 6.5 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
MIO Medio
Prueba del indol: Resultado positivo: color rojo.
Agregar al medio de cultivo 3-5 gotas de Indol Reactivo (REF Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece
B1550361). incoloro-amarillento.

Control de Calidad

Microorganismos CRECIMIENTO Movilidad Indol Ornitina decarboxilasa

Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio + + +


Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Satisfactorio - - -
Proteus mirabilis ATCC 43071 Satisfactorio + - +
Enterobacter cloacae ATCC 13047 Satisfactorio + - +

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio sin inocular Sin cambios establecidadas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Limitaciones va apropiadamente.
Para un correcto ensayo, agregar el Indol Reactivo luego que se - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
interpretó el resultado de la movilidad y de la ornitina. mismo según reglamentaciones vigentes.

Materiales necesarios no provistos Referencias


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Ewing. 1986. Edwards and Ewing’s identification of Enterobacte-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- riaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., New York, N.Y.
miento. - Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s
Manual of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins,
Precauciones Baltimore, Md.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
sivo. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Washington, D.C.
ñado. - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- bacteria, 3rd ed. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Indicaciones al consumidor
to. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad 11/2015 - rEv .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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MR-VP Medio
Uso
Medio utilizado para la realización del ensayo de Rojo de Metilo y Características del producto
Voges Proskauer. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Es particularmente útil para la clasificación de enterobacterias. deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, transparente sin pre-
Fundamento cipitado.
En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes nece-
sarios para el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de Almacenamiento
carbono fermentable. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
través de distintas vías metabólicas. Según la vía utilizada, se origi-
narán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético, ácido Procedimiento
fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol). Siembra
Esta diferencia en el metabolismo bacteriano, podría ser reconoci- Por inoculación directa a partir del cultivo en estudio.
da por la adición de un indicador como rojo de metilo, para revelar
la presencia de productos ácidos, y por la adición de alfa naftol Incubación
e hidróxido de potasio para evidenciar la presencia de productos En aerobiosis, a 35-37°C durante 48 a 72 horas.
finales neutros.
Voges y Proskauer, describieron una coloración rojiza que aparecía Interpretación de los resultados
después de adicionar hidróxido de potasio a los cultivos de ciertos Examinar los tubos y revelar las pruebas bioquímicas
microorganismos en medio con glucosa. Esta coloración se debe a Prueba del rojo de metilo: añadir unas gotas de una solución de rojo
la oxidación del acetilmetil carbinol a diacetilo el cual reacciona con de metilo al 0.04%, observar el color del medio.
la peptona del medio para dar un color rojo. Prueba del Voges Proskauer: añadir 0,6 ml de alfa naftol al 5% en
alcohol etílico absoluto y 0.2 ml de hidróxido de potasio al 40% a
Contenido y composición 2.5 ml de cultivo. Agitar vigorosamente el tubo, y dejar a tempe-
Código B0213905: envase x 100 g. ratura ambiente durante 10-15 minutos. Observar el color de la
Código B0213906: envase x 500 g. superficie del medio.

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación:


Pluripeptona......................................................................................................................7.0.
Glucosa...................................................................................................................................... 5.0. Prueba del rojo de metilo:
Fosfato dipotásico..................................................................................................... 5.0. Resultado positivo: color rojo.
pH final: 6.9 ± 0.2 Resultado negativo: color amarillo.

Instrucciones Prueba de Voges Proskauer:


Suspender 17 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 Resultado positivo: desarrollo de un color rojo en pocos minutos
minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición para después de una completa agitación del tubo.
disolución total. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 118- Resultado negativo: ausencia de color rojo.
121°C durante 15 minutos.

HOJA 1 DE 2
MR-VP Medio
sivo.
Control de Calidad - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Microorganismos CRECIMIENTO Prueba del Prueba de - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Rojo de Metilo Voges rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Proskauer
Escherichia coli Satisfactorio + - - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 25922 to.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio - + - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 700603 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Proteus mirabilis Satisfactorio + - establecidadas por el laboratorio.
ATCC 43071 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Salmonella typhimurium Satisfactorio + - va apropiadamente.
ATCC 14028 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Enterobacter cloacae Satisfactorio - + mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 13047
Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Voges and Proskauer. 1898. Z. Hyg. 28:20.
Medio sin inocular Sin cambios - Clark W.M., and Lubs H.A. 1915. The differentiation of bacteria
of the colon-aerogenes family by use of indicators. J. Infect. Dis.
Limitaciones 17:160-173.
- Examinar los tubos y realizar la prueba de Rojo de Metilo y Voges - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Proskauer luego de la incubación durante 48 a 72 horas. No reali- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
zar las pruebas a las 24 horas debido a la presencia de resultados more, Md.
falsos positivos y falsos negativos respectivamente. - Ewing. 1986. Edwards and Ewing’s identification of Enterobac-
- En algunas cepas positivas para la prueba VP, puede no desarro- teriaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., Inc., New York,
llar el color rojo en la superficie mediante el revelado por la meto- N.Y.
dología descripta anteriormente. En estos casos, se recomienda ca- - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
lentar el medio de cultivo para favorecer el desarrollo de color rojo. vol. 1 American Society for Microbiology, Washington, D.C.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Materiales necesarios no provistos clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Washington, D.C.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Indicaciones al consumidor
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Precauciones Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- 11/2015 - REV .01

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M.R.S. Agar
USO
Medio de cultivo apropiado para el aislamiento y recuento de lac- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
tobacilos y otras bacterias ácido lácticas a partir de muestras clíni- Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
cas y alimentos (especialmente productos lácteos). lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar oscuro.
FUNDAMENTO
El Agar M.R.S. fue desarrollado por Man, Rogosa y Sharpe, y por su ALMACENAMIENTO
formulación permite el adecuado desarrollo de lactobacilos y otras Medio de cultivo deshidratado a 2-8 ºC.
bacterias ácido lácticas Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
La proteosa peptona, el extracto de carne, el extracto de levadura
y la glucosa constituyen la fuente nutritiva ya que aportan nitroge- PROCEDIMIENTO
no, carbono, vitaminas y minerales. El monoleato de sorbitán, las Siembra
sales de sodio, magnesio y manganeso proveen cofactores para el Por inoculación directa del material en estudio, estriando la super-
crecimiento bacteriano y pueden inhibir el desarrollo de algunos mi- ficie del medio de cultivo.
croorganismos. El citrato de amonio actúa como agente inhibitorio
del crecimiento de bacterias Gram negativas. El agar es el agente Incubación
solidificante. En atmósfera con 5% de CO2 , a 35-37 ºC durante 24-72 horas.

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS


Código B0220505: envase x 100 g. Observar la morfología y el color de las colonias.
Código B0220506: envase x 500 g.

FÓRMULA (en gramos por litro)


PROTEOSA PEPTONA Nº 3........................................................................................10.0. CONTROL DE CALIDAD
EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................10.0.
EXTRACTO DE LEVADURA............................................................................................ 5.0. MICROORGANISMOS CRECIMIENTO
GLUCOSA....................................................................................................................................20.0. Lactobacillus fermentum Satisfactorio
MONOLEATO DE SORBITÁN.................................................................................... 1 ml ATCC 9338
FOSFATO DIPOTÁSICO...................................................................................................... 2.0. Lactobacillus casei Satsfactorio
ACETATO DE SODIO............................................................................................................. 5.0. ATCC 393
CITRATO DE AMONIO......................................................................................................... 2.0. Escherichia coli Inhibido
SULFATO DE MAGNESIO................................................................................................. 0.2. ATCC 25922
SULFATO DE MANGANESO.......................................................................................0.05.
AGAR................................................................................................................................................13.0.
pH FINAL: 6.4 ± 0.2 CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio sin inocular Sin cambios
INSTRUCCIONES
Suspender 68,25 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y llevar a ebullición MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
durante 1 ó 2 minutos para disolución total. Distribuir en recipientes Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles. miento.

HOJA 1 DE 2
M.R.S. Agar
PRECAUCIONES mismo según reglamentaciones vigentes.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo. REFERENCIAS
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- - De Man, J.C., Rogosa, M. and Sharpe, M.E. (1960). A Medium for
ñado. the Cultivation of Lactobacilli. J. Appl. Bacteriol., 23 (1), 130.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- more, Md.
to. - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
va apropiadamente. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del

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M.R.S. Caldo
Uso durante 1 ó 2 minutos para disolución total. Distribuir en recipientes
Medio de cultivo apropiado para el enriquecimiento de lactobacilos apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
y otras bacterias ácido lácticas a partir de muestras clínicas y ali-
mentos (especialmente productos lácteos). Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, no presen-
Fundamento ta libre deslizamiento.
El Caldo M.R.S. fue desarrollado por Man, Rogosa y Sharpe, y por Medio de cultivo preparado: color ámbar oscuro.
su formulación permite el adecuado desarrollo de de lactobacilos y
otras bacterias ácido lácticas Almacenamiento
La proteosa peptona, el extracto de carne, el extracto de levadura y Medio de cultivo deshidratado a 2-8 ºC.
la glucosa constituyen la fuente nutritiva ya que aportan nitrogeno, Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
carbono, vitaminas y minerales. El monoleato de sorbitán, las sales
de sodio, magnesio y manganeso proveen cofactores para el creci- Procedimiento
miento bacteriano y pueden inhibir el desarrollo de algunos micro- Siembra
organismos. El citrato de amonio actúa como agente inhibitorio del Por inoculación directa del material a analizar.
crecimiento de bacterias Gram negativas.
Incubación
Contenido y composición En aerobiosis, a 35-37 ºC hasta 3 días ó a 30 ºC hasta 5 días.
Código B0221305: envase x 100 g.
Código B0221306: envase x 500 g. Interpretación de los resultados
El crecimiento microbiano se evidencia por la presencia de turbi-
FÓRMULA (en gramos por litro) dez.
Proteosa peptona Nº 3........................................................................................10.0.
Extracto de carne...................................................................................................10.0. Control de Calidad
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0.
Glucosa....................................................................................................................................20.0. Microorganismos CRECIMIENTO
Sorbitán monoleato.............................................................................................. 1 ml Lactobacillus fermentum Satisfactorio
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 2.0. ATCC 9338
Acetato de sodio............................................................................................................. 5.0. Lactobacillus casei Satisfactorio
Citrato de amonio......................................................................................................... 2.0. ATCC 393
Sulfato de magnesio................................................................................................. 0.2. Escherichia coli Inhibido
Sulfato de manganeso.......................................................................................0.05. ATCC 25922
pH final: 6.5 ± 0.2

Instrucciones CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Suspender 55,25 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar Medio sin inocular Sin cambios
5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición

HOJA 1 DE 2
M.R.S. Caldo

Materiales necesarios no provistos - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de va apropiadamente.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
miento. mismo según reglamentaciones vigentes.

Precauciones Referencias
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - De Man, J.C., Rogosa, M. and Sharpe, M.E. (1960). A Medium for
sivo. the Cultivation of Lactobacilli. J. Appl. Bacteriol., 23 (1), 130.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ñado. maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- more, Md.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Indicaciones al consumidor
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
establecidas por el laboratorio. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

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SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Mueller Hinton Agar


Uso Instrucciones
Medio de cultivo recomendado universalmente para la realización Suspender 37 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar em-
de la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. beber de 10 a 15 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir
durante 1 minuto para disolución total. Esterilizar a 121°C durante
Fundamento 15 minutos. Enfriar a 45°-50°C y distribuir en placas de Petri es-
Medio de cultivo nutritivo no selectivo que promueve el desarro- tériles, en volumen apropiado para que el espesor sea de 4 mm
llo microbiano. Por su composición, ha sido recomendado por el sobre una superficie horizontal (25-30 ml en placas de 9 cm de
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) antiguamente diámetro).
llamado National Committee for Clinical Laboratory Standards Previo a su distribución en placas de Petri, puede ser suplementado
(NCCLS), para ser utilizado en forma rutinaria en la realización del con 5% de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) prepa-
antibiograma en medio sólido, debido a que presenta buena repro- rándose así Mueller Hinton Sangre Agar.
ducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad, su contenido
en inhibidores de sulfonamidas, trimetoprima y tetraciclina es bajo, Características del producto
la mayoría de los patógenos microbianos crece satisfactoriamente Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
y una gran cantidad de datos adicionales que han sido evaluados y lizamiento.
avalados usando este medio de cultivo. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, permite rea- Suplementado con sangre: color rojo cereza.
lizar las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en especies
de estreptococos. También, con el agregado de sangre puede utili- Almacenamiento
zarse para el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricional- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
mente exigentes. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

Contenido y composición Procedimiento


Código B0213705: envase x 100 g. Siembra
Código B0213706: envase x 500 g. Hisopado en superficie.
El inóculo microbiano dependerá del grupo microbiano o microor-
FÓRMULA (en gramos por litro) ganismo en estudio.
Infusión de carne..................................................................................................300.0.
Peptona ácida de caseína...............................................................................17.5. Incubación
Almidón......................................................................................................................................... 1.5. La atmósfera, el tiempo y temperatura de incubación dependerán
Agar................................................................................................................................................15.0. del grupo microbiano o microorganismo en estudio.
pH final: 7.3 ± 0.1

Nota: la infusión de carne es equivalente a 3 g de polvo.

HOJA 1 DE 3
Mueller Hinton Agar

Grupo Microbiano Inóculo microbiano Incubación


Microorganismo

Enterobacterias Crecimiento en medio líquido o suspensión directa de la colo- En aerobiosis, a 35 ± 2 ºC durante 16 a 18 horas
Pseudomonas aeruginosa nia equivalente al estándard 0,5 de Mc Farland.

Enterococcus spp. Crecimiento en medio líquido o suspensión directa de la colo- En aerobiosis, a 35 ± 2 ºC durante 16 a 18 horas. Si se ensaya el
nia equivalente al estándard 0,5 de Mc Farland. disco de vancomicina 30 ug incubar 24 horas.

Acinetobacter spp. Crecimiento en medio líquido o suspensión directa de la colo- En aerobiosis, a 35 ± 2 ºC durante 20 a 24 horas.
Burkholderia cepacia nia equivalente al estándard 0,5 de Mc Farland.
Stenotrophomonas maltophilia

Staphylococcus spp. Suspensión directa de la colonia equivalente al estándard 0,5 En aerobiosis, a 35 ± 2 ºC durante 16 a 18 horas. En el caso que
de Mc Farland. se ensayen los discos de cefoxitina, con Staphylococcus coagulasa
negativa y en todos los casos al ensayar oxacilina y vancomicina,
incubar las placas durante 24 horas.

Vibrio cholerae Suspensión directa de la colonia equivalente al estándard 0,5 En aerobiosis a 35 ± 2 ºC durante 16 a 18 horas.
de Mc Farland.

Streptococcus pneumoniae Suspensión directa de la colonia En atmósfera con 5 % de CO2 , a 35 ± 2 ºC


Streptococcus grupo viridans equivalente al estándard 0,5 de Mc Farland. durante 20 a 24 horas.
Streptococcus spp. Grupo Beta
Hemolítico.

Interpretación de los resultados TMS. En un medio satisfactorio, se produce una zona clara de inhi-
- Los lotes de agar Mueller Hinton Britania cumplen con las nor- bición del desarrollo de diámetro 20 mm o mayor.
mas descriptas en el documento M6 - P del NCCLS: ¨Evaluating - Otro aspecto de cuidado en el control de calidad en el agar Mueller
production lots of dehydrated Mueller Hinton agar¨. Esto es muy Hinton es que las variaciones en cationes divalentes principalmente
importante pues algunos lotes pueden variar significativamente y calcio y magnesio pueden afectar los resultados con tetraciclina,
si las bacterias no crecen adecuadamente, las zonas de inhibición polimixina y aminoglucósidos cuando se ensayan cepas de Pseu-
en las pruebas de difusión son generalmente más grandes, quedan domonas spp. Por tal motivo, se deben cumplir los límites de control
fuera de los límites de control de calidad y pueden llevar a resulta- de calidad publicados por el CLSI.
dos erróneos. - Los resultados deben ser cuidadosamente observados con todos
- Los medios que contienen cantidades excesivas de timidina o ti- los organismos de control para evitar datos aberrantes debido al
mina pueden revertir el efecto inhibitorio de las sulfonamidas y tri- medio de cultivo. Para aquellas cepas que no puedan crecer sa-
metoprima, produciendo así zonas de inhibición mas pequeñas y por tisfactoriamente en el Agar Mueller Hinton no suplementado, se
lo tanto informes de falsa resistencia. Para evaluar el contenido de agrega sangre desfibrinada de carnero al agar fundido y enfriado,
timidina del lote de agar Mueller Hinton, se utiliza la cepa de control en concentración final al 5% (v/v).
de calidad: Enterococcus faecalis ATCC 29212 frente a discos de

HOJA 2 DE 3
Mueller Hinton Agar

Control de Calidad Precauciones


Para el control de precisión y exactitud del Mueller Hinton Agar - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
se usan las siguientes cepas control: sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Escherichia coli..................................................................................ATCC 25922 ñado.
Staphylococcus aureus...............................................................ATCC 25923 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Pseudomonas aeruginosa.......................................................ATCC 27853 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Enterococcus faecalis................................................................ATCC 29212 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Klebsiella pneumoniae ........................................................... ATCC 700603 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
Para evaluar el desempeño de inhibidores de enzimas beta - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
lactamasas en Mueller Hinton Agar, se utiliza la cepa con- va apropiadamente.
trol: - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
Escherichia coli ..................................................................................................ATCC 35218
Referencias
Para el control de precisión y exactitud del Mueller Hinton - Bauer, Kirby, Sherris and Turck. 1966. Am. J. Clin. Pathol. 45:493.
Sangre Agar se utiliza la cepa control: - Isenberg (ed.). 1992. Clinical Microbiology Procedures Handbook,
volume 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
Streptococcus pneumoniae ....................................................................ATCC 49619 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO more, Md.
Medio sin inocular Sin cambios - Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;
Nineteenth Informational Supplement, Disk Diffusion and MIC Tes-
Limitaciones ting, volume 29 N°3 M100-S19 (January 2009), Clinical and Labo-
La evaluación de Staphylococcus a temperaturas mayores a 35 ºC ratory Standards Institute (CLSI).
puede no detectar cepas meticilino resistentes.
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.

11/2015 - reV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

CÓDIGO Nº ELABORADOR Nº DE LOTE Nº FECHA DE HOJA 3 DE 3


DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO
DIAGNÓSTICO ESTÉRIL LÍMITE DE INSTRUCCIONES
IN VITRO TEMPERATURA DE USO

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Mueller Hinton Caldo


USO Ajuste de cationes:
Medio universalmente recomendado para realizar la prueba de - Preparación de la solución stock de cloruro de calcio: disolver
sensibilidad de los antimicrobianos en medio líquido. 3,68 g de Ca Cl2. 2 H2O en 100 ml de agua desionizada. Concen-
tración de Ca2+ : 10 mg /ml.
FUNDAMENTO - Preparación de la solución stock de cloruro de magnesio: disolver
Medio nutritivo que favorece el crecimiento de diversos microorga- 8,36 g de Mg Cl2.6 H2O en 100 ml de agua desionizada. Concen-
nismos. Se utiliza para determinar la concentración inhibitoria míni- tración de Mg2+ : 10 mg/ml.
ma (CIM) de los microorganismos frente a los antimicrobianos. - Esterilización de las soluciones stock: mediante la técnica de fil-
Al igual que su presentación en forma de agar, el caldo Mueller tración por membrana. Conservar a 4°C hasta su uso.
Hinton presenta buena reproducibilidad de los resultados lote a Suplementar el caldo Mueller Hinton preparado, esterilizado y a
lote y tiene un bajo contenido de inhibidores especialmente para temperatura 4 ºC con las soluciones stock. Agregar con agitación
sulfamidas, trimetoprima y tetraciclinas. constante 0.1 ml de cada solución stock por litro de caldo. Así se
Puede ser suplementado para permitir el desarrollo de bacterias incrementa en 1 mg /l la concentración final de estos cationes.
exigentes en sus requerimientos nutricionales.
Con el agregado de sangre se evalúan ciertas especies de estrep- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
tococoss y con el agregado de determinados cationes se evalúa el Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
crecimiento de Pseudomonas frente a aminoglucósidos. lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro ligeramente opales-
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN cente.
Código B0216905: envase x 100 g.
Código B0216906: envase x 500 g. ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
FÓRMULA (en gramos por litro) Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
INFUSIÓN DE CARNE..................................................................................................300.0.
PEPTONA ÁCIDA DE CASEÍNA...............................................................................17.5. PROCEDIMIENTO
ALMIDÓN......................................................................................................................................... 1.5. Siembra
pH FINAL: 7.3 ± 0.1 Consultar en bibliografía de referencia la metodología apropiada.
En general podemos detallar:
Nota: la infusión de carne 300 g es equivalente a 3 g de polvo. Preparar el inóculo del microorganismo en estudio equivalente al
estándard 0,5 de Mc Farland mediante crecimiento en medio lí-
INSTRUCCIONES quido o suspensión directa de la colonia. En estas condiciones el
Suspender 22 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 inóculo microbiano es 1-2 x 108 UFC/ml
minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto Dentro de los 15 minutos que el inóculo ha sido estandarizado ino-
para disolución total. Distribuir en tubos o en otros recipientes apro- cular el caldo Mueller Hinton con un volumen determinado para
piados y esterilizar en autoclave a 121°C por 15 minutos. que cada tubo contenga 5 x 105 UFC/ml (rango 3 x 105 a 7 x 105
UFC/ml).
Notas: en caso de realizar la CIM de Pseudomonas aeruginosa
frente a aminoglucósidos o la CIM de los microorganismos a tetra- Incubación
ciclinas, el caldo Mueller Hinton una vez preparado y esterilizado, Consultar en bibliografía de referencia la metodología apropiada
debe ser suplementado con Ca2+ y Mg2+ para obtener una concen- según el microorganismo en estudio.
tración final de 20 a 25 mg de Ca2+/l y 10 a 12,5 mg de Mg2+/l de
medio de cultivo. En general podemos detallar:

HOJA 1 DE 2
Mueller Hinton Caldo

Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35 ºC durante MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS


16-20 horas. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Streptococcus spp.: en aerobiosis, a 35 ºC durante 20 a 24 horas. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
El crecimiento microbiano se observa por la presencia de turbidez PRECAUCIONES
(detección visual). - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Determinar la concentración inhibitoria mínima que corresponde a sivo.
la menor concentración de antimicrobiano que inhibe el desarrollo - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
microbiano. ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
CONTROL DE CALIDAD - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Escherichia coli Satisfactorio establecidas por el laboratorio.
ATCC 25922 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Staphylococcus aureus Satisfactorio va apropiadamente.
ATCC 25923 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 27853
Escherichia coli Satisfactorio REFERENCIAS
ATCC 35218 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Enterococcus faecalis Satisfactorio maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
ATCC 29212 timore, Md.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
ATCC 49619 * vol. 1. American Society for Microbiology, Washington , D.C.
- Methods fro Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria
that Grow Aerobically.1993. NCCLS Document M7-A3, vol 13 Nº
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO 25.
Medio sin inocular Sin cambios - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
Notas: - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Los lotes de caldo Mueller Hinton Britania cumplen con las normas clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
CLSI. Washington, D.C.
* Debe utilizarse Mueller Hinton Caldo suplementado con 2,5-5 % - Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;
de sangre equina lisada y ajuste de cationes. Twenty - First Informational Supplement, Disk Diffusion and MIC
La cepa de Escherichia coli ATCC 35218 se recomienda para el Testing, volume 32 N°3 M100-S22 (January 2012), Clinical and
control de combinaciones con inhibidores de betalactamasa tales Laboratory Standards Institute (CLSI).
como ácido clavulánico o sulbactama.
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
LIMITACIONES Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Realizar controles periódicos de las características fisicoquímicas y Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
desempeño microbiológico del medio de cultivo.
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0219005 B0219006

Moeller Medio Base para


Decarboxilasas
Uso prueba” y un “tubo control”.
Medio basal que al ser suplementado con lisina, arginina u ornitina El tubo prueba contiene Moeller Medio Base suplementado con
es utilizado en la diferenciación de bacilos Gram negativos según el aminoácido en estudio. No agregar mas de un aminoácido a un
la actividad enzimática de los microorganismos sobre estos ami- mismo tubo.
noácidos. El tubo control corresponde el Moeller Medio Base sin el agregado
de aminoácidos.
Fundamento
En 1955, Moeller introdujo este medio de cultivo para evaluar la Contenido y composición
producción bacteriana de las enzimas lisina decarboxilasa, arginina Código B0219005: envase x 100 g.
dehidrolasa y ornitina decarboxilasa. Código B0219006: envase x 500 g.
Estas pruebas junto a otros ensayos bioquímicos permiten iden-
tificar Enterobacterias, Aeromonas, Plesiomonas y especies de FÓRMULA (en gramos por litro)
Vibrios. Peptona de carne......................................................................................................... 5.0.
En el medio base de Moeller, la peptona y el extracto de carne Extracto de carne...................................................................................................... 5.0.
suministran la fuente de carbono y nitrógeno necesaria para el cre- Glucosa....................................................................................................................................... 0.5.
cimiento bacteriano. El piridoxal actúa como coenzima en la decar- Piridoxal............................................................................................................................. 0.005.
boxilación de los aminoácidos. La glucosa es el hidrato de carbono Rojo de cresol.......................................................................................................... 0.005.
fermentable mientras que el púrpura de bromocresol y el rojo de Púrpura de bromocresol............................................................................0.01.
cresol son los indicadores del pH. pH final: 6.0 ± 0.2
No contiene aminoácidos sino que estos se deben agregar previo
al uso. La concentración final de aminoácidos debe ser al 1% (en Instrucciones
caso de L-aminoácidos) o al 2% (si se dispone de DL-aminoáci- Suspender 10,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
dos). 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el me- Fraccionar una porción que corresponderá al Medio Control (sin el
dio de cultivo y provocan el viraje al color amarillo. agregado de aminoácidos).
El ambiente ácido favorece la actividad enzimática decarboxilasa y Agregar L-aminoácidos en concentración final 1% (en caso de DL-
dehidrolasa. En este caso se metaboliza el aminoácido presente a aminoácidos agregar en concentración final 2%).
su correspondiente amina, elevando el pH del medio de cultivo y No agregar mas de un aminoácido a una misma fracción (no mez-
tornándolo al color púrpura o violeta. clar aminoácidos).
Por decarboxilación de lisina se produce cadaverina, mientras que Para cada fracción: calentar agitando frecuentemente y hervir 1 mi-
la decarboxilación de ornitina genera putrescina. La arginina es nuto hasta disolver completamente. Distribuir en tubos y esterilizar
hidrolizada a ornitina y luego es decarboxilada a putrescina. en autoclave a 121 ºC durante 10 minutos.
Si el organismo en estudio no tiene actividad decarboxilasa o de-
hidrolasa, el medio permanece ácido (amarillo) por fermentación Características del producto
de la glucosa. Medio de cultivo deshidratado: color beige oscuro, homogéneo, li-
bre deslizamiento.
Importante: siempre se debe trabajar en paralelo entre un “tubo Medio de cultivo preparado: color rojo amarillento.

HOJA 1 DE 3
Moeller Medio Base para Decarboxilasas

Almacenamiento Interpretación de los resultados


Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Observar y comparar el color del medio de cultivo entre el tubo
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. control y el tubo prueba.
Para cada microorganismo y para cada aminoácido en estudio:
Procedimiento
Siembra Resultado positivo:
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio inocular: Tubo prueba: color púrpura o violeta.
Tubo control: Moeller Medio Base para Decarboxilasas. Tubo control: color amarillo.
Tubo prueba: Moeller Medio Base para Decarboxilasas suplementa-
do con ornitina, o arginina o lisina. Resultado negativo:
Agregar a todos los tubos, 1 ml de aceite mineral estéril. Tubo prueba y tubo control: color amarillo.

Incubación Resultado inválido:


En aerobiosis, a 35-37 °C hasta 96 horas. Tubo control púrpura o violeta.

Control de Calidad

Microorganismos CRECIMIENTO Lisina Ornitina Arginina


Decarboxilasa Decarboxilasa Dehidrolasa
Escherichia coli ATCC 25922 Satisfactorio + + -
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Satisfactorio + - -
Enterobacter cloacae ATCC 13047 Satisfactorio - + +
Proteus mirabilis ATCC 43071 Satisfactorio - + -
Shigella flexneri ATCC 12022 Satisfactorio - - -
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Satisfactorio + + +

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio sin inocular Sin cambios ben protegerse del aire con una capa de aceite mineral. La exposi-
ción al aire puede causar alcalinización en la superficie del medio
Limitaciones originando resultados falsos positivos.
- La prueba debe ser realizada con microorganismos que generen
ácidos a partir de la glucosa ya que es necesario un ambiente ácido Materiales necesarios no provistos
para la actividad enzimática decarboxilasa y dehidrolasa. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
- Luego de la incubación pueden observarse 2 colores en el medio calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
de cultivo: amarillo y púrpura. Agitar el tubo para homogeneizar el miento.
color y realizar la interpretación de los resultados.
- Si se incuba demasiado tiempo (varios días) en algunos casos Precauciones
puede desaparaecer el color del medio de cultivo debido a la degra- - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
dación del indicador de pH. Esto puede ocurrir con Proteus mirabilis sivo.
y Proteus vulgaris. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
- Un color gris en el medio de cultivo puede indicar reducción del ñado.
indicador más que la formación de productos finales alcalinos. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
- Para obtener las reacciones apropiadas, los tubos inoculados de- rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.

HOJA 2 DE 3
Moeller Medio Base para Decarboxilasas

- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- more, Md.


to. - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad - Baron, Peterson and Finegold. 1994. Bailey & Scott’s diagnostic
establecidadas por el laboratorio. microbiology, 9th ed. Mosby-Year Book, Inc., St. Louis, Mo.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
va apropiadamente. microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
mismo según reglamentaciones vigentes. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
Referencias - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
- Moeller. V. 1955. Simplified tests for some aminoacid decarboxyla- bacteria, 3rd ed. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
ses and for the arginine dehydrolase system. Acta. Pathol. Microbiol.
Scand. 36:158. Indicaciones al consumidor
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 3 DE 3


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B0212205 B0212206

Nutritivo Agar
Uso Características del producto
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el aisla- Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
miento y recuento de microorganismos con escasos requerimien- deslizamiento.
tos nutricionales. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro ligeramente opales-
Su uso está descripto en procedimientos para el análisis de ali- cente.
mentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria. Suplementado con sangre: color rojo cereza.

Fundamento Almacenamiento
Medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la pluripeptona y Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
el extracto de carne constituyen la fuente de carbono, nitróge- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
no y aportan nutrientes para el desarrollo bacteriano. El agregado
de cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el Procedimiento
agente solidificante. Siembra
Puede ser suplementado con sangre ovina desfibrinada estéril pa- En superficie: inocular directamente la muestra por estría.
ra favorecer el crecimiento de microorganismos exigentes en sus En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su
requerimientos nutricionales y permite una clara visualización de dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
las reacciones de hemólisis. a 40 - 45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y ro-
tación. Dejar solidificar.
Contenido y composición
Código B0212205: envase x 100 g. Incubación
Código B0212206: envase x 500 g. El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
del microorganismo que se quiera recuperar.
FÓRMULA (en gramos por litro) En general se recomienda:
Pluripeptona....................................................................................................................... 5.0. Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37º C durante
Extracto de carne...................................................................................................... 3.0. 18 a 24 horas.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 8.0. Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Agar................................................................................................................................................15.0. fera con 5-10 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
pH final: 7.3 ± 0.2
Interpretación de los resultados
Instrucciones Observar las características de las colonias.
Suspender 31 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
dejar reposar 5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir nes de hemólisis:
1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en recipientes Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los
enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri microorganismos.
estériles. Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo

HOJA 1 DE 2
Nutritivo Agar

claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- miento.
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre-
dedor de la colonia en estudio. Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Control de Calidad sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Microorganismos CRECIMIENTO ñado.
Escherichia coli Satisfactorio - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 25922 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Staphylococcus aureus Satisfactorio - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 25923 to.
Enterococcus faecalis Satisfactorio - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 29212 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio establecidas por el laboratorio.
ATCC 27853 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
Nutritivo Agar suplementado con 5% de sangre ovina: - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
Microorganismos CRECIMIENTO Hemólisis
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta Referencias
ATCC 19615 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
ATCC 6305 more, Md.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa - Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the mi-
ATCC 49619 crobiological examination of foods, 4th ed. American Public Health
Association, Washington, D.C.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio sin inocular Sin cambios Indicaciones al consumidor
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Materiales necesarios no provistos Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de

11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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B0212305 B0212306

Nutritivo Caldo
Uso Almacenamiento
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el de- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
sarrollo de microorganismos con escasos requerimientos nutricio- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
nales.
Está descripto en muchos procedimientos para el análisis de ali- Procedimiento
mentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria. Siembra
Directa a partir de la muestra en estudio. Si se trabaja con hisopo,
Fundamento descargar el contenido del mismo en este medio de cultivo.
Medio no selectivo, contiene pluripeptona (una mezcla de partes
iguales de peptona de carne y de caseína) y extracto de carne que Incubación
constituyen la fuente de carbono y nitrógeno necesarias para el En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18 a 24 horas.
adecuado desarrollo bacteriano.
Puede ser utilizado además, como preenriquecimiento en la bús- Interpretación de los resultados
queda de Salmonella spp. a partir de alimentos, ya que permite Examinar los tubos para evaluar el crecimiento por turbiedad. Cuan-
recuperar células dañadas, diluir metabolitos tóxicos y sustancias do sea necesario, subcultivar en medios sólidos apropiados y reali-
inhibitorias. zar la identificación bioquímica.

Contenido y composición Control de Calidad


Código B0212305: envase x 100 g.
Código B0212306: envase x 500 g. Microorganismos Crecimiento
Staphylococcus aureus Satisfactorio
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 25923
Pluripeptona....................................................................................................................... 5.0. Escherichia coli Satisfactorio
Extracto de carne...................................................................................................... 3.0. ATCC 25922
pH final: 6.9 ± 0.2 Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio
ATCC 27853
Instrucciones
Suspender 8 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
minutos y calentar con agitación frecuente, llevando a ebullición CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
para disolución total. Distribuir en tubos u otros recipientes apropia- Medio sin inocular Sin cambios
dos y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos.

Características del producto Materiales necesarios no provistos


Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
deslizamiento. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Medio de cultivo preparado: color ámbar. miento.

HOJA 1 DE 2
Nutritivo Caldo

Precauciones Referencias
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
sivo. maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- timore, Md.
ñado. - Marshall (ed.). 1993. Standard methods for the examination of
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- dairy products, 16th ed. American Public Health Association, Was-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. hington, D.C.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- - Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the mi-
to. crobiological examination of foods, 4th ed. American Public Health
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Association, Washington, D.C.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio. Indicaciones al consumidor
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
va apropiadamente. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


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B0223505 B0223506

Oxford Modificado Agar Base


Uso Instrucciones
Medio de cultivo que con el agregado de antimicrobianos permite Suspender 26,3 g del polvo en 500 ml de agua purificada. Dejar re-
el aislamiento selectivo de Listeria spp. posar 5 minutos. Mezclar y calentar con agitación frecuente. Llevar
a ebullición para disolución total. Distribuir en recipientes apropia-
Fundamento dos y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
Medio de cultivo base que contiene los nutrientes necesarios para Enfriar a 50 ºC y agregar asépticamente 2 ml del contenido de
el adecuado desarrollo bacteriano. un vial Suplemento Selectivo para Oxford Modificado Agar Base
Es diferencial para el desarrollo de Listeria spp, debido a que el (REF B0361721) previamente reconstituido con 2,1 ml de agua
producto de hidrólisis de la esculina en presencia de iones Fe3+ purificada estéril. Homogeneizar bien y distribuir en placas de Petri
forma un compuesto fenólico de color negro. estériles.
Con el agregado del Suplemento Selectivo para Oxford Modificado
Agar Base se logra un crecimiento apropiado y una clara visuali- Características del producto
zación de las colonias de Listeria spp., mientras que se inhibe total Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
o parcialmente el desarrollo de la flora acompañante presente en lizamiento.
la muestra en estudio. Medio de cultivo preparado: color ámbar.

Contenido y composición Almacenamiento


Código B0223505: envase x 100 g. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Código B0223506: envase x 500 g. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

FÓRMULA (en gramos por litro) Procedimiento


Columbia Agar Base ..............................................................................................39.0. Siembra
Esculina...................................................................................................................................... 1.0. Sembrar estriando la superficie del medio de cultivo.
Citrato de Hierro y amonio .......................................................................... 0.5.
Cloruro de litio...........................................................................................................12.0. Incubación
pH FINAL: 7.2 ± 0.2 En atmósfera con 5-10% CO2, a 35-37 ºC, durante 24-48 horas.

REF B0361721: Suplemento Selectivo para Oxford Modifica- Interpretación de los resultados
do Agar Base. Observar las características de las colonias.
El contenido de 1 vial se agrega a 500 ml de medio de cultivo.
Fórmula (por vial) Control de Calidad
Colistin............................................................................................................................. 0.005 g Corresponde al medio de cultivo suplementado con el Suplemento
Ceftazidima.....................................................................................................................0.01 g Selectivo para Oxford Modificado Agar Base.

HOJA 1 DE 2
Oxford Modificado Agar Base
Control de Calidad - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Microorganismos Crecimiento Características de - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
las colonias rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Listeria monocytogenes Satisfactorio Lisas verdosas, con halo - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 19114 negro sobre fondo claro to.
Listeria ivanovii Satisfactorio Lisas verdosas, con halo - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 19119 negro sobre fondo claro nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Escherichia coli Inhibido --- establecidas por el laboratorio.
ATCC 25922 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Enterococcus faecalis Inhibido --- va apropiadamente.
ATCC 29212 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Proteus mirabilis Inhibido --- mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 43071
Referencias
-Curtis, G.D.W., Mitchell, R.G., King, A.F. And Griffin, E.J. 1989a. A
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO selective differential medium for the isolation of Listeria monocyto-
Medio sin inocular Sin cambios genes. Lett. Appl. Microbiol. 8, 95-98.
-Curtis, G.D.W., Nichols, W.W. and Falla, T.J. 1989b. Selective agents
Materiales necesarios no provistos for Listeria can inhibit their growth. Lett. Appl. Microbiol. 8, 169-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de 172.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
miento. Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.

Precauciones Indicaciones al consumidor


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
sivo. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
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TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0216605 B0216606

Papa Glucosado Agar


Uso ácido tartárico al 10 %, cuando el agar se encuentra entre 45-50
Medio de cultivo adecuado para el aislamiento y recuento de hon- ºC. Distribuir en placas de Petri estériles.
gos y levaduras en alimentos, productos farmacéuticos y otros ma-
teriales de importancia sanitaria. Nota: 200 gramos de infusión de papas es equivalente a 4 g del
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de polvo deshidratado
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor-
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Fundamento deslizamiento.
En un medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la infusión Medio de cultivo preparado: color ámbar claro ligeramente opales-
de papa y la glucosa favorecen el desarrollo exuberante de hongos cente.
y levaduras. El agar es el agente solidificante.
Es diferencial en base a la producción de pigmentos por los micro- Almacenamiento
organismos que crecen en el mismo. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Puede lograrse un medio selectivo si al medio de cultivo una vez Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
esterilizado se lo lleva a pH final: 3.5 ± 0.2 mediante el agregado
de ácido tartárico. Procedimiento
Siembra
Contenido y composición En superficie: inocular directamente la muestra.
Código B0216605: envase x 100 g. En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su
Código B0216606: envase x 500 g. dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
FÓRMULA (en gramos por litro) ción. Dejar solidificar.
Infusión de papa....................................................................................................... 200.0 .. .
Glucosa....................................................................................................................................20.0 . Incubación
Agar................................................................................................................................................15.0. En aerobiosis, a 20-25 ºC ó 30-32 ºC según el método seguido,
pH final: 5.6 ± 0.2 durante 5 a 7 días o mayor tiempo según las características de la
muestra y el microorganismo que se quiera recuperar.
Instrucciones
Disolver 39 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar Interpretación de los resultados
5 minutos. Calentar hasta ebullición con agitación continua para Observar y describir el color y la morfología de las colonias obte-
disolución total. Distribuir en recipientes apropiados. Esterilizar en nidas.
autoclave a 121°C durante 15 minutos. Si se desea ajustar el pH
a 3.5 agregar aproximadamente 14 ml de una solución estéril de

HOJA 1 DE 2
Papa Glucosado Agar
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Microorganismos Crecimiento ñado.
Aspergillus brasiliensis Satisfactorio - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 16404 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Candida albicans Satisfactorio - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 10231 to.
Saccharomyces cerevisiae Satisfactorio - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 9763 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Trichophyton mentagrophytes Satisfactorio establecidas por el laboratorio.
ATCC 9533 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO mismo según reglamentaciones vigentes.
Medio sin inocular Sin cambios
Referencias
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Limitaciones maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
- En caso de ajustar el pH mediante el agregado de ácido tartárico, more, Md.
el medio no podrá ser sometido nuevamente a tratamiento térmico - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ya que puede hidrolizarse el agar y perder sus propiedades gelifi- tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
cantes. Productos no Obligatoriamente Estériles.
- Realizar ensayos de identificación adicionales de los microorga- - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
nismos que hayan desarrollado. gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Tests. Harmonized Method.
Materiales necesarios no provistos - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- organisms. Harmonized Method.
miento.
Indicaciones al consumidor
Precauciones Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
sivo.

11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0224005 B0224006

Peptona Bufferada con Cloruro


de Sodio
Uso Instrucciones
Medio utilizado como diluyente de muestras. Disolver 16,1 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de dejar reposar 5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- durante 1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en reci-
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). pientes apropiados y esterilizar en autoclave durante 15 minutos
a 121 ºC.
Fundamento
Medio de cultivo, útil para diluir y realizar ensayos de control higié- Características del producto
nico de materias primas y productos terminados, en productos no Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
obligatoriamente estériles, cuya fórmula está descripta en diversas deslizamiento.
Farmacopeas Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
En el medio de cultivo, la tripteína aporta nutrientes necesarios
para el desarrollo bacteriano. Las sales fosfato constituyen un sis- Almacenamiento
tema buffer, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
El agregado de Tween 80, en concentraciones de 1 a 10 gramos Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
por litro, es útil para neutralizar compuestos tales como fenol, for-
malina, hexaclorofeno. Procedimiento
Siembra
Contenido y composición Consultar en Farmacopea de los Estados Unidos de Norteamérica
Código B0224005: envase x 100 g. (USP XXXI) la metodología adecuada según el material en estudio.
Código B0224006: envase x 500 g.
Incubación
Consultar en Farmacopea de los Estados Unidos de Norteamérica
FÓRMULA (en gramos por litro) (USP XXXI) la metodología adecuada según el material en estu-
Fosfato monopotásico.......................................................................................... 3.6. dio.
Fosfato disódico..............................................................................................................7.2.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 4.3. Interpretación de los resultados
Tripteína...................................................................................................................................... 1.0. El crecimiento microbiano se observa por la presencia de turbidez
0H final: 7.0 ± 0.2 en el medio de cultivo.

HOJA 1 DE 2
Peptona Bufferada con Cloruro de Sodio
Control de Calidad - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Microorganismos Crecimiento - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Staphylococcus aureus Satisfactorio rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 6538 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Escherichia coli Satisfactorio to.
ATCC 25922 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 9027 establecidas por el laboratorio.
Salmonella typhimurium Satisfactorio - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 14028 va apropiadamente.
Salmonella enteritidis Satisfactorio - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 13076 mismo según reglamentaciones vigentes.
Escherichia coli Satisfactorio
ATCC 8739 Referencias
- European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO ganisms.
Medio sin inocular Sin cambios - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Materiales necesarios no provistos Tests. Harmonized Method.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
miento. organisms. Harmonized Method.

Precauciones Indicaciones al consumidor


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
sivo. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

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B0221105 B0221106

Pseudomonas Agar F
Uso pleto. Distribuir en tubos u otros recipientes apropiados y esterilizar
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento, la detección y la di- en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Colocar los tubos en
ferenciación de especies de Pseudomonas en base a la produc- posición inclinada para solidificar el medio de cultivo (pico de flau-
ción de fluoresceína. Conocido también como medio King B y Flo ta). También puede distribuirse en placas de Petri estériles.
Agar.
Características del producto
Fundamento Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
En el medio de cultivo, la tripteína y la peptona de carne aportan lizamiento.
los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la glicerina Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
favorece la producción de pigmentos, la concentración de fosfato
dipotásico estimula la producción de fluoresceína e inhibe la pro- Almacenamiento
ducción de piocianina y piorrubina. El sulfato de magnesio provee Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
los cationes necesarios que incrementan la producción de fluores- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ceína y el agar es el agente solidificante.
Procedimiento
Contenido y composición Siembra
Código B0221105: envase x 100 g. A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, del cual se sospeche la
Código B0221106: envase x 500 g. presencia de Pseudomonas spp., tomar una colonia y
estriar la superficie del medio.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Tripteína...................................................................................................................................10.0. Incubación
Peptona de carne......................................................................................................10.0. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 1.5. Si no se observa crecimiento, reincubar a 25-30 ºC, o dejar a 22 ºC
Sulfato de magnesio................................................................................................. 1.5. y observar diariamente hasta 7 días.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.2 ± 0.2 Interpretación de los resultados
Examinar las colonias bajo luz ultravioleta, a 260nm.
Instrucciones Se considera un resultado positivo la observación de fluoresceína,
Suspender 38 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Agregar 10 que es un pigmento de color amarillo-verdoso fluorescente que ro-
ml de glicerina. Calentar con agitación constante para homogenei- dea la colonia o que se extiende por todo el medio de cultivo debido
zar el producto. Llevar a ebullición para que se disuelva por com- a fenómenos de difusión.

HOJA 1 DE 2
Pseudomonas Agar F
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Control de Calidad ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Microorganismos Crecimiento Producción rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
de pigmento - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo - verdoso to.
ATCC 9027 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Amarillo - verdoso nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 27853 establecidas por el laboratorio.
Burkholderia cepacia Satisfactorio No pigmenta - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 25608 va apropiadamente.
Escherichia coli Satisfactorio No pigmenta - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 25922 mismo según reglamentaciones vigentes.

Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - King, E.O., Ward, M.K., and Raney, D.E. 1954. Two simple media for
Medio sin inocular Sin cambios the demonstration of pyocyanin and fluorescein. J. Lab. Clin. Med.
44:301.
Limitaciones - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Algunas cepas de P. fluorescens y P. pútida solo producen fluo- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
resceína a temperatura ambiente, y se pueden obtener resultados more, Md.
falsos negativos si el medio se incuba a 30-35 ºC, por eso, ante - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
la ausencia de crecimiento luego de incubación a 35-37 ºC, se microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
recomienda dejar los tubos conteniendo el medio de cultivo a tem- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
peratura ambiente. tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- Antes de exponer el cultivo bacteriano a la luz ultravioleta, verificar Productos no Obligatoriamente Estériles.
que hay adecuado crecimiento de microorganismos, ya que la luz - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
ultravioleta tiene efecto bactericida. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
Materiales necesarios no provistos - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mit Test.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Indicaciones al consumidor
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Precauciones Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo. 11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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B0220905 B0220906

Pseudomonas Agar P
Uso Petri estériles.
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento, la detección y la dife-
renciación de especies de Pseudomonas en base a la producción Características del producto
de piocianina. Conocido también como medio King A y Tech Agar. Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
lizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
En el medio de cultivo, la peptona de gelatina aporta los nutrientes
necesarios para el desarrollo bacteriano, la glicerina favorece la Almacenamiento
producción de pigmentos, las sales de magnesio y potasio estimu- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
lan la producción de piocianina y piorrubina e inhiben la producción Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
de fluoresceína. El agar es el agente solidificante.
Procedimiento
Contenido y composición Siembra
Código B0220905: envase x 100 g. A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, del cual se sospeche la
Código B0220906: envase x 500 g. presencia de Pseudomonas spp., tomar una colonia y estriar
la superficie del medio.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de gelatina..............................................................................................20.0. Incubación
Sulfato de potasio.....................................................................................................10.0. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Cloruro de magnesio............................................................................................. 1.4. Si no se observa crecimiento, reincubar a 25-30 ºC, o dejar a 22 ºC
Agar................................................................................................................................................15.0. y observar diariamente hasta 7 días.
pH final: 7.2 ± 0.2
Interpretación de los resultados
Instrucciones Un resultado positivo es por observación de los pigmentos piocia-
Suspender 46.4 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Agregar nina y/o piorrubina.
10 ml de glicerina. Calentar con agitación constante para homo- La producción de piocianina se observa como una zona color azul,
geneizar el producto. Llevar a ebullición para que se disuelva por azul-verdoso que rodea la colonia, o que se extiende en todo el
completo. medio de cultivo debido a la difusión del pigmento.
Distribuir en tubos u otros recipientes apropiados y esterilizar en La producción de piorrubina se observa como una zona de color
autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. rojo alrededor de la colonia o que se extiende en todo el medio de
Colocar los tubos en posición inclinada para solidificar el medio cultivo debido a la difusión del pigmento.
de cultivo (pico de flauta). También puede distribuirse en placas de

HOJA 1 DE 2
Pseudomonas Agar P
sivo.
Control de Calidad - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Microorganismos Crecimiento Producción - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
de pigmento rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Verde o verde - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 27853 azulado to.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Verde o verde - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 9027 azulado nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Burkholderia cepacia Satisfactorio No pigmenta establecidas por el laboratorio.
ATCC 25608 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Satisfactorio No pigmenta va apropiadamente.
ATCC 25922 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Referencias


Medio sin inocular Sin cambios - King, E.O., Ward, M.K., and Raney, D.E. 1954. Two simple media for
the demonstration of pyocyanin and fluorescein. J. Lab. Clin. Med.
Limitaciones 44:301.
- La ausencia de piocianina no descarta que el microorganismo - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
aislado sea P. aeruginosa. maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
- Bajas cantidades de piocianina pueden no ser evidenciadas, por more, Md.
eso, ante la sospecha de su presencia, se recomienda agregar al - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
medio de cultivo unas gotas de cloroformo, para exaltar la visuali- microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
zación del pigmento. - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
- La presencia concomitante de piorrubina y/o piomelanina, puede tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
afectar la visualización del color característico de la piocianina. Productos no Obligatoriamente Estériles.
- La producción de pigmento, puede aumentarse dejando los tubos - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
conteniendo medio de cultivo a 22 ºC luego de haberlos incubado clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
previamente toda la noche a 35-37 ºC. Washington, D.C.
- United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
Materiales necesarios no provistos mit Test.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Indicaciones al consumidor
miento. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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Pseudomonas Isolation Agar


Uso Almacenamiento
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento selectivo de Pseu- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
domonas spp. También permite la diferenciación de Pseudomonas Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
aeruginosa de otras Pseudomonas en base a la producción de pig-
mentos. Procedimiento
Siembra
Fundamento Efectuar la siembra del material en estudio procurando obtener co-
Este producto consiste en una modificación del medio de culti- lonias aisladas.
vo Pseudomonas Agar P, al cual se le agregó irgasan que es un
agente antimicrobiano de amplio espectro para poder así lograr un Incubación
medio selectivo para el aislamiento de Pseudomonas spp. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
En el medio de cultivo, la peptona de gelatina aporta los nutrien- Si no se observa crecimiento, reincubar a 25-30 ºC, o dejar a 22 ºC
tes necesarios para el desarrollo bacteriano. La glicerina, las sales y observar diariamente hasta 7 días.
de magnesio y potasio estimulan la producción de los pigmentos
piocianina y piorrubina. El irgasan, inhibe el desarrollo de bacterias Interpretación de los resultados
Gram positivas y algunas bacterias Gram negativas, excepto Pseu- Observar el crecimiento microbiano y la producción de pigmentos.
domonas spp. El agar es el agente solidificante. La producción de piocianina se observa como una zona color azul,
azul-verdoso que rodea la colonia, o que se extiende en todo el
Contenido y composición medio de cultivo debido a la difusión del pigmento.
Código B0224905: envase x 100 g. La producción de piorrubina se observa como una zona de color
Código B0224906: envase x 500 g. rojo alrededor de la colonia o que se extiende en todo el medio de
cultivo debido a la difusión del pigmento.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Peptona de gelatina..............................................................................................20.0 Control de Calidad
Sulfato de potasio.....................................................................................................10.0
Cloruro de magnesio............................................................................................. 1.4 Microorganismos Crecimiento Producción
Irgasan ................................................................................................................................. 0.025 de pigmento
Agar................................................................................................................................................15.0 Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Verde o verde
ph final: 7.2 ± 0.2 ATCC 27853 azulado
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Verde o verde
Instrucciones ATCC 9027 azulado
Suspender 46.4 g del polvo en un litro de agua purificada. Agregar Escherichia coli Inhibición total -----
10 ml de glicerina. Calentar con agitación constante para homo- ATCC 25922 o parcial
geneizar el producto. Llevar a ebullición para que se disuelva por Staphylococcus aureus Inhibición total -----
completo. Esterilizar en autoclave 15 minutos a 121 ºC. Distribuir ATCC 25923 o parcial
en placas de Petri estériles.

Características del producto CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre Medio sin inocular Sin cambios
deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.

HOJA 1 DE 2
Pseudomonas Isolation Agar
Limitaciones - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
- La ausencia de piocianina no descarta que el microorganismo to.
aislado sea P. aeruginosa. - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
- Bajas cantidades de piocianina pueden no ser evidenciadas, por nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
eso, ante la sospecha de su presencia, se recomienda agregar al establecidas por el laboratorio.
medio de cultivo unas gotas de cloroformo, para exaltar la visuali- - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
zación del pigmento. va apropiadamente.
- La presencia concomitante de piorrubina y/o piomelanina, puede - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
afectar la visualización del color característico de la piocianina. mismo según reglamentaciones vigentes.
- La producción de pigmento, puede aumentarse dejando los tubos
conteniendo medio de cultivo a 22 ºC luego de haberlos incubado Referencias
previamente toda la noche a 35-37 ºC. - King, E.O., Ward, M.K., and Raney, D.E. 1954. Two simple media for
the demonstration of pyocyanin and fluorescein. J. Lab. Clin. Med.
Materiales necesarios no provistos 44:301.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Furia and Schenkel. 1968. Soap and Chemical specialties.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- January.
miento. - Baron, E. J., and S. M. Finegold. 1990. Bailey & Scott’s diagnostic
microbiology, 8th ed C.V. Mosby Company, St Louis, MO.
Precauciones - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
sivo. Washington, D.C.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado. Indicaciones al consumidor
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0224705 B0224706

R2A Agar
reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
Uso llición para disolución total.
Medio de cultivo recomendado por el Standard Methods for the Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121
Examination of Water and Wastewater y por la Farmacopea Euro- ºC durante 15 minutos.
pea 6º Edición para el recuento de microorganismos heterótrofos
en aguas tratadas. Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Fundamento deslizamiento.
Medio de cultivo desarrollado por Reasoner y Geldreich para el Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
recuento bacteriano en aguas tratadas.
Por su bajo contenido nutricional y mediante una incubación pro- Almacenamiento
longada, estimula el desarrollo de bacterias estresadas, de creci- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
miento lento y tolerantes al cloro, halladas por ejemplo en aguas Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
tratadas.
En el medio de cultivo, el extracto de levadura, la proteosa peptona Procedimiento
Nº 3, la peptona ácida de caseína y la glucosa, aportan los nutrien- Siembra
tes necesarios para el desarrollo de microorganismos. Consultar la metodología en el Standard Methods for the Examina-
El almidón y el piruvato de sodio favorecen la recuperación de cé- tion of Water and Wastewater sección 9215 A.
lulas dañadas. La sal fosfato es la fuente de fósforo y regula el pH, Se puede sembrar mediante las siguientes técnicas:
mientras que el sulfato de magnesio aporta los correspondientes - Pour plate: inocular 0,1 a 2 ml de la muestra directa o de su
iones. El agar es el agente solidificante. dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
Contenido y composición ción. Dejar solidificar.
Código B0224705: envase x 100 g. - Diseminación en superficie: inocular un volumen máximo de
Código B0224706: envase x 500 g. 0,5 ml de la muestra directa o de su dilución y esparcirla en toda la
superficie del agar. Verter un volumen del medio de cultivo fundido
FÓRMULA (en gramos por litro) y enfriado a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vai-
Extracto de levadura ........................................................................................ 0.5. vén y rotación. Dejar solidificar.
Proteosa peptona Nº 3 ......................................................................................... 0.5. - Filtración por membrana: el volumen a filtrar dependerá de la
Peptona ácida de caseína ................................................................................ 0.5. probable contaminación de la muestra.
Glucosa .................................................................................................................................... 0.5.
Almidón soluble ........................................................................................................... 0.5. Incubación
Piruvato de sodio ......................................................................................................... 0.3. Consultar la metodología en el Standard Methods for the Examina-
Fosfato dipotásico ................................................................................................... 0.3. tion of Water and Wastewater sección 9215 A o en la Farmacopea
Sulfato de magnesio ............................................................................................0.05. Europea 6º Edición.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.2± 0.2 En general, podemos detallar:

Instrucciones
Suspender 18.2 g en 1 litro de agua purificada. Mezclar bien y dejar

HOJA 1 DE 2
R2A Agar

Temperatura Tiempo mínimo Tiempo óptimo - Se obtiene un mejor desempeño del medio de cultivo al sembrar
(ºC) (días) (días) la muestra mediante la técnica de diseminación en superficie pero
Farmacopea Europea 30 – 35 5 7 en este caso debe sembrarse menor volumen de muestra que por
6 º Edición otras técnicas.
Standard Methods for the - Puede requerirse mayor tiempo de incubación que el indicado
Examination of Water and 20 - 28 5 7 para lograr mayor recuperación microbiana.
Wastewater - Al ser un medio de cultivo poco nutritivo, el tamaño de colonias es
menor para las bacterias de crecimiento rápido.
Interpretación de los resultados
Realizar el recuento de colonias y expresarlo teniendo en cuenta la Materiales necesarios no provistos
alícuota de muestra sembrada. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Control de Calidad miento.
Se efectúa por incubación de estos microorganismos a 35-37 ºC
durante 48 horas en aerobiosis. Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Microorganismos Crecimiento sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Bacillus subtilis Colonias amarillentas ñado.
ATCC 6633 anaranjadas - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Pseudomonas aeruginosa Colonias blancas rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 9027 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Enterococcus faecalis Colonias blancas to.
ATCC 29212 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Salmonella typhimurium Colonias blancas nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 14028 establecidas por el laboratorio.
Escherichia coli Colonias blancas - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 8739 va apropiadamente.
Staphylococcus aureus Colonias blanco - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 6538 amarillentas mismo según reglamentaciones vigentes.

Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Reasoner and Geldreich. 1985. Appl. Environ. Microbiol. 49:1.
Medio sin inocular Sin cambios - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
biological Examination., Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
Limitaciones - European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
- El medio de cultivo R2A Agar está recomendado y se utiliza para Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
el análisis de aguas tratadas. ganisms.
- La técnica de pour plate puede afectar el crecimiento y desarrollo
de bacterias estresadas debido al shock térmico que puede pro- Indicaciones al consumidor
ducirse al verter sobre la muestra el medio de cultivo esterilizado, Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
fundido y enfriado a 44-46 ºC así como también por la baja tensión Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
de oxigeno que existe durante la incubación.
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Rappaport Vassiliadis Caldo


USO INSTRUCCIONES
Medio utilizado para enriquecimiento selectivo de especies de Sal- Suspender 42,5 gramos del polvo en 1 litro de agua purificada.
monella spp. (excepto Salmonella typhi y Salmonella paratyphi A) Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando
a partir de alimentos, medicamentos y otros materiales de impor- frecuentemente hasta disolución total. Distribuir en recipientes
tancia sanitaria. apropiados y esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 115ºC.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo,
libre deslizamiento.
FUNDAMENTO Medio de cultivo preparado: color verde azulado.
Medio de cultivo desarrollado originalmente por Rappaport et al
(1956) y luego modificado por Vassiliadis et al (1976-1983) en el ALMACENAMIENTO
cual se disminuyó la concentración de verde de malaquita. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Es un medio de cultivo nutritivo que contiene un sistema buffer Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
de fosfatos, alta concentración de sales de magnesio y sodio y la
presencia del colorante verde de malaquita (oxalato). PROCEDIMIENTO
El enriquecimiento selectivo de especies de salmonella se debe a Siembra
la capacidad de estos microorganismos de sobrevivir y multiplicar- Consultar en la bibliografía de referencia la metodología adecuada
se a presiones osmóticas relativamente altas (debido a la elevada según el material en estudio.
concentración de cloruro de magnesio en el medio), a pH relati- Generalmente una muestra preenriquecida (1:10) debe preceder al
vamente bajos, y porque se suprime el efecto tóxico del verde de enriquecimiento en Rappaport Vassiliadis Caldo. La relación entre
malaquita hacia las salmonellas debido a la presencia de cloruro de el inóculo de la muestra y el medio de cultivo queda finalmente
magnesio. La incubación a 41-42 ºC favorece la selectividad hacia 1:100.
las salmonellas. Por ejemplo 25 g de la muestra se agregan a 225 ml de un medio
nutritivo sin azúcares o preferiblemente a Agua Peptonada Buffe-
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN rada ( ) y se incuba 16 a 24 horas.
Código B0225005: envase x 100 g. Luego a partir de la muestra preenriquecida transferir 0,1 ml a 10
Código B0225006: envase x 500 g. ml de Rappaport Vassiliadis Caldo.

FÓRMULA (en gramos por litro) Incubación


PEPTONA DE SOJA ............................................................................................................. 4,5 Durante 24-48 horas a 41-42 ºC.
CLORURO DE MAGNESIO.6H2O.........................................................................29,0 Luego de la incubación, subcultivar en medios selectivos pa-
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 8,0 ra el crecimiento de Salmonella: Salmonella Shigella Agar
FOSFATO DIPOTÁSICO...................................................................................................... 0,4 ( ), Hektoen Entérico Agar ( ), Verde Brillante
FOSFATO MONOPOTÁSICO.......................................................................................... 0,6 Agar ( ) Mac Conkey Agar ( ).
VERDE DE MALAQUITA.............................................................................................0,036
pH FINAL: 5,2 ± 0,2 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
El crecimiento microbiano se observa por turbidez.

HOJA 1 DE 2
Rappaport Vassiliadis Caldo
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
CONTROL DE CALIDAD - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
to.
MICROORGANISMOS CRECIMIENTO - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Salmonella enteritidis Bueno nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 13076 establecidas por el laboratorio.
Salmonella typhimurium Bueno - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 14028 va apropiadamente.
Escherichia coli Inhibido - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 25922 mismo según reglamentaciones vigentes.
Escherichia coli Inhibido
ATCC 8739 REFERENCIAS
- Rappaport, F., Konforti, N. and Navon, B. (1956). A new enrich-
ment medium for certain salmonellae. J. Clin Pathol. 9, 261-266.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Vassiliadis, P., Paternaki, E., Papaiconomou, N., Papadakis, J.A. And
Medio sin inocular Sin cambios Trichopoulos, D. 1976. Nouveau procède d´enrichessement de sal-
monella. Ann. Microbiol. Inst Pasteur, 127B,195-200.
LIMITACIONES - Vassiliadis, P. 1983. The Rappaport Vassiliadis (RV) enrichment
- No se recomienda su uso para el enriquecimiento y recuperación medium for the isolation of salmonellas: An overview. J. Appl. Bac-
de Salmonella typhi y Salmonella paratyphi A. teriol. 54,69-76.
- La temperatura de incubación recomendada es 41-42 ºC debido - Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
a que algunas cepas de salmonella, particularmente Salmonella du- Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
blin, no crecen a 43 ºC. - European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS ganisms.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
miento. Tests. Harmonized Method.
- United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
PRECAUCIONES cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- organisms. Harmonized Method.
sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
ñado. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

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Recuento en Placa Agar


Uso Almacenamiento
Medio de cultivo recomendado para el recuento de bacterias aeró- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
bicas en aguas, aguas residuales, productos lácteos y otros alimen- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
tos. También es recomendado como medio general para determi-
nar poblaciones microbianas. Procedimiento
Siembra
Fundamento En superficie: inocular directamente la muestra.
La productividad de este medio, está basada en el alto contenido En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su
nutricional de sus componentes, que permite el desarrollo de las dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
bacterias presentes en la muestra. Cuando se analiza leche y pro- a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
ductos lácteos algunos autores recomiendan suplementarla con ción. Dejar solidificar.
leche descremada estéril de uso bacteriológico en una proporción
de 1 g por litro. El agar es el agente solidificante. Incubación
En aerobiosis, a 32-35 °C durante 24-48 horas.
Contenido y composición
Código B0211205: envase x 100 g. Interpretación de los resultados
Código B0211206: envase x 500 g. Efectuar el recuento de colonias.

FÓRMULA (en gramos por litro) Control de Calidad


Extracto de levadura............................................................................................ 2.5.
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. Microorganismos Crecimiento
Glucosa....................................................................................................................................... 1.0. Escherichia coli Satisfactorio
Agar................................................................................................................................................15.0. ATCC 8739
pH final: 7.0 ± 0.2 Staphylococcus aureus Satisfactorio
ATCC 6538
Instrucciones Bacillus subtilis Satisfactorio
Suspender 23,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar ATCC 6633
reposar 5 minutos. Calentar con agitación constante y llevar a ebu- Lactobacillus fermentum Regular
llición para disolver completamente. Distribuir en recipientes apro- ATCC 9338
piados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.

Características del producto CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO


Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- Medio sin inocular Sin cambios
lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro ligeramente opales-
cente.

HOJA 1 DE 2
Recuento en Placa Agar

Materiales necesarios no provistos - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de mismo según reglamentaciones vigentes.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento. Referencias
- Marth (ed.). 1978. Standard methods for the examination of dairy
Precauciones products, 14th ed. American
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Public Health Association, Washington, D.C.
sivo. - Marshall (ed.). 1993. Standard methods for the examination of
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- dairy products, 16th ed. American
ñado. Public Health Association, Washington, D.C.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. biological Examination., Standard Methods for the Examination of
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
to.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Indicaciones al consumidor
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
establecidas por el laboratorio. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.

11/2015 - REv .01

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HOJA DE SEGURIDAD
SABOURAUD GLUCOSADO AGAR SIN
ANTIBIÓTICOS
REVISION: 02 FECHA: 02/03/2020

____________________________________________________________________________________________________
1. IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO Y DEL FABRICANTE

Código del producto: B02-253-05 x 100 g


B02-253-06 x 500 g
Nombre del producto: Sabouraud Glucosado Agar Sin Antibióticos

1.1 Identificación de la sustancia


Medio de cultivo formado por mezcla de diversos componentes.

1.2 Usos identificados


Es utilizado para análisis de laboratorio de microbiología.

1.3 Identificación del Fabricante: Laboratorios Britania S.A.


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info@britanialab.com

____________________________________________________________________________________________________
2. COMPOSICIÓN E INFORMACIÓN SOBRE LOS INGREDIENTES

Ingredientes peligrosos: Esta preparación no contiene sustancias que representen un riesgo para la
salud, según la definición de la Directiva de sustancias peligrosas 67/548/EEC.

___________________________________________________________________________________________________
3. IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Peligros para la salud humana: No clasificado como peligroso.

Contacto con los ojos: Puede provocar irritación temporal.


Contacto con la piel: Puede provocar irritación por contacto repetido o prolongado.
Ingestión: Una dosis grande puede tener los siguientes efectos: diarrea, náuseas, vómitos.
Inhalación: La exposición al polvo en altas concentraciones puede tener los siguientes
efectos: irritación de la nariz, garganta y las vías respiratorias.

1 de 3
____________________________________________________________________________________________________
4. PRIMEROS AUXILIOS

Luego de inhalación: Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.


Luego de contacto con la piel: Lavar la piel con abundante agua y jabón y enjuagar bien.
Luego de contacto con los ojos: Lavar con abundante agua durante 15 minutos.
Conseguir atención médica si el enrojecimiento o el dolor persisten.
Luego de la ingestión: Lavar la boca con abundante agua. Luego ingerir 2-3 vasos de agua
para diluir lo ingerido. Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.

____________________________________________________________________________________________________
5. MEDIDAS DE EXTINCIÓN DE INCENDIOS

Medios de extinción apropiados: Utilizar extinguidor de agua, espuma, productos químicos en polvo o CO2

Equipo de protección: No se requieren medidas especiales.

____________________________________________________________________________________________________
6. MEDIDAS A TOMAR EN EL TRANSCURSO DE DERRAMES ACCIDENTALES

Precauciones personales: Usar guantes descartables, antiparras y ropa protectora correspondiente.

Derrame: Colocar en recipientes apropiados para eliminación de residuos de laboratorio.


Lavar el área de derrame con abundante agua. No requiere de medidas
especiales.

____________________________________________________________________________________________________
7. MANIPULACIÓN Y ALMACENAMIENTO

Manipulación: Evítese el contacto con los ojos, piel y ropa.


Almacenamiento: Conservar a 2º - 25ºC, en su envase bien cerrado en lugar seco y al abrigo de la
luz.

____________________________________________________________________________________________________
8. CONTROLES DE EXPOSICIÓN / PROTECCIÓN PERSONAL

Medidas de protección respiratoria: Protección antipolvo.


Medidas de protección manos: Usar guantes descartables de vinilo.
Medidas de protección ojos: Usar gafas protectoras.
Medidas de protección cuerpo: Usar guardapolvo o bata protectora.

____________________________________________________________________________________________________
9. PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS

Estado físico: Polvo


Color: Beige claro
Olor: Característico
Solubilidad en agua: Soluble

2 de 3
____________________________________________________________________________________________________
10. DATOS SOBRE LA ESTABILIDAD Y LA REACTIVIDAD

Estabilidad: Permanece estable en las condiciones de conservación y manipuleo


recomendadas en la sección 7.

Reactividad: No se conocen reacciones peligrosas ni productos de descomposición peligrosos.

____________________________________________________________________________________________________
11. INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA

Toxicidad aguda: No presenta riesgo de toxicidad aguda.

Irritación de la piel y
membranas mucosas: Grado de irritación insuficiente para clasificarlo como irritante.

Irritación ocular: Grado de irritación insuficiente para clasificarlo como irritante.

____________________________________________________________________________________________________
12. INFORMACIÓN SOBRE ECOLOGÍA

Ecotoxicidad: No contiene sustancias nocivas conocidas para el entorno o no degradables.

____________________________________________________________________________________________________
13. CONSIDERACIONES AL MOMENTO DE LA ELIMINACIÓN

Según disposiciones locales sobre eliminación de residuos de laboratorio.

____________________________________________________________________________________________________
14. INFORMACIÓN SOBRE EL TRANSPORTE

ADR/ADN: No clasificado.

IATA: No regulado bajo las Normas IATA.

____________________________________________________________________________________________________
15. INFORMACIONES REGLAMENTARIAS

Frases de riesgo: Ninguna.

Frase de seguridad: Evitar el contacto con piel y ojos.

____________________________________________________________________________________________________
16. OTRA INFORMACIÓN

La información proporcionada en esta Hoja de Seguridad es exacta según nuestro mejor conocimiento e información a la fecha
de su emisión. La información proporcionada está diseñada exclusivamente como una guía para la manipulación, uso,
almacenamiento transporte y eliminación seguros, y no se considera una garantía de calidad. La información se refiere sólo al
material mencionado y puede no ser válida para ese material utilizado con otro/s material/es o en cualquier otro proceso, a
menos que se especifique lo contrario.

FIN DE LA INFORMACIÓN

3 de 3
B0215005 B0215006

Sabouraud Glucosado Agar


Uso Características del producto
Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
de hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo deslizamiento.
de levaduras. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, ligeramente opales-
cente sin precipitado.
Fundamento
Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de Almacenamiento
hongos, particularmente los asociados con infecciones Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
cutáneas (piel, pelo). Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
En el medio de cultivo, la peptona, la tripteína y la glucosa son los
nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El alto contenido Procedimiento
de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH ácido, inhiben el Siembra
desarrollo bacteriano y favorecen el crecimiento de hongos y leva- Estriar directamente la superficie del medio de cultivo.
duras. El agar es el agente solidificante.
Puede ser suplementado con otros agentes selectivos de creci- Incubación
miento. En aerobiosis a 20-25 ºC.
El tiempo dependerá del hongo y levadura que se quiera recu-
Contenido y composición perar. Como regla general, incubar en las condiciones descriptas
Código B0215005: envase x 100 g. durante 2 a 7 días. En el caso de investigar dermatofitos, incubar
Código B0215006: envase x 500 g. durante 5 a 20 días y examinar el cultivo cada 4 a 6 días.

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación de los resultados


Peptona........................................................................................................................................ 5.0. Describir las características típicas de las colonias y subcultivar en
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. medios apropiados para identificación.
Glucosa....................................................................................................................................40.0.
Cloranfenicol...............................................................................................................0.05. Control de Calidad
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 5.6 ± 0.2 Microorganismos Crecimiento
Aspergillus brasiliensis Satisfactorio
Instrucciones ATCC 16404
Suspender 65 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 Candida albicans Satisfactorio
minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuente- ATCC 10231
mente y hervir 1 minuto hasta disolver completamente. Trichophyton mentagrophytes Satisfactorio
Distribuir en tubos o en otros recipientes apropiados y esterilizar ATCC 9533
en autoclave a 118-121 ºC durante 15 minutos. Saccharomyces cerevisiae Satisfactorio
Colocar los tubos en posición inclinada para solidificar el medio ATCC 9763
de cultivo (pico de flauta). También puede distribuirse en placas de
Petri estériles.
Nota: mantener en lugar fresco, pues la exposición al calor au- CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
menta la hidrólisis de los componentes. Medio sin inocular Sin cambios

HOJA 1 DE 2
Sabouraud Glucosado Agar
Limitaciones - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
- El cloranfenicol, además de inhibir el desarrollo bacteriano, puede nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
inhibir el desarrollo de ciertos hongos patogénicos. establecidas por el laboratorio.
- Evitar el sobrecalentamiento del medio de cultivo por riesgo de - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
oscurecimiento, acidificación y disminución de las propiedades ge- va apropiadamente.
lificantes del agar. - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
- Realizar ensayos de identificación adicionales de los microorga- mismo según reglamentaciones vigentes.
nismos que hayan desarrollado.
Referencias
Materiales necesarios no provistos - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- more, Md.
miento. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Precauciones Washington, D.C.
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- - European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
sivo. Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- ganisms.
ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Indicaciones al consumidor
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
to.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Sabouraud Glucosado Caldo


Uso Procedimiento
Medio utilizado para el enriquecimiento y cultivo de hongos y le- Siembra
vaduras. También es conocido como Caldo Sabouraud Dextrosa y Inoculación directa del material en estudio.
como Medio de Antibióticos N° 13.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de Incubación
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- En aerobiosis a 20-25 ºC.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). El tiempo dependerá del hongo y levadura que se quiera recuperar.
Como regla general, incubar en las condiciones descriptas durante
Fundamento 2 a 7 días. En el caso de investigar dermatofitos, incubar durante 5
La tripteína (peptona de caseína) y la peptona de carne constitu- a 20 días y examinar el cultivo cada 4 a 6 días.
yen las fuente de nitrógeno, vitaminas y carbono necesarios para
el crecimiento de hongos y levaduras y la glucosa es la fuente de Interpretación de los resultados
energía. El crecimiento se evidencia por la aparición de turbidez.

Contenido y composición Control de Calidad


Código B0217805: envase x 100 g.
Código B0217806: envase x 500 g. Microorganismos Crecimiento
Aspergillus brasiliensis Satisfactorio
FÓRMULA (en gramos por litro) ATCC 16404
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. Candida albicans Satisfactorio
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0. ATCC 10231
Glucosa....................................................................................................................................20.0. Trichophyton mentagrophytes Satisfactorio
pH final: 5.6 ± 0.2 ATCC 9533
Saccharomyces cerevisiae Satisfactorio
Instrucciones ATCC 9763
Suspender 30 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición para
disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
autoclave a 121°C durante 15 minutos. Medio sin inocular Sin cambios

Características del producto


Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre Materiales necesarios no provistos
deslizamiento. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Precauciones
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.

HOJA 1 DE 2
Sabouraud Glucosado Caldo

- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Referencias


ñado. - Grove and Randall. 1955. Assay methods of antibiotics. Medical
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- Encyclopedia, Inc. New York, N.Y.
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
to. Tests. Harmonized Method.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
establecidas por el laboratorio. organisms. Harmonized Method.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente. Indicaciones al consumidor
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
mismo según reglamentaciones vigentes. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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Salmonella Shigella Agar


Uso Instrucciones
Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento Suspender 60 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir minutos y mezclar hasta homogeneizar. Calentar con agitación fre-
de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche cuente y llevar a ebullición durante 1 minuto para disolución total.
su presencia. No esterilizar en autoclave.
Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Fundamento
En el medio de cultivo la pluripeptona y el extracto de carne apor- Características del producto
tan los nutrientes para el desarrollo microbiano. Medio de cultivo deshidratado: color rosado, homogéneo, libre des-
Las sales biliares y el verde brillante inhiben el desarrollo de una lizamiento.
amplia variedad de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los Medio de cultivo preparado: color naranja ligeramente opalescen-
coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. te.
La lactosa es el hidrato de carbono fermentable. El tiosulfato de
sodio permite la formación de SH2 que se evidencia por la forma- Almacenamiento
ción de sulfuro de hierro. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
El rojo neutro es el indicador de pH y el agar es el agente solidi- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ficante.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de Procedimiento
desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de Siembra
pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Sembrar estriando directamente la superficie del medio de cultivo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de
lactosa, crecen adecuadamente en el medio de cultivo, y producen Incubación
colonias transparentes. En aerobiosis a 35-37 °C durante 18-24 horas.
La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con
centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro. Interpretación de los resultados
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas
la muestra en Selenito Caldo ( ). o rojizas.
Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del
Contenido y composición color del medio, incoloras.
Código B0213805: envase x 100 g. Microorganismos productores de SH2: colonias con centro ne-
Código B0213806: envase x 500 g. gro.

FÓRMULA (en gramos por litro)


Pluripeptona....................................................................................................................... 5.0.
Extracto de carne...................................................................................................... 5.0.
Lactosa......................................................................................................................................10.0.
Mezcla de sales biliares................................................................................... 8.5.
Citrato de sodio............................................................................................................... 8.5.
Tiosulfato de sodio.................................................................................................... 8.5.
Citrato férrico................................................................................................................. 1.0.
Verde brillante ............................................................................................... 0.00033.
Rojo neutro................................................................................................................... 0.025.
Agar................................................................................................................................................13.5.
pH final: 7.0 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Salmonella Shigella Agar I
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
Control de Calidad
Precauciones
Microorganismos Crecimiento Color de la Producción - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Colonia de SH2 sivo.
Salmonella enteritidis Satisfactorio Incolora + - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 13076 ñado.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incolora + - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 14028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Shigella flexneri Satisfactorio Incolora - - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 12022 to.
Shigella sonnei Satisfactorio Incolora - - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25931 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Proteus mirabilis Satisfactorio Incolora + establecidas por el laboratorio.
ATCC 43071 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Inhibición parcial Rojo-rosada - va apropiadamente.
ATCC 25922 o total - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Enterococcus faecalis Inhibición parcial Incolora - mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 29212 o total
Referencias
- Leifson. E. 1935. New culture media based on sodium desoxycho-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO late for the isolation of intestinal pathogens and for the enumera-
Medio sin inocular Sin cambios tion of colon bacilli in milk and water. J. Pathol. Bacteriol. 40:581.
- Taylor W.I., and Harris, B. 1965. Isolation of shigellae. II. Compa-
Limitaciones rison of plating media and enrichment broths. Am. J. Clin. Pathol.
- Por ser un medio altamente selectivo, algunas pocas cepas de 44:476.
Shigella pueden no desarrollar adecuadamente en el mismo. - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Ocasionalmente unos pocos microorganismos no patógenos pue- maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
den desarrollar pero son facilmente diferenciados por su capacidad timore, Md.
de fermentar la lactosa.
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - rEV .01

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Sangre Agar Base Con Azida


Uso Preparación de Agar Sangre
Medio de cultivo adecuado para el aislamiento primario y selectivo Agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep)
de estreptococos y estafilococos cuando están en presencia de al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar
flora Gram negativa, a partir de muestras clínicas, aguas y otros y distribuir en placas de Petri estériles.
materiales de importancia sanitaria.
Suplementado con sangre ovina permite la observación de las re- Características del producto
acciones de hemólisis. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
deslizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color ámbar.
En el medio de cultivo la pluripeptona y el extracto de carne apor- Suplementado con sangre: color rojo cereza.
tan nutrientes para el desarrollo microbiano. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. Almacenamiento
A la concentración empleada, la azida de sodio ejerce un efecto Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
bacteriostático solamente sobre los microorganismos Gram ne- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
gativos, otorgando selectividad y favoreciendo el desarrollo de los
Gram positivos. Procedimiento
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril Siembra
(Britasheep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en Por inoculación directa del material en estudio, estriar sobre la su-
sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las perficie del medio de cultivo.
reacciones de hemólisis.
Incubación
Contenido y composición El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
Código B0212905: envase x 100 g. del microorganismo que se quiera recuperar.
Código B0212906: envase x 500 g. En general se recomienda:
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
FÓRMULA (en gramos por litro) 18 a 24 horas.
Pluripeptona....................................................................................................................10.0 . Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Extracto de carne...................................................................................................... 3.0. fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0.
Azida de sodio..................................................................................................................... 0.2. Interpretación de los resultados
Agar................................................................................................................................................15.0. Observar las características de las colonias.
pH final: 7.2 ± 0.2 Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
nes de hemólisis:
Instrucciones Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
Disolver 33 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar 5 halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición para a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los
autoclave a 118-121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C. microorganismos.

HOJA 1 DE 2
Sangre Agar Base Con Azida
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo medios de cultivo que contienen sangre ya que la azida de sodio
claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. incrementa la hemólisis alfa y beta.
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me-
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre- Materiales necesarios no provistos
dedor de la colonia en estudio. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Control de Calidad miento.
Los resultados corresponden al medio de cultivo suplemen- Precauciones
tado con 5% de sangre ovina: - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
Microorganismos Crecimiento Hemólisis - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 19615 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 6305 to.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 49619 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Staphylococcus aureus Satisfactorio N/A establecidas por el laboratorio.
ATCC 25923 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Inhibido -- va apropiadamente.
ATCC 25922 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Referencias


Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Limitaciones more, Md.
- Este es un medio de cultivo selectivo por lo cual se recomienda - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
inocular la muestra en estudio en paralelo junto con un medio nu- vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
tritivo no selectivo.
- Algunas cepas de Proteus spp. pueden desarrollar en el medio de Indicaciones al consumidor
cultivo, aunque el fenómeno de swarming está inhibido. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- La hemólisis obtenida puede ser diferente a la observada en otros Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - rEV .01

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Sangre Agar Base


Uso y distribuir en placas de Petri estériles.
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de numerosos mi-
croorganismos. Características del producto
Al ser suplementado con sangre ovina, permite el crecimiento de Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
microorganismos nutricionalmente exigentes y la clara visualiza- deslizamiento.
ción de reacciones de hemólisis. Medio de cultivo preparado: color ámbar.
Suplementado con sangre: color rojo cereza.
Fundamento
La infusión de músculo de corazón y la peptona, otorgan al medio Almacenamiento
un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran va- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
riedad de microorganismos, aún de aquellos nutricionalmente exi- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
gentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar
es el agente solidificante. Procedimiento
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril Siembra
(Britasheep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en Por inoculación directa del material en estudio, estriar sobre la su-
sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las perficie del medio de cultivo.
reacciones de hemólisis.
Incubación
Contenido y composición El tiempo, temperatura y atmósfera de incubación, dependerán del
Código B0214905: envase x 100 g. microorganismo que se quiera recuperar.
Código B0214906: envase x 500 g. En general se recomienda:
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 ºC hasta 48
FÓRMULA (en gramos por litro) horas.
Infusión de músculo de corazón...................................................375.0. Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Peptona.....................................................................................................................................10.0. fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0.
Agar................................................................................................................................................15.0. Interpretación de los resultados
pH final: 7.3 ± 0.2 Observar las características de las colonias.
Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Nota: la infusión de músculo de corazón es equivalente a 10 g de nes de hemólisis:
polvo. Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
Instrucciones a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
Suspender 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo- de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los
sar 5 minutos y mezclar perfectamente hasta obtener una suspen- microorganismos.
sión homogénea. Calentar con agitación frecuente y hervir 1 minuto Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo
para disolución total. Esterilizar a 121 ºC durante 20 minutos. claro, brillante alrededor de la colonia en estudio.
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me-
Preparación de Agar Sangre: dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre-
Agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) dedor de la colonia en estudio
al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar

HOJA 1 DE 2
Sangre Agar Base
obtener el mejor rendimiento, incubar las placas en atmósfera con
Control de Calidad CO2 o en anaerobiosis.

Microorganismos Crecimiento Materiales necesarios no provistos


Escherichia coli Satisfactorio Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
ATCC 25922 calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Staphylococcus aureus Satisfactorio miento.
ATCC 25923
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Precauciones
ATCC 27853 - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
Sangre Agar Base suplementado con 5% de sangre ovina: - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ñado.
Microorganismos Crecimiento Hemólisis - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 19615 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa to.
ATCC 6305 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 49619 establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Medio sin inocular Sin cambios mismo según reglamentaciones vigentes.

Limitaciones Referencias
- Las reacciones hemolíticas de una amplia variedad de microor- - Forbes, Sahm and Weissfeld (ed.). 1998. Bailey & Scott’s diagnos-
ganismos son diferentes al usar sangre equina respecto al utilizar tic microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
sangre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estreptoco- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
cos grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suplementado clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
con sangre equina pero no en el agar suplementado con sangre Washington, D.C.
de carnero, y son mal clasificadas como Estreptococos Grupo A al
usar sangre equina. Indicaciones al consumidor
- La atmósfera de incubación puede influenciar en el tipo de re- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
acción de hemólisis en los estreptococos beta hemolíticos. Para Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - rEV .11

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Selenito Caldo
Uso 1 gramo o 1 ml de una suspensión de materia fecal o descargar el
Medio que permite el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. contenido del hisopo.
a partir de muestras clínicas, especialmente heces y orinas.
Muestras sólidas: aproximadamente 1 gramo.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesa- Orina: centrifugar y cultivar el sedimento.
rios para el adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe la flora Gram Muestras líquidas: mezclar partes iguales (1:1) de la muestra con el
positiva y la mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp. caldo doble concentración.
durante las primeras 8-12 horas de incubación.
Incubación
Contenido y composición En aerobiosis, a 35-37 °C, durante 16-24 horas.
Código B0212005: envase x 100 g. Luego de la incubación, subcultivar en medios selectivos pa-
Código B0212006: envase x 500 g. ra el crecimiento de Salmonella: Salmonella Shigella Agar (
), Hektoen Entérico Agar (Britania), Verde Brillante Agar
FÓRMULA (en gramos por litro) ( ), Mac Conkey Agar ( ).
Peptona........................................................................................................................................ 5.0.
Lactosa......................................................................................................................................... 4.0. Interpretación de los resultados
Fosfato de sodio..........................................................................................................10.0. El crecimiento microbiano se observa por turbidez.
Selenito de sodio.......................................................................................................... 4.0.
pH final: 7.0 ± 0.2
Control de Calidad
Instrucciones
Suspender 23 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar Microorganismos Crecimiento en Crecimiento en
bien y calentar ligeramente hasta su disolución completa. Evite el Selenito Caldo Mac Conkey Agar
calentamiento excesivo. Salmonella enteritidis Satisfactorio Colonias incoloras
No esterilizar en autoclave. ATCC 13076
Distribuir en tubos u otros recipientes estériles un volumen no me- Salmonella typhimurium Satisfactorio Colonias incoloras
nor a 5 ml. ATCC 14028
Escherichia coli Inhibición parcial Colonias rosadas con
Características del producto ATCC 25922 precipitado
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des- Proteus mirabilis Regular Colonias incoloras
lizamiento. ATCC 43071
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, traslúcido.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Almacenamiento Medio sin inocular Sin cambios
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

Procedimiento
Siembra
Materia fecal: a un tubo con 10-15 ml de caldo selenito, agregar

HOJA 1 DE 2
Selenito Caldo
Limitaciones - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
- Descartar el medio de cultivo preparado si se observa gran can- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
tidad de precipitado rojizo. Esto es debido a la oxidación del sele- establecidas por el laboratorio.
nito. - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
- Se aconseja usar el medio el mismo día de la preparación y se va apropiadamente.
recomienda guardar en heladera si no se usa de inmediato. El al- - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
macenamiento por largos períodos puede afectar y reducir la se- mismo según reglamentaciones vigentes.
lectividad del mismo.
- No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, Referencias
debido a que el efecto inhibitorio del selenito disminuye luego de - Leifson, E. 1936. New selective enrichment medium for the iso-
las primeras 6-12 horas de incubación, y además porque no es lation of typhoid and paratyphoid (Salmonella) bacilli. Am. J. Hyg.
favorable para la mayoría de las cepas de Salmonella, que pueden 24:423.
no recuperarse. La única ventaja de incubar durante 48 horas es el
incremento de la recuperación de Salmonella pullorum. - North, W.R., and Bartram, M.T. (1953). The efficiency of Selenite
Broth of different compositions in the isolation of Salmonella. Appl.
Materiales necesarios no provistos Microbiol. 1, 130.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
miento. more, Md.
- Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
Precauciones biological Examination., Standard Methods for the Examination of
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
sivo. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
ñado. Washington, D.C.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Indicaciones al consumidor
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
to. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

11/2015 - REV .01

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Selenito Cistina Caldo


Uso a ligeramente opalescente.
Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella
spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales de importancia Almacenamiento
sanitaria. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios Procedimiento
para el desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono Siembra
fermentable, el selenito de sodio inhibe flora Gram positiva y la - Puede realizarse la siembra partiendo de un caldo de preenrique-
mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp. durante las cimiento o en forma directa conservando la proporción 1:10.
primeras 8-12 horas de incubación. - Muestras sólidas: aproximadamente 1 gramo.
La L-cistina es el agente reductor y la FDA propuso que se agre- - Materia fecal: a un tubo con 10 ml de caldo selenito, agregar 1
gue a la formulación del Selenito Caldo porque reduce la toxicidad gramo o 1 ml de una suspensión de materia fecal o descargar el
del selenito de sodio llevando así a una mayor recuperación de contenido del hisopo.
especies de Salmonella.
Incubación
Contenido y composición En aerobiosis a 35-37 ºC, durante 16 a 24 horas.
Código B0215405: envase x 100 g. Luego de la incubación, subcultivar en medios selectivos pa-
Código B0215406: envase x 500 g. ra el crecimiento de Salmonella: Salmonella Shigella Agar
( ), Hektoen Entérico Agar ( ), Verde Brillante
FÓRMULA (en gramos por litro) Agar ( ), Mac Conkey Agar ( ).
Peptona........................................................................................................................................ 5.0.
Lactosa......................................................................................................................................... 4.0. Interpretación de los resultados
Fosfato de sodio..........................................................................................................10.0. El crecimiento microbiano se observa por turbidez.
Selenito de sodio.......................................................................................................... 4.0.
L-Cistina.....................................................................................................................................0.01.
pH final: 7.0 ± 0.2 Control de Calidad
Microorganismos Crecimiento en Crecimiento en
Instrucciones Selenito Cistina Caldo Mac Conkey Agar
Suspender 23 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar Salmonella enteritidis Satisfactorio Colonias incoloras
bien y calentar ligeramente hasta disolución completa. Evite el ca- ATCC 13076
lentamiento excesivo. Salmonella typhimurium Satisfactorio Colonias incoloras
No esterilizar en autoclave. ATCC 14028
Distribuir en tubos u otros recipientes estériles un volumen no me- Escherichia coli Inhibición parcial Colonias rosadas con
nor a 5 ml. ATCC 25922 precipitado
Proteus mirabilis Regular Colonias incoloras
Características del producto ATCC 43071
Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
lizamiento. CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio de cultivo preparado: color ámbar muy claro de transparente Medio sin inocular Sin cambios

HOJA 1 DE 2
Selenito Cistina Caldo

Limitaciones - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-


- Descartar el medio de cultivo preparado, si se observa gran canti- va apropiadamente.
dad de precipitado rojizo. Esto es debido a la oxidación del selenito. - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
- Se aconseja usar el medio el mismo día de la preparación y se mismo según reglamentaciones vigentes.
recomienda guardar en heladera si no se usa de inmediato. El al-
macenamiento por largos períodos puede afectar y reducir la se- Referencias
lectividad del mismo. - Leifson, E. 1936. New selective enrichment medium for the iso-
- No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, lation of typhoid and paratyphoid (Salmonella) bacilli. Am. J. Hyg.
debido a que el efecto inhibitorio del selenito disminuye luego de 24:423.
las primeras 6-12 horas de incubación, y además porque no es - North, W.R., and Bartram, M.T. (1953). The efficiency of Selenite
favorable para la mayoría de las cepas de Salmonella, que pueden Broth of different compositions in the isolation of Salmonella. Appl.
no recuperarse. La única ventaja de incubar durante 48 horas es el Microbiol. 1, 130.
incremento de la recuperación de Salmonella pullorum. - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Materiales necesarios no provistos more, Md.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- biological Examination., Standard Methods for the Examination of
miento. Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
- Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Precauciones clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Washington, D.C.
sivo. - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
ñado. Productos no Obligatoriamente Estériles.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. mit Test.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
to. Indicaciones al consumidor
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
establecidas por el laboratorio.

11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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SIM Medio
Uso Enfriar y solidificar en posición vertical.
Medio semisólido destinado a verificar la movilidad, producción de
indol y de sulfuro de hidrógeno por los microorganismos. Características del producto
Es útil para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae. Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
lizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color ámbar.
Medio de cultivo en el cual la tripteína y la peptona aportan nutrien-
tes para el desarrollo microbiano. El triptófano es un aminoácido Almacenamiento
constituyente de muchas peptonas y particularmente de la tripteína Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
y puede ser metabolizado por algunas bacterias para formar indol. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
En el proceso interviene un conjunto de enzimas llamadas tripto-
fanasa. El indol producido se combina con el aldehido del reactivo Procedimiento
de Ehrlich (Indol Reactivo REF B1550361) o de Kovac´s, para Siembra
originar un compuesto de color rojo. Por punción profunda utilizando aguja de inoculación recta.
A partir del tiosulfato de sodio los microorganismos pueden gene- Inocular el centro del tubo, y la punción debe abarcar 2 tercios de
rar ácido sulfhídrico que reacciona con el hierro presente formán- profundidad del medio de cultivo desde la superficie.
dose un compuesto de color negro.
El agar es el agente solidificante y a esta concentración le otorga Incubación
al medio la propiedad de ser semisólido, condición necesaria para En aerobiosis. a 35-37 °C, durante 18-24 horas.
detectar movilidad, que se evidencia por el enturbiamiento del me-
dio o por crecimiento que difunde mas allá de la línea de siembra Interpretación de los resultados
del microorganismo en estudio. Observar la movilidad y el color del medio de cultivo. Luego realizar
la prueba de indol.
Contenido y composición
Código B0213105: envase x 100 g. Movilidad:
Código B0213106: envase x 500 g. Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas allá de
la línea de siembra.
FÓRMULA (en gramos por litro) Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siembra.
Tripteína...................................................................................................................................20.0.
Peptona........................................................................................................................................ 6.1. Producción de SH2:
Sulfato de hierro y amonio.......................................................................... 0.2. Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo a lo largo
Tiosulfato de sodio.................................................................................................... 0.2. de la línea de siembra o en todo el medio.
Agar................................................................................................................................................... 3.5. Resultado negativo: el medio permanece sin cambio de color.
pH final: 7.3 ± 0.2
Prueba del indol:
Instrucciones Agregar al medio de cultivo 3 a 5 gotas de Indol Reactivo (REF
Suspender 30 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 B1550361).
minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir durante un minu- Resultado positivo: color rojo.
to para disolución total. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece in-
a 121°C durante 15 minutos. coloro-amarillento.

HOJA 1 DE 2
SIM Medio
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
Control de Calidad miento.

Microorganismos Crecimiento Movilidad Indol SH2 Precauciones


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Escherichia coli Satisfactorio + + - sivo.
ATCC 25922 - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Escherichia coli Satisfactorio + + - ñado.
ATCC 35218 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Escherichia coli Satisfactorio + + - rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 8739 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Salmonella typhimurium Satisfactorio + - + to.
ATCC 14028 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Shigella flexneri Satisfactorio - - - nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 12022 establecidadas por el laboratorio.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio - - - - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 700603 va apropiadamente.
Proteus mirabilis Satisfactorio + - + - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 43071 mismo según reglamentaciones vigentes.

Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Ewing. 1986. Edwards and Ewing’s identification of Enterobacte-
Medio sin inocular Sin cambios riaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., New York, N.Y.
- Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s
Limitaciones Manual of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins,
- Para un correcto ensayo, agregar el Indol Reactivo luego que se Baltimore, Md.
interpretó el resultado de la movilidad y la producción de ácido sul- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
fhídrico. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
- La movilidad puede ser difícil de observar en las bacterias ae- Washington, D.C.
robias estrictas ya que sólo crecen en la superficie del medio de - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
cultivo. bacteria, 3rd ed. Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
- Algunas bacterias productoras de melanina como M. morganii,
pueden generar un color parduzco en el medio de cultivo. Este color Indicaciones al consumidor
no debe confundirse con el ennegrecimiento debido a la produc- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
ción de ácido sulfhídrico. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.

Materiales necesarios no provistos


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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B0213205 B0213206

Simmons Citrato Agar


Uso Instrucciones
Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base Suspender 24,2 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar re-
a la capacidad de usar citrato como única fuente de carbono y posar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebulli-
energía. ción durante 1 o 2 minutos para disolución total. Distribuir en tubos
y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Fundamento Enfriar y solidificar en posición inclinada (pico de flauta).
En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente
de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. Características del producto
Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteria- Medio de cultivo deshidratado: color amarillo-verdoso, homogéneo,
no. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es libre deslizamiento.
cofactor enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmó- Medio de cultivo preparado: color verde.
tico, el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color
azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante. Almacenamiento
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganis- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
mos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono usan Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consi-
guiente producción de alcalinidad. Procedimiento
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias posee- Siembra
doras de citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. Estriar la superficie del medio de cultivo.
El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato
y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen Incubación
a ácidos orgánicos que al ser utilizados como fuente de carbono, En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24-72 horas.
producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces Algunos microorganismos pueden requerir hasta 7 días de incu-
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permea- bación.
sa.
Interpretación de los resultados
Contenido y composición - Positivo: crecimiento bacteriano con un intenso color azul en el
Código B0213205: envase x 100 g. pico de flauta.
Código B0213206: envase x 500 g. - Negativo: ausencia de crecimiento y permanencia del color verde
del medio de cultivo.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Citrato de sodio............................................................................................................... 2.0
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 1.0.
Fosfato monoamónico............................................................................................ 1.0.
Sulfato de magnesio................................................................................................. 0.2.
Azul de bromotimol...............................................................................................0.08.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 6.9 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Simmons Citrato Agar
Control de Calidad Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Microorganismos Crecimiento Color del medio sivo.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Azul - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 700603 ñado.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Azul - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 14028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Azul - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 27853 to.
Escherichia coli Negativo Verde - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 25922 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Shigella flexneri Negativo Verde establecidas por el laboratorio.
ATCC 12022 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO mismo según reglamentaciones vigentes.
Medio sin inocular Sin cambios
Referencias
Limitaciones - Simmons JS. A culture medium for differentiating organisms of
-Si se usa un inóculo denso para sembrar el medio de cultivo, pue- the typhoid-colon aerogenes groups and for isolation of certainfun-
de variar el color del pico del verde al amarillo-amarronado. Esto gi. J Infect Dis 1926; 39: 209-214.
no afecta el color verde del resto del medio de cultivo, pero puede - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
afectar la visualización azul de un resultado positivo. maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
- Inóculos muy densos, pueden originar resultados falsos positivos. timore, Md.
- Cuando se siembra una serie de pruebas bioquímicas a partir del - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
mismo cultivo, se debe esterilizar la aguja de inoculación antes de clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
inocular la prueba del citrato o sino inocularla primero. Cualquier Washington, D.C.
arrastre de materia orgánica puede originar resultados falsos po- - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical
sitivos. bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.

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T.C.B.S. Medio
Uso Agar................................................................................................................................................15.0.
Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, pH final: 8.6 ± 0.2
Vibrio parahemolyticus y otras especies de Vibrio a partir de heces,
aguas y alimentos.
También es conocido con el nombre “Agar Tiosulfato Citrato Bilis Instrucciones
Sacarosa”, o como “Agar Selectivo para Vibrios”. Suspender 89 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
Fundamento para disolución total. Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Preparado según la fórmula desarrollada por Kobayashi, es el me- No esterilizar en autoclave.
dio de cultivo nutritivo selectivo y diferencial más adecuado para el
aislamiento de las especies de Vibrio. Características del producto
El extracto de levadura, la peptona de carne y la tripteína apor- Medio de cultivo deshidratado: color tostado claro, homogéneo, li-
tan los nutrientes para el desarrollo microbiano. La bilis de buey, bre deslizamiento.
el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora Medio de cultivo preparado: color verde azulado.
acompañante, favoreciendo el crecimiento de Vibrio spp. El cloruro
de sodio mantiene el balance osmótico y debido a su alta concen- Almacenamiento
tración también contribuye a la selectividad del medio. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
La sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el azul de Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
bromotimol y azul de timol son los indicadores de pH que en un
ambiente alcalino le otorgan al medio de cultivo el color verde- Procedimiento
azulado y viran al color amarillo en medio ácido (por utilización de la Siembra
sacarosa). El tiosulfato de sodio es la fuente de azufre y junto con Estriar la superficie del medio de cultivo.
el citrato ferrico permiten la detección de la producción de ácido Según el tipo de muestra a procesar puede realizarse la inoculación
sulfhídrico por formación de un compuesto color negro. El agar es directa en T.C.B.S. Medio, o puede ser necesario el enriquecimiento
el agente solidificante. previo en Agua Peptonada Alcalina ( ).
Se recomienda que las muestras de materia fecal, aguas y alimen-
Contenido y composición tos en los que se quieran recuperar especies de Vibrio, sean pre-
Código B0216705: envase x 100 g. viamente enriquecidas en Agua Peptonada Alcalina durante 5 a 8
Código B0216706: envase x 500 g. horas a 35-37 ºC y luego subcultivadas en T.C.B.S. Medio.
En el caso de muestras clínicas provenientes de infecciones extra-
FÓRMULA (en gramos por litro) intestinales generalmente no es necesario realizar enriquecimiento
Extracto de levadura............................................................................................ 5.0. previo en Agua Peptonada Alcalina.
Peptona de carne......................................................................................................... 5.0.
Tripteína...................................................................................................................................... 5.0. Incubación
Citrato de sodio............................................................................................................10.0. En aerobiosis, a 35-37°C durante 18-24 horas.
Tiosulfato de sodio.................................................................................................10.0.
Bilis de buey.......................................................................................................................... 8.0. Interpretación de los resultados
Sacarosa.................................................................................................................................20.0. Observar las características de las colonias.
Cloruro de sodio.......................................................................................................10.0. Microorganismos fermentadores de sacarosa: colonias amari-
Citrato férrico................................................................................................................. 1.0. llas.
Azul de bromotimol...............................................................................................0.04. Microorganismos no fermentadores de sacarosa: colonias del
Azul de timol....................................................................................................................0.04. color del medio, con centro verde.

HOJA 1 DE 2
T.C.B.S. Medio

Control de Calidad Precauciones


- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Microorganismos CRECIMIENTO Características sivo.
de las colonias - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Vibrio cholerae Satisfactorio Amarillas de 2-3 mm de ñado.
diámetro, de borde traslúcido - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Vibrio Satisfactorio Centro verde, borde traslúcido rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
parahaemolyticus - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Aeromonas Inhibido --- to.
hydrophila - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Escherichia coli Inhibido --- nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 25922 establecidas por el laboratorio.
Proteus mirabilis Inhibición total Centro verde y bordes - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 43071 o parcial traslucidos va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO
Medio sin inocular Sin cambios Referencias
- Kobayashi, T., Enomoto, S., Sakazaki, R., and Kuwahara. S. 1963.
Limitaciones A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS (modified
- Realizar identificación bioquímica a las colonias presuntivas de Nakanishi´s agar). Jap. J. Bacteriol. 18: 387.
Vibrio spp. - Mac Faddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Se recomienda no realizar la prueba de la oxidasa a las colonias maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
de T.C.B.S. Medio porque pueden obtenerse resultados falsos ne- more, Md.
gativos. - August, M.J., et al. 1990. Cumitech 3A; Quality Control and Quality
- Es conveniente sembrar la muestra en paralelo con un medio de Assurance Practices in Clinical Microbiology, Coordinating ed., A.S.
cultivo nutritivo no selectivo ya que algunas cepas de Vibrio pueden Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
no desarrollar satisfactoriamente en T.C.B.S. Medio. - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
- Algunas cepas de Vibrio cholerae pueden fermentar lentamente biological Examination., Standard Methods for the Examination of
la sacarosa y observarse de color verdoso a las 24 horas de incu- Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
bación. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Algunas cepas de Proteus y Enterococos pueden crecer y obser- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
varse como colonias pequeñas. Washington, D.C.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.
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Tetrationato Caldo Base


Uso para disolución total. Enfriar a 45°C. Agregar 20 ml de solución io-
Medio de cultivo utilizado para el enriquecimiento selectivo de Sal- durada. Mezclar y distribuir en tubos estériles 10 ml. No esterilizar
monella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales de im- por autoclave.
portancia sanitaria.
Solución iodo iodurada: Fórmula
Fundamento Iodo................................................................................................................................................ 6.0 g
El medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes Ioduro de potasio..................................................................................................... 5.0 g
necesarios para el desarrollo bacteriano, y carbonato de calcio que Agua........................................................................................................................................ 20.0 ml
neutraliza y adsorbe metabolitos tóxicos.
La selectividad está dada por la presencia de sales biliares y tetra- Características del producto
tionato (compuesto generado en el medio de cultivo al reaccionar Medio de cultivo deshidratado: color blanquecino, homogéneo, libre
el tiosulfato de sodio con la solución iodo-iodurada) que inhiben el deslizamiento.
desarrollo de microorganismos Gram positivos y algunas entero- Medio de cultivo preparado: suspensión color blanco lechoso.
bacterias. Salmonella spp. contiene la enzima tetrationato reducta-
sa y puede crecer satisfactoriamente en el medio de cultivo debido Almacenamiento
a que no la afecta la toxicidad del tetrationato. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Para evitar la proliferación de especies de Proteus spp., se reco- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
mienda agregar 40 mg/l de Novobiocina previo al agregado de la
solución iodo iodurada. Procedimiento
Siembra
Contenido y composición - Puede realizarse la siembra partiendo de un caldo de preenrique-
Código B0214505: envase x 100 g. cimiento o en forma directa conservando la proporción 1:10.
Código B0214506: envase x 500 g. - Muestras sólidas: aproximadamente 1 gramo.
- Materia fecal: a un tubo con 10 ml de caldo tetrationato, agregar
FÓRMULA (en gramos por litro) 1 gramo o 1 ml de una suspensión de materia fecal o el contenido
Peptona 5.0 del hisopo.
Sales biliares 1.0
Carbonato de calcio 10.0 Incubación
Tiosulfato de sodio 30.0 En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 12-24 horas.
pH final: 8.4 ± 0.2 Luego, subcultivar en medios selectivos para el crecimiento de Sal-
monella: Salmonella Shigella Agar ( ), Hektoen
Instrucciones Entérico Agar ( ), Verde Brillante Agar ( ), Mac
Suspender 46 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar vi- Conkey Agar ( ).
gorosamente. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición

HOJA 1 DE 2
Tetrationato Caldo Base

Interpretación de los resultados - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Control de Calidad establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Microorganismos CRECIMIENTO Caracteristicas de las colonias va apropiadamente.
en Salmonella Shigella Agar - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incoloras con producción de SH2 mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 14028
Salmonella enteritidis Satisfactorio Incoloras con producción de SH2 Referencias
ATCC 13076 - Mueller. L. 1923. Un nouveau milieu d´enrichissement pour le re-
Escherichia coli Inhibición parcial Rosada roja cherche du bacilli typhique et des paratyphiques. C. R. Soc. Biol.
ATCC 25922 (Paris) 89:434.
- Kaufman, F. 1930. Zentrabl. Bakteriol. Parsitenkd. Infektionskr.
Hyg. Abt. I Orig. 113:148.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Kaufman. 1935. Z. Hyg. Infektionskr. 117:26.
Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Limitaciones more, Md.
-El medio no debe someterse a tratamiento térmico por calor luego - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
de agregar la solución iodo iodurada. biological Examination., Standard Methods for the Examination of
-El medio base puede mantenerse a 4°C, dura varios meses, pero Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
una vez agregada la solución iodo iodurada debe usarse en el mis- - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
mo día. clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
Materiales necesarios no provistos - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Productos no Obligatoriamente Estériles.
miento. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
mit Test.
Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Indicaciones al consumidor
sivo. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
to.
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


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Tioglicolato Medio Fluido sin


Indicador
Uso Instrucciones
Medio de cultivo utilizado en microbiología clínica e industrial para Suspender 30 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo-
el desarrollo de microorganismos aerobios y anaerobios y para en- sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
sayos de control de esterilidad de diversos productos. hasta disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esteri-
lizar a 121°C durante 15 minutos.
Fundamento
Fue descripto originalmente por Brewer. Presenta la misma calidad Características del producto
nutricional del Tripteína Soya Caldo ( ) y favorece el cre- Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
cimiento de una amplia variedad de microorganismos, incluidos los deslizamiento.
nutricionalmente exigentes. Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
Las sustancias reductoras como tioglicolato de sodio, el sulfito
de sodio y cisteína disminuyen el potencial de oxido reducción y Almacenamiento
proporcionan una anaerobiosis suficiente y debido a los grupos Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
-SH- de estos compuestos, se neutralizan los efectos bacteriostá- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
ticos de los derivados mercuriales, arsenicales y de otros metales
pesados que pudieran estar presentes en la muestra en estudio. Procedimiento
El bajo contenido de agar le otorga la propiedad de ser un medio Siembra
fluído y retarda la dispersión de CO2 y O2. Inocular el material en estudio.
Debido a todas estas características desarrollan microorganismos Según la muestra a analizar, se puede proceder de la siguiente ma-
aerobios, anaerobios facultativos y estrictos. nera:
- Muestras líquidas: agregar 1 o 2 gotas de la muestra a tubos
Contenido y composición conteniendo medio de cultivo.
Código B0214405: envase x 100 g. - Muestras sólidas: macerar en caldo estéril. Luego sembrar de la
Código B0214406: envase x 500 g. misma manera que para muestras líquidas.
- Hisopos: insertarlos en el medio de cultivo, luego de haber sem-
brado el medio sólido apropiado.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Tripteína....................................................................................................................................17.0. Incubación
Peptona de soya.............................................................................................................. 3.0. El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependerán
Glucosa....................................................................................................................................... 6.0. del microorganismo que se quiera recuperar.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 2.5.
Tioglicolato de sodio............................................................................................. 0.5. En general:
L-cistina.....................................................................................................................................0.25. Microorganismos de fácil crecimiento: a 35-37 º C durante 18 a
Sulfito de sodio.............................................................................................................. 0.1. 24 horas.
Agar................................................................................................................................................... 0.7. Microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales: a
pH final: 7.0 ± 0.2 35-37 ºC hasta 7 días.

HOJA 1 DE 2
Tioglicolato Medio Fluido sin Indicador

Ensayos de esterilidad de productos farmacéuticos: 14 días. Materiales necesarios no provistos


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
Interpretación de los resultados calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
El crecimiento microbiano se observa por turbidez. miento.
- Microorganismos aerobios estrictos: crecen en la parte supe-
rior del medio de cultivo. Precauciones
- Microorganismos anaerobios facultativos: crecen en todo el - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
medio de cultivo. sivo.
- Microorganismos anaerobios estrictos: crecen en las profun- - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
didades del medio del cultivo. ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Control de Calidad rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Microorganismos CRECIMIENTO - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Bacillus subtilis Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 6633 establecidas por el laboratorio.
Staphylococcus aureus Satisfactorio - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 6538 va apropiadamente.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 9027 mismo según reglamentaciones vigentes.
Clostridium sporogenes Satisfactorio
ATCC 19404 Referencias
Bacteroides fragilis Satisfactorio - Brewer. 1940. JAMA 115:598.
ATCC 25285 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Streptococcus pyogenes Satisfactorio maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
ATCC 19615 timore, Md.
- Reischelderfer and Mangels. 1992. In Isenberg (ed.), Clinical mi-
crobiology procedures handbook, vol. 1. American Society for Mi-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO crobiology, Washington, D.C.
Medio sin inocular Sin cambios - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Limitaciones Washington, D.C.
En el cultivo de anaerobios se recomienda previo a la siembra de la
muestra, eliminar el oxígeno presente mediante el hervido de los Indicaciones al consumidor
tubos con las tapas flojas, y luego enfriarlos a temperatura ambien- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
te con las tapas bien cerradas. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo. 11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0214005 B0214006

Tioglicolato USP con Indicador


Medio
Uso FÓRMULA (en gramos por litro)
Medio fluído que permite el cultivo y enriquecimiento de microorga- Tripteína...................................................................................................................................15.0.
nismos aerobios, anaerobios facultativos y anaerobios estrictos. Extracto de levadura............................................................................................ 5.0.
Es utilizado en ensayos de esterilidad de productos farmacéuticos Glucosa....................................................................................................................................... 5.5.
y cosméticos. Cloruro de sodio.......................................................................................................... 2.5.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de Tioglicolato de sodio............................................................................................. 0.5.
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Agar................................................................................................................................................0.75.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). L-cistina........................................................................................................................................ 0.5.
Resazurina....................................................................................................................... 0.001.
Fundamento pH final: 7.1 ± 0.2
Este medio de cultivo tiene una composición bastante similar a la
del medio Tioglicolato sin indicador ( ). Instrucciones
Su base nutritiva constituída por tripteína, extracto de levadura y Suspender 29,75 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
glucosa permite el crecimiento de una amplia variedad de microor- reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
ganismos que involucran los de escasos requerimientos nutriciona- llición hasta disolución total. Distribuir en recipientes adecuados y
les y los nutricionalmente exigentes. esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar y guar-
La presencia de grupos -SH- (aportados por la cisteína y el tio- dar a temperatura ambiente protegido de la luz.
glicolato de sodio) en medios de cultivos con digestos proteicos,
disminuye el potencial de oxido reducción facilitando así el desa- Nota: Si el medio preparado presenta más de un 30% de oxidación
rrollo de diversas bacterias anaerobias y además se neutralizan los volver a calentar para eliminar el oxígeno absorbido.
efectos bacteriostáticos de los derivados mercuriales, arsenicales
y de otros metales pesados que pudieran estar presentes en la Características del producto
muestra en estudio. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
La resazurina es el indicador de óxido-reducción. En presencia de deslizamiento.
oxígeno es de color rosado-fucsia y es incoloro en ausencia de Medio de cultivo preparado: color ámbar claro, ligeramente opa-
oxígeno. lescente.
El bajo contenido de agar le otorga la propiedad de ser un medio
fluído y retarda la dispersión de CO2 y O2. Almacenamiento
Debido a todas estas características desarrollan microorganismos Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
aerobios, anaerobios facultativos y estrictos. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.

Contenido y composición Procedimiento


Código B0214005: envase x 100 g. Siembra
Código B0214006: envase x 500 g. Inocular directamente el material en estudio.
Consultar bibliografía de referencia (por ejemplo: Farmacopea Na-
cional Argentina 7º Edición y USP XXXI) la metodología apropia-
da.

HOJA 1 DE 2
Tioglicolato USP con Indicador Medio

Incubación te con las tapas bien cerradas.


El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependerán
del microorganismo que se quiera recuperar. Materiales necesarios no provistos
Consultar bibliografía de referencia (por ejemplo: Farmacopea Na- Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
cional Argentina 7º Edición y USP XXXI) la metodología apropiada. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
miento.
En general:
Microorganismos de fácil crecimiento: a 35-37 º C durante 18 a Precauciones
24 horas. - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales: a sivo.
35-37 ºC hasta 7 días. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Ensayos de esterilidad de productos farmacéuticos: 14 días ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Interpretación de los resultados rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
El crecimiento microbiano se observa por turbidez. - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
- Microorganismos aerobios estrictos: crecen en la parte supe- to.
rior del medio de cultivo. - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
- Microorganismos anaerobios facultativos: crecen en todo el nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
medio de cultivo. establecidas por el laboratorio.
- Microorganismos anaerobios estrictos: crecen en las profun- - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
didades del medio del cultivo. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Control de Calidad mismo según reglamentaciones vigentes.

Microorganismos CRECIMIENTO Referencias


Bacillus subtilis Satisfactorio - Brewer. 1940. JAMA 115:598.
ATCC 6633 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Staphylococcus aureus Satisfactorio maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
ATCC 6538 timore, Md.
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio - Reischelderfer and Mangels. 1992. In Isenberg (ed.), Clinical mi-
ATCC 9027 crobiology procedures handbook, vol. 1. American Society for Mi-
Clostridium sporogenes Satisfactorio crobiology, Washington, D.C.
ATCC 19404 - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Bacteroides fragilis Satisfactorio clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
ATCC 25285 Washington, D.C.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ATCC 19615 tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Productos no Obligatoriamente Estériles y Ensayos de Esterilidad.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (71). Sterility Tests.
Medio sin inocular Sin cambios Harmonized Method.

Limitaciones Indicaciones al consumidor


En el cultivo de anaerobios se recomienda previo a la siembra de la Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
muestra, eliminar el oxígeno presente mediante el hervido de los Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
tubos con las tapas flojas, y luego enfriarlos a temperatura ambien-
11/2015 - rEv .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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B0221205 B0221206

Todd Hewitt Caldo


Uso REF B0361621: Suplemento GeNa para Caldo Todd Hewitt
Medio de cultivo que permite el desarrollo de bacterias de rápi- El contenido de 1 vial se agrega a 1 litro de medio de cultivo.
do crecimiento y nutricionalmente exigentes a partir de diversas
muestras. Fórmula (por vial)
Es especialmente utilizado para el cultivo de estreptococos beta Gentamicina................................................................................................................ 0.008 g
hemolíticos antes de su tipificación serológica. Con el agregado Acido nalidíxico................................................................................................... 0.015 g
de antimicrobianos es recomendado por el CDC para el enriqueci-
miento selectivo del Estreptococo Grupo B en partir de muestras
de tracto genital femenino. Instrucciones
Suspender 30 gramos del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
Fundamento reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
La fuente nutritiva del medio de cultivo que estimula el crecimien- llición para disolución total. Distribuir en tubos u otros recipientes
to microbiano está constituída por la infusión cerebro corazón y la apropiados. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
peptona los cuales proveen nitrógeno, vitaminas y aminoácidos. La
glucosa es el hidrato de carbono fermentable y el cloruro de sodio Nota: en caso de preparar Caldo Todd Hewitt suplementado con
mantiene el balance osmótico. CoNa o con GeNa, reconstituir asépticamente el contenido del vial
Por fermentación de la glucosa se generan productos ácidos que con 1,1 ml de agua purificada estéril. Agregar 1 ml del contenido
son neutralizados por las sales fosfato de sodio y carbonato de so- del vial a 1 litro de caldo Todd Hewitt. Homogeneizar bien y distri-
dio, evitándose así la destrucción de las hemolisinas producidas por buir en tubos. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
los microorganismos y permitiendo así su tipificación serológica. Enfriar a temperatura ambiente.

Contenido y composición Características del producto


Código B0221205: envase x 100 g. Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
Código B0221206: envase x 500 g. deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
FÓRMULA (en gramos por litro)
Infusión cerebro corazón.........................................................................3.10. Almacenamiento
Peptona ...................................................................................................................................20.0. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Glucosa....................................................................................................................................... 2.0. Medio de cultivo preparado a 10-35 ºC.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 2.0.
Fosfato disódico............................................................................................................. 0.4. Procedimiento
Carbonato de sodio................................................................................................... 2.5. Siembra
pH final: 7.8 ± 0.2 Directa, a partir del material en estudio.

Si se realiza la búsqueda selectiva del Estreptococo del Grupo B Incubación


a partir de muestras del tracto genital femenino, agregar al caldo En aerobiosis, a 35-37 °C durante 24-48 horas.
Todd Hewitt el Suplemento CoNa o el Suplemento GeNa (uno de
estos 2 suplementos). Interpretación de los resultados
El crecimiento microbiano se observa por turbidez del medio de
REF B0361521: Suplemento CoNa para Caldo Todd Hewitt cultivo.
El contenido de 1 vial se agrega a 1 litro de medio de cultivo.

Fórmula (por vial)


Sulfato de colistina..................................................................................... 0.010 g
Acido nalidíxico................................................................................................... 0.015 g

HOJA 1 DE 2
Todd Hewitt Caldo

Control de Calidad nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad


establecidas por el laboratorio.
Corresponde al Todd Hewitt Caldo sin el agregado de antimicro- - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
bianos. va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Microorganismos CRECIMIENTO mismo según reglamentaciones vigentes.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio
ATCC 19615 Referencias
Streptococcus agalactiae Satisfactorio - Todd and Hewitt. 1932. J. Pathol. Bacteriol. 35:973.
ATCC 27956 - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
ATCC 49619 timore, Md.
Enterococcus faecalis Satisfactorio - Facklam and Washington II. 1991. In Balows, Hausler, Hermann,
ATCC 29212 Isenberg and Shadomy (ed.), Manual of clinical microbiology, 5th ed.
Staphylococcus aureus Satisfactorio American Society for Microbiology, Washington, D.C.
ATCC 25923 - Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
-Centers for Disease Control and Prevention. Prevention of perina-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO tal group B streptococcal disease (1996).A public health perspec-
Medio sin inocular Sin cambios tive.MMWR 45: 1-24.
- Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
Materiales necesarios no provistos - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Washington, D.C.
miento. - National Center for Infectious Diseases. Prevention of Perinatal
Group B Streptococcal Disease. 2002.MMWR 51 (RR11); 1-22.
Precauciones - Ley Nacional Argentina Nº 26369/2008: Incorporación con ca-
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- rácter obligatorio como práctica rutinaria de control y prevención
sivo. la realización el examen de detección del Estreptococo Grupo B
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- agalactiae a todas las embarazadas con edad gestacional entre las
ñado. semanas 35 y 37.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Indicaciones al consumidor
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
to. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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B0210205 B0210206

Tripteína Soya Agar


Uso Instrucciones
Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y Disolver 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y dejar
aislamiento de una gran variedad de microorganismos reposar 5 minutos. Calentar agitando suavemente y hervir durante
aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos. 1 o 2 minutos hasta su disolución total. Distribuir en recipientes
Al ser suplementado con sangre permite el crecimiento de micro- apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121 ºC durante 15 mi-
organismos exigentes y la clara visualización de reacciones de he- nutos.
mólisis. Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- enfriado a 45-50 ºC. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). estériles.

Fundamento Características del producto


En el medio de cultivo, la tripteína y la peptona de soya aportan Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
nutrientes ricos en péptidos, aminoácidos libres, bases púricas y deslizamiento.
pirimídicas, minerales y vitaminas. La peptona de soya además es Medio de cultivo preparado: color ámbar.
fuente de hidratos de carbono que estimulan el crecimiento de Suplementado con sangre: color rojo cereza.
diversos microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico y el agar es el agente solidificante. Almacenamiento
Puede ser utilizado como base a la cual se suplementa con nu- Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
trientes o con antimicrobianos, lográndose un medio enriquecido o Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
selectivo de acuerdo al aditivo.
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril Procedimiento
(Britasheep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en Siembra
sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación de las Por inoculación directa del material en estudio, sobre la superficie
reacciones de hemólisis. del medio de cultivo.
El agregado de extracto de levadura en concentración 0,6 % favo-
rece el crecimiento de especies de Listeria. Incubación
Es un medio adecuado para cultivar y mantener cepas de Aeromo- El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán
nas, y aumentando el porcentaje de cloruro de sodio, para mante- del microorganismo que se quiera recuperar.
ner cepas de algunos Vibrios (excepto V. cholerae). En general se recomienda:
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante
Contenido y composición 18 a 24 horas.
Código B0210205: envase x 100 g. Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Código B0210206: envase x 500 g. fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.

FÓRMULA (en gramos por litro) Interpretación de los resultados


Tripteína...................................................................................................................................15.0. Observar las características de las colonias.
Peptona de soya.............................................................................................................. 5.0. Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. nes de hemólisis:
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.3 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Tripteína Soya Agar

Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un Precauciones


halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto sivo.
de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
microorganismos. ñado.
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me- - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre- to.
dedor de la colonia en estudio. - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Control de Calidad establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Microorganismos CRECIMIENTO va apropiadamente.
Escherichia coli Satisfactorio - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 8739 mismo según reglamentaciones vigentes.
Staphylococcus aureus Satisfactorio
ATCC 6538 Referencias
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ATCC 9027 maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Enterococcus faecalis Satisfactorio more, Md.
ATCC 29212 - Holt, Krieg, Sneath, Staley and Williams (ed.). 1994. Bergey’s
Manual™of determinative bacteriology, 9th ed. Williams & Wilkins,
Baltimore, Md.
Tripteína Soya Agar suplementado con 5% de sangre ovina: - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Microorganismos CRECIMIENTO Hemólisis Washington, D.C.
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ATCC 19615 tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa Productos no Obligatoriamente Estériles.
ATCC 6305 - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (61) Microbiolo-
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
ATCC 49619 Tests. Harmonized Method.
- United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiologi-
cal Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Micro-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO organisms. Harmonized Method.
Medio sin inocular Sin cambios
Indicaciones al consumidor
Materiales necesarios no provistos Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para con- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
trol de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según
requerimiento.
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


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HOJA DE SEGURIDAD
TRIPTEINA SOYA CALDO
Con LECITINA DE SOJA
REVISION: 02 FECHA: 02/03/2020

____________________________________________________________________________________________________
1. IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO Y DEL FABRICANTE

Código del producto: B02-187-05 x 100 g


B02-187-06 x 500 g
Nombre del producto: Tripteina Soya Caldo con Lecitina de Soja

Fabricante: Laboratorios Britania S.A.


Los Patos 2175 (C1283ABI) CABA – ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
info@britanialab.com

____________________________________________________________________________________________________
2. COMPOSICIÓN E INFORMACIÓN SOBRE LOS INGREDIENTES

Ingredientes peligrosos: Este producto no contiene sustancias que representen un riesgo


para la salud.

____________________________________________________________________________________________________
3. IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Peligros más importantes: No clasificado como peligroso.

Peligros para la salud humana: Ojos: Irritación temporal.


Piel: Puede provocar irritación luego de contacto prolongado o repetido.
Ingestión: Sólo en grandes dosis puede provocar diarrea, náuseas, vómitos.
Inhalación: En altas dosis puede provocar Irritación en nariz, garganta y vías
respiratorias.
____________________________________________________________________________________________________
4. PRIMEROS AUXILIOS

Luego de inhalación: Retirar a la persona del lugar de exposición.


Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.
Luego de contacto con la piel: Lavar la piel con abundante agua y jabón.
Luego de contacto con los ojos: Lavar con abundante agua durante 15 minutos.
Recibir atención médica si el enrojecimiento o el dolor persisten.
Luego de la ingestión: Lavar la boca con abundante agua. Luego ingerir 1-3 vasos de agua
para diluir lo ingerido. Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.

____________________________________________________________________________________________________
5. MEDIDAS DE EXTINCIÓN DE INCENDIOS

Medios de extinción apropiados: Utilizar extinguidor de agua, espuma, productos químicos en polvo o CO2

Equipo de protección: No se requieren medidas especiales.

____________________________________________________________________________________________________
6. MEDIDAS A TOMAR EN EL TRANSCURSO DE DERRAMES ACCIDENTALES

Precauciones personales: Usar guantes descartables, máscara de protección de polvo, antiparras y ropa
protectora correspondiente.
Derrame: No requiere de medidas especiales. Colocar en recipientes apropiados para
eliminación de residuos de laboratorio. Lavar el área de derrame con abundante
agua.

____________________________________________________________________________________________________
7. MANIPULACIÓN Y ALMACENAMIENTO

Manipulación: Evítese la inhalación del polvo usando si es necesario máscaras protectoras.


Evítese el contacto con los ojos, piel y ropa.
Almacenamiento: Conservar a temperatura ambiente entre 15 y 35ºC.
En su envase bien cerrado y al abrigo de la luz, humedad, agentes oxidantes.

____________________________________________________________________________________________________
8. CONTROLES DE EXPOSICIÓN / PROTECCIÓN PERSONAL

Medidas de protección respiratoria: Usar máscara antipolvo o escudo facial.


Medidas de protección manos: Usar guantes descartables de vinilo.
Medidas de protección ojos: Usar gafas protectoras.
Medidas de protección cuerpo: Usar guardapolvo o bata protectora.

____________________________________________________________________________________________________
9. PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS

Estado físico: Polvo


Color: Beige
pH: 7,3 +/- 0,2
Olor: Característico
Solubilidad en agua: Soluble
________________________________________________________________________________________________
10. DATOS SOBRE LA ESTABILIDAD Y LA REACTIVIDAD

Estabilidad: Polvo higroscópico estable en las condiciones de conservación y manipuleo


recomendadas en la sección 7.
Reactividad: Evitar la exposición a la luz solar en forma directa y a las altas temperaturas.

____________________________________________________________________________________________________
11. INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA

Toxicidad aguda: Bajo nivel de toxicidad aguda.


Irritación de la piel y
membranas mucosas: Puede causar ligera irritación transitoria.
Irritación ocular: Puede causar ligera irritación transitoria.

____________________________________________________________________________________________________
12. INFORMACIÓN SOBRE ECOLOGÍA

Ecotoxicidad: No hay datos específicos.

____________________________________________________________________________________________________
13. CONSIDERACIONES AL MOMENTO DE LA ELIMINACIÓN

Según disposiciones locales sobre eliminación de residuos de laboratorio.

____________________________________________________________________________________________________
14. INFORMACIÓN SOBRE EL TRANSPORTE

ADR/ADN: No clasificado.

IATA: No regulado bajo las Normas IATA.

____________________________________________________________________________________________________
15. INFORMACIONES REGLAMENTARIAS

Frases de riesgo: No aplicable.

Frase de seguridad: Mantener el recipiente bien cerrado.


No aspirar el polvo.
En caso de contacto con los ojos, lavar de inmediato con abundante agua. Si es
necesario consultar al médico.
Evítese el contacto con la piel.
Usar ropa de protección adecuada.
____________________________________________________________________________________________________
16. OTRA INFORMACIÓN

La información proporcionada en esta Hoja de Seguridad es exacta según nuestro mejor conocimiento e información a la fecha
de su emisión. La información proporcionada está diseñada exclusivamente como una guía para la manipulación, uso,
almacenamiento transporte y eliminación seguros, y no se considera una garantía de calidad. La información se refiere sólo al
material mencionado y puede no ser válida para ese material utilizado con otro/s material/es o en cualquier otro proceso, a
menos que se especifique lo contrario.
B0210305 B0210306

Tripteína Soya Caldo


Uso minutos.
Medio adecuado para el desarrollo de microorganismos exigentes.
Es utilizado en el control de esterilidad de productos biológicos, Características del producto
farmacéuticos y cosméticos. Medio de cultivo deshidratado: color beige, homogéneo, libre des-
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de lizamiento.
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Medio de cultivo preparado: color ámbar claro.
teamérica (EP, JP y USP respectivamente).
Almacenamiento
Fundamento Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
La tripteína y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en pép- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
tidos, aminoácidos libres, bases púricas y pirimídicas, minerales y
vitaminas. La peptona de soya contiene alta cantidad de hidratos Procedimiento
de carbono que estimulan el crecimiento de una amplia variedad Siembra
de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance os- Inocular directamente el material en estudio.
mótico. El fosfato dipotásico otorga capacidad buffer y la glucosa Consultar bibliografía de referencia (por ejemplo: Farmacopea Na-
es la fuente de energía. cional Argentina 7º Edición y USP XXXI) la metodología apropia-
da.
Contenido y composición
Código B0210305: envase x 100 g. Incubación
Código B0210306: envase x 500 g. El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependerán
del microorganismo que se quiera recuperar.
FÓRMULA (en gramos por litro) Consultar bibliografía de referencia (por ejemplo: Farmacopea Na-
Tripteína....................................................................................................................................17.0. cional Argentina 7º Edición y USP XXXI) la metodología apropia-
Peptona de soya.............................................................................................................. 3.0. da.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0.
Fosfato dipotásico...................................................................................................... 2.5. En general se recomienda:
Glucosa....................................................................................................................................... 2.5. Microorganismos de fácil crecimiento: a 35-37 º C durante 18 a
pH final: 7.3 ± 0.2 24 horas.
Microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales: a
Instrucciones 35-37 ºC hasta 7 días.
Suspender 30 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar repo- Ensayos de esterilidad de productos farmacéuticos: 14 días.
sar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición
hasta disolver completamente. Distribuir en tubos u otros recipien- Interpretación de los resultados
tes apropiados y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 El crecimiento microbiano se observa por la presencia de turbidez

HOJA 1 DE 2
Tripteína Soya Caldo

Control de Calidad rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.


- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Microorganismos CRECIMIENTO - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Aspergillus brasiliensis Satisfactorio nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 16404 establecidas por el laboratorio.
Bacillus subtilis Satisfactorio - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 6633 va apropiadamente.
Candida albicans Satisfactorio - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ATCC 10231 mismo según reglamentaciones vigentes.
Escherichia coli Satisfactorio
ATCC 8739 Referencias
Staphylococcus aureus Satisfactorio - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
ATCC 6538 maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
Staphylococcus aureus Satisfactorio more, Md.
ATCC 25923 - Isenberg (ed.). 1992. Clinical Microbiology Procedures Handbook,
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio volume 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
ATCC 6305 - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
Streptococcus pyogenes Satisfactorio biological Examination., Standard Methods for the Examination of
ATCC 19615 Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
Salmonella typhimurium Satisfactorio - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
ATCC 14028 clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Washington, D.C.
ATCC 9027 - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
Productos no Obligatoriamente Estériles y Ensayos de Esterilidad.
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiolo-
Medio sin inocular Sin cambios gical Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration
Tests. Harmonized Method.
Materiales necesarios no provistos - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (71). Sterility Tests.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Harmonized Method.
calidad, reactivos y medios de c ultivo adicionales según requeri- - Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;
miento. Nineteenth Informational Supplement, Disk Diffusion and MIC Tes-
ting, volume 29 N°3 M100-S19 (January 2009), Clinical and Labo-
Precauciones ratory Standards Institute (CLSI).
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo. Indicaciones al consumidor
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
ñado. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
11/2015 - rEV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
HOJA DE SEGURIDAD
TRIPTOSA FOSFATO CALDO
REVISION: 02 FECHA: 06.02.2019

____________________________________________________________________________________________________
1. IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO Y DEL FABRICANTE

Código del producto: B02-185-05 x 100 g


B02-185-06 x 500 g
B02-185-08 x 5 Kg
B02-185-09 x 25 Kg

Nombre del producto: Triptosa Fosfato Caldo

1.1 Identificación de la sustancia


Medio de cultivo formado por mezcla de diversos componentes.

1.2 Usos identificados


Es utilizado para análisis de laboratorio de microbiología.

1.3 Identificación del Fabricante: Laboratorios Britania S.A.


Los Patos 2175 (C1283ABI) CABA – ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
info@britanialab.com

____________________________________________________________________________________________________
2. COMPOSICIÓN E INFORMACIÓN SOBRE LOS INGREDIENTES

Ingredientes peligrosos: Esta preparación no contiene sustancias que representen un riesgo para la
salud, según la definición de la Directiva de sustancias peligrosas 67/548/EEC.

___________________________________________________________________________________________________
3. IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Peligros para la salud humana: No clasificado como peligroso.

Contacto con los ojos: Puede provocar irritación temporal.


Contacto con la piel: Puede provocar irritación por contacto repetido o prolongado.
Ingestión: Una dosis grande puede tener los siguientes efectos: diarrea, náuseas, vómitos.
Inhalación: La exposición al polvo en altas concentraciones puede tener los siguientes
efectos: irritación de la nariz, garganta y las vías respiratorias.

1 de 3
____________________________________________________________________________________________________
4. PRIMEROS AUXILIOS

Luego de inhalación: Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.


Luego de contacto con la piel: Lavar la piel con abundante agua y jabón y enjuagar bien.
Luego de contacto con los ojos: Lavar con abundante agua durante 15 minutos.
Conseguir atención médica si el enrojecimiento o el dolor persisten.
Luego de la ingestión: Lavar la boca con abundante agua. Luego ingerir 2-3 vasos de agua
para diluir lo ingerido. Consultar al médico si persisten síntomas de malestar.

____________________________________________________________________________________________________
5. MEDIDAS DE EXTINCIÓN DE INCENDIOS

Medios de extinción apropiados: Utilizar extinguidor de agua, espuma, productos químicos en polvo o CO2

Equipo de protección: No se requieren medidas especiales.

____________________________________________________________________________________________________
6. MEDIDAS A TOMAR EN EL TRANSCURSO DE DERRAMES ACCIDENTALES

Precauciones personales: Usar guantes descartables, antiparras y ropa protectora correspondiente.

Derrame: Colocar en recipientes apropiados para eliminación de residuos de laboratorio.


Lavar el área de derrame con abundante agua. No requiere de medidas
especiales.

____________________________________________________________________________________________________
7. MANIPULACIÓN Y ALMACENAMIENTO

Manipulación: Evítese el contacto con los ojos, piel y ropa.


Almacenamiento: Conservar a 2º - 25ºC, en su envase bien cerrado en lugar seco y al abrigo de la
luz.

____________________________________________________________________________________________________
8. CONTROLES DE EXPOSICIÓN / PROTECCIÓN PERSONAL

Medidas de protección respiratoria: Protección antipolvo.


Medidas de protección manos: Usar guantes descartables de vinilo.
Medidas de protección ojos: Usar gafas protectoras.
Medidas de protección cuerpo: Usar guardapolvo o bata protectora.

____________________________________________________________________________________________________
9. PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS

Estado físico: Polvo


Color: Beige claro
Olor: Característico
Solubilidad en agua: Soluble

____________________________________________________________________________________________________
10. DATOS SOBRE LA ESTABILIDAD Y LA REACTIVIDAD
2 de 3
Estabilidad: Permanece estable en las condiciones de conservación y manipuleo
recomendadas en la sección 7.

Reactividad: No se conocen reacciones peligrosas ni productos de descomposición peligrosos.

____________________________________________________________________________________________________
11. INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA

Toxicidad aguda: No presenta riesgo de toxicidad aguda.

Irritación de la piel y
membranas mucosas: Grado de irritación insuficiente para clasificarlo como irritante.

Irritación ocular: Grado de irritación insuficiente para clasificarlo como irritante.

____________________________________________________________________________________________________
12. INFORMACIÓN SOBRE ECOLOGÍA

Ecotoxicidad: No contiene sustancias nocivas conocidas para el entorno o no degradables.

____________________________________________________________________________________________________
13. CONSIDERACIONES AL MOMENTO DE LA ELIMINACIÓN

Según disposiciones locales sobre eliminación de residuos de laboratorio.

____________________________________________________________________________________________________
14. INFORMACIÓN SOBRE EL TRANSPORTE

No clasificado.

____________________________________________________________________________________________________
15. INFORMACIONES REGLAMENTARIAS

Frases de riesgo: Ninguna.

Frase de seguridad: Evitar el contacto con piel y ojos.

____________________________________________________________________________________________________
16. OTRA INFORMACIÓN

La información proporcionada en esta Hoja de Seguridad es exacta según nuestro mejor conocimiento e información a la
fecha de su emisión. La información proporcionada está diseñada exclusivamente como una guía para la manipulación, uso,
almacenamiento transporte y eliminación seguros, y no se considera una garantía de calidad. La información se refiere sólo al
material mencionado y puede no ser válida para ese material utilizado con otro/s material/es o en cualquier otro proceso, a
menos que se especifique lo contrario.

FIN DE LA INFORMACIÓN

3 de 3
B0213405 B0213406

T.S.I. Agar
(Triple Sugar Iron Agar)
USO INSTRUCCIONES
Medio universalmente empleado para la diferenciación de ente- Suspender 62,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
robacterias, en base a la fermentación de los hidratos de carbono reposar 5 minutos. Mezclar bien, calentar con agitación frecuente
glucosa, lactosa y sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico. y hervir 1 o 2 minutos hasta disolución total. Distribuir en tubos,
llenandolos con un volumen que ocupe hasta la tercera parte de los
FUNDAMENTO mismos. Esterilizar en autoclave a 121°C por 15 minutos.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, apor- Enfriar y dejar solidificar el agar en pico de flauta profundo.
tan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.
La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fer- CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
mentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la deslizamiento.
fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido sulfhí- Medio de cultivo preparado: color rojo.
drico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol
es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance ALMACENAMIENTO
osmótico. El agar es el agente solidificante. Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo
en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidró- PROCEDIMIENTO
geno que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el Siembra
típico sulfuro de hierro de color negro. A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, con aguja
de inoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo y ex-
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN tendiendo sobre la superficie del mismo.
Código B0213405: envase x 100 g.
Código B0213406: envase x 500 g. Incubación
En aerobiosis, a 35-37°C durante 18 a 24 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................... 3.0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
PLURIPEPTONA....................................................................................................................20.0. Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0. 1- Superficie alcalina/profundidad ácida (pico rojo/fondo
LACTOSA......................................................................................................................................10.0. amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
SACAROSA.................................................................................................................................10.0. 2- Superficie ácida/Profundidad ácida (pico amarillo/fondo
GLUCOSA....................................................................................................................................... 1.0. amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sa-
SULFATO DE HIERRO Y AMONIO.......................................................................... 0.2. carosa.
TIOSULFATO DE SODIO.................................................................................................... 0.2. 3- Superficie alcalina/Profundidad alcalina (pico rojo/fondo
ROJO DE FENOL.............................................................................................................. 0.025. rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares.
AGAR................................................................................................................................................13.0. 4- La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo
pH FINAL: 7.3 ± 0.2 indican que el microorganismo produce gas.

HOJA 1 DE 2
T.S.I. Agar (Triple Sugar Iron Agar)

5- El ennegrecimiento del medio indica que el microorganis- MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS


mo produce ácido sulfhídrico. Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
CONTROL DE CALIDAD miento.

MICROORGANISMOS SUPERFICIE/ PRODUCCIÓN PRODUCCION PRECAUCIONES


PROFUNDIDAD DE GAS DE SH2 - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Escherichia coli A/A + - sivo.
ATCC 25922 - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Klebsiella pneumoniae A/A + - ñado.
ATCC 700603 - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
Proteus mirabilis K/A - + rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 43071 - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
Salmonella typhimurium K/A - + to.
ATCC 14028 - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Shigella flexneri K/A - - nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
ATCC 12022 establecidas por el laboratorio.
Pseudomonas aeruginosa K/K - - - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
ATCC 27853 va apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
A: reacción ácida (color amarillo) mismo según reglamentaciones vigentes.
K: reacción alcalina (color rojo)
REFERENCIAS
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - Ewing. 1985. Edwards and Ewing’s identification of Enterobac-
Medio sin inocular Sin cambios teriaceae, 4th ed. Elsevier Science Publishing Co., Inc., New York,
N.Y.
LIMITACIONES - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
- Los resultados de la prueba deber ser leídos luego de 18 a 24 maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
horas de incubación. Si la lectura se efectua a tiempos menores more, Md.
pueden existir falsos positivos por la presencia de acidez o la acidez - Forbes, Sahm and Weissfeld. 1998. Bailey & Scott’s diagnostic
generada no sea suficiente para producir el viraje del indicador microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis, Mo.
rojo de fenol del color rojo al amarillo. Si se lee luego de 24 ho- - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
ras se pueden obtener resultados falsos negativos por consumo tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
de peptonas durante el crecimiento de los microorganismos con la Productos no Obligatoriamente Estériles.
consecuente alcalinidad del medio de cultivo. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
- Si la generación de SH2 es elevada puede llevar al ennegreci- clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
miento de todo el fondo del medio de cultivo y dificultar la visua- Washington, D.C.
lización de la acidez producida. Es necesario aclarar que para que - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
se produzca SH2 debe existir un ambiente ácido, por eso si no se mit Test.
observa se debe considerar igualmente acidez positiva. - European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological
- Para la siembra utilizar aguja de inoculación. No utilizar ansas de Examination of Non sterile products: Test for Specified Microor-
inoculación ya que pueden llevar a resultados falsos positivos de ganisms.
producción de gas por alteraciones mecánicas del medio de cul-
tivo. INDICACIONES AL CONSUMIDOR
- La forma de inoculación de este medio de cultivo depende de la Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
técnica utilizada por el profesional. Se puede inocular primero el Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
11/20105- REV .01

fondo y luego el pico o de manera opuesta. Esto no afectará los


resultados.

SÍMBOLOS UTILIZADOS

HOJA 2 DE 2

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
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TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0212405 B0212406

Verde Brillante Agar


Uso Instrucciones
Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento Suspender 58 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5
de Salmonella spp., excepto Salmonella typhi y Salmonella para- minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición para
typhi a partir de muestras clínicas, alimentos, y otros materiales de disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en
importancia sanitaria. autoclave a 118-121°C durante 15 minutos.
Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Fundamento
Desarrollado por Kristensen, Lester y Jurgens en 1925 y modifi- Características del producto
cado por Kauffmann. Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogéneo, libre des-
En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, lizamiento.
constituyen la fuente de nitrógeno, vitaminas y minerales. La lacto- Medio de cultivo preparado: color naranja amarronado.
sa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, el rojo
fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay produc- Almacenamiento
ción de ácido a partir de la fermentación de azúcares, el cloruro de Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
sodio mantiene el balance osmótico, y el verde brillante actúa como Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
agente selectivo que inhibe fundamentalmente el desarrollo de flo-
ra Gram positiva y de algunos microorganismos Gram negativos. El Procedimiento
agar es el agente solidificante. Siembra
Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran número de Sembrar en superficie por estriado un inóculo denso de la muestra
muestras de heces o alimentos, por su alta capacidad de diferen- directa o de una dilución.
ciación de las colonias sospechosas.
Incubación
Contenido y composición En aerobiosis, a 35-37°C hasta 48 horas.
Código B0212405: envase x 100 g.
Código B0212406: envase x 500 g. Interpretación de los resultados
Bacterias que fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias
FÓRMULA (en gramos por litro) amarillo-verdosas, rodeadas por un halo de color amarillo verdoso
Pluripeptona....................................................................................................................10.0. del medio de cultivo.
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0. Bacterias que no fermentan la lactosa y/o sacarosa: colonias
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. de color blanco rosadas o transparentes rodeadas por un halo rojizo
Lactosa......................................................................................................................................10.0. del medio de cultivo.
Sacarosa.................................................................................................................................10.0.
Rojo fenol...........................................................................................................................0.08.
Verde brillante....................................................................................................0.0125.
Agar................................................................................................................................................20.0.
pH final: 6.9 ± 0.2

HOJA 1 DE 2
Verde Brillante Agar
Precauciones
Control de Calidad - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
sivo.
Microorganismos Crecimiento Características - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
de las colonias ñado.
Salmonella enteritidis Satisfactorio Blanco rosadas o - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 13076 transparentes sobre fondo rojo rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Blanco rosadas o - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 14028 transparentes sobre fondo rojo to.
Proteus mirabilis Escaso o Regular Blanco rosadas o - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 43071 transparentes sobre fondo rojo nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Klebsiella pneumoniae Escaso o Regular Amarillo-verdosas sobre fondo establecidas por el laboratorio.
ATCC 700603 amarillo - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Escherichia coli Escaso o Regular Amarillo-verdosas sobre fondo va apropiadamente.
ATCC 25922 amarillo - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Shigella flexneri Inhibido - mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 12022
Staphylococcus aureus Inhibido - Referencias
ATCC 6538 - Kristensen, M., Lester, V., and Jurgens, A. 1925. On the use of
trypsinized casein, bromthymol blue, bromcresol purple, phenol red
and brilliant green for bacteriological nutrient media. Br. J. Exp. Pa-
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO thol., 6, 291.
Medio sin inocular Sin cambios - Kauffmann, F. 1935. Z. Hyg. Infektionskr., 117, 26.
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
Limitaciones timore, Md.
- Por ser un medio altamente selectivo no se recomienda para el - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
aislamiento de Salmonella typhi, Salmonella paratyphi y Shigella biological Examination., Standard Methods for the Examination of
spp. ya que generalmente no desarrollan o lo hacen en forma muy Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
escasa en este medio de cultivo. - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
- Para el procesamiento de materia fecal se recomienda hacer culti- tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
vo primario en medios menos selectivos, como Salmonella Shigella Productos no Obligatoriamente Estériles.
Agar ( ), o Mac Conkey Agar ( ). - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
mit Test.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Indicaciones al consumidor
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
miento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
11/2015 - rEv .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0210705 B0210706

Verde Brillante Bilis 2% Caldo


Uso Procedimiento
Este medio está recomendado para el recuento de coliformes tota- Siembra
les y fecales, por la técnica del número más probable. a- Para el análisis de coliformes totales en muestras fluidas, sem-
brar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1
Fundamento ml en caldo simple concentración.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios
para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante Número Volumen de la Volumen Concentración
son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias de tubos muestra de medio del medio
Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la 3 10 ml 10 ml Doble
lactosa es el hidrato de carbono fermentable. 3 1 ml 10 ml Simple
Es una propiedad del grupo coliforme, la fermentación de la lactosa 3 0.1 ml 10 ml Simple
con producción de ácido y gas.
b.- Para el análisis de coliformes totales en muestras sólidas (ali-
Contenido y composición mentos, cosméticos, fármacos), efectuar diluciones seriadas 10-1,
Código B0210705: envase x 100 g. 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución por triplicado en medio de cul-
Código B0210706: envase x 500 g. tivo simple concentración.

FÓRMULA (en gramos por litro) Número Dilución de Volumen de Volumen Concentración
Bilis de buey deshidratada.........................................................................20.0 de tubos la muestra la muestra de medio del medio
Lactosa......................................................................................................................................10.0 3 10-1 1 ml 10 ml Simple
Peptona.....................................................................................................................................10.0 3 10 -2
1 ml 10 ml Simple
Verde brillante....................................................................................................0,0133 3 10 -3
1 ml 10 ml Simple
pH final: 7.2 ± 0.2
c- Para análisis de coliformes fecales, a partir de cada tubo positivo
Instrucciones en el test presuntivo de coliformes totales (proveniente de Verde
Suspender 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Disolver Brillante y Bilis 2% Caldo ó Mac Conkey Caldo ó Lauril Sulfato
y distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham. Calentar a ( ) utilizando la técnica del NMP), o a partir de colonias
100º C durante 30 minutos. No esterilizar en autoclave. presentes en diferentes medios, que se presume sean coliformes,
transferir una ansada a un tubo con Verde Brillante y Bilis al 2%,
Características del producto incubando a 44,5 - 45,5 ºC y otra en Agua Triptona ( )
Medio de cultivo deshidratado: color verde, homogéneo, libre des- para detectar la producción de indol.
lizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde. Incubación
a- Para coliformes totales: en aerobiosis, a 35 - 37 °C durante
Almacenamiento 48 horas.
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. b- Para coliformes (fecales): en aerobiosis, a 44,5 - 45,5 °C du-
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. rante 24 horas.

HOJA 1 DE 2
Verde Brillante Bilis 2% Caldo

Interpretación de los resultados Materiales necesarios no provistos


El crecimiento se evidencia por la presencia de turbidez en el medio Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
de cultivo. calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
- Positivo: turbidez y presencia de gas. Puede existir viraje del color miento.
del medio de cultivo al color amarronado o amarillo.
-Negativo: ausencia de turbidez y/o gas. Precauciones
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
Control de Calidad sivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Microorganismos Crecimiento Producción de gas ñado.
Escherichia coli Satisfactorio + - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 25922 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Escherichia coli Satisfactorio + - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 8739 to.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio + - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 700603 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Proteus mirabilis Satisfactorio - establecidas por el laboratorio.
ATCC 43071 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Salmonella typhimurium Satisfactorio - va apropiadamente.
ATCC 14028 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Staphylococcus aureus Inhibición parcial - mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 6538 o total
Referencias
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
Medio sin inocular Sin cambios maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
timore, Md.
Expresión de Resultados: Para muestras fluidas expresar el - Clesceri, L.S., Greenberg A.E., Eaton A.D. 1998. Part 9000, Micro-
NMP por 100 ml de muestra, y para muestras sólidas expresarlo biological Examination., Standard Methods for the Examination of
por gramo de producto. Water and Wastewater 20th Edition, APHA.
- Corry, J.E.L., Curtis, G.D.W., Baird, R.M. 2003. Handbook of Culture
Limitaciones Media for Food Microbiology, volume 37, Elsevier Science.
El desempeño del medio de cultivo respecto a la productividad y
selectividad es mucho mas consistente cuando se decontamina por Indicaciones al consumidor
calentamiento a 100 ºC durante 30 minutos respecto a la esterili- Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
zación en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
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SÍMBOLOS UTILIZADOS

DIAGNÓSTICO CÓDIGO Nº ELABORADOR ESTÉRIL Nº DE LOTE Nº FECHA DE LÍMITE DE INSTRUCCIONES HOJA 2 DE 2


IN VITRO DETERMINACIÓNES VENCIMIENTO TEMPERATURA DE USO

LABORATORIOS BRITANIA S.A.


LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
B0214305 B0214306

Violeta Rojo y Bilis Agar


Uso Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Este es un medio selectivo para la investigación presuntiva y re-
cuento de coliformes en alimentos, productos lácteos y otros ma- Características del producto
teriales de importancia sanitaria. Medio de cultivo deshidratado: color beige amarronado, homogé-
neo, libre deslizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color púrpura rojizo.
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan
los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales Almacenamiento
biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
neutro es el indicador de pH. El agar es el agente solidificante.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el Procedimiento
medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo inten- Siembra
so. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, - Para propósitos generales: estriar directamente sobre la super-
de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona ficie del medio de cultivo.
rojiza de bilis precipitada. - Para recuento bacteriano:
- En superficie: sembrar hasta 0,1 ml de la muestra directa o de la
Contenido y composición dilución apropiada y esparcirla en el medio de cultivo.
Código B0214305: envase x 100 g. - En profundidad: inocular hasta 1 ml de la muestra directa o de la
Código B0214306: envase x 500 g. dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
ción. Dejar solidificar.
FÓRMULA (en gramos por litro) Luego, si se desea, agregar una sobrecapa de medio de cultivo
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0. para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el cre-
Peptona.........................................................................................................................................7.0. cimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de
Sales biliares...................................................................................................................... 1.5. azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp.
Lactosa......................................................................................................................................10.0.
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. Incubación
Rojo neutro.......................................................................................................................0.03. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-24 horas. Las placas pue-
Cristal violeta............................................................................................................ 0.002. den ser reincubadas durante 24 horas adicionales.
Agar................................................................................................................................................15.0.
pH final: 7.4 ± 0.2 Interpretación de los resultados
Bacterias que fermentan la lactosa: colonias rojo púrpura, ro-
Instrucciones deadas por un halo de precipitación rojizo.
Suspender 41,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar Bacterias que no fermentan la lactosa: colonias del color del
5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición du- medio, incoloras.
rante 1 minuto para disolución total. No esterilizar en autoclave.

HOJA 1 DE 2
Violeta Rojo y Bilis Agar

Control de Calidad calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-


miento.
Microorganismos Crecimiento Características
de las colonias Precauciones
Escherichia coli Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de diámetro, con - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu-
ATCC 8739 halo de precipitación rojizo sivo.
Escherichia coli Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de diámetro, con - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
ATCC 25922 halo de precipitación rojizo ñado.
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Rojas, de 1 a 2 mm de diámetro, con - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
ATCC 700603 halo de precipitación rojizo rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Salmonella typhimurium Satisfactorio Incoloras - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
ATCC 14028 to.
Proteus mirabilis Satisfactorio Incoloras - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
ATCC 43071 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Incoloras establecidas por el laboratorio.
ATCC 9027 - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
Enterococcus faecalis Escaso Rosadas, pequeñas, puntiformes va apropiadamente.
ATCC 29212 - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Staphylococcus aureus Inhibido __ mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 6538
Referencias
- Mossel D.A. A., Mengerink, W.H.J., and Scholts, H.H.A. 1962. Use
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO of a modified Mac Conkey Agar Medium for the selective growth
Medio sin inocular Sin cambios and enumeration of all Enterobacteriaceae. J. Bacteriol., 84, 391.
- Hausler, W.J. (ed.). Standard Methods for the Examination of Dairy
Products, 13th ed., Washington, D.C.: American Public Health As-
Limitaciones sociation, 1972.
- Las cepas de Enterococcus pueden desarrollar en este medio de - Speck, M.L. (ed.). Compendium of Methods for the Microbiological
cultivo como colonias pequeñas, puntiformes, rosadas. Examination of Foods. Washington, D.C.: American Public Health
- El medio de cultivo no es específico para enterobacterias ya que Association, 1976.
pueden crecer otros microorganismos (Aeromonas spp.). Es ne- - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
cesario realizar pruebas bioquímicas adicionales de identificación maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
microbiana. more, Md.
- La selectividad del medio de cultivo disminuye luego de 24 horas
de incubación y los microorganismos inicialmente inhibidos pueden Indicaciones al consumidor
desarrollar. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Materiales necesarios no provistos
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
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Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar


Uso reposar 5 minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebu-
Medio de cultivo selectivo, utilizado para la detección y el recuento llición durante 1 minuto hasta disolución total. No esterilizar por
de enterobacterias totales a partir de alimentos y productos far- autoclave.
macéuticos. Enfriar y distribuir en placas de Petri estériles.
Su fórmula cumple con los requerimientos de la Armonización de
Farmacopeas Europea, Japonesa y de los Estados Unidos de Nor- Características del producto
teamérica (EP, JP y USP respectivamente). Medio de cultivo deshidratado: color beige rojizo, homogéneo, libre
deslizamiento.
Fundamento Medio de cultivo preparado: color púrpura rojizo.
En el medio de cultivo, la peptona de gelatina y el extracto de le-
vadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bac- Almacenamiento
teriano, las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
de la flora acompañante Gram positiva, la glucosa es el hidrato de Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. El agar
es el agente solidificante. Procedimiento
Todas las enterobacterias fermentan la glucosa, esto produce la Siembra
acidificación del medio y el viraje del indicador de pH al color rojo - Para propósitos generales: estriar directamente sobre la super-
intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo ficie del medio de cultivo.
púrpura, de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas generalmente de una - Para recuento bacteriano:
zona rojiza de bilis precipitada. - En superficie: sembrar hasta 0,1 ml de la muestra directa o de la
dilución apropiada y esparcirla en el medio de cultivo.
Contenido y composición - En profundidad: inocular hasta 1 ml de la muestra directa o de la
Código B0217205: envase x 100 g. dilución. Verter un volumen del medio de cultivo fundido y enfriado
Código B0217206: envase x 500 g. a 40-45°C. Homogeneizar mediante movimientos de vaivén y rota-
ción. Dejar solidificar.
FÓRMULA (en gramos por litro) Luego, si se desea, agregar una sobrecapa de medio de cultivo
Peptona de gelatina..................................................................................................7.0. para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el cre-
Extracto de levadura............................................................................................ 3.0. cimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0. azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp.
Glucosa....................................................................................................................................10.0.
Mezcla de sales biliares................................................................................... 1.5. Incubación
Rojo neutro.......................................................................................................................0.03. En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 18-24 horas.
Cristal violeta............................................................................................................ 0.002.
Agar................................................................................................................................................15.0. Interpretación de los resultados
pH final: 7.4 ± 0.2 Bacterias que fermentan la glucosa: colonias rojo púrpura, ro-
deadas por un halo de precipitación rojizo.
Instrucciones Bacterias que no fermentan la glucosa: colonias del color del
Suspender 41,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar medio, incoloras.

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Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar
Precauciones
Control de Calidad - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
Microorganismos Crecimiento Características ñado.
de las colonias - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterio-
Escherichia coli Satisfactorio Rojo púrpura, con halo de ro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
ATCC 8739 precipitación rojizo - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Escherichia coli Satisfactorio Rojo púrpura, con halo de - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y mani-
ATCC 25922 precipitación rojizo pularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad esta-
Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Rojo púrpura, con halo de blecidas por el laboratorio.
ATCC 700603 precipitación rojizo - Las características del producto pueden alterarse si no se conserva
Salmonella typhimurium Satisfactorio Rojo púrpura, con halo de apropiadamente.
ATCC 14028 precipitación rojizo - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
Proteus mirabilis Satisfactorio Rojo púrpura, con halo de mismo según reglamentaciones vigentes.
ATCC 43071 precipitación rojizo
Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio Incoloras Referencias
ATCC 9027 - Mossel D.A. A., Mengerink, W.H.J., and Scholts, H.H.A. 1962. Use of
Enterococcus faecalis Escaso Rosadas, pequeñas, a modified Mac Conkey Agar Medium for the selective growth and
ATCC 29212 puntiformes enumeration of all Enterobacteriaceae. J. Bacteriol., 84, 391.
Staphylococcus aureus Inhibido -- - Hausler, W.J. (ed.). Standard Methods for the Examination of Dairy
ATCC 6538 Products, 13th ed., Washington, D.C.: American Public Health Asso-
ciation, 1972.
- Speck, M.L. (ed.). Compendium of Methods for the Microbiological
CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO Examination of Foods. Washington, D.C.: American Public Health As-
Medio sin inocular Sin cambios sociation, 1976.
- MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore,
Limitaciones Md.
- Las cepas de Enterococcus pueden desarrollar en este medio de - Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
cultivo como colonias pequeñas, puntiformes, rosadas. tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- El medio de cultivo no es específico para enterobacterias ya que Productos no Obligatoriamente Estériles.
pueden crecer otros microorganismos (Aeromonas spp.). Es ne- - United States Pharmacopeia (USP 31),. 2008. (61) Microbiologi-
cesario realizar pruebas bioquímicas adicionales de identificación cal Examination of Nonsterile products: Microbial Enumeration Tests.
microbiana. Harmonized Method.
- La selectividad del medio de cultivo disminuye luego de 24 horas - United States Pharmacopeia (USP 31). 2008. (62) Microbiological
de incubación y los microorganismos inicialmente inhibidos pueden Examination of Nonsterile products: Tests for Specified Microorga-
desarrollar. nisms. Harmonized Method.

Materiales necesarios no provistos Indicaciones al consumidor


Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
miento.
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Vogel Johnson Agar


USO INSTRUCCIONES
Medio utilizado para la rápida detección de estafilococos coagula- Suspender 61 g del polvo en un litro de agua purificada. Mezclar
sa positivo fermentadores de manitol, a partir de alimentos y otros bien. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto
materiales de importancia sanitaria y clínica. para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterili-
zar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50°C
FUNDAMENTO y agregar asépticamente 20 ml de Solución Estéril de Telurito de
Consiste en una modificación realizada por Vogel y Johnson, quie- Potasio al 1% (REF B0360366).
nes agregaron el indicador de pH e incrementaron el contenido Mezclar suavemente y distribuir en placas de Petri estériles.
de manitol al Agar Telurito Glicina desarrollado por Zebovitz, Evans
y Niven. CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
En el medio de cultivo, la tripteína y el extracto de levadura aportan Medio de cultivo deshidratado: color rosado, homogéneo, libre des-
los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. lizamiento.
El manitol es el hidrato de carbono fermentable. El telurito de po- Medio de cultivo preparado: color rojo.
tasio, el cloruro de litio y la alta concentración de glicina inhiben el
desarrollo de la flora habitual de tracto respiratorio superior y de ALMACENAMIENTO
algunas especies de microorganismos Gram positivos y negativos, Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
permitiendo el crecimiento selectivo de estafilococos. El rojo fenol Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
es el indicador de pH y el agar es el agente solidificante.
Es diferencial por la fermentación de manitol y reducción de telu- PROCEDIMIENTO
rito a teluro. Siembra
Los estafilococos coagulasa positivo, fermentan el manitol, produ- Estriar la superficie del medio de cultivo.
ciendo la acidificación del medio y el viraje del indicador de pH al En caso de inoculación directa de la muestra en estudio, sembrar
color amarillo, y también reducen el telurito a teluro observándose un inóculo denso y en forma masiva del mismo.
como colonias de color negro.
Incubación
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-48 horas.
Código B0211605: envase x 100 g.
Código B0211606: envase x 500 g. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Observar las características de las colonias.
FÓRMULA (en gramos por litro) Bacterias fermentadoras de manitol: halo amarillo en el medio
TRIPTEÍNA...................................................................................................................................10.0. de cultivo alrededor de la colonia.
EXTRACTO DE LEVADURA............................................................................................ 5.0. Bacterias no fermentadoras de manitol: halo rojizo en el medio
MANITOL.......................................................................................................................................10.0. de cultivo alrededor de la colonia.
FOSFATO DIPOTÁSICO...................................................................................................... 5.0. Bacterias que reducen el telurito de potasio: colonias de color
CLORURO DE LITIO.............................................................................................................. 5.0. grisáceo-negro.
GLICINA.........................................................................................................................................10.0. Bacterias que no reducen el telurito de potasio: colonias del
ROJO DE FENOL.............................................................................................................. 0.025. color del medio, transparentes.
AGAR................................................................................................................................................16.0.
pH FINAL: 7.2 ± 0.2

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Vogel Johnson Agar

CONTROL DE CALIDAD

MICROORGANISMOS CRECIMIENTO FERMENTACION REDUCCIÓN DE CARACTERÍSTICAS DE


DE MANITOL TELURITO DE POTASIO LAS COLONIAS
Staphylococcus aureus Satisfactorio Positivo Positivo Colonias negras, rodeadas de una zona amarilla
ATCC 25923
Staphylococcus Satisfactorio Positivo Positivo Colonias negras, rodeadas de una zona amarilla
aureus ATCC 6538
Staphylococcus Regular Negativo Positivo Colonias negras, pequeñas rodeadas de una zona roja
epidermidis ATCC 14990
Escherichia coli Total o parcialmente -- -- --
ATCC 25922 Inhibido
Proteus mirabilis Total o parcialmente Negativo Positivo Colonias negras, rodeadas de una zona roja
ATCC 43071 Inhibido

CONTROL DE ESTERILIDAD RESULTADO ducto.


Medio sin inocular Sin cambios - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
LIMITACIONES establecidas por el laboratorio.
- No calentar el medio de cultivo luego que se agregó el telurito de - Las características del producto pueden alterarse si no se conser-
potasio ya que es un compuesto termolábil. va apropiadamente.
- Durante las primeras horas, el crecimiento de estafilococos puede - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
ser escaso, por eso se recomienda incubar las placas durante 48 mismo según reglamentaciones vigentes.
horas.
- Las bacterias no fermentadoras de manitol presentan halo roji- REFERENCIAS
zos alrededor de las colonias. El color rojo del halo puede ser mas - Zebovitz, E., Evans, J.B. and Niven, C. F. 1955. Tellurite Glycine
intenso que el color del medio de cultivo debido a la utilización de Agar, a selective plating medium for the quantitative detection of
peptonas por estos microorganismos con el consecuente viraje a la coagulase positive staphylococci. J. Bacteriol. 70:686.
alcalinidad del medio de cultivo. - Vogel, R.A., and Johnson, M. 1960. A modification of the Tellurite
Glycine medium for use in the identification of Staphylococcus au-
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS reus. Public Health Lab. 18:131.
Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri- maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
miento. more, Md.
- Farmacopea Nacional Argentina, Codex Medicamentarius Argen-
PRECAUCIONES tino, Séptima Edición, volumen 1. 2003. Control Microbiológico de
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- Productos no Obligatoriamente Estériles.
sivo. - United States Pharmacopeia (USP 27). 2004. (61) Microbial Li-
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da- mit Test.
ñado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete- INDICACIONES AL CONSUMIDOR
rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el pro- Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
11/2015 - REV .01

SÍMBOLOS UTILIZADOS

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