Mecanismos de resistencia a

antibióticos.
Microbiología I
T.M Mg. Karin Del Campo C.
2020
Datos generales
• Infecciones por MO-MR son muy prevalentes en
microbiología clínica
• 50 – 60% de las infecciones en EE.UU son causadas
por bacterias MR.
• Causando 77,000 muertes por año.
• Reto terapéutico presencia de MR
Los mecanismos de resistencia se resumen en 5
categorías:

1. Modificación enzimática del antibiótico.

2. Bombas de salida (Eflujo).
3. Cambios en la permeabilidad de la membrana
externa.
4. Alteraciones del sitio de acción.
5. Nuevas rutas metabólicas.
1. Modificación enzimática del antibiótico

• Expresión de enzimas capaces de modificar la

estructura del atb (perdida de funcionalidad).
• Las Beta-lactamasas son las mas prevalentes
• Proteínas capaces de hidrolizar el anillo beta-lactámico
del atb.
• Enzimas (aminoglucósidos:
• Modifican atb mediante acetilación, adenilación y
fosforilación
Beta-lactamasas
• Enzimas hidrolíticas de anillo BL.
• Ubicuas en bacterias Gram negativas y algunos Gram positivos
• Resistencia a: Bencipenicilinas, Aminopenicilinas, Carboxipenicilinas y
Ureidopenicilinas
• Pero no hidrolizan de forma significativa las cefalosporinas.
• Genes codificantes de BL (plásmidos o cromosomas)
• Fácil transferencia entre bacterias.

• > 890 beta-lactamasas actualmente caracterizadas

• Las familias más comunes dentro de las enterobacterias son: blaTEM,

blaSHV, blaOXA-1 y blaCARB
• blaTEM, blaSHV → Inhibidas por Ac. Clavulánico y algunas Cef3°
• blaOXA-1 → Hidrolizan Oxacilina
• blaCARB → Hidrolizan Carbenicilina
 (BLEA)
• Primeras enzimas denominadas betalactamasas
• Espectro ampliado
• Tienen acción sobre penicilinas y cefalosporinas de primera
generación.

Modificación genética

(BLEE)
• Generación de BL de espectro expandido
• Tienen acción sobre cefalosporinas de tercera generación
BLEE

• Múltiples en BGN (Klebsiella y E. coli).

• Resistencia a cefalosporinas de 1° a 3°, aztreonam,
penicilinas.
• Incapaces de hidrolizar cefamicinas (cefoxitin y cefotetán) y
carbapenémicos → (resistencia mas reciente)
• Generadas por mutaciones espontaneas de BLER.
• BLEE: Clínico debe considerar R a Cef de amplio espectro y
monobactámicos
• Son inhibidas por inhibidores de BL (AC-SUL-TAZO).
• Principal diferencia con AmpC!!!!
BLEE

• Ambler en 1980 propone clasificarlas en cuatro clases:

A, B, C y D
• Mas prevalentes: TEM-1 (A), SHV y CTX-M
• TEM y SHV:
• Hidrolizan Ceftazidima con > fuerza que a Ceftriaxona o
Cefotaxima.

• CTX-M: Hidrolizan Cefotaxima y Ceftriaxona > que

Ceftazidima.
• Labs deben deben testear ambos (Cefota y Cefta)
• Menos prevalentes: PER, VEB-1 y BES-1
 Método confirmatorio (NCCLS), para la presencia de BLEE.
Aumento de 5mm en el halo de inhibición si se utiliza un disco con la
combinación cefalosporina + ácido clavulánico en relación a cuando se
usa un disco solo con la cefalosporina.
CTX = cefotaxima (30µg) CTX/ CLAV = cefotaxima (30µg) con ácido
clavulánico (10µg) CAZ = ceftazima (30µg) CAZ/CL

Rev Chil Infect 2003; 20 (Supl 1): S11 - S23

Beta-lactamasas tipo AmpC
• Enzimas codificadas en cromosomas en BGN
• Hidrolizan cefalosporinas (1,2 y 3) + aztreonam e inhibidores de
BL.

• Principalmente AMPCES
• Aeromonas spp, Morganella morganii, Providencia spp,
Pseudomonas aeruginosa, Proteus spp (indol +), Citrobacter
freundii, Enterobacter spp y Serratia spp.

• AmpC → Mediada por plásmidos en K. pneumoniae y Salmonella

spp (naturalmente ausentes cromosomalmente AmpC)
Carbapenemasas
• Enzimas hidrolíticas de Carbapenémicos
• Cromosomales o en EGM.

• Clasificación de Ambler (A-B-D)

• Clase A y D: Carbapenemasas con residuo de serina (serin-
betalactamasas)
• Clase B: Metalobetalactamasas MBL
• Dependencia de Zinc para su funcionamiento
• Resistentes a todos los betalactámicos excepto Aztreonam
• Clase D: constituyen un grupo reducido de enzimas plasmídicas, con
actividad incrementada sobre oxacilina (OXA-1)
Tipos de carbapenemasas
• Acinetobacter spp y Enterobacteriaceae → Carbapenemasas
de serina.
• A. baumannii: CBP serina clase D.
• OXA-23-27, OXA 40 Y OXA 58. →Transposones y plásmidos.
• Tipos OXA confieren R a CBP cuando la bacteria expresa otro
mecanismo de R como cierre de porinas o bombas de eflujo.
• Enterobacterias:
• Enzimas de clase A
• NMC-A, SME-1-3, KPC, IMI-1, GES-2, VIM, OXA-48
(Oxacilinasa)
KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemasa)

• OMS (2014): informó que las cepas de K. pneumoniae resistentes a

carbapenémicos se han diseminado mundialmente y que el principal
mecanismo de resistencia es la enzima KPC.
• La enzima KPC se encuentra codificada por el gen blaKPC, localizado en el
transposón Tn4401
• Colombia 2007: identificación por primera vez KPC fuera de familia
Enterobacteriaceae → P. aeruginosa.
• Confirmación KPC+
• Método eliminado en enero 2018 → Actualización CLSI
Otras enzimas modificadoras
• Metilasas
• Acetil-transferasas Inactivación de Aminoglucósidos
• Nucleotidil-transferasas
• Fosfotransferasas

• Acetil-transferasa AAC
Kanamicina, Amikacina y
• Metilasa 16S rARN Tobramicina
Bombas de salida (Eflujo)
• Se encuentran en la mb externa celular
• Expulsan metabolitos, detergentes, solventes orgánicos, etc.

Finalidad: mantención de bajas concentraciones de sustancias tóxicas en la

célula.

• Lo realizan mediante la hidrolisis de ATP o mecanismo de

contratransporte iónico como sustrato energético.

Toman el antibióticos del espacio periplásmico y lo expulsan al exterior.

Evitan que antibióticos llegue al sitio de acción.

• Generalmente hay combinación sinérgica entre bombas, porinas y

mutaciones en sitio de acción para protección bacteriana.
Se pueden clasificar en 6 familias:

1. ABC (ATP binding cassette)

2. MF (major facilitator)
- Acinetobacter baumannii
3. MATE (multidrug and toxic efflux)
4. RND (resistance nodulation division)
- Acinetobacter baumannii
- Pseudomonas aeruginosa MexAB-OprM
5. SMR (small multidrug resistance)
6. DMT (drug/metabolite transporter superfamily)
Ej: Resistencia a Quinolonas

• Dos plásmidos identificados a la fecha: pHPA y pOLA52

• pHPA:
• codifica a la proteína de membrana interna QepA (familia MFS)
• R a quinolonas hidrofílicas como ciprofloxacino y norfloxacino
• pOLA52:
• Codifica a proteína de MI OqxA (familia RND) y a OqxB
• OqxAB confieren resistencia a ácido nalidíxico y ciprofloxacina
• Con ayuda de proteína TolC → Complejo OqxAB-TolC

✓ Confieren resistencia a quinolonas

✓ Mediante sistemas expulsión
✓ Generan disminución de la concentración intracelular del fármaco
• MexAB-OprM en P.
aeruginosa.
• Asociada a RI a
fluoroquinolonas.
• 3 subunidades: MexA,
MexB y OprM
Cambios en la permeabilidad de la
membrana externa
• Las bacterias generan cambios en la bicapa lipídica.
• Porinas:
• Proteinas (mb externa) formadoras de canales.
• Intercambio acuoso
• Regulan la entrada de ciertos elementos, entre ellos
antibióticos
• Cambios en porinas pueden generar bloqueo en el
intercambio en la ME.
 Cierre o perdida de Porinas
• Canales anclados a la ME de BGN
• Función principal:
• Facilitar captación pasiva de Aá
• Especificas o inespecíficas
• P. aeruginosa → Porina específica
OprD utilizada por carbapenémicos
(Imi-Mero)
• Se cierra en caso de resistencia
a CBP → R
• Afinidad y difusión de Imipenen
es 70 veces > que Meropenem
• MERO puede ser expulsado →
IMI no!
Alteraciones del sitio de accion
• Sitios de acción se pueden encontrar en diferentes partes
bacterianas.
• Modificación en la estructura de los ligandos genera
diferentes grados de resistencias.
• Síntesis de pared celular:
• PBP → responsables de la transpeptidación
• Modificaciones estructurales secundarias a mutaciones
pueden disminuir afinidad por BL.
Mecanismos de resistencia a BL
 Método para detección de resistencia a
meticilina en S. aureus
• Difusión del disco (incubación recomendada: 35°C)
• Discos de Oxacilina de 1 µg.
• Es el método menos confiable de detección teniendo baja especificidad.
• El NaCl adicionado al agar o la incubación mayor a 48 horas mejoran la
sensibilidad.
• Adicionalmente, se ha demostrado que el cefoxitin (cefamicina) in vitro,
induce la producción de PBP2a en cepas de S. aureus meticilino
sensibles (SAMS).
• Método de difusión del disco con Cefoxitin (FOX 30 µg) buen ensayo
para la detección de resistencia de bajo nivel a oxacilina en cepas de S.
aureus.

Mecanismos de resistencia a antibióticos β-lactámicos en S. aureus. Kasmera, 38(1), 18-35.

Establecimiento de una ruta
metabólica alternativa
• Es un tipo de resistencia
mediada por cambios en la
molécula blanco.
• En este caso cambian varias
enzimas de la ruta metabólica
haciendo que el antibiótico no
pueda actuar.
• Ej: Sulfas y Trimetroprim
Mecanismos cromosómicos de resistencia a trimetoprim
• Mutaciones en el gen dfr → > mayor expresión de la enzima
dihidrofolato reductasa

Mecanismos de resistencia a sulfonamidas

• Mutaciones en el gen folP (dihidropteroato sintasa) → menor
afinidad del antibiótico por la enzima mutada.

Otros mecanismos incluyen:

• Sobreproducción del ácido para-aminobenzóico
(PABA)
• Alteraciones en la permeabilidad de la membrana
celular.