Biología Celular y Molecular

Teoría Nº 1: Ácidos Nucleicos

 ACIDOS NUCLEICOS: Historia

FRIEDRICH MIESCHER - 1870

- Son macromoléculas que fueron aisladas por primera vez por Miescher en 1870.
- Su nombre se origina del hecho de que la primera vez que se identificaron se observó que
eran ácidos, que se encontraban en el núcleo celular.

EXPERIMENTOS DE FRIEDRICH GRIFFITH - 1928

Friedrich Griffith utilizó dos cepas de: Bacterias Streptococcus pneumoniae
- Cepa S: cuyas colonias eran de superficie lisa y producían la muerte de ratones.
- Cepa R: no encapsulada (rough), cuyas colonias tienen una superficie rugosa y que no
mataban a los ratones.
Se observó que:
 La cepa S producía infección letal en los ratones.
 Las cepas R no producían infección letal en los ratones.
 Las cepas S muertas por calor eran inofensivas, excepto cuando se las mezclaba con cepa R vivas.
 Este experimento permite inferir que algún factor de la cepa S muerta pasa a las cepas R vivas y
las transforma en cepas infecciosas letales.
 Griffith no supo cuál era ese factor.

EXPERIMENTOS DE OSWALD AVERY – 1944

Oswald Avery repitió el trabajo de Griffith agregando ADNasa pancreática. Demostró de esta forma
que el factor de transformación era el ADN. Concluyó que el material hereditario era ADN y no una
proteína.

El experimento se basó en calentar las células S (virulentas), a las que se le agregaban en 3 tubos
diferentes: ADNasa, ARNasa y Proteasa, por último, se las mezclaba con las células R (no virulentas).
Estas 3 mezclas distintas, se inyectaban en ratones y lo que se observo fue que, aquellos que
recibieron la mezcla con ADNasa no morían, por eso, se concluyó que el material genético era el ADN
y no una proteína.

EXPERIMENTO DE HERSHEY Y CHASE – 1952

Este se realizó con el fin de determinar si el ADN o las proteínas eran la base del material genético.
En primer lugar, marcaron el ADN de los Fagos con Fosforo 32 (P32) luego, dejaron que estos
infectaran bacterias de E. coli y observaron que el fosforo era visible en las células bacterianas.
En segundo lugar, marcaron los Fagos con Azufre 35 (S35) ya que los aminoácidos como cisteína y
metionina contienen azufre. Luego dejaron que los fagos infectaran bacterias de E.coli y lo que se
observó fue que el azufre quedaba en el fago y no en las células bacterianas. Lo que confirmó que el
material genético era lo que infecta a las bacterias, y no las proteínas como se pensaba.

 ACIDOS NUCLEICOS: Tipos

En las células se encuentran dos tipos de ácidos nucleicos:
– el ácido desoxirribonucleico (ADN)
– el ácido ribonucleico (ARN)

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ADN: Forma genes, material hereditario de las
células, y contiene las instrucciones para la
síntesis de todas las proteínas que el
organismo necesita.
ARN: Está asociado a la transmisión de la
información genética. Hay tres tipos de ARN,
los tres más importantes:
1- ARN mensajero (ARNm): Copia la
información del ADN y la transporta
hacia los ribosomas para la síntesis de
proteínas. El ARNm tiene una
estructura diferente en procariotas y
en eucariotas. Es monocatenario.
2- ARN de transferencia (ARNt):
Transporta los AA hacia el ribosoma
para la síntesis de proteínas.
3- ARN ribosómico (ARNr): Se encuentra
asociado con proteínas ribosómicas
formando Ribosomas.

ARNm eucariota
- Monocistrónico (Codifica para una proteína)
- Posee caperuza en el extremo 5´
- Posee una cola poli-A en el extremo 3´
- Presenta exones (regiones codificantes) e intrones (regiones no codificantes).
ARNm procariota
- Policistrónico (codifica más de una proteína)
- Carece de caperuza y cola poli-A
- No posee intrones ni exones

 ACIDOS NUCLEICOS: Ubicación

En EUCARIOTAS: El ADN se encuentra en:
- Núcleo: El ADN se encuentra asociado a proteínas histónicas y no histónicas.
- Mitocondrias El ADN en mitocondrias y cloroplastos
- Cloroplastos (Células vegetales y algas verdes) es similar de las células procariotas.

En PROCARIOTAS: Como estas células no poseen núcleo, se pensaba que el ADN se encontraba
disperso en el citoplasma, pero luego se observó que estaba asociado a proteínas no histónicas que
formaban parte de una condensación llamada nucleoide (que a diferencia del núcleo, carece de
envoltura).

En VIRUS: El ADN se encuentra asociados a proteínas histónicas. Recordar que estos no se consideran
procariotas ni eucariotas. No pueden reproducirse por sí solos ya que necesitan de un huésped para
hacerlo. Por lo tanto, no son tomados en cuenta como organismos vivos.

 ACIDOS NUCLEICOS: Nucleósidos y Nucleótidos

NUCLEOSIDOS: Es la unión de la base nitrogenada con la pentosa mediante un enlace N-glicosídico.
Se conocen como ribonucleósidos o desoxirribonucleósidos.
NUCLEÓTIDOS: Cuando al nucleósido se le une el fosfato mediante un enlace éster.
Reacción:
Nucleósido + Fosfato = Nucleótido + H2O

Los nucleótidos son unidades monoméricas que forman los ácidos nucleicos.

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Bases nitrogenadas:
- Pirimidinas: C, U, T
- Purinas: A, G
NUCLEOTIDOS: Funciones
- Se encuentran libres en las células.
- Pueden actuar como:
- Reguladores metabólicos (aportando energía)
- Activadores de enzimas
- Coenzimas

DINUCLEÓTIDO: Formación del enlace fosfo-diéster

Los nucleótidos forman cadenas por medio de

enlaces covalentes entre el carbono 3´ de la ribosa o
de la desoxirribosa y la molécula de fosfato del
siguiente nucleótido que a su vez está unido al
carbono 5´ de la pentosa.

POLIMERIZACIÓN: Ocurre cuando se agregan nucleótidos 5’ fosfato al extremo 3’ OH de la cadena

preexistente.

 ESTRUCTURA DEL ADN:

 ESTRUCTURA PRIMARIA:
• Es la secuencia de nucleótidos de una sola cadena.
• Es el esqueleto de pentosas y fosfatos y una secuencia de bases nitrogenadas.
• El número de hebras diferentes de ADN que se puede formar combinando las cuatro
bases nitrogenadas -adenina, guanina, citosina y timina-, es muy elevado.
• La secuencia de ADN se lee y se expresa siempre en sentido 5’- 3’
La complementariedad de bases involucra la formación de puentes de hidrógeno.
- 2 Puentes de Hidrogeno entre A y T
- 3 Puentes de Hidrogeno entre C y G
• Siempre una purina se enfrenta a una pirimidina.

 ESTRUCTURA SECUNDARIA:
La estructura secundaria del ADN es la disposición espacial en doble hélice de dos cadenas de
polinucleótidos, con las bases nitrogenadas enfrentadas y unidas mediante puentes de hidrógeno.

• Experimento Franklin y Wilkins – 1950 a 1953

Determinaron que el diámetro del ADN es de aproximadamente 20 Amstrongs, que se repetían
ciertas unidades cada 3,4 Å, y que había otra repetición mayor cada 34 Å.
• Watson y Crick – 1953
Elaboraron el modelo de la doble hélice del ADN. En el cual publicaron que el ADN estaría formado
por 2 cadenas unidas a través de puentes de hidrogeno entre las bases nitrogenadas. Donde ambas
cadenas serian complementarias, y antiparalelas.

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Características de la doble hélice del ADN

• 2 cadenas de polinucleótidos unidas entre sí • Esqueleto azúcar fosfato hacia fuera
• Antiparalelas • Planos de las bases perpendiculares al eje y
• Complementarias paralelos entre sí
• Estabilizadas por puentes de hidrógeno • Gira en sentido dextrógiro (reloj)
entre bases nitrogenadas • 10 pares de nucleótidos por vuelta (3,4 nm)
• Enrolladas en espiral alrededor de un eje • Diámetro 2 nm
imaginario

Formas del ADN:

FORMA B FORMA A FORMA Z

- Promedio de la estructura
fisiológica
- 10 bp por vuelta (3,4 nm)
- 1 bp 0,34 nm
- Rotación dextrógira
- Esta forma aparece cuando
se deseca la forma A.
- No se ha encontrado en
condiciones fisiológicas.
- Es más ancha y corta que la
forma B.
- 11 bp por vuelta
- Rotación dextrógira
- Tiene un enrollamiento
irregular que provoca una
configuración en zigzag.
- Esta estructura aparece en
regiones del ADN donde se
alternan muchas citosinas y
guaninas.
- Se piensa que la forma Z
constituye señales para las
proteínas reguladoras de la
expresión del mensaje
genético.
- Más larga y estrecha que la
forma B.
- 12 bp por vuelta
- Rotación es levógira.

Conclusión: El número de nucleótidos por vuelta, el ancho de la cadena y el tamaño de los surcos es
diferente en las tres formas del ADN.

 ESTRUCTURA TERCIARIA:

 TOPOLOGÍA DEL ADN

- Plasmido: ADN circular
- Cromosoma bacteriano: ADN
Circular (5.106 bp)
- Cromosoma eucariota: ADN lineal
Las moléculas de ADN circular, como el ADN bacteriano o el ADN mitocondrial, presentan una
estructura terciaria, conocida como ADN superenrrollado.

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 MUTACIONES DEL ADN

• Pueden ser inducidas por modificaciones químicas en las bases nitrogenadas.
• Pueden ser inducidas por la introducción de un análogo de base nitrogenada dentro del ADN.

 DESNATURALIZACION – RENATURALIZACION DEL ADN

• La doble hélice de ADN en estado natural es muy estable.
• Si se calienta a una temperatura de 100°C, las dos hebras de la doble hélice se separan y se produce
la desnaturalización del ADN.
• Si posteriormente se mantiene el ADN desnaturalizado a 65°C, las dos hebras vuelven a unirse.
• Esta restauración de la doble hélice es lo que se llama renaturalización y es lo que permite la
hibridación si se parte de hebras de distintos ADN.
• La desnaturalización del ADN puede medirse por el aumento de la densidad óptica y definir la
temperatura de fusión (Tm) para cada molécula. La Tm es dependiente del % de G-C y de la
concentración salina

 ESTRUCTURA DEL ARN

• Contiene ribosa
• Suele ser monocatenario. Pero en retrovirus es bicatenario
• La ribosa tiene un OH en el carbono 2’
• El uracilo toma el lugar de la timina
• Suele estar en forma lineal
• Salvo en algunos virus, no constituye el material genético
• Cumple tres funciones: mensajero, de transferencia y estructural (ribosomal)
• Se copia en forma monocatenaria usando como plantilla el ADN
• Algunos tienen actividad enzimática (ribozimas)
• Constituido por ribonucleótidos cuyas bases son: A, U, C, G.
• Estos ribonucleótidos se unen entre ellos mediante enlaces fosfodiéster.