BIOLOGIA GENERAL PARA INGENIEROS

Código: 008995MG
PRÁCTICA N° 1: RECONOCIMIENTO DE
BIOMOLÉCULAS

1. GENERALIDADES

En la composición de los seres vivos predominan cuatro elementos: carbono, oxígeno, hidrógeno y
nitrógeno. La capacidad del átomo de carbono para formar enlaces covalentes es la base a partir de la
cual se forman moléculas orgánicas que tienen la propiedad de formar macromoléculas de un mayor
grado de complejidad. Estas biomoléculas pueden pertenecer a cuatro grupos que se separan con
base en la proporción relativa de sus elementos constitutivos, el tipo de enlaces que mantienen
estables, su estructura y sus propiedades físicas y químicas. La diversidad estructural y química de las
biomoléculas hace posible identificar su presencia en una muestra, mediante el uso de pruebas
cualitativas o cuantitativas que se basan en reacciones químicas específicas entre uno o más agentes
o reactivos y la biomolécula en cuestión. Como resultado de la reacciones, se puede generar un
cambio de coloración, formación de anillos coloreados o de precipitados, que indican la presencia de
determinado compuesto orgánico en la muestra.

2. ACTIVIDAD EXPERIMENTAL.
2.1. Problema de Investigación:
2.2.
Los seres vivos y todo el material que de ellos se deriva, está formado por diferentes tipos de
compuestos que se pueden identificar (cualificar) y cuantificar. Cuáles son esas sustancias, permite
generar ideas sobre la posible función, propiedades y usos que estas puedan tener. La identificación
cualitativa se realiza por medio de reacciones bastante específicas, cuyo producto es coloreado de
fácil detección.

En esta práctica se pretende contestar las siguientes preguntas:

¿Cuál es la composición mayoritaria en términos de las biomoléculas del material (muestras) a

estudiar en esta práctica de laboratorio?

¿Cómo actúan los reactivos (Tabla 2) que permiten detectar la presencia de biomoléculas en las
diferentes muestras? Para responder esta última pregunta usted debe hacer una investigación usando
la literatura disponible en la literatura. Esta investigación le permitirá establecer sus hipótesis a partir
de la naturaleza química del reactivo y del contenido de las diferentes biomoléculas en cada una de
las diferentes muestras
Para esto último ud debe hacer una investigación exhaustiva que le permitirá establecer sus hipótesis
a partir de la naturaleza química del reactivo y del contenido de las diferentes biomoléculas en cada
una de las diferentes muestras..

Tabla 2. Reactivos utilizados para la identificación de diferentes moléculas de importancia biológica

BIOMOLECULA REACTIVO
Proteínas Biuret
Carbohidratos Molish, Benedict y Lugol
Lípidos Prueba de solubilidad en
solventes polares y
apolares
Ácidos Nucleicos Difenilamina

3.2. Materiales y reactivos

En la tabla 3 se indican los diferentes materiales y reactivos que se utilizaran en el proceso de

identificación de las biomoléculas

Tabla 3. Materiales y reactivos por grupo

Materiales y Reactivos Muestras
equipos

2 gradillas Molisch (α-naftol) gotero Leche entera 5 mL

20 tubos de ensayo Benedict 10 mL Leche deslactosada 5 mL
Pinza para tubo Lugol Gotero Extracto de papa 8 mL
Tres pipetas Biuret 20 mL Extracto de frijol verde o soya 8 mL
graduadas (1, 5 y
10 mL)
1 pipeteador gotero Extracto de hígado 10 mL
1 aro con nuez Etanol 10 mL Aceite de cocina 10 mL
Vaso precipitado de Éter de petróleo 10 mL Margarina Pequeña porción
50 mL
Vaso precipitado de Difenilamina* 5 mL Solución patrón de almidón 10 mL
250mL 1%
Placa de Buffer fosfatos 0,1M 10 mL Solución patrón de glucosa 1% 8 mL
calentamiento a pH 7,4.
1 vidrio de reloj Diclorometano 10 mL Solución patrón de sacarosa 6 mL
1%
Baño de María Ácido oleico Solución patrón de glucógeno 4 mL
1%
Centrífuga H2SO4 concentrado 10 mL Solución patrón de ADN 1% 2 mL
Tubos de centrífuga Suspensión de levadura 1% 2 mL
Espátula Solución de BSA* al 1% en sln 10 mL
de NaCl al 0,9%.
Algodón 4 mL
4 mL
4 mL
*BSA: Albúmina sérica bovina
*Difenilamina: (1 g de difenilamina en 100 ml de ácido acético glacial más 2,5 ml de H2SO4
concentrado)

4. PROCEDIMIENTO

4.1. Preparación muestras

Extracto de Papa: Macerar cubitos de papa adicionando 8 mL de agua, centrifugar durante 10

minutos y obtener el sobrenadante en un tubo debidamente marcado.

Extracto de frijol: Triturar en un mortero 0.5 g de frijol verde o frijol soya con 8 mL de agua destilada,
centrifugar por 10 minutos y depositar el sobrenadante en un tubo marcado.

Extracto de hígado: Macerar trocitos de hígado previamente desangrados (cortar en pequeños trozos
y lavar con agua destilada en repetidas ocasiones hasta que quede libre de sangre). Pesar 0.8 g y en
un mortero macerarlo con 8 mL de buffer de fosfatos 0,1M, pH= 7,4; centrifugar por 10 minutos,
separar el sobrenadante y mantenerlo en un vaso de precipitados sumergido en baño con hielo hasta
su uso.

4.2. Determinación cualitativa proteínas

Coloque en una gradilla ocho tubos de ensayo y añada a cada uno 2 mL de leche entera, extracto de
hígado, de papa, de frijol, solución de almidón, de BSA, aceite vegetal y agua. Después de tener los
tubos debidamente marcados y con la muestra de estudio, adicionar 2 mL del reactivo de Biuret,
mezclar, esperar 15 minutos y observar.

4.3. Determinación cualitativa de carbohidratos

Carbohidratos en general: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada uno 2 mL
de extracto de papa, de frijol, de hígado, leche entera, leche daslactosada, solución de almidón, de
BSA, de glucosa, aceite vegetal y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con las
muestras, adicione 3 gotas del reactivo de Molish (α-naftol) y mezcle bien, luego adicione por las
paredes del tubo 1 mL de ácido sulfúrico concentrado. No agite, observe la interface entre el H2SO4 y
la muestra.

Azúcares reductores: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada uno 2 mL de
leche entera, leche deslactosada, bebida hidratante, solución de glucosa, de sacarosa, de almidón, de
BSA, aceite vegetal y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con las muestras,
adicione 1mL del reactivo de Benedict, mezcle bien y coloque los tubos en un baño de agua en
ebullición de 10 a 15min, observe.
Polisacáridos: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada uno 2 mL de extracto
de papa, de frijol, de hígado, solución de sacarosa, de BSA, de almidón, de glucógeno, una mota de
algodón y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con las muestras, adicione 10
gotas del reactivo de Lugol, mezcle y observe.

4.4. Solubilidad de lípidos.

Coloque en una gradilla cuatro tubos de ensayo y añada a cada uno 3mL de etanol, éter de petróleo,
diclorometano y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con el solvente, adicione
una pequeña porción de margarina. Agite y observe. Repita el procedimiento agregando a los tubos 10
gotas de aceite vegetal y luego con 10 gotas de ácido oleico

4.5. Determinación cualitativa de ADN.

Coloque en una gradilla cuatro tubos de ensayo y añada a cada uno 1 mL de suspensión de levadura
al 1%, extracto de hígado, solución de ADN y agua. Después de tener los tubos debidamente
marcados y con la muestra, añada 1 mL de difenilamina. Caliente en baño de agua sin dejarla hervir
por 20 minutos (en algunas ocasiones se requiere más tiempo), deje reposar 10 minutos en un baño
hielo y observar el cambio de coloración.

5. BIBLIOGRAFÍA

BACCA, G. Cecilia y CADAVID, V. Rubén Alberto. Manual de Bioquímica del Ejercicio. Bogotá:
UNINCCA –SEI, 2004.

CURTIS, Helena, Biología. 4 ed. Buenos Aires: Médica Panamericana, 1989.

DALLOS, Dilia. Prácticas de Biología General. Bogotá: Centro de Publicaciones. Unisalle, 1998.

DE Robertis, De Robertis. Biología celular y molecular. 11 ed. Argentina: El Ateneo 1986.

HOLUM, JOHN R. Fundamentos de química general, orgánica y bioquímica para ciencias de la

salud. México: Limusa, 2003.

PURVES, William. et al. Vida. La ciencia de la Biología. 6 ed. México: Médica Panamericana, 2006.

VILLEE, Claude. Biología. 3 ed. México: Interamericana, 1996.

 PREINFORME E INFORME

Biomoléculas

Grupo #: ___________

Integrantes:

________________________________________________________________________

1. Consulta. (1 pto)

Investigue y conteste las siguientes preguntas. A partir de esto ud. puede construir un marco teórico
que le permitirá entender los fundamentos conceptuales de la práctica, plantear sus hipótesis y
entender los experimentos, así mismo esto será base de la discusión de resultados.

¿Cómo se llama el enlace entre los aminoácidos para generar las proteínas y el enlace entre los
monosacáridos para formar los polisacáridos?

¿Cómo actúa y sobre que parte de la molécula proteica actúa el reactivo de Biuret?

¿Cómo actúa y sobre que parte de la molécula de carbohidrato actúa el reactivo de Molish?

¿Cuál es la razón a nivel estructural, para considerar a un carbohidrato como azúcar reductor?

¿En la reacción de identificación de azúcares reductores con el reactivo de Benedict, influye el tamaño
del carbohidrato y/o los tipos de enlace del mismo?
¿Qué es la albumina sérica bovina (BSA)?

¿Cuál es el papel de la difenilamina en el proceso de extracción e identificación del ADN?

Complete la siguiente tabla

MUESTRA COMPOSICIÓN GENERAL

Hígado
Leche entera
Leche deslactosada
Papa
Frijol
Bebida hidratante
Suero fisiológico
Aceite de cocina
Margarina
Resultados.

1.1. Identificación de proteínas con el reactivo de Biuret.

Pregunta:

Hipótesis

Tabla de datos:

MUESTRA LO ESPERADO LO OBSERVADO

Leche entera
Extracto de hígado
Extracto de papa
Extracto de frijol
Solución de almidón
Aceite vegetal
Solución BSA
Agua

Discusión de Resultados: (3 ptos)

1.2. Identificación de carbohidratos con el reactivo de Molish. (3 ptos)

Pregunta:

Hipótesis

Tabla de datos:

MUESTRA LO ESPERADO LO OBSERVADO

Leche deslactosada
Extracto de papa
Extracto de frijol
Extracto de hígado
Solución de almidón
 Solución de BSA
Aceite vegetal
Solución de glucosa
Agua

Discusión de Resultados: (3 ptos)

1.3. Identificación de azúcares reductores con el reactivo de Benedict. (3 ptos)

Pregunta:

Hipótesis

Tabla de datos: (3 ptos)

MUESTRA LO ESPERADO LO OBSERVADO

Leche entera
Leche deslactosada
Solución sacarosa
Solución glucosa
Solución almidón
Aceite vegetal
Solución BSA
Agua

Discusión de Resultados: (3 ptos)

1.4. Identificación de polisacáridos con el reactivo de Lugol. (3 ptos)

Pregunta:

Hipótesis

Tabla de datos:

MUESTRA LO ESPERADO LO OBSERVADO

Extracto de frijol
Extracto de papa
Extracto de hígado
Solución de sacarosa
Algodón
Solución de BSA
Solución de almidón
Solución de glucógeno
Agua

Discusión de Resultados: (3 ptos)

1.5. Solubilidad de Lípidos. (3 ptos)

Pregunta:

Hipótesis
Tabla de datos.

MARGARINA ACEITE VEGETAL ACIDO OLEICO

SOLVENTE
esperado observado esperado observado esperado observado
Agua
Etanol
Diclorometano
Éter de petróleo

Discusión de Resultados: (3 ptos)

1.6. Identificación de ADN. (3 ptos)

Pregunta:

Hipótesis

Tabla de datos.

MUESTRA LO ESPERADO LO OBSERVADO

Suspensión de levadura
Extracto de hígado
Solución de ADN
Agua.

Discusión de Resultados: (3 ptos)

2. Discusión de resultados.

Para elaborar la discusión de los resultados tenga en cuenta las siguientes preguntas o sugerencias.
- Identifique en cada experiencia, cual es la sustancia que actúa como control positivo y cual
como control negativo. Cuáles son las observaciones sobre los controles.
- Discuta si lo observado esta de acuerdo con lo esperado.
- A partir de lo investigado, relacione para cada experiencia, a nivel de composición y estructura
química, porque algunas muestras dan prueba positiva y otras dan prueba negativa. Adicionalmente y
bajo la luz de la interacción entre el reactivo y la muestra ¿Fueron corroboradas las hipótesis
planteadas?
- Diga si se acepta la hipótesis

3. Bibliografía. (1 pto)

Enuncie la bibliografía utilizada como apoyo para la elaboración de la consulta, la discusión de los
resultados y las conclusiones. Use como modelo la bibliografía que se encuentra en el fundamento
teórico de esta práctica.