ENERGÍA Y CONSUMO DE SUBSTANCIAS FUNDAMENTALES 21P

M. EN. C. JULIO CÉSAR HERNÁNDEZ ARELLANO

GRUPO BC11B/BC59

1. Se homogenizaron 0.5Kg de tejido muscular de cerdo, con 5 litros de solución salina amortiguada. Se
centrifugó para eliminar el tejido conectivo, restos celulares, núcleos y partículas grandes en general
y el volumen del sobrenadante obtenido fue de 4.5 litros, cuyo contenido total de proteínas (CTP)
fueron 50g. Al determinar la actividad específica (AE) inicial de una enzima X, contenida en dicho
sobrenadante, resulto ser de 0.1Uenzimáticas/mg de proteína.
a) Calcular la actividad enzimática total (AET)contenido en el sobrenadante.
b) Al tratar de purificar la enzima, se encontró, que en cada paso de la purificación se fue perdiendo un
20% de la AET, en cambio, su AE fue de aumentando 10 veces cada vez. Calcular tanto la AET y la
AE de 5 pasos de purificación.
c) Si al concluir la purificación, se obtuvieron únicamente 170U enzimáticas totales ¿cuál fue el
rendimiento final porcentual de la actividad enzimática total?
d) Al someter la enzima a un estudio de cinética enzimática, resulto ser inhibida por iones CN -.
Determinas las KM, Vmáx, pendientes, tipo de inhibición y las rectas con los siguientes datos
experimentales:

Velocidad
Sustrato
(U/mg)
[mM]
Sin inhibidor Con inhibidor
2.0 0.125 0.067
3.0 0.170 0.087
4.0 0.190 0.110
10.0 0.290 0.150
15.0 0.330 0.180

e) Asumiendo que la concentración del inhibidor fue de 5 mM, determinar el valor de la constante de
inhibición (Ki).

2. Determinas las KM, Vmáx, pendientes, tipo de inhibición y las rectas con los siguientes datos
experimentales:

Velocidad
Sustrato
(μ/min)
[mM]
Sin inhibidor Con inhibidor
3 10.4 4.1
5 14.5 6.4
10 22.5 11.3
30 33.8 22.6
90 40.5 33.8