Fundamentos de la tincion de Gram

 
Fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativoLos fundamentos de
la técnica se basan en las diferencias entre las paredescelulares de las bacterias
Gram positivas y Gram negativasLa pared celular de las bacterias Gram positivas
posee una gruesa capa depeptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos:
Anclado en la carainterna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se
encuentra elácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está
ancladosolamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)Por el
contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada,y se encuentra
unida a una segunda membrana plasmática exterior (decomposición distinta a la
interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capadelgada de peptidoglicano unida a
una membrana exterior por lipoproteínas. Lamembrana exterior está hecha de
proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se
tiñen diferencialmente debido a estasdiferencias constitutivas de su pared. La clave es
el peptidoglicano, ya que esel material que confiere su rigidez a la pared celular
bacteriana, y las Grampositivas lo poseen en mucha mayor proporción que las
Gram negativas.La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se
debe a quela membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes
orgánicos,como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglicano
queposee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de
cristalvioleta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se
escapa,perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las
Grampositivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporciónde
peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sinoque este
actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que puedaescaparse el
complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea.Bacterias
Escherichia coli vistas al microscopio tras ser teñidas con la tinciónde Gram

 Partes del Microscopio

    - OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador (por donde mira).
Su misión es ampliar la imagen del objetivo. Suelen tener dos oculares, por
eso se llaman binoculares, si solo tiene uno se llama monocular.

    - El TUBO:  El tubo óptico se puede acercar o alejar de la preparación (lo
que se quiere ver) mediante un TORNILLO MACROMÉTRICO o de grandes
movimientos que sirve para realizar un primer enfoque. El tornillo
macrométrico permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o hacia
abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar. 

    - REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al

girar, cambiar los objetivos. La esfera se suele llamar CABEZAL y contiene
los sistemas de lentes oculares (monoculares o binoculares (2 lentes)).

    - BRAZO : Es una pieza metálica de forma curvada que puede girar;
sostiene por su extremo superior al Tubo Óptico y en el inferior lleva varias
piezas importantes.

    - PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación que se quiere

observar. Tiene en su centro una abertura circular por la que pasará la luz
del sistema de iluminación.
    - OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de
ésta determinando las cantidad de aumentos con la que queremos
observar.

    - PINZAS DE SUJECION: Parte mecánica que sirve para sujetar la

preparación. La mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas
adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance longitudinal
y  transversal de la preparación. 

    - CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos que inciden
sobre la preparación. El condensador de la parte de abajo también se
llama FOCO y es el que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

    -TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y

micrométrico que consigue el enfoque correcto.

    - BASE: Sujeccion de todo el microscopio.

   Sobre la PLATINA se coloca la preparación que se va a observar con un

Orificio central por el que pasa la Luz procedente del Espejo. El ESPEJO con
una cara plana y otra cóncava, está montado sobre un eje giratorio ubicado
en la zona más inferior del brazo por debajo de la Platina.

   Ahora veamos un video donde nos explican las partes y luego un juego
para averiguar lo que hemos aprendido jugando.
OBJETIVOS
 Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones.
 Reconocer la importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias biológicas
Cuidados del microscopio
Es importante tener en cuenta los siguientes cuidados y precauciones al usar el
microscopio:

 Cuando se transporte el microscopio tómelo siempre con las dos manos. Nunca tenga objetos
adicionales en sus manos.
 Al colocar el microscopio sobre la mesa, sitúelo a unos 10 o 15 cm del borde.
 Si se requiere limpiar los lentes utilice sólo el papel y solución destinada para tal fin. No
utilice ningún otro tipo de papel.
 Cuando termine de trabajar deje el microscopio en el lente objetivo de 4X