UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

MICROBIOLOGÍA

MICROSCOPÍA: EL MICROCOPIO ÓPTICO

EL NOMBRE

El término microscopio proviene del

vocablo griego mikroskopein que
significa:
• Micro = pequeño
• Scopein = ver, observar
Es el instrumento diseñado
especialmente para poder apreciar
elementos muy pequeños y que
resultan prácticamente impercep-
tibles para la visión humana.
MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
COMPARACIÓN DE FUNCIONAMIENTO DEL MO Y ME
FORMACIÓN DE IMAGEN
 Imagen Real, invertida
p q

Imagen
‘Objeto’
virtual

Objeto

Objetivo Ocular

Object outside focal point Real image used as object for eyepiece.
Forms a real image Eyepiece forms virtual image for eye.
PARÁMETROS ÓPTICOS
✓ Amplificación
✓ Poder de resolución
✓ Campo de visión
✓ Profundidad de campo
✓ Contraste
AMPLIFICACIÓN

Aumento del tamaño de la imagen.

• Amplificación total: Dado por el producto de la lente
ocular por el objetivo.
• Amplificación vacía: incremento de la imagen sin que
pueda percibirse mayores detalles.

Amplificación de imagen Amplificación vacía imagen

PODER DE RESOLUCIÓN
▪ RESOLUCIÓN. Habilidad para distinguir los detalles finos
de una placa o muestra particular.
Entre los factores que más influyen para lograr una
buena resolución, se encuentran la apertura numérica, la
clase de muestra, la iluminación, la corrección de
aberraciones y el tipo de contraste utilizado.

Higher resolution Lower resolution

El límite de resolución de un microscopio se define
como la distancia mínima a partir de la cual ya no es
posible distinguir la separación entre dos puntos..

Ojo humano Microscopio Microscopio

compuesto electrónico
Poder de 100 µm ó 0.1 mm 0. 2 mm ó 200 µm 0.2 µm ó 2 Aº
resolución
CAMPO DE VISIÓN

El área que se observa

cuando se mira a través
de los lentes de un
microscopio
CAMPO DE VISIÓN

Lentes Lente ocular Magnificación Tamaño de

Objetivos total campo
4x 10x 40x 5 µm
10x 10x 100x 1.8 µm
40x 10x 400x 0.45 µm
100x 10x 1000x 0.18 µm

40 x 100x 400x
PROFUNDIDAD DE CAMPO
Grosor del espécimen o muestra
que es razonablemente clara a un
determinado nivel de enfoque.

Las series de imágenes muestran como la profundidad de

campo pueden influenciar la apariencia de la imagen

Con estrecha
Con una gran
profundidad
profundidad
de campo.
de campo, la
Solo parte de
imagen entera
las imagénes
está en foco al
están en foco
al mismo mismo tiempo.
40X 400X
timpo.
CONTRASTE

▪ Diferencia de absorción de luz entre el objeto y el medio

▪ Puede aumentarse con las tinciones

Tres imágenes de Paramecium caudatum (vacuolas alimentarias con células de levadura)

 SISTEMAS QUE COMPONEN EL M.O.

• El sistema mecánico está compuesto por el conjunto de

piezas de sostén y desplazamiento que permiten el enfoque
del objeto a observar, estas son: base o pie, brazo, tubo o
cañón, cremallera, tornillos micro y macrométrico, revólver
portaobjetivos y platina.

• El sistema óptico corresponde al conjunto de piezas que

colaboran en la ampliación de la imagen, es decir: objetivos
y oculares que son las lentes del microscopio

• El sistema de iluminación comprende aquellos

componentes encargados de hacer llegar la luz, dosificarla
y dirigirla a través del preparado, estos son: fuente de
iluminación, condensador y diafragma.
SISTEMA DE SOPORTE O ESTATIVO

Platina

Brazo

Píe
SISTEMA DE AJUSTE

Anillo de
ajuste de los
oculares Tornillo que
permite
mover el
cabezal

Tornillos del
condensador
Tornillos
reguladores
de la platina
Palanca de
cierre del
diafragma
SISTEMA DE ENFOQUE
PLATINA

Pinza Escala
 PARTE ÓPTICA

▪ Lentes:
oculares
objetivos

▪ Sistema de
iluminación:
condensador
Diafragma
fuente de luz
SISTEMA DE ILUMINACIÓN: FUENTE DE LUZ

▪ Suele ser una lámpara

halógena de intensidad
graduable
▪ Se enciende y apaga con
un interruptor
▪ En el exterior puede tener
un filtro
Filtro

Interruptor y
graduación de la luz
Lámpara
CONDENSADOR Y DIAFRAGMA

▪ Condensador: concentra
la luz de la lámpara en
un punto de la
preparación

▪ Diafragma o iris
(está dentro del
condensador):si se
cierra mejora el
contraste, pero
empeora la resolución
Cerrar el diafragma hasta que logre un mejor
contratse
LENTES: OBJETIVOS

▪ Están colocados en el
revolver
▪ Tienen un sistema de
amortiguación
▪ Un anillo coloreado indica
los aumentos
▪ Son de 4, 10, 40 y 100
(inmersión) aumentos
LENTES: OBJETIVOS
DISTANCIA ENTRE OBJETIVOS Y MUESTRA
 ACEITE DE INMERSIÓN

• Los hay de baja, media y alta viscosidad

• Su empleo es imprescindible con el objetivo de
inmersión (100x)
ENFOQUE CON UN OBJETIVO DE INMERSIÓN
USO DEL OBJETIVO DE INMERSIÓN
OCULARES: 10x; 15x; 20x
AJUSTE DE LOS OCULARES
TRIOCULARES Y TETRAOCULARES
FACTORES QUE INFLUENCIAN LA CALIDAD Y TAMAÑO DE UNA
IMAGEN

• Distancia focal

• Tamaño de muestra

• Tipo de muestra

• Calidad del microscopio y lentes

• Cantidad de luz sobre la muestra

• Calidad de la muestra
 FORMACIÓN DE LA IMAGEN
FUENTE DE LUZ
Imprescindible para que funcione el microscopio

CONDENSADOR
Concentra los rayos dispersos e ilumina solo la muestra

LENTE OBJETIVO
Amplifica la imagen y forma: IMAGEN REAL E INVERTIDA

LENTE OCULAR
Amplifica la imagen anterior y forma una IMAGEN VIRTUAL

LENTE INTRAOCULAR
Genera la imagen sobre la retina que es la que el cerebro
interpreta