Microscopía confocal de alta

resolución: ConfoScan

Integrantes: Camila Álvarez

Sebastián Campos
Carolina Rojas
Valeria Reyes
Microscopía
● Un microscopio es un aparato o mecanismo que posibilita una mejor visibilidad de los elementos u
objetos de menor tamaño, obteniendo una imagen aumentada de los mismos. La ciencia que se encarga
de la investigación de esta serie de objetos pequeños, empleando este instrumento tiene por nombre
microscopía.
● Etimológicamente hablando la palabra microscopio proviene del griego, que quiere decir “dispositivo o
aparato para observar pequeñas cosas, que no son visibles a simple vista”:

Micro que significa “pequeño”

Scopio alude a “aparato para ver u observar”.

Microscopía Confocal
❏ Microscopio patentado por Minsky en 1957.
❏ El Microscopio confocal emplea una técnica óptica de imagen para incrementar el contraste y/o
reconstruir imágenes tridimensionales utilizando un colimador para eliminar la luz desenfocada.
❏ Su uso es reciente.
❏ Permite realizar cortes ópticos finos a muestras de tejidos de distinto tamaño y realizar
reconstrucciones en 3D a partir de cortes seriados.
❏ Es una técnica no invasiva.
Tipos de Microscopios Confocal

● Slit Scanning Confocal Microscope (SSCM)

● Laser Scanning Confocal Microscope (LSCM)
● Disc Scanning Confocal Microscope (DSCM)
● Tandem Scanning Confocal Microscope ()
Slit Scanning
Confocal
Microscope
Componentes LÁSER
Como fuente luminosa temporal, que
focaliza el haz
Láser de luz en un solo punto de la muestra,
de modo que
barre la muestra plano a plano, creando
Como fuente luminosa temporal, que focaliza el
multitud de
haz de luz en un solo punto de la muestra, de modo
imágenes bidimensionales que un
que barre la muestra plano a plano, creando
ordenador interpreta,
multitud de imágenes bidimensionales que un
generando finalmente una imagen
ordenador interpreta, generando finalmente una
tridimensional del
imagen tridimensional del objeto a estudio.
objeto a estudio.
 Diafragmas:
❏ Limitan la accesibilidad del haz. Se
encuentran situados antes y después de la
lente, permitiendo enfocar la iluminación en
un único punto.
2) Diafragmas:
Limitan la accesibilidad del haz. Se
encuentran situados antes y después de
la lente, permitiendo enfocar la
iluminación en un único punto.
 Detector: Detector:
P
ermite mejorar la calidad de la imagen
❏ Permite mejorar la calidad de la imagen por
por disminución de la sensibilidad de los
disminución de la sensibilidad de los
fotodetectores a intensidades bajas de
fotodetectores a intensidades bajas de
fluorescencia. Sólo la luz que está
fluorescencia. Sólo la luz que está dentro de
dentro de este plano puede ser
este plano puede ser detectada, de modo que
detectada, de modo que la calidad de
la calidad de imagen es mucho mejor que las
imagen es mucho mejor que las de
de campo amplio.
campo amplio.
¿Cómo Funciona?
❏ La clave básica para el enfoque confocal, es el uso de técnicas de filtrado espacial para eliminar la luz
fuera de foco, o el deslumbramiento en especímenes cuyo grosor excede el plano de enfoque inmediato.
Principio Físico
❏ El principio se basa en iluminar al espécimen
punto por punto y eliminar la luz
proveniente de los planos no enfocados y
para ello utiliza Pinholes (colimador de
orificio delimitante), de esta manera se
obtiene una visualización con una resolución
más alta. Se requiere de una fuente de luz
muy potente, y un filtro con un agujero
colocado en el trayecto del rayo de luz.
Comparación
Aplicaciones
❏ En investigaciones en biología celular y biomedicina para medir procesos dinámicos.
❏ Realizar vídeos para capturar secuencias en muy corto tiempo en células vivas y otras aplicaciones.
❏ En procesos celulares para medir actividades enzimáticas, reacciones de oxidación, pH intracelular,
fagocitosis, apoptosis, comunicaciones intercelulares y electrofisiología.
❏ Estudios de ADN y ARN.
❏ Morfología de organoides citoplasmáticos.
❏ Cirugía y otros métodos clínicos.
En oftalmología
● El microscopio confocal al ser un método no invasivo y requerir el mínimo
contacto de la córnea logramos obtener imágenes de sus capas con lo que es
posible:

Observar y analizar el grosor de la córnea, para valoración de cambios dinámicos y

estructurales

Definir cambios estructurales

Útil en la realización de cirugías

diagnósticos de patologías
Córnea
Conclusión
Bibliografía
Revista de ciencias el pinar

Introducción a la microscopia

http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6_7.htm

https://es.scribd.com/doc/26078216/Guia-de-Principios-de-Microscopia-Prof-Cabrera

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-31942016000600015

http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0365-66912005000900003