UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE BIOLOGÍA

CURSO: BIOLOGÍA GENERAL – LABORATORIO
INFORME DE LA PRÁCTICA N°1
TITULO:
Microscopía

ALUMNOS:
 Galván Quispe, Sol Angie Susana 20190498
 Simón Paniagua, Kristel Dayane 20190517
 Segovia Zapata, Susana Elvira 20190516
 Mendoza Rojas, Edith Genoveva 20190502
PROFESORA:
 Yvette Ludeña Hinojosa

FECHA DE ENTREGA: 11 de Abril del 2019

I. Introducción

El microscopio es un instrumento diseñado para hacer posible la observación y el

examen de objetos muy pequeños, de dimensiones inferiores a 0,1 mm. Los cuales
no podrían ser observados a simple vista por el ojo humano. Está constituido
esencialmente por un sistema de lentes, que, dispuestos en forma especial, nos
proporcionan una imagen muy amplificada de un objeto. Su invención se atribuye al
fabricante holandés de lentes, Jansen en el año 1590 y a Galileo en el año 1606,
pero fue Anton Van Leeuwenhoeck uno de los primeros que además de fabricarlo lo
usó con fines biológicos.

El invento del microscopio ha posibilitado una serie de descubrimientos posteriores.

En 1665 Robert Hooke utilizando un microscopio óptico simple, examinó un fino
corte de corteza de corcho y encontró que está compuesto por una masa de diminutas
cámaras, que llamo “células”. En realidad, solo observó paredes celulares, ya que este
tejido está muerto en la madurez y las células ya no tienen contenido
intracitoplasmático.

La mayoría de las células son muy pequeñas por lo que es indispensable el uso del
microscopio para su visualización. Por lo general el poder resolutivo del ojo
humano es de 0,1 mm (100 um), es decir la menor distancia vista o resuelta
(distancia límite de resolución) por el ojo humano es de dos líneas separadas 0,1
mm. de distancia; si hay dos líneas a menos de 0,1 mm. de distancia, veremos una
sola línea. Los microscopios se utilizan para mejorar la resolución.

Existen dos tipos de microscopios: Ópticos y Electrónicos

II. Objetivos
 Identificar correctamente las partes del microscopio óptico compuesto y el
microscopio óptico simple (estereoscopio).
 Practicar el manejo adecuado del microscopio óptico compuesto y el estereoscopio
para comprender sus propiedades y características básicas para hacer una buena
observación.
 Realizar observaciones microscópicas de muestras biológicas
III. Materiales y Métodos

Materiales del alumno por mesa

-2 estiletes -Regla milimetrada de 20 cm

-Láminas portaobjetos -Láminas cubreobjetos
-Goteros -Muestras de agua estancada

Materiales del laboratorio

-Microscopio óptico simple -Microscopio Óptico Compuesto

o estereoscopio
-Placas Petri -Pipetas Pasteur

CARACTERISTICAS DE LA VISIÓN CON EL MICROSCOPIO

Grado de Aumento
Es la magnificación total que sufre la imagen de una muestra debido al efecto de los
lentes oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de veces que
aumenta el lente ocular por el número de veces que aumenta el lente objetivo. Si el
objetivo aumenta la imagen de una muestra 40 veces, esta al pasar por la lente
ocular será nuevamente aumentada. Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificación
total en este caso será: 10Xx40X=400X.Este resultado permite saber cuántas veces
más grande estamos viendo la imagen de un objeto.

Poder de Resolución
Es la capacidad de poder distinguir con nitidez una muestra. El ojo humano tiene un
poder de resolución de 0.1 milímetros, o sea, 100 micras. Este concepto está ligado
al concepto de Distancia Limite de Resolución (D.L.R) definido como la distancia
mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. El microscopio
óptico tiene un poder de resolución de 0,2 micras o 200 nanómetros o 2000
Armstrong, mejorando en 500 veces la visión del ojo humano. La distancia límite de
resolución de un microscopio óptico compuesto depende de la longitud de onda de
la fuente luminosa y de la apertura numérica (propiedad óptica de la lente). Puede
ser calculada mediante la siguiente fórmula.

D.L.R =(O,61λ) / A.N.

λ=Longitud de onda de la fuente luminosa
A.N=Apertura numérica del lente
D.L.R= Distancia límite de resolución

Existe una correspondencia entre el aumento de un objeto y su apertura numérica,

de tal modo que las lentes con mayores aumentos generalmente tendrán mayores
aperturas numéricas. El poder de resolución es quizá la característica más
importante de un buen microscopio ya que de nada sirve una imagen muy grande
del objeto, si esta se ve borrosa y no puede distinguirse en sus detalles.

Distancia de Trabajo
Es la distancia que existe entre el objeto en observación y el lente objetivo. Esta
distancia variara según el aumento del lente objetivo con el que te trabaje. Es
inversamente proporcional el grado aumento; es decir, cuanto mayor sea el aumento
del lente objetivo menor será la distancia de trabajo. Cuando se trabaje con un lente
de inmersión entre el lente objetivo y la preparación debido a que el índice de
refracción para este tipo de lente es la del aceite y no la del aire. Esto permite
obtener una imagen de gran tamaño y al mismo tiempo de gran nitidez.

MANEJO DEL MICROSCOPIO

 Colocar el microscopio sobre la mesa de trabajo

 Identificar y ubicar las partes mecánicas, ópticas y de iluminación del
microscopio óptico compuesto de acuerdo a la descripción de su manual.
 Localizar el sistema de iluminación situado por debajo de la platina y
verificar la posición del condensador, del diafragma y de la luz incorporada
o espejo.
Establecer sus características y diferencias
 Observar el lente ocular y establecer sus características
 Localizar los objetivos y verificar sus características

Iluminación

 Verificar que los lentes y la fuente de luz incorporada o espejo estén

completamente limpios y que el diafragma del condensador este abierto.
  Colocar los lentes objetivos en su posición normal para la visualización de
las muestras, subir el condensador al tope si es necesario con mayor cantidad
de luz o bajarlo si es necesario menor cantidad de luz.
Enfoque
 Colocar la lámina portaobjetos en la platina, sujetada por las pinzas
 Hacer coincidir la muestra con la abertura de la platina y el lente objetivo
 Coloque su vista sobre el ocular y desplace el tornillo macro métrico hasta
que aparezca la imagen.
 Con el tornillo micrométrico realice movimientos finos hasta que vea con
nitidez la imagen.

OBSERVACIÓN DE MUESTRAS EN EL MICROSCOPIO

Muestras Fijadas en Láminas Portaobjetos (Preparados en seco)

Son aquellos en los cuales la muestra se encuentra fija a la lámina portaobjetos,

pudiendo llevar laminilla cubre objeto o no. La observación de estos preparados se
hace generalmente con el objetivo de inmersión, debiéndose previamente colocar
una gota de aceite de cedro. Estos preparados también pueden ser observados por
los objetivos a seco.

Observación Directa de Muestras (Preparados en fresco)

Son aquellos preparados en los que la muestra no se encuentra fija a la lámina

portaobjeto si no que está sumergida en una sustancia liquida y generalmente se
utiliza una laminilla cubre objeto para la observación.

Observación de Muestras
Para observar las muestras revisar los pasos indicados en el manejo del microscopio
y proceder a enfocar las suyas, empezando con el objetivo de menor aumento
colocar la lámina con los preparados en fresco o en seco, acercar la platina hasta ver
con claridad, luego observar las características del objeto. Mientras observar la
muestra operar el tornillo micrométrico, abrir o cerrar el diafragma hasta observar
con claridad, de igual manera suba y baje el condensador. Describa lo que observa.
IV. Hipótesis

Mediante el buen uso del microscopio óptico compuesto y el estereoscopio se puede

lograr una buena observación de muestras biológicas, además comprender las
propiedades y características básicas de estos instrumentos.

V. Resultados y Discusión
Sistemas Partes Función
ÓPTICO Lente ocular Amplia la imagen del
objeto
Lente objetivo Amplia la imagen de la
muestra, se sitúa cerca de
ésta.
ILUMINACIÓN Fuente de luz Envía los rayos luminosos
o hacia el condensador
lámpara
Diafragma Regula la cantidad de luz
que entra en el
condensador.
Condensador Sistema de lentes que
concentra los rayos
luminosos sobre la
preparación.
Tubo ocular Contiene en su parte
superior al lente ocular
Revólver Permite cambiar de objetivo
al girar
Platina Lugar donde se coloca la
muestra

MECÁNICO SOPORTE

Brazo

Base

TORNILLOS DE Consigue le enfoque rápido

ENFOQUE

Macrometrico
Micrométrico Logra el enfoque nítido
Partes del microscopio Óptico Compuesto

Completar el siguiente cuadro para hallar el poder de resolución de cada uno de los
objetivos del microscopio, considerando que la longitud de onda de la luz blanca es de 5500
A°.
OCULAR OBJETIVO G.A D.L.R D.T
Menor 4X 40X 3,355 µm 26,2 mm

Mediano 10X 100X 1,345 µm 7,8 mm

10X
Mayor 40X 400x 0,516 µm 0,31 mm

X= Aumentos D.L.R= Distancia límite de resolución

G. A= Grado de aumento D. T=Distancia de trabajo

Observación de muestras

Estereoscopio Microscopio óptico compuesto

Muestra: Cucaracha Muestra: Agua estancada
Observación: partes de la cucaracha Observación: Protozoarios
Grado de aumento: Objetivo: 40X
Grado de aumento:400X
VI. Conclusiones

-Logramos identificar correctamente las partes del microscopio óptico compuesto y

del estereoscopio, además pudimos realizar un manejo adecuado de ambos
microscopios lo que nos sirvió para comprender sus propiedades y características
básicas.
-También pudimos realizar de una manera adecuada observaciones microscópicas
de muestras biológicas.

VII. Cuestionario
1. ¿Qué es la apertura numérica?

En un sistema óptico, la apertura numérica es un

número adimensional caracterizado por el rango de ángulos para los cuales el
sistema acepta luz. En un objetivo de microscopio, la apertura numérica se define
como la medida de su capacidad para colectar la luz y poder examinar los detalles
del espécimen.

2. ¿A cuántos micrómetros, Armstrong, nanómetros equivalen 0,2 milímetros?

0.2 milímetros-------200 micrómetros

0.2 milímetros-------2000000 Armstrong

0.2 milímetros-------200000 nanómetros

3. ¿Qué lente objetivo utilizaría para enfocar el preparado y obtener un mayor campo
visual?

El lente objetivo que se usaría sería el de 100x porque debido a que usa un aceite
de inmersión este le permite mayor nitidez y una mayor resolución del
microscopio.
4. ¿Qué tipo de imagen se obtiene con el microscopio estereoscopio?

Al observar con un microscopio estereoscopio obtenemos una imagen virtual,

directa y tridimensional. Es apropiado para observar objetos o muestras opacas y
realizar disecciones en organismos pequeños, debido a que en este tipo de
microscopio se puede manipular la muestra mientras se observa.

5. ¿Cuál es la diferencia entre aumento y poder de resolución?

La diferencia es que el aumento de un instrumento óptico permite conocer hasta cuantas

veces más grande se puede observar un objeto dado, mientras que el poder de
resolución hace referencia a la capacidad del instrumento óptico para diferenciar dos
puntos entre sí .Es decir, un instrumento puede aumentar una imagen sin que en ella se
pueda reconocer figura alguna, pero si a ello se le agrega un cierto poder de resolución, el
instrumento además de aumentarte un objeto permite verlo con muchas nitidez y claridad.

6. Describa los diferentes tipos de microscopio óptico y electrónico.

Microscopios Ópticos
• Microscopio Óptico Simple o Estereoscopio: Este tipo de microscopio es
binocular y posee un lente convergente. Sólo sirve para exámenes superficiales
como disecciones de insectos, observación de colonias, etc.
• Microscopio Óptico Compuesto : Este microscopio produce una imagen ampliada
de la muestra que se está observando por medio de dos sistemas ópticos, hechos
cada uno de una o más lentes.
• Microscopio de Campo Luminoso
• Microscopio de Campo Oscuro
• Microscopio de Contraste en Fase
• Microscopio de Luz Polarizada
• Microscopio de Interferencia
• Microscopio de Luz Ultravioleta

Microscopios Electrónicos
• Microscopio Electrónico de Transmisión: Permite la observación de muestra en
cortes ultra finos. Este microscopio dirige el haz de electrones hacia el objeto que se
desea aumentar. Para utilizarlo debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores
de un par de miles de angstroms.
• Microscopio Electrónico de Barrido: Crea una imagen ampliada de la superficie de
un objeto. No es necesario cortar el objeto en capas para observarlo, sino que puede
 colocarse en el microscopio con muy pocos preparativos. Explora la superficie de la
imagen punto por punto.
• Microscopio Electrónico de Barrido y Transmisión: Combina los elementos de los
dos microscopios previamente descritos, y puede mostrar los átomos individuales de
un objeto.
• Micro analizador de Sonda de Electrones: un microscopio electrónico que cuenta
con un analizador de espectro de rayos X, puede analizar los rayos X de alta energía
que produce el objeto al ser bombardeado con electrones.

7. Enumere ejemplos de muestras que observaría en un microscopio óptico compuesto

y en un microscopio óptico simple

Microscopio óptico compuesto Microscopio óptico simple

1. Linfocito: con todos los 1.Moscas disecadas
objetivos
2. Mitocondria: con objetivos 2.Helechos
100X
3. Grano de polen: a partir de 10X 3.Cara de mariposa
4. Moho del pan: a partir de 4X 4.Flores
VIII. Bibliografía

 Brock, T. (1991). Biología de los microorganismos. Barcelona, España 956

pp: Edic. Sexta. Edit. Omega S.A.
 Cortez, R., Chamochumbi, M. y Olivia, N. (1986). Guía de Practicas de
laboratorio. Curso Biología I. Facultad de Ciencias Biológicas. Dpto.
Ciencias Biológicas Universidad Nacional de Trujillo 97 pp.
 Guía de trabajos Prácticos. Curso Biología General. Departamento de
Biología. Universidad Nacional Agraria la Molina.
 Pelckzar, M., R. Reid, y E.C. Chan. (1984) .Elementos de Microbiología La
Colina S.A. España.253 pp. Edic. Primera. Edit