UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

INFORME DE PRACTICA 8

EXTRACCION ETANOLICA DE ACEITES VEGETALES

Alumno: Joel Gamonal Rimarachin

Código: 164003C

Curso: Biotecnología

Docente: Mcblgo. MSc. Jhon W. García López

Febrero; 2022
 Extracción etanolica de aceites vegetales

I. MARCO TEÓRICO

El aceite vegetal es un compuesto orgánico obtenido a partir de semillas

u otras partes de las plantas en cuyos tejidos se acumula como fuente de
energía. La composición química de los aceites vegetales corresponde en la
mayoría de los casos a una mezcla de 95% de triglicéridos (triésteres
formados por la reacción de los ácidos grasos) y 5% de ácidos grasos libres,
esteroles, ceras y otros componentes minoritarios. Los aceites son ésteres
formados por la condensación (unión) de ácidos grasos con glycerol (Tabio
et al., 2017).

El llantén
Tiene propiedades antiinflamatorias, anti bacterianas, astringentes,
antihemorrágicas; también como cicatrizante de heridas, tanto internas como
externas. Dentro de su composición se encuentra un metabolito secundario
que se denomina aucubigemina, derivado de la aucubina, es el compuesto
activo de mayor relevancia y posiblemente sea el responsable de la actividad
antibacteriana de la planta. P. major cuenta, también, con sustancias como:
ácido salicílico, sales minerales de potasio y zinc. Además, rutina, alcaloides
(noscapida), esencias, resinas, esteroides, bases aminadas y compuestos
azufrados. Igualmente, posee ácidos-fenoles y una lactona (loliolida) o
digiprolactana, entre otros. Tambien contiene diversos flavonoides, tales
como apigenina, luteolina y escutellarina (Ramirez et al., 2016).

El extracto de Plantago major es efectivo contra Bacillus subtilis,

Staphylococcus aureus, Candida albicans, Candida tropicalis y Escherichia
coli: y el extracto acuoso en frío, los extractos líquidos y el jugo de las hojas
de Plantago lanceolata tiene efecto bacteriostático y bactericida mientras las
infusiones y la decocción no tienen ese efecto. El efecto antibacteriano es
provocado por el aglicón de la aucubina (aucubigenina) liberado por una ß-
glucosidasa (Cargua, 2018).

Las hojas frescas contienen las propiedades desinfectantes y favorecer la

cicatrización. Una hoja fresca, una vez lavada, al ser aplicada sobre una
herida, ayuda a detener el flujo de la sangre, cicatrizarla y prevenir el riesgo
de infección. Cuenta también con la presencia de mucílagos, pectinas,
flavonoides, taninos, un glucósido cromogénico iridoide denominado
aucubósido (aucubina) y otro glucósido llamado catalpol. Tanto las hojas
como las flores y el tallo poseen el glucósido aucubina. La aucubigenina es
el principio activo de mayor relevancia (Acosta et al., 2019).
 Extracción por solvente
La extracción de muestras sólidas con solventes, generalmente conocida
como extracción sólido-líquido o lixiviación, es un método muy utilizado en
la separación de compuestos antioxidantes a partir de residuos sólidos. Estos
residuos requieren la extracción con solventes convencionales y la posterior
eliminación de estos para obtener un extracto concentrado. Los solventes
más habituales son agua acidificada, etanol, metanol, isopropanol, hexano,
ciclohexano, tolueno, xileno, ligroína, éter etílico, éter isopropílico, acetato
de etilo, acetona, cloroformo (Tabio et al., 2017).
El etanol permite la obtención de aceites y harinas de mejor calidad ya
que reduce los niveles de ácidos grasos libres, además permite la eliminación
de factores antinutricionales como el gosipol, las aflatoxinas y el ácido
clorogénico. Cuando se utilizan solventes no polares, como n-hexano, para
remover el aceite restante que queda en la torta o expeller, va quedando,
aproximadamente, un 1-2% del aceite total de la semilla original. Este tipo
de extracción utiliza un solvente que difunde a través de la matriz semi-
permeable. Este proceso de extracción es una combinación de varios
mecanismos que incluyen lixiviación, lavado, difusión y diálisis. La
lixiviación y el lavado retiran el aceite libre y de fácil acceso para el
solvente. La difusión y la diálisis son procesos más lentos para extraer el
aceite que no está fácilmente accesible (Rodriguez, 2019).

Factores que influyen en el proceso de extracción:

Los factores que influyen en el proceso de extracción son: Tiempo de
extracción, Cantidad de solvente, Temperatura del solvente, Tipo de solvente
y Tamaño de partícula. El hexano es el solvente más utilizado en el proceso
de extracción de aceite por su disponibilidad, así como su no reactividad con
el óleo, y su alta capacidad de disolver ácidos grasos a temperaturas
relativamente bajas. Sin embargo, el etanol podría ser un solvente alternativo
debido a su baja toxicidad y su carácter removable. El tamaño de partícula es
muy importante ya que cuanto más pequeñas y homogéneas sean estas,
mayor será la superficie interfacial y más se favorecerá la operación de
transferencia de masa. Sin embargo, tamaños excesivamente pequeños
pueden hacer que las partículas se compacten dificultando la extracción
(Tabio et al., 2017; Tabio et al., 2018).

II. OBJETIVO
El estudiante será capaz de conocer el protocolo experimental de extraer
el aceite vegetal.

III. MATERIALES
➢ Placas petri
 ➢ Micro Pipetas de 100 y 1000 uL
➢ Bagueta
➢ Beaker de 50ml, 100 ml y 250 ml
➢ Embudo
➢ Fiolas de 10ml y 25 ml
➢ Matraces de 250 ml
➢ Mortero
➢ Frasco ámbar
➢ Molino triturador
➢ Papel filtro
➢ Asas de siembra
➢ Hisopos estériles

EQUIPOS:
➢ Balanza Analítica Sartorious
➢ Cabina de flujo laminar
➢ Horno esterilizador
➢ Estufa
➢ Autoclave
➢ Destilador de agua
➢ Refrigeradora

IV. PROCEDIMIENTO

a) Recolección y preparación de la muestra vegetal del aceiteesencial de

las hojas de la muestra vegetal
Selección y lavado de las hojas Se realizará una selección y separación
solo de las hojas de la planta, luego se limpiarán para el secado. Las
hojas limpias se secarán mediante una deshidratación natural,
realizándola a temperatura ambiente por 4 días.
b) Obtención del aceite esencial Se trabajarán con las hojas que
presenten características organolépticas adecuadas.
El método de extracción por Clevenger se inicia recolectando las hojas
verdes se lavan con agua destilada eliminando impurezas y luego
dejando secar en el laboratorio de la universidad por 14 días, una vez
pasado el tiempo de secado se corta en pequeños trozos las hojas y se
coloca 150 gramos de estas hojas en el equipo de extracción Clevenger y
se adiciona 1.5 L de agua destilada como solvente en punto de ebullición
bajo para evitar la degradación de la muestra se procede a la extracción
del aceite esencial.
c) Almacenamiento
El aceite colectado se guardó en frascos de color ámbar debidamente
rotulados, debido a que son inestables fotoquimicamente y se conservó
en refrigeración a 4°C hasta el momento de su utilización.
V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Luego de una semana de estar expuesto las partículas de hoja de llantén en

etanol, se evaporó este quedando el extracto verde; se filtró y se colocó en un
frasco ambar:

Tabio y colaboradores (2018) en su trabajo que tuvieron como

objetivo determinar las condiciones de operación del proceso de
extracción del aceite contenido en las semillas de Moringa oleifera
Lam. variedad Plain de origen cubano utilizando etanol como solvente,
indican que los factores temperatura de extracción y relación soluto-
solvente influyeron de manera significativa en la variable respuesta,
teniendo asociados valores de probabilidad menores que 0,05. Y la mejor
condición para la extracción de aceite se logró operando a una relación
soluto-solvente 1:6 y a una temperatura de extracción de 65 °C.

A diferencia de nuestra practica en el tiempo de macerado Ramirez et

al. (2018) con el objetivo de caracterizar fitoquímicamente los extractos
de nuestra especie autóctona de llantén, Plantago tomentosa Lam.;
maceraron durante 48 horas, dando como resultado que el rendimiento de
los extractos etanólicos de invierno fueron del 6,7% PA y 5,3% R y en
primavera PA 1,8% y R 5,6%. Los extractos de las PA de ambos
períodos estacionarios presentaron: taninos, azúcares, aminoácidos,
esteroides y en menor medida alcaloides, fenoles y saponinas; y los
extractos correspondientes a las raíces han reflejado alta presencia de
azúcares.
 Cargua (2018) con el objetivo de evaluar la actividad antimicrobiana
in vitro del extracto etanólico y aceite esencial de Plantago major sobre
cepas de Candida albicans mediante la técnica de difusión de disco en
agar; encontraron que los extractos etanólicos de P. major presentaron
actividad antimicrobiana contra C. albicans (100% HI) y los extractos
etanólicos al 25%, 50% y alcohol absoluto no poseen actividad
antimicrobiana. Se estableció que la actividad antifúngico aumenta de
forma proporcional a la concentración del extracto. Concluyendo que
existe un efecto bactericida mostrado por el extracto bruto etanólico de
Plantago major sobre Candida albicans.
Acosta et al. (2019) en su estudio el objetivo fue determinar el efecto
inhibitorio in vitro del extracto etanólico de Plantago major “llantén”
sobre cepas de Staphylococcus aureus y Streptococcus β-hemolíticos.
Utilizaron el método de difusión para el extracto etanólico, para la
formación de halos de inhibición y el método de macrodilución en Caldo
para determinar la CMI. Encontraron que P. major es sensible para
Staphylococcus aureus con un promedio del halo de inhibición 14,64 mm
y un promedio de 150 mg/ml respecto a la CMI. Mientras que
Streptococcus β hemolíticos no presentó sensibilidad.
Según Usaquén y Zafra (2018); quienes tuvieron como objetivo en su
trabajo evaluar el proceso de extracción de semilla de mango a nivel
laboratorio; el contacto directo entre la semilla y el solvente dificultan el
proceso de separación del producto, es por eso que las pruebas de
extracción se llevan a cabo con una barrera física que no permita que se
genere una mezcla entre las materias primas, pero que a la vez permita
que el solvente la traspase; concordando en que se emplea papel filtro.

El efecto de la humedad sobre la estructura del sólido y su interacción

con el solvente se aprecia en el trabajo de Rodriguez (2019) que tuvo
como objetivo estudiar el uso de enzimas en el proceso extractivo de
aceite de collets de girasol, utilizando solventes no convencionales y la
obtención de otros derivados a escala laboratorio, promoviendo el
desarrollo de tecnologías alternativas; allí se señala que a 7 % de
humedad el etanol tiene una capacidad similar a la del n-hexano para
extraer aceite, con una eficiencia de 98,51 %. En cambio, en el rango de
mayores humedades no se observan diferencias significativas y la
extracción cae a valores de alrededor del 85%.

Zubair et al. (2018) tuvieron como objetivo revelar los posibles

efectos antiinflamatorios de los extractos de hojas de Plantago major en
las células epiteliales orales in vitro. Prepararon extractos de hojas de P.
major a base de agua y etanol a partir de material vegetal liofilizado y se
 probaron in vitro utilizando la línea de células epiteliales orales H400. La
actividad antiinflamatoria de P. major se probó contra el lipopolisacárido
(LPS) de E. coli usando el ensayo del factor nuclear kappa beta (NF-kB).
Tanto los extractos a base de agua como los de etanol, así como una
combinación de los dos extractos, mostraron actividad
antiinflamatoria. Una concentración de 0,1 mg/mL (sobre la base del
peso seco) produjo los mejores resultados para todos los extractos. Sus
resultados muestran que los efectos sinérgicos tanto de los polifenoles
como de los compuestos hidrosolubles (posiblemente polisacáridos) son
responsables de las actividades antiinflamatorias de P. major .

VI. CONCLUSIÓN

El proceso de extracción de aceite vegetal básicamente requiere de un

solvente (etanol), de un tiempo de evaporación de este y de un tamaño
pequeño de partículas vegetales para tener un excelente resultado de
extracto.

VII. REFERENCIAS

Acosta, J., Verategui, C., Iglesias S., Moreno, M. & Failoc, V. (2019).
Efecto inhibitorio, in vitro del extracto etanólico de Plantago Major
“Llantén” frente a cepas de staphylococcus aureus y streptococcus β-
hemolíticos. MEDICINA NATURISTA 2019; Vol. 13 (2).
Recuperado de:
https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/6985215.pdf

Cargua, R. (2018). ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DEL EXTRACTO

ALCOHÓLICO Y ACEITE ESENCIAL DE Plantago major
(LLANTÉN) FRENTE A Candida albicans.. UNIVERSIDAD
REGIONAL AUTÓNOMA DE LOS ANDES UNIANDES. Ecuador.
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 Ramirez, L, Britos, Torres & Karaben. (2018). Estudio Fitoquímico de
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Tabio, D., Espinos, C., Díaz, Y., Rondón, M., Fernandez, E. & Piloto, R.
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