CUANTIFICACIÓN DE METANOL EN WHISKY POR CROMATOGRAFÍA DE GASES

Oscar Daniel Arredondo Gañan

arredondo.oscar@correounivalle.edu.co
201960551 – 2131
Miguel Angel Londoño
miguel.angel.londono@correounivalle.edu.co
201867197 – 2131
Esteban Lopez Meneses
esteban.meneses@correounivalle.edu.co
201960536 – 2131
Departamento de Química, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Universidad del Valle sede Yumbo, Colombia.

Laboratorio De Análisis Industriales

Docente: Harold Humberto Diaz
Fecha de realización: 21 de mayo de 2023.
Fecha de entrega: 25 de mayo de 2023.

PROPÓSITO
Determinar cuantitativamente la cantidad de
metanol presente en una muestra de whisky
artesanal y validar el método analítico.
ALCANCE
Cuantificar el contenido de metanol y en qué
proporción se encuentra.
FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
El whisky es una bebida alcohólica que muchas
veces llega a ser muy exclusiva, por tanto, es muy
importante conocer la cantidad y proporción de
congéneres presentes en la muestra, en este caso el
interés de estudio es saber la cantidad de metanol
presente en dicha muestra y evaluar si cumple con
las especificaciones contempladas a la norma NTC
917:1996.
HIPÓTESIS
Se cree que la mayoría de las muestras de whisky
cumplen con la norma técnica colombiana NTC
917:1996 que regula las bebidas alcohólicas. Whisky
e indica la cantidad máxima permitida de metanol
en alcohol anhidro cuyo valor es 300 ppm.
OBJETIVOS
General
 Cuantificar metanol en una muestra de
whisky por cromatografía de gases.
 Validar un método analítico sencillo y
práctico.
Específicos
 Confirmar o rechazar experimentalmente el
cumplimiento de especificaciones de
metanol según la norma NTC 917:1996.
 Establecer condiciones de trabajo en
cromatografía de gases para la
cuantificación de metanol en una bebida
alcohólica de buena calidad (Whisky).
IINTRODUCCIÓN
Las bebidas alcohólicas, desde el punto de vista
histórico, son unos de los productos derivados de
matrices alimentarias más antiguos. Este producto,
era principalmente usado para rituales
ceremoniales y actualmente, se encuentra
vinculado a actividades sociales. Por ello, se ha
convertido en una de las bebidas más consumidas

1
en el mundo y está asociada principalmente a daños
en la salud.
El Whisky nació en Irlanda y su elaboración se
extendió rápidamente en Escocia. Es un destilado
de cereal envejecido en barricas de madera. Los
pioneros en destilarlo y formalizar el proceso de
elaboración fueron monjes, de ellos pasó a los
campesinos que instalaron infinidad de alambiques
caseros. Actualmente, el whisky es el más preciado
en el mercado de aguardientes. Entre los licores que
se importan en Colombia, el whisky es lo que más
toman los colombianos y se identifica como un
mercado que está en crecimiento. De hecho, para
2020 se espera que aumente un 53% frente al año
inmediatamente anterior. Frente a este hecho, nos
propusimos realizar un método analítico que
determinara un alcohol dañino para la salud como
lo es el metanol, ya que este por medio del proceso
de la destilación del whisky se puede llegar a Figura 1. Reacción de la fermentación
obtener.
La levadura del hongo lleva a cabo un proceso
Preparación del whisky químico natural conocido como fermentación. La
fermentación es una serie de reacciones
La preparación de un whisky se hace por medio de
bioquímicas que llevan a cabo algunos organismos,
cereales de diferentes especies (la cebada, el trigo,
en ausencia de oxígeno, para obtener energía a
el centeno y el maíz), la sustancia más importante
partir de glucosa. El producto final de la
del cereal es el azúcar ya que va a ser el alimento de
fermentación, generalmente una molécula orgánica
los hongos encargados de la fermentación. Se
pequeña. Puede ser ácido acético (vinagre), ácido
condicionan los cereales en temperatura y
láctico (yogures, quesos, o leche agria) o etanol
humedad adecuadas para que comience el proceso
(alcohol etílico).
de germinación, de este modo, las enzimas del
cereal van a convertir el almidón que almacenan en En unas grandes cubas se mezclan litros y litros de
glucosa para alimentar a la fruta planta. la mezcla de agua con azúcar, se añaden unos pocos
kilos de levadura y se le deja al hongo hacer su
Después de la germinación interrumpida y el secado
trabajo durante 50-60 horas. Una vez pasado este
y triturado de los cereales tenemos una especie de
tiempo se tiene una mezcla con un contenido de
muesli con un alto contenido en azúcar. Se necesita
alcohol de entre un 7 y un 10%.
extraer el muesli y para ello, se agita malta seca y
triturada en un gran recipiente con agua muy En un alambique los productos más volátiles van a
caliente durante varias horas. Luego se filtra el empezar a evaporarse y a salir por la chimenea.
líquido que ahora es una disolución muy Éstos serán conducidos por toda la fontanería hasta
concentrada de azúcar en agua, pasa a las cubas de llegar al serpentín donde, desde fuera, se van a
fermentación. enfriar para que condensen. La mezcla que
condense va a ser, en cada destilación sucesiva, más
concentrada en alcohol. Para fabricar whisky se
llevan a cabo dos destilaciones para obtener hasta
un 65% de alcohol.

2
El whiskey tiene que pasar al menos 3 años
envejeciendo en un barril, es en este proceso de
envejecimiento cuando el whisky adquiere el color y
también se evapora un poco de alcohol. Como el
whisky está mucho tiempo en los barriles, del 65%
de volumen de alcohol, se pasa a un whisky final de
un 55% de alcohol. Antes de embotellarlo, el whisky
se diluye con una cantidad pequeña de agua que
baja la graduación hasta aproximadamente un 45-
48%. Además, en este paso, el experto en aromas
de la destilería puede decidir mezclar proporciones
distintas de whisky de varios barriles para obtener
el sabor ideal. En esta validación se presentarán los
materiales, la linealidad del sistema, los
tratamientos de la muestra, condiciones del
cromatógrafo de gases, y las diferentes pruebas
estadísticas que se usarán para verificar la veracidad
del método presentado.
MARCO TEÓRICO
Validación corresponde al proceso mediante el cual
se logran postular las características del desempeño
y las limitaciones del método utilizado, así como la
identificación de los efectos que me puedan
modificar dichas características, lo cual se ha de
evidenciar de forma objetiva. Cuando se realiza una
validación de un método por parte del laboratorio,
lo que se busca es determinar con fundamentos
estadísticos que el método es efectivo para los fines
previos.[1]
El etanol y el agua son los componentes más
abundantes de bebidas alcohólicas, sin embargo,
hay una pequeña fracción de compuestos volátiles
entre ellos el metanol, analito de interés para
nuestro estudio, llamados congéneres, que se
sintetizan a través de una serie de mecanismos
biológicos, como el metabolismo de la levadura y
reacciones enzimáticas.[2]
1-hexanol, metanol, acetaldehído, acetal (o 1,1-
dietoxietano), acetato de etilo, formiato de etilo,
lactato de etilo y algunos alcoholes superiores (2-
metilbutan-1-ol, 2-metilpropan-1-ol, 2-feniletanol,
3-metilbutan-1-ol, butan-1-ol, butan-2-ol y propan-
1-ol) representan el principal contenido de
congéneres.
La cromatografía es la separación de una mezcla de
compuestos (solutos) en componentes individuales
para facilitar la identificación (determinación
cualitativa) y la medición (determinación
cuantitativa) de cada componente, esta es una de
las técnicas cromatográficas disponibles y resulta
adecuada para analizar entre el 10 y el 20% de los
compuestos conocidos. [2]
Figura 2: Un diagrama simplificado de un
cromatógrafo de gases.
PARAMETROS ANALITICOS
La linealidad de un método analítico es su capacidad
para obtener resultados de prueba que sean
proporcionales ya sea directamente, o por medio de
una transformación matemática bien definida, a la
concentración de analito en muestras en un
intervalo dado. La evaluación de linealidad se debe
utilizar un mínimo de 5 puntos de datos para una
evaluación adecuada; Consideraciones de linealidad
e intervalo para el protocolo de validación los
criterios de aceptación deben equilibrar el rigor
científico con las limitaciones prácticas, valor R 2
mínimo: ≥ 0,99 hasta ≥ 0,9999, la intersección-y
estadísticamente no significativa, dentro del n% de
la respuesta de la solución estándar.
Centroide: Para el centroide de la curva de
calibración se tuvo en cuenta el rango lineal del
sistema.
Exactitud: Para la exactitud del método se evalúa
con un estándar de referencia de acetonitrilo de
composición conocida con el propósito de
determinar el contenido de metanol presente en la
muestra problema mediante la determinación del
promedio y desviación estándar.
Precisión: Para garantizar la repetibilidad se realiza
seis veces el análisis de un estándar de acetonitrilo.
3
Límite de Cuantificación y Detección: Estos
parámetros se evalúan teniendo en cuenta los
resultados obtenidos a través de la pendiente y su
desviación estándar obtenidos previamente de la
linealidad del sistema.
FUNDAMENTO ESTADÍSTICO
Mínimos Cuadrados: El método de mínimos
Centroide: Los puntos cercanos a este valor son
cuadrados supone una relación lineal real entre la
determinados con más certidumbre que aquellos
respuesta (Y) y la variable independiente X. Además,
alejados del centroide, por lo tanto, mediciones
se asume que no hay errores en los valores de X.
realizadas cerca del centro de la curva darán menos
Cuando hay incertidumbre en los valores X, el
incertidumbre en la concentración del analito que
análisis básico de mínimos cuadrados puede no dar
aquellas realizadas en los extremos.
como resultado la mejor línea recta. En su lugar,
debe utilizarse un análisis de correlación. (Skoog,
2014)

Linealidad: Es la capacidad de un ensayo para

proporcionar resultados que se correlacionan
directamente (o por medio de transformaciones
matemáticas) ajustadas a la concentración de
analito en la muestra dentro de un rango
establecido. Se determina a partir de la
construcción de curvas de calibración, sean de
índole normal o por adición estándar.
Parámetros de calidad que evalúan la linealidad
son:
Desviación estándar de la regresión
Límite de Detección: Existen varias formas de
establecer el límite de detección, algunas asociadas
con la desviación del blanco y otras relacionadas
con las curvas de calibración. Pero en general, este
parámetro está asociado con la cantidad mínima
que da señal sobre la existencia del analito en la
muestra, este valor no necesariamente debe ser
cuantificable.

Límite de Cuantificación: Es la mínima cantidad de

analito en la muestra que se puede cuantificar bajo
las condiciones experimentales, se obtiene de los
resultados de la curva de calibración. A nivel
Coeficiente de correlación.
estadístico se considera que está asociada con diez
𝑟=(𝑆𝑥𝑦√𝑠𝑥𝑥∗𝑠𝑦𝑦) veces la relación de la desviación estándar de la
señal del blanco.
Coeficiente de determinación.

4

Exactitud: La exactitud expresa la proximidad o el
grado de identidad entre el valor analítico obtenido
por una metodología con respecto a la medida, que
es aceptado convencionalmente como valor
verdadero o un valor de referencia y el valor
experimentalmente encontrado.
Se puede determinar con una diferencia o sesgo, o
también con un porcentaje de recuperación.
Precisión: La precisión corresponde al grado de
concordancia entre una serie de mediciones
analíticas obtenidas en igualdad de condiciones a
partir de una misma muestra representativa o de
referencia. La precisión mide el error aleatorio o
indeterminado de un análisis.
Parámetros de calidad de la precisión son:
La desviación estándar relativa.
La desviación estándar relativa de la media.
El coeficiente de variación.
La varianza.
Prueba Anova
Permite determinar si existen diferencias
estadísticamente significativas entre las medias de
tres o más grupos.
Prueba de Fisher
Es el test exacto utilizado cuando se quiere estudiar
si existe asociación entre dos variables cualitativas,
es decir, si las proporciones de una variable son
diferentes dependiendo del valor que adquiera la
otra variable.
METODOLOGÍA
Condiciones y materiales
Tabla 1. Reactivos e instrumentación.
# Materiales e instrumentación
1 Balanza analítica
3 Macro pipeteador
1 Micropipeta de 100-1000 µL
3 Pipeta volumétrica 0,5mL
3 Pipeta volumétrica 1 mL
3 Pipeta volumétrica 2 mL
3 Pipeta volumétrica 3 mL
3 Pipeta volumétrica 5 mL
3 Pipeta volumétrica 10 mL
3 Pipeta volumétrica 20 mL
3 Pipeta volumétrica 25 mL
15 Vaso de precipitado 100 mL
5 Vaso de precipitado 250 mL
5 Vaso de precipitado 50 mL
3 Vaso de precipitados de 1000 mL
10 Matraz aforado 100 mL
23 Matraz aforado 50 mL
1 Agitador magnético
6 Magnetos + saca magneto
5
 1 Equipo de Cromatografía de gases DETECTOR
1 Jeringa para cromatografía de gases Temperatura de
270 °C
3 Canasta detector
3 Frasco lavador grande Ionización de
Detector
3 Escobillón llama
Helio: 15,0
mL/min
Tabla 2. Reactivos químicos Hidrógeno: 40,0
Flujos
Reactivos mL/min
Agua desionizada Aire seco: 400,0
Acetonitrilo mL/min
Metanol grado analítico
Tabla 4. Congéneres posibles de encontrar
Tabla 3. Condiciones cromatográficas
Congéneres Punto de ebullición
INYECTOR (°C)
Tipo de inyección Fraccionada Etanal 20,2
Volumen de inyección 1 µL Acetona 56,5
Temperatura 250,0 °C Acetato de sodio 77,1
Helio (gas
2-propanol 82,0
portador) 2,43
Flujo 1-propanol 97,1
mL/min /
Nitrógeno isobutanol 108,0
Flujo total de la 1-butanol 117,7
126,8 mL/min
columna Ácido acético 117,9
Presión 84,8 KPa 2-metil-1-butanol 125,7
COLUMNA 1-pentanol 131,2
Tipo Carbo WAX
3-metil-1-butanol 131,2
Máxima temperatura 300,0 °C
Lactato de etilo 151
Longitud de la columna 30,0 m
Diámetro interno de la Furfural 161,7
0,32 mm Octanoato de etilo 206
columna
HORNO DE LA COLUMNA Decanato de etilo 241
Inicial de 38°C
que se
mantiene por Métodos analíticos por desarrollar
un minuto con La metodología analítica empleada para cuantificar
una rampa de metanol presente en whisky consiste en realizar la
temperatura de cuantificada por medio de técnicas cromatográficas,
Temperatura de la
0,5 °C/min teniendo en cuenta los parámetros estadísticos
columna
hasta alcanzar como la exactitud y precisión de los métodos
una empleados con la finalidad de obtener resultados
temperatura de confiables.
40 °C, que se
mantiene por Al analizar metanol en bebidas alcohólicas por
un minuto cromatografía de gases (CG), es necesario realizar
un tratamiento adecuado a la muestra, del estándar

6
interno y el patrón de metanol implicados en el 200 2 1 50
sistema cromatográfico, para ello es necesario 400 4 1 50
proceder y seguir las recomendaciones que se
600 6 1 50
describen a continuación con el objetivo de
establecer las condiciones óptimas para el análisis, 800 8 1 50
además de evitar en gran medida el detrimento e 1000 10 1 50
integridad del equipo. Concentraciónes altas (ppm)
1050 10,5 1 50
1100 11 1 50
Análisis por cromatografía de gases (CG) 1150 11,5 1 50
Linealidad y rango del sistema
Determinar los rangos de concentraciones en donde Posteriormente, el contenido de metanol de cada
hay linealidad. Dentro del rango de concentraciones patrón y la muestra se determinará de acuerdo con
se proyectan tres líneas de calibración: línea de el área del pico de metanol y acetonitrilo obtenido
bajas, medias y altas concentraciones. en GC. Se grafica la relación de áreas del estándar
interno (Acetonitrilo) y el metanol analítico vs la
Límite de detección (LD) y de cuantificación (LC) del concentración y se determina experimentalmente el
instrumento, el cual se calcula tanto en señal como rango más lineal de la curva y que permita
en concentración. determinar la concentración de la muestra. A dicho
Límite de detección (LD) y de cuantificación (LC) del rango escogido como lineal se le debe realizar la
método, el cual solamente se calcula en prueba de hipótesis T para pendiente, intercepto y
concentración. coeficiente.

Esto se realiza en rango bajo, rango medio y rango

alto, dependiendo de la curva de calibración. LINEALIDAD DEL MÉTODO
Se realiza una curva de calibración por patrón Con la concentración de la muestra ya determinada
interno, la cual se realizará en 3 rangos de se prepara una curva de calibración similar a la
concentración (ppm) como se ilustra en la tabla 5 utilizada para la linealidad del sistema, pero
partiendo de una disolución de metanol grado HPLC adicionando una cantidad determinada de muestra
con una concentración de 5000 ppm, se realizará a cada patrón que me permita tener una
cada estándar por triplicado donde cada analista del concentración cercana al centroide de la curva, de
grupo de tres realizará uno. Esto ayudará a observar manera separada se prepara un volumen igual al de
la precisión por analista en la elaboración de la los patrones pero que contenga solo la muestra y mi
curva. estándar interno para posteriormente el área de la
Tabla 5. Curva de calibración muestra más estándar interno restarla a las áreas
de cada patrón de la curva, posteriormente se
Alíc. de calcula un porcentaje de recuperación. Esto se
Sln Alíc. Acet. Vol. final realiza por triplicado. Con el porcentaje de
Conc. (ppm)
MetOH (mL) (mL) recuperación se grafica y se determina
(mL) experimentalmente la linealidad del método.
Concentraciónes bajas (ppm)
50 0,5 1 50
100 1 1 50 EXACTITUD DEL MÉTODO
150 1,5 1 50 Este criterio se realiza simultáneamente con la
Concentraciónes medias (ppm) linealidad del método ya que se emplean

7
porcentajes de recuperación, adicionalmente se
debe realizar una prueba de hipótesis T para
determinar si el valor medio hallado y el valor
considerado verdadero no difieren
significativamente para un grado de probabilidad
determinado.
Curva de estándar interno
Se usa para la calibración trazando la proporción del
analito-señal a la señal estándar interna en función
de la concentración de analito de los estándares.
Esto se hace para corregir la pérdida de analito
durante la preparación de la muestra o la entrada
de la muestra. El patrón interno debe ser similar,
pero no idéntico, a las especies químicas de interés
en las muestras, ya que los efectos de la
preparación de la muestra deben, en relación con la
cantidad de cada especie, ser los mismos para la
señal del patrón interno. En cuanto a la señal de la
especie de interés en el caso ideal. Agregar
cantidades conocidas de analitos de interés es una
técnica distinta llamada adición estándar, que se
realiza para corregir los efectos de la matriz.
PRECISIÓN
Precisión por analista
Descripción
Se utilizará la misma muestra, la cual es tratada
previamente (es decir, se hace un proceso de
filtrado), por cada uno de los analistas, por
triplicado y a esto, se le sacará un promedio (en
concentración del analito). A los promedios de los
tres analistas se les realiza la desviación estándar y
el coeficiente de variación, el cual debe ser inferior
al 5%, esto nos indicará qué todos los analistas
están llegando al mismo resultado. Para comparar
estos resultados se debe aplicar una prueba Anova,
donde nos indicará si hay diferencias significativas
entre los resultados y si los hay se debe aplicar una
prueba de Tukey o una prueba de Fischer para
saber entre qué analistas hay diferencias
significativamente.
Procedimiento
Cada uno de los analistas (A, B y C) tomarán 5 mL de
la muestra, 1mL del estándar interno (acetonitrilo)
para realizar la cuantificación de metanol, esto por
triplicado. Los procedimientos por realizar están
descritos posteriormente. A los resultados
obtenidos por cada analista se les sacará un
promedio y, posteriormente, se realizará los
cálculos de desviación estándar y coeficiente de
variación.
Precisión Por día
Descripción
Se utilizará la misma muestra, la cual es tratado
previamente (es decir, se hace un proceso de
filtrado), en este caso lo hará un solo analista, el
cual analizará la muestra en tres días diferentes, por
triplicado, a los resultados se les realiza la
desviación estándar y el coeficiente de variación, el
cual debe ser inferior al 5%, esto nos indicará qué
todos los analistas están llegando al mismo
resultado. Para comparar estos resultados se debe
aplicar una prueba Anova, donde nos indicará si hay
diferencias significativas entre los resultados y si los
hay se debe aplicar una prueba de Tukey o una
prueba de Fischer para saber entre qué días hay
diferencias significativamente.
Procedimiento
Cada uno de los analistas (A, B y C) tomarán 5mL de
la muestra, 1mL del estándar interno (acetonitrilo)
para realizar la cuantificación de metanol, esto por
triplicado. Esto lo realizará en 2 días diferentes (ej.
Jueves y sábado). Los procedimientos por realizar
nuevamente se encuentran descritos
posteriormente. A los resultados obtenidos por
cada día se les sacará un promedio y,
posteriormente, se realizará los cálculos de
desviación estándar y coeficiente de variación.
Repetitividad
Se realiza la medición 6 veces del patrón del 100%
en la curva, se prepara 6 veces este y se calcula el
coeficiente de varianza y porcentaje de desviación
estándar relativa (%RSD), el coeficiente de variación
debe ser menor o igual al 2%.
ESPECIFICIDAD
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Se realiza por hidrolisis acida con HCl 0,1 M y
posterior neutralización a la muestra. Se realiza por
duplicado.
ROBUSTEZ
Se realiza cambiando parámetros del cromatógrafo
con el fin de observar si existe un cambio en la
separación deseada, dichos parámetros pueden ser:
Temperatura del detector, inyector y el horno(°C),
rampa de temperatura, agitación de las muestras o
diluciones.
PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES
Preparación de las soluciones estándares para la
curva de calibración.
En matraces de 50.00ml, preparar las soluciones
patrón para realizar una curva de calibración de
metanol en un rango entre 100 a 1000 ppm ;
agregar a cada matraz 1.00ml del estándar interno
(acetonitrilo) y completar el volumen con agua
destilada.
Preparación de la muestra
a) En un matraz de 50.00ml, tomar la alícuota
respectiva de acuerdo con la muestra
problema; agregar 1.00ml del estándar
interno y enrasar con agua destilada.
b) Encender el cromatógrafo de gases,
asegurándose previamente que la columna
esté instalada y tiene suministro de la fase
móvil. programar las condiciones de
cromatografía (tabla 3), necesarios para
obtener la resolución adecuada.
c) Identificar los tiempos de retención,
correspondientes al metanol y al estándar
interno, inyectando 1μL.
d) Inyectar 1μL de cada solución estándar y de
la muestra preparada (esa última por
triplicado).
e) Registrar los datos obtenidos de calibración
y de la muestra. Determine la cantidad de
metanol de la muestra problema expresada
en ppm.
CROONOGRAMA DE ACTIVIDADES
En el desarrollo de la tabla, se fijan todas las
jornadas para ambos laboratoristas durante las tres
sesiones.
Tabla 6. Asignación de las actividades para los
laboratoristas.
CROONOGRAMA DE ACTIVIDADES
DIA 1 (Linealidad y exactitud)
1. Ingreso del personal.
2. Lavado de material correspondiente.
3. Preparación de estándares de metanol
en el rango de 50-1050 ppm
4. Preparación de la muestra de whisky y
blanco con el ajuste del centroide de la
curva.
7. Subir al 4to piso a Cromatografía de
gases (CG).
8. Recolección de datos.
9. Tratamiento de desechos.
10. Lavado y entrega de material.
11. Salida del personal.
CROONOGRAMA DE ACTIVIDADES
DIA 2 (Precisión, especificidad y robustez)
1. Ingreso del personal.
2. Lavado de material correspondiente.
3.  Preparación de patrones a utilizar
4. Preparación de la muestra de whisky y
blanco con el ajuste del centroide de la
curva.
7. Subir al 4to piso a Cromatografía de
gases (CG).
8. Recolección de datos.
9. Tratamiento de desechos.
10. Lavado y entrega de material.
11. Salida del personal.
CROONOGRAMA DE ACTIVIDADES
DIA 3 (Pruebas finales)
1. Ingreso del personal.
2. Lavado de material correspondiente.
3. Según necesidad.

9
4. Preparación de la muestra de whisky y [3] Gronbaek, M., Deis, A., Sorensen, T. I. A.,
blanco con el ajuste del centroide de la Becker, U., Schnohr, P., & Jensen, G. (1995).
curva. Mortality associated with moderate intakes
7. Subir al 4to piso a Cromatografía de of wine, beer, or spirits. BMJ, 310(6988),
gases (CG). 1165–1169.
8. Recolección de datos. https://doi.org/10.1136/bmj.310.6988.1165
9. Tratamiento de desechos.
10. Lavado y entrega de material.
11. Salida del personal.

Figura 3. Diagrama de PERT

Bibliografía
[1] Council Directive 92/84/EEC on the
approximation of the rates of excise duty on
alcohol and alcoholic beverages. (1992).
https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN
/TX-T/HTML/?
uri=CELEX:31992L0084&from=GA. Accessed
5 February 2020.
[2] The Craft Beverage Modernization and Tax
Reform provisions of the Tax Cuts and Jobs
Act of 2017.
https://www.ttb.gov/alcohol/craft-
beverage-modernization-and-tax-reform-
cbmtra. Accessed 4 July 2020.

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