Extraccion y caracterizacion de aceite esencial de eucalipto

Helen Yiseth Pelaez Muñoz (1942166-2131) helen.pelaez@correounivalle.edu.co

Carolina Guzman Marquez (1824251-2131) carolina.marquez@correounivalle.edu.co

Universidad del Valle

Facultad de ciencias naturales y exactas, Departamento de química
Laboratorio de Analisis industrial

Docente: Harold Humberto Diaz

Fecha de práctica: marzo 30 de 2023
Fecha de entrega: abril 13 de 2023

Resumen

Se extrajo el aceite esencial de eucalipto a partir de 44,82± 0,02 g hojas secas de eucalipto
por medio de hidrodestilación utilizando agua como solvente, luego se realizó el proceso de
separación por decantación para de aceite y agua. Para determinar las propiedades de:
índice de refracción 1,4613 se utilizó el equipo ATAGO NAR-2T, las bandas características
de eucalipto en el espectro IR utilizando el espectrofotómetro infrarrojo de transformada
Fourier modelo IRAffinity-1 marca Shimadzu, el cual tiene una resolución máxima de
0.5cm-1, y para el análisis por cromatografía de gases acoplado a masas se utilizó el equipo
SGCMS-QP2010,con fase móvil de Helio, lo que permitió identificar los componentes como:
eucaliptol, ácidos fenólicos, cineol, entre otros, concluyendo que los compuestos
identificados son los que se encuentran presentes en el aceite esencial extraído, lo que
indica un buen método para el análisis.

Palabras clave: Hidrodestilación, cromatografía de gases, Infrarrojo, aceite esencial,

eucalipto.

Resultados y cálculos Análisis FTIR - ATR

Se pesaron 44,82 ± 0,02 g de hojas de

eucalipto secas y se realizó la extracción
de su aceite esencial usando
hidrodestilación. Después de realizada la
extracción, el producto obtenido se
decantó para separar el aceite de
eucalipto del agua y poder realizar los
análisis a la muestra de aceite esencial
obtenida.

Imagen 2. Espectro FTIR del aceite

esencial de eucalipto.
Indice de refraccion

Tabla 1. Índice de refracción del agua y

aceite esencial de eucalipto.

sustancia indice de
refraccion

Agua 1,333

Aceite 1,4586

Corrección del índice de refracción

Imagen 2. Cromatograma de la muestra
𝒏 = 𝒏’ + C(T ‘ - T) (1) de aceite esencial de eucalipto.

𝒏= lectura a 20°C
𝒏’ = lectura a 26°C
C= corrección de 0,00045 por °C
T= 20°C
T ‘ = 26°C

𝒏= 1,4586 + 0,00045 (26°C - 20°C) =

𝒏= 1,4613

Imagen 3. Espectro de masas del pico 6

Análisis de la muestra por del cromatograma.
cromatografía de gases acoplado a
masas

Tabla 2. Condiciones cromatográficas

Solvente diclorometano

Columna Rxi-1HT (100% dimetil-

polisiloxano)

flujo de la 1,0 mL/min

columna

gas Helio

Imagen 4. Listado de sustancias que

componen el pico 6 del cromatograma
(librería NIST 11s.lib)
Análisis de resultados
Los aceites esenciales son usados por su
atractivo sabor como especias y agentes
saborizantes de alimentos. Unos pocos
son valorados por su acción fungicida y
antibacteriana. Otros son usados con
propósitos medicinales (alcanfor,
eucalipto) y otros como repelentes de
insectos (citronela). Son también
empleados en perfumería, en la industria
alimentaria o como fuente de materias
primas 1.
Los componentes de los aceites
esenciales se encuentran a menudo en
las glándulas o espacios intercelulares en
el tejido de las plantas. Estos pueden
estar en todas las partes de la planta,
pero se encuentran a menudo en las
semillas, flores, hojas y frutos. Algunos
aceites esenciales se encuentran en la
planta en forma de precursores no
volátiles, frecuentemente glucósidos y
muchos otros son volátiles con el vapor y
pueden ser aislados por destilación al
vapor, otros métodos para aislar aceites
esenciales son, extracción con solventes,
métodos de exprimido por presión e
hidrodestilación 1 . Este último fue el
método usado para la obtención del aceite
esencial de eucalipto en la práctica de
laboratorio. Este método consiste en la
destilación de las flores u otras partes de
la planta por medio de vapor de agua. Los
aceites esenciales tienen un punto de
ebullición superior al del agua, pero la
mezcla del aceite esencial más agua
presenta un punto de ebullición inferior y
por eso puede ser destilada. Al pasar por
el condensador, los vapores se enfrían,
condensan y se transforman en un líquido
formado por dos fases inmiscibles; fase
orgánica (aceite esencial) y fase acuosa,
que para ciertos aceites contiene cierta
cantidad de esencia. La fase orgánica,
formada por el aceite esencial, se separa
fácilmente de la acuosa al tener distinta
densidad y ser inmiscibles. Normalmente
la fase orgánica formada por el aceite
esencial es la fase menos densa y flota
sobre la fase acuosa aunque hay
excepciones 2.
Imagen 5. Montaje del equipo de
hidrodestilación.
En el presente documento se estará
estudiando la composición del aceite
esencial de eucalipto, a través de
diferentes análisis tales como
espectroscopia infrarroja por transformada
de Fourier con reflectancia total atenuada,
refractometría y cromatografía de gases
usando como detector un espectrómetro
de masas, para lo cual se pesaron 44,82 ±
0,02 g de hojas de eucalipto secas, masa
de la cual solo se extrajeron unos cuantos
microlitros de aceite que esencial que se
usaron para realizar los análisis
anteriormente mencionados.
Para realizar el estudio detallado de la
muestra obtenida de aceite esencial de
eucalipto, se empezó realizando un
análisis a través de la espectroscopia
infrarroja por transformada de Fourier -
reflectancia total atenuada o FTIR -ATR,
en un equipo marca SHIMADZU, en la
cual se elimina la necesidad de una
preparación destructiva de la muestra, o el
uso de solventes, sino que la muestra sea
sólida o líquida, como en este caso es
puesta en la superficie del cristal
(usualmente hecho de diamante o
germanio). El haz de luz en el espectro
del infrarrojo es direccionado al cristal y es
internamente reflejado totalmente por él,
creando una onda que se extiende hasta
la muestra contenida sobre el cristal,
debido a que algunas regiones o
longitudes de onda serán absorbidas por
la muestra, la onda resultante será
detectada como un interferograma al cual
se le realizará una transformación
matemática (transformada de Fourier)
para posteriormente resultar en un
espectro de infrarrojo en el cual se
observará el tipo de vibración en los
enlaces de la molécula, lo que lleva a
identificar los posibles grupos funcionales
presentes en ella 3. De acuerdo a lo
anterior, al realizar el análisis del espectro
infrarrojo obtenido, se observaron ciertas
bandas de absorción características del
compuesto, como una banda alargada y
ancha en 3307,92 cm-1 correspondiente a
la tensión del enlace O-H por la formación
de puentes de hidrógeno en el agua que
aún estaba presente en la muestra de
aceite esencial, al lado de esta banda
ancha, se pueden observar unas
pequeñas bandas en 2966,52 y 2922,16
cm-1 correspondientes a las vibraciones
de tensión de los grupos CH24 presentes
en el éter bicíclico o terpeno cíclico
oxigenado que es el eucaliptol o 1,8
cineol5 , además de las bandas que se
observan entre los 1080,14 y 1213,23
cm-1 que corresponden a vibraciones de
tensión C-O-C asimétrica del mismo
terpeno cíclico oxigenado, así como
bandas 1377,17 y 1305,81 cm-1 que se
identifican como deformación simétrica de
metilos y deformación de aleteo y torsión
de metilenos respectivamente 4. Debido a
que al aceite esencial de eucalipto lo
componen otras sustancias como ácidos
fenólicos (gálico, gentísico, cafeico y
ferulico)6, se puede observar una pequeña
banda a 920,05 cm-1 que corresponde a la
deformación fuera del plano del OH
asociado, y bandas en 1641,42 y 1631,78
cm-1 correspondientes a la tensión
asimétrica del C-O.4
Por otra parte al realizar el análisis
refractométrico del aceite esencial de
eucalipto se obtuvo un resultado de
1,4613, resultado que se encuentra en el
rango que se observa en la literatura, el
cual menciona que a 20°C 𝒏D no es
inferior a 1,4580 ni superior a 1,4700 7, lo
que confirma que lo que se obtuvo del
proceso de destilación fue
mayoritariamente el aceite esencial de
eucalipto.
Finalmente, se analizó el aceite esencial
de hojas de eucalipto en un
espectrómetro de masa GCMS-QP2010
ultra acoplado a un cromatógrafo de
gases con una columna de
Rxi-1HT(100% dimetil-polisiloxano), para
ello se usaron 25 microlitros de aceite
esencial y como disolvente diclorometano,
se obtuvo el cromatograma (imagen 2),
donde el pico 6 representa el eucaliptol
pues se encuentra en mayor abundancia,
a partir de este se observa en la imagen 3
el espectro de masas del eucalipto, el cual
se compara con la base teórica Spectral
for Organic Compounds SDBS (imagen
6)8 observando la similitud en los picos
abundantes como el 43 donde al
comparar el resultado experimental
(imagen 3) con el teórico (imagen 6) en
ambos casos la abundancia es del
100%,al igual que en el fragmento 81 el
cual tiene una abundancia del 68%
aproximadamente y el pico 93 en donde la
abundancia es de 40%
aproximadamente,además, el respectivo
ion molecular m/z 154 en ambos casos, lo
que evidencia la formula molecular de
C10H18O, correspondiente al 1,8 cineol o
Eucaliptol(imagen 7).
 81

Imagen 6. Espectro de Masas teórico del 43

1,8 cineol.

De los análisis realizados en el

Imagen 7. Ion Molecular m/z 154. cromatógrafo de gases, acoplado a
masas , se realizó la identificación de los
También, en la siguiente tabla se compuestos mayoritarios en el aceite
presentan los picos abundantes esencial de eucalipto los cuales fueron el
observados en el espectro 3 y en la parte eucaliptol,Cineol,1,3,3-Trimetil-2-oxabicycl
de anexos se observa el mecanismo para o[2.2.2]octano y 1,8 epoxi, los cuales son
cada fragmentación d el 1,8 cineol. sinónimos conocidos del eucalipto, la
predominancia en los compuestos
Tabla 3. Fragmentos del espectro de provenientes del aceite de eucalipto se
masas. ratifica en que corresponde a los
Fragmento m/z Molécula monoterpenos, además, el Eucaliptol o
1,8-cineol es quien posee la mayor
139 concentración en la matriz oleosa, pues
los picos de mayor altura corresponden al
eucalipto. Cabe resaltar que los
monoterpenos que se encuentran en esta
planta poseen propiedades terapéuticas
como: antiinflamatorias, analgesicas,
9
retardo a los dolores .
Conclusiones
Se puede concluir que por medio de la
hidrodestilación se extrajo una buena
cantidad de aceite para realizar las
diferentes pruebas, las cuales permitieron
identificar los compuestos principales en
el Eucalipto.
El análisis por espectroscopia FTIR -ATR
es muy útil para identificar la presencia de
grupos funcionales característicos de las
sustancias que se desean estudiar, ya
que se lograron identificar las bandas
correspondientes a la estructura del
Eucalipto.
El índice de refracción confirmó la
presencia de eucalipto pues se encuentra
dentro del rango establecido en la
literatura para el eucaliptol, por
consiguiente el compuesto se encuentra
en una cantidad lo suficientemente alta
como para obviar la actividad óptica de los
demás compuestos presentes, sin
embargo, esta prueba no es definitiva
para caracterizar completamente el
compuesto.
Los resultados obtenidos por
cromatografía de gases acoplado a
masas coincidieron con los espectros de
la database SDBS, por lo que afirma que
se extrajo satisfactoriamente el aceite de
Eucalipto, el cual posee propiedades
antiinflamatorias y analgesicas.
Finalmente, la cromatografía de gases es
una excelente herramienta para la
identificación y caracterización de los
compuestos, pues, se obtiene mayor
información con alta precisión y en cortos
plazos de tiempo.
Bibliografía
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Enfocado a biología y alimentos. (2008).
Colombia: Universidad de Caldas.
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compounds,SDBS. (s/f). Aist.go.jp.
[9]Gonzalez, F.(2021). Repositorio USM,
“Determinación de componentes volátiles
de aceite de Eucalipto (Eucalyptus
globulus).”
Anexos
1.Mecanismo de Fragmentación
Nota:Debido a que se realiza por medio
de word no se pueden realizar las flechas
con media cabeza.