“BIOESTIMULANTES QUIMICOS EN LA ACELERACION

DE LA GERMINACIÓN DE LAS SEMILLAS DE CAFÉ

(Coffea arabica L.) cvs. CATURRA Y LIMANI

Joseph Sánchez Escalante, Luis García Carrión

PROBLEMA IDENTIFICADO.

En nuestro país no se produce ni comercializa semillas certificadas de

variedades de café que garanticen una alta productividad y excelente calidad
de taza. Los programas de renovación de los cafetales decadentes necesitan
semilla mejorada como insumo estratégico para la reconversión productiva y
sostenible de la caficultura peruana. Se conoce que la semilla de café por
poseer un carácter indeseable, i.e., una germinación lenta y desuniforme,
dificulta obtener y trasplantar en menor tiempo plántulas de calidad por causa
del excesivo tiempo requerido para obtenerlas durante la emergencia. Además,
en la selva alta no se conoce ensayos publicados sobre el uso de
bioestimulantes eficaces que aceleren y uniformicen el proceso germinativo de
las semillas de café que signifique ahorro de tiempo y labor antes de proceder
al trasplante.

OBJETIVOS.

Determinar el efecto bioestimulante de los tratamientos de pre-siembra en la

germinación de las semillas y el vigor de las plántulas de café cvs. Caturra y
Limani

HIPOTESIS.

La aplicación de bioestimulantes en pre-siembra a las semillas de café, cvs.

Caturra y Limaní, acelerará y sincronizará la germinación de las semillas; así
como, la mejor expresión del vigor y crecimiento de las plántulas.
 I. INTRODUCCION.

El café (Coffea arábica L.) es una especie comercial muy importante en

aproximadamente el 70% de los países de los trópicos húmedos y que se
cultiva en 10 millones de hectáreas con una producción mundial de 5 millones
de toneladas de café verde aprox., de los cuales el 69% proviene de cultivares
de Coffea arábica L. (Arcila et al, 2001)

El mercado mundial del café luego de un descenso casi continúo entre 2011/12
y 2012/13, los precios del café se recuperaron en el 2013/14. Debido a la grave
sequía de Brasil, el precio referencial de la Organización Internacional de café
(OIC) pasó de menos de 1 dólar USA por libra en noviembre de 2013, a un
nivel elevado de 178,96 centavos en abril de 2014 (OIC, 2015).

La caficultura peruana según la Junta Nacional del Café (JNC) se desarrolla en

11 regiones, involucrando 67 provincias y 338 distritos rurales. La superficie
sembrada excede las 400,000 hás. En el 2010 se exportaron 4 millones 987 mil
quintales de café verde, por un valor FOB de US $ 888 millones. (SCAN, 2011).

Casi todos los cultivares de café son poblaciones autógamas y homogéneas

debido a su sistema de reproducción sexual. El café arábigo es una especie
tetraploide (2n = 4x = 44 cromosomas), cuya uniformidad y estabilidad se
mantiene por generaciones, excepto cuando ocurre una súbita mutación
natural. Además, la multiplicación por semillas tiene una enorme ventaja en el
proceso del mejoramiento genético porque es posible propagar cualquier
genotipo una vez que el Fitomejorador lo haya identificado y estabilizado.

Todo cultivar o variedad de café tiene una vida útil limitada. Su mayor o menor
permanencia en el campo está condicionada por factores endógenos (cultivar,
condiciones agroecológicas y estado fitosanitario) y exógenos (calidad o
preferencia) (García y García, 2012). En nuestro país, hace tres años la
diseminación de una raza más agresiva de Hemileia vastatrix (“roya del café”)
vulneró la resistencia vertical de los hospederos causando pérdidas entre 50-
70% del producto cosechado, obligando a los productores a cambiar su
variedad susceptible de mejor calidad por otras resistentes pero de
relativamente menor calidad, v.g. Costa Rica 95, Colombia, Castillo, entre
otras.

El uso de semillas de café de comprobado potencial productivo y de fina

calidad de taza es estratégica e imprescindible para un programa de
renovación de cafetales decadentes que promueva la reconversión productiva y
sostenible de la caficultura peruana. Sin embargo, la semilla de café por poseer
ser de germinación lenta (35-45 días) y asincrónica dificulta obtener plántulas
de calidad por el largo tiempo que precede al transplante (Franco-Rosa et al,
2010).

Por otro lado, se tiene reportes que el uso de tratamientos de pre-siembra

(Wosene et al, 2010) y el uso de bioestimulantes químicos (orgánicos e
inorgánicos), reducen la duración del periodo de germinación y mejoran el vigor
de las plántulas de café (Schmidt, 2000; González et al, 2015)

En la búsqueda de encontrar algún tratamiento de pre-siembra que acelere la

germinación y permita tener en menor tiempo plántulas aptas de mejor vigor y
desarrollo para el trasplante al campo definitivo, fue lo que motivó e impulsó a
proponer este ensayo que busca alcanzar los siguientes objetivos:

OBJETIVOS.

1. Determinar el efecto estimulador de los tratamientos de pre-siembra en la

germinación de la semilla de café cvs. Typica y Limani.

2. Evaluar el vigor y desarrollo de plántulas de café cvs. Typica y Limani

durante su primera fase fenológica en vivero.

.
 II. REVISION DE LITERATURA

Las semillas de las plantas superiores contienen un embrión circundado por

capas cobertores cuya función es asegurar el establecimiento de la nueva
plántula. Las plantas ajustan su crecimiento en respuesta a estímulos internos
y externos a través de la actividad de las fitohormonas. Las fitohormonas como
el ácido abscísico (ABA), las auxinas y el etileno, juegan un rol clave en la
regulación de las respuestas del crecimiento (Vanstraelen y Benková 2012),
particularmente en la dormancia de la semilla y la germinación (Koornneef et
al., 2002; Finkelstein, 2004).

No obstante, poco se conoce acerca de los procesos moleculares claves que

controlan la dormancia y la germinación de las semillas en respuesta a los
factores: hormonal y ambiental. Dos principales formas de dormancia fisiológica
de la semilla han sido descritas: (i) dormancia del embrión y (ii) dormancia por
causa de la cubierta seminal.

2.1 La dormancia de las semillas.

En muchas especies vegetales las capas que cubren la semilla imponen una
barrera física que impiden la salida de la radícula, y que debe ser superado por
el potencial de crecimiento del embrión. En las semillas endospérmicas las
contribuciones tanto de la testa como de las capas del endospermo sobre la
dormancia de la cubierta seminal necesitan ser considerados y mejor
entendidas
(Leubner-Metzger, 2003).

Se ha reportado que la ruptura del endospermo es el principal proceso que

limita la germinación en las semillas de las Rubiáceas v.g. café. En este caso
de germinación limitada por el endospermo, se debilita el endospermo
micropilar que rodea al extremo de la radícula que al parecer se requiere para
la salida de la misma y probablemente involucre la hidrólisis de la pared celular
mediante enzimas hidrolíticas (Kucera et al, 2005).

El ácido abscísico (ABA) es un inhibidor hormonal que controla tanto las

respuestas en crecimiento como del estrés, incluyendo la dormancia de la
semilla en su inicio y mantenimiento, la inhibición de la germinación, la apertura
de los estomas y el crecimiento de la raíz y el retoño (Cutler et al. 2010).

2.2 La germinación de las semillas.

La germinación comienza con la absorción de agua mediante la imbibición de

la semilla seca seguida por la expansión del embrión. Generalmente culmina
con la ruptura de las capas cobertoras y la emergencia de la radícula, que es
considerada como el final del proceso. La salida de la radícula al final de la
germinación depende del crecimiento que es regulado por la absorción de agua
(Kucera et al, 2005).

La absorción de agua por una semilla se da en 3 fases, la primera con una

rápida absorción inicial (fase I, i.e. la imbibición) seguida de la fase de meseta
(fase II). Un incremento adicional en la absorción de agua (fase III), ocurre solo
cuando la
germinación se ha completado al alargarse el eje embriónico que rompe las
estructuras cobertoras (Manz et al., 2005).

2.3 Tratamientos de pre-siembra.

Un estudio de tratamientos de pre-siembra combinado con el efecto de la

remoción del pergamino y el lavado en agua a diferentes tiempos reporta que la
mejora respuesta en la emergencia la tuvo la semilla sin pergamino con 85% a
los 90 días después de la siembra; así como, el índice de vigor. Además, las
semilla lavada por 72 h., resultó superior a las semillas lavadas por menos de
72h. (Worsene et al, 2010)
Por otra parte, Bhodthipuks et al,(1996) citado por Schmidt (2000), reporta que
el uso del peróxido de hidrógeno (H 202) acelera el inicio de la germinación de
las semillas forestales embebidas en una solución del 1% al incrementarse el
abastecimiento de oxígeno.

2.3 Interacción hormonal en la germinación de las semillas.

La liberación de la dormancia de las semillas y la germinación de las especies

que poseen dormancia en la cubierta seminal está determinada por el balance
de fuerzas entre el potencial de crecimiento del embrión y las restricciones
ejercidas por las capas cobertoras, v.g. de la testa y del endosperma (Kucera
et al, 2005)

En muchas especies vegetales, el ácido abscísico (ABA) está involucrado en la

inducción y tal vez en el mantenimiento del estado dormante. La sobrexpresión
de los genes para la biosíntesis del ABA puede incrementar el contenido del
ABA en las semillas fortaleciendo su dormancia y retardando la germinación
(Nambara y Marionpoll, 2003).

La sobremaduración, i.e., un periodo de almacenaje seco a temperatura

ambiente de las semillas maduras frescamente cosechadas, es un método
común de liberación de la dormancia. Una declinación en el contenido del ácido
absícico (ABA), disminuye la sensibilidad al ABA e incrementa la sensibilidad a
las giberelinas (Koornneef et al., 2002; Leubner-Metzger, 2002; Feurtado et al.,
2004).

Cuando se adiciona ácido giberélico (AG3) o fluridona a las semillas, se

previene la biosíntesis del ABA y se aceleró la tasa de germinación de la
semilla de Nicotiana plumbaginifolia (Grappin et al., 2000). El ABA inhibe el
potencial de crecimiento del embrión y el debilitamiento de las capas
endospérmicas durante la germinación de la semilla de café. Un aumento
transitorio en el contenido de ABA en el embrión fue evidente durante la
imbibición temprana. El tratamiento con ABA inhibe, y el tratamiento con
fluridona acelera la salida de la radícula de las semillas de café (da Silva et al.,
2004).

De acuerdo a la hipótesis del balance hormonal para la dormancia de la semilla

propuesta por Karssen y Lacka (1986), el ABA y el AG3 actúan en diferentes
tiempos y sitios durante la vida de la semillas. El ABA induce a la dormancia
durante la maduración y el AG3 juegan un rol clave en la superación de la
dormancia y en la promoción de la germinación (Kucera et al, 2005). Se ha
reportado que hay alto contenido de ABA en el embrión durante la germinación
y muy poca cantidad de AG3 bioactivo (Dewar et al., 1998). Los factores
ambientales como la luz y la temperatura pueden alterar la biosíntesis del AG3
del tejido específico (Yamauchi et al., 2004).

Un ensayo utilizando diferentes concentraciones de Bioenraiz, con propiedades

auxínicas en semillas embebidas de café por 20 min., reporta que el mejor
tratamiento fue la concentración de 200 mL. L-1 a los 60 días después de la
siembra donde se obtuvo el 94,5% de germinación. Además, las plántulas
tratadas con Bioenraiz a los 7 meses mostraron diferencias significativas en los
caracteres cuantitativos comparados con el testigo (González et al, 2015)
 III. MATERIALES Y METODOS

3.1 Ubicación.

El ensayo se llevará a cabo durante los meses de Julio-Noviembre de 2015 en

el Laboratorio de Micropropagación In Vitro, y en el Vivero de la Facultad de
Agronomía de la Universidad Nacional Agraria de la Selva.

3.2 Material genético.

Las muestras de semillas frescas, del cv. Costa Rica 95 (clase no certificada,
con algunos requisitos de calidad), fue donada por el Ing. R. Moscoso procedente de
Junín, y la segunda del cv. Bourbón (semilla común) fue colectada de un agricultor de
Santa Lucía. Esta última fue seleccionada, homogenizada y acondicionada para este
ensayo. La cantidad requerida será de 500 semillas por cada cultivar de café, las
mismas que serán identificadas (etiquetadas), utilizando un código alfanumérico.

3.3 Procedimiento.

Las semillas de cada cultivar: Costa Rica 95 y Bourbón, serán sometidas a

tratamientos de pre-siembra, mecánicos, físicos y químicos. El tratamiento mecánico-
físico consistirá en desprender manualmente el pergamino de las semillas secas antes
de ser sometidos al tratamiento físico (sometimiento de las semillas a inmersión en
agua pura durante 72 h (3 días). Este constituirá un tratamiento, y el resto de
tratamientos químicos consistirán en someter a las semillas a los productos químicos:
Peróxido de Hidrógeno (H2O2), Nitrato de Potasio (KNO3), y al Acido giberélico (AG3),

Antes de ser sometidos las semillas a la inmersión con los productos químicos,
éstas serán desinfectadas con lejía comercial a razón de 1 cojín (5.25% de hipoclorito
de sodio)/kg de semilla (2,500 – 3,000 semillas). Los tiempos de inmersión y
concentraciones de los productos químicos a serán utilizados en este ensayo
(laboratorio y vivero), se detallan en el ítem 3.5

3.4 Variables en estudio.

Las variables que serán evaluadas se dan a continuación:

1. Número de días a la aparición de la radícula

2. Número de plántulas germinadas y no germinadas a los 7, 14, 21 y 28 días
3. Número de plantas normales y anormales
4. Número de días para alcanzar los estados fenológicos S1- S5 (da Rosa et
al, 2010)

FASE DESCRIPCIÓN
 I1 : Semilla embebida 1
I2 : Semilla embebida 2
G : Semilla germinada
S1 : Plántula 1
S2 : Plántula 2
S3 : Plántula 3
S4 : Plántula 4
S5 : Plántula 5

5. Número de días para alcanzar el estado de “fosforito”

6. Número de días para alcanzar el estado de “mariposa”
7. Número de pares de hojas de la plántula a los 60 y 90 días
8. Área foliar de la plántula a los 60 y 90 días
9. Índice de vigor de la plántula a los 60 y 90 días
10. Peso total de materia seca de la plántula a los 90 días

3.5. Tratamientos en estudio.

Comprenden 5 tratamientos incluyendo un testigo absoluto (sin ningún

tratamiento), con 4 repeticiones de 25 semillas cada uno. La codificación y descripción
de estos tratamientos se dan a continuación:

N° CODIGO DESCRIPCION
1 T0 Semillas con pergamino (Testigo)
2 T1 Semillas sin pergamino, embebidas en agua por 72 horas
3 T2 Semillas sin pergamino, embebidas en agua por 72 h. + H 202 al 1.5%
4 T3 Semillas sin pergamino, remojadas en agua por 72 h.+ KNO 3 al 2%
5 T4 Semillas sin pergamino, remojadas en agua por 72 h.+ AG 3 a 250 ppm

3.6 Diseño experimental.

El ensayo será analizado mediante un diseño completo al azar (DCA), con 5

tratamientos (incluyendo el testigo) y 4 repeticiones. Complementariamente se
determinarán estadísticos univariados, de tendencia central (promedio), y de
dispersión (desviación estándar, coeficiente de variabilidad y rango), cuyas fórmulas
no necesitan ser presentadas aquí ya que son muy conocidas y de uso general. Por la
cantidad de datos a registrar y para facilitar el procesamiento estadístico de los
mismos se utilizará el software PAST, v. 5, y como software de verificación, el software
MINITAB, v. 12.1
 IV.- BIBLIOGRAFIA CITADA.

Arcila, P.J.; l.Buhr; H. Bleiholder; H. Hack; H. Wicke. 2001. Aplicación de la escala

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.-.
 V. CRONOGRAMA DE EJECUCION.

MESES DEL AÑO 2015

Junio Julio Agost Septiembre Octubre Nov. Dic
ACTIVIDADES o .

Elaboración y aprobación del

x x              
proyecto
Instalación del ensayo de
x               
germinación
Evaluaciones de la germinación
x  x            
(5 semanas)
Repique al estado de
x          
“mariposa”
Evaluación del vigor de la
   x x
plántula
Otras evaluaciones cuantitativas x x
Procesamiento estadístico de
x
datos
Elaboración del informe final y
        x  x    
Artículo cientifico

VI. PRESUPUESTO DEL ENSAYO.

A. Materiales: S/. 100.00

B. Instrumental: S/. 200.00
C. Reactivos: S/. 100.00
D. Productos químicos: S/. 100.00

TOTAL: S/. 500.00 nuevos soles