MICROBIOLOGÍA - UNIDAD III
Factores ambientales que afectan el crecimiento, desarrollo y reproducción de
microorganismos
3.1 CRECIMIENTO MICROBIANO
5.1 Fisión binaria (Libro)
Se define el crecimiento como el
aumento en el número de células.
Las células microbianas tienen un período
de vida limitado, y una especie se
mantiene solo a resultas del crecimiento
continuado de su población.
Crecimiento bacteriano como Escherichia
coli, las células se elongan hasta
aproximadamente el doble de su longitud
original y después forman un tabique que
divide la célula en dos células hijas . Este
proceso recibe el nombre de fisión
binaria.
El tabique que se forma se llama septo
y es el resultado del crecimiento hacia
dentro de la membrana citoplasmática y la
pared celular desde posiciones opuestas;
la formación del septo continúa hasta que
las dos células hijas se separan.
Siempre que una célula se divide para
formar dos células hijas, decimos que ha
habido una generación, y el tiempo
necesario para este proceso se llama
tiempo de generación.
En la generación, todos los componentes
celulares aumentan proporcionalmente,
de manera que la célula tiene un
crecimiento equilibrado. Cada célula
recibe un cromosoma y suficientes copias
de ribosomas y todos los demás
complejos macromoleculares, monómeros
e iones inorgánicos para poder existir
como célula independiente.
El reparto entre las dos células hijas del
DNA replicado depende de la unión de
este a la membrana citoplasmática
durante la división, y la constricción causa
la separación de los cromosomas en las
dos células hijas.
5.2 Las proteínas Fts y la división
celular (Libro)
Existen proteínas que están presentes en
todas las células las cuales son las Fts
● La proteína FtsZ tiene un papel
importante en la fisión binaria
La FtsZ está emparentada con la tubulina,
proteína importante en división celular en
eucariotas y en mayoría de arqueas.
Otras Fts se encuentran en arquea y no
en bacteria. Solo se centrará esta guía en
bacterias.
El divisoma
Las Fts interaccionan con la célula para
formar el divisoma
● En bacilos: El divisoma empieza
con unión de moléculas de FtsZ,
que forma un anillo en la parte
central de la célula

➔ ZipA es un anclaje para FtsZ
➔ FtsI es una proteína de biosíntesis
del peptidoglicano
➔ FtsK participa en la separación de
los cromosomas
➔ FtsA es una ATPasa.
ZipA es una proteína de anclaje que
conecta con el anillo de FtsZ con la
membrana citoplasmática y lo estabiliza
FtsA contribuye a conectar FtsZ con la
membrana citoplasmática e incorpora
otras proteínas al divisoma
● FtsA es similar a la actina en
eucariotas
El divisoma se forma hacia la última
cuarta parte de la división celular, antes
de eso la célula ya está elongada y el
ADN replicado (Figura 5.3).
El divisoma contiene proteínas necesarias
para la síntesis de peptidoglicano, entre
ellas está el FtsI.
● FtsI: proteína de unión a la
penicilina presententes en la célula
● La penicilina inhibe su actividad
Replicación del DNA, proteínas Min y
división celular
El DNA se replica antes de que se forme
el anillo FtsZ, de lo contrario se bloquea el
anillo.
Proteínas como MinC, MinD y MinE
interaccionan para guiar a FtsZ hasta el
punto medio.
MinD: Forma un espiral en la superficie
de la membrana citoplasmática y ayuda a
MinC a unirse.
MinD: Su espiral se encuentra a lo largo
del eje de la célula e inhibe la división
celular al impedir la formación de FtsZ
Ya que MinE se encuentra también de
polo a polo en la célula, aparta del centro
a MinC y MinD.
Como MinC y MinD permanecen más
tiempo en los polos el centro de la célula
tendrá, la menor concentración de estas
proteínas. Por tanto, el centro de la célula
se convierte en el sitio más permisivo para
la unión de FtsZ, de manera que el anillo
se forma justo allí (Figura 5.3).
5.3 La proteína MreB y la morfología
celular
Así como hay proteínas específicas que
dirigen la división celular en procariotas,
otras proteínas específicas condicionan la
forma de la célula.
La forma de las células y MreB
MreB es la proteína que da la forma a las FtsZ mientras que en los bacilos crece en
bacterias, ya que forma un citoesqueleto diversos sitios a lo largo de la célula.
simple en bacterias y pocas en arqueas.

MreB forma un hélice filamentoso justo

por debajo de la membrana citoplasmática
dentro de la célula.

La inactivación del gen que codifica MreB

en los bacilos hace que las células tengan
forma de coco.

La mayoría de las bacterias que de

manera natural tienen forma de coco
carecen del gen MreB.

¿Cómo define MreB la forma de una

célula? MreB dirige la síntesis de nueva Biosíntesis de peptidoglicano
pared celular rotando en el interior del
cilindro celular e iniciando la síntesis de la La síntesis del nuevo peptidoglicano
pared en los puntos en que entra en durante el crecimiento requiere el corte
contacto con la membrana citoplasmática, controlado del peptidoglicano preexistente
de manera que la elongación de un bacilo y la inserción simultánea de los
se produce únicamente a lo largo de su precursores del peptidoglicano.
eje mayor
El bactoprenol es una molécula
Crescentina transportadora de lípidos que ejerce una
función importante en el último proceso.
Caulobacter crescentus es una especie
de Proteobacteria que además de MreB, El bactoprenol es un alcohol C55
produce una proteína determinante de la hidrófobo que se une a un
forma celular llamada crescentina. La N-acetilglucosamina/ácido
crescentina se organiza en filamentos de N-acetilmurámico/pentapéptido, precursor
unos 10 nm de anchura que se sitúan en del peptidoglicano.
la superficie cóncava de la célula curvada.
El bactoprenol transporta los precursores
5.4 Biosíntesis del peptidoglicano del peptidoglicano a través de la
(Libro) membrana citoplasmática haciéndolos
bastante hidrófobos para atravesarla.
En las células de todas las especies de
Bacteria que contienen peptidoglicano, el Las autolisinas, son enzimas que actúan
peptidoglicano preexistente se tiene que hidrolizando los enlaces que conectan la
cortar temporalmente para permitir que el N-acetilglucosamina y el ácido
recién sintetizado se inserte durante el N-acetilmurámico al esqueleto, hacen
proceso de crecimiento. unos pequeños cortes en el
peptidoglicano existente. Entonces se
En los cocos, el nuevo material de pared añade nuevo material de pared a través
crece en sentido opuesto desde el anillo de esos cortes
En el periplasma, el bactoprenol
interacciona con transglicosilasas, unas
enzimas que insertan los precursores en
el punto de crecimiento de la pared celular
y catalizan la formación del enlace
glicosídico.
La unión entre el peptidoglicano viejo y el
nuevo forma un cordoncillo en la
superficie celular de las bacterias
grampositivas que se llama banda de
pared.
Las nuevas unidades de tetrapéptidos
deben empalmarse al peptidoglicano
existente inmediatamente después de que
las autolisinas actúen, pues una brecha
podría causar la lisis espontánea de la
célula, llamada autolisis.
Transpeptidación
El paso final de la síntesis de la pared
celular es la transpeptidación.
En la transpeptidación se forman los
puentes peptídicos entre los residuos de
ácido murámico en cadenas adyacentes
de glicano.
En las bacterias gramnegativas los
puentes se forman entre el ácido
diaminopimélico (DAP) de un péptido y la
d-alanina del péptido adyacente.
Si bien hay dos residuos de d-alanina al
final del precursor del peptidoglicano, solo
uno permanece en la molécula final; el
otro es eliminado durante la
transpeptidación
3.1.1. CURVA DE CRECIMIENTO
5.5 Aspectos cuantitativos del
crecimiento microbiano (Libro)
En la figura 5.9 se observa un ejemplo de
velocidad de crecimiento de cultivo
microbiano
El patrón de crecimiento de población, en
donde el número de células se duplica a
intervalos constantes de tiempo, se llama
crecimiento exponencial.
Cuando se representa el número de
células en escala logarítmica (log10) en
función del tiempo, es decir una gráfica
semilogarítmica, la pendiente pasa a ser
una línea recta. Lo que indica que las
células crecen exponencialmente y la
población se duplica a intervalos
constantes.
5.6 El ciclo de crecimiento (Libro)
Fase de latencia
Se le llama fase de latencia cuando un
cultivo microbiano se inocula en un medio
fresco y empieza el crecimiento tras un
periodo de tiempo
● La fase de latencia puede ser
breve o extenso
No hay fase de latencia cuando
1. Se transfieren células de un cultivo
que estaba en la fase exponencial
al mismo medio y en las mismas
condiciones de crecimiento
(temperatura, ventilación,
 etcétera), no se producirá fase de
latencia y el crecimiento
exponencial empezará
inmediatamente.
Hay fase de latencia cuando:
1. Si el inóculo se toma de un cultivo
viejo, porque las células carecen
de varios constituyentes
esenciales y se necesita un tiempo
para su biosíntesis.
2. Si el inóculo es de poca viabilidad
(pocas células vivas) o contiene
células dañadas por algún agente
agresor, como altas o bajas
temperaturas, radiación o 5.7 Cultivo continuo (Libro)
sustancias tóxicas, pero no
muertas.
3. Si se transfiere un cultivo
microbiano de un medio de cultivo
rico a uno más pobre
Fase exponencial
Se le llama fase exponencial cuando la
población de células se duplica en
intervalos regulares durante un tiempo
corto o largo según los recursos
disponibles y otros factores.
La velocidad de crecimiento exponencial
varía mucho y depende de las
condiciones ambientales (temperatura,
composición del medio de cultivo), así
como de las características genéticas del
propio organismo.
En general, los procariotas crecen más
rápidamente que los microorganismos
eucariotas, y los eucariotas más
pequeños, suelen crecer más
rápidamente que los grandes.
Fase estacionaria y fase de muerte
Se le llama fase estacionaria cuando el
crecimiento exponencial cesa por debido
a que se agotan los nutrientes en el medio
o bien porque se acumulan los desechos
del organismo.
En la fase estacionaria no se produce
aumento ni disminución netos del número
de células, de modo que la velocidad de
crecimiento de la población es cero.
Después el cultivo entra en la llamada
fase de muerte y se produce siguiendo
una función exponencial.
● La fase de muerte es mucho más
lenta que la fase de crecimiento
exponencial
El ambiente en un cultivo discontinuo
cambia constantemente a causa del
consumo de nutrientes y la producción de
desechos. En un dispositivo de cultivo
continuo es posible sortear estos cambios.
El quimiostato
El tipo más habitual de cultivo continuo es
el quimiostato, un dispositivo en el que se
puede controlar de manera independiente
la velocidad de crecimiento y la densidad
celular.
Dos factores controlan la velocidad de
crecimiento y la densidad celular,
respectivamente
1. La velocidad de dilución, que es la
velocidad a la que el medio fresco
entra y el medio usado sale
2. La concentración de un nutriente
limitante, como la fuente de
carbono o nitrógeno, presente en
el medio estéril que entra en el
recipiente del quimiostato.
3.1.2 Métodos directos e indirectos
para la cuantificación del crecimiento
(Libro)
3.2 HUMEDAD Y ACTIVIDAD DE AGUA
 Por encima de una temperatura
5.15 Osmolaridad y crecimiento determinada, las proteínas y otros
microbiano (Libro) componentes celulares pueden
desnaturalizarse o dañarse
La disponibilidad de agua se expresa en irreversiblemente
términos de actividad de agua o actividad
acuosa (aw), que es la relación entre la Las temperaturas cardinales son tres
presión de vapor de aire en equilibrio con ● Mínima: no es posible el
una sustancia o una solución y la presión crecimiento
de vapor del agua pura. ● Óptima: el crecimiento es más
rápido
El citoplasma de una célula tiene, ● Máxima: tampoco es posible el
normalmente, mayor concentración de crecimiento
solutos que el ambiente, de manera que
la tendencia es que el agua se difunda son características para cada
hacia el interior. En estas condiciones se microorganismo y pueden diferir
dice que la célula tiene un balance de enormemente entre especies.
agua positivo, que es su estado normal

Solutos compatibles

Cuando un organismo se transfiere de un

medio con aw alto a otro con aw bajo,
mantiene el balance positivo aumentando
su concentración interna de soluto.

Se le llama solutos compatibles, cuando

el soluto no inhibe los procesos celulares
de manera significativa. Son normalmente
moléculas orgánicas muy solubles en
agua como azúcares, alcoholes o Clases de organismos según la
derivados de aminoácidos. temperatura

3.3. PRESIÓN HIDROSTÁTICA Existen cuatro grandes clases de

microorganismos
● Psicrófilo: Temperatura óptima
3.4. TEMPERATURA baja
● Mesófilo: Temperatura óptima
A temperaturas demasiado frías o moderada
demasiado calientes los microorganismos ● Termófilo: Temperatura óptima
no podrán crecer e incluso pueden morir. alta
● Hipertermófilo: Temperatura
Temperaturas cardinales óptima muy alta

Cuando la temperatura sube, la velocidad Escherichia coli es un mesófilo típico, y

de las reacciones enzimáticas aumenta y sus temperaturas cardinales están
el crecimiento se acelera. claramente definidas.
 ● La temperatura óptima está cerca
de 39 °C
● La máxima son 48 °C
● La mínima son 8 °C.
5.12 Vida microbiana a bajas
temperaturas (Libro)
Se les llama extremófilos a los
microorganismos que sobreviven a
temperaturas extremas, ya sean muy
bajas o muy altas
Microorganismos psicrófilos y cantidad de ácidos grasos insaturados y
psicrotolerantes
Psicrófilo: aquel organismo con una
temperatura óptima de crecimiento de
15°C o menos, mínima de 0°C y máxima
debajo de 20°C
● Mayo de 20°C, mueren
Psicrotolerantes: organismos que crecen
a 0 °C pero tienen temperaturas óptimas
de crecimiento entre 20 °C y 40 °C
Los organismos psicrotolerantes están
más distribuidos en la naturaleza que los
psicrófilos
Adaptaciones moleculares para la
psicrofilia
Los psicrófilos pueden seguir teniendo
actividad enzimática ya que producen
enzimas que funcionan con el frío y que
pueden desnaturalizarse o inactivarse a
temperaturas óptimas.
Algunas enzimas activas a bajas
temperaturas presentan un mayor
contenido de hélices alfa y menor de
láminas beta.
Las láminas beta suelen ser más rígidas
que las hélices alfa, el mayor contenido
de estas últimas en las enzimas activas
en el frío permite a estas enzimas más
flexibilidad.
Las enzimas activas a bajas temperaturas
suelen tener mayor contenido de
aminoácidos polares y menor de
aminoácidos hidrófobos y menos enlaces
débiles, como puentes de hidrógeno y
enlaces iónicos..
En los psicrófilos su membrana
citoplasmática sigue siendo funcional a
temperaturas bajas debido a una mayor
de cadena corta.
Algunas bacterias psicrófilas contienen
ácidos grasos poliinsaturados, los cuales
permanecen flexibles incluso cuando hace
mucho frío.
En los psicrófilos existen proteínas de
«choque térmico» y los crioprotectores,
que no están limitados a los psicrófilos.
● Tienen funciones como mantener
otras proteínas en forma activa en
condiciones de frío o unirse a
mRNA específicos y facilitar su
traducción
5.13 Vida microbiana a altas
temperaturas (Libro)
Ambientes con temperaturas altas
Termófilos: aquellos organismos cuya
temperatura óptima supera los 45°C
Hipertermófilos: aquellos organismos
cuya temperatura óptima supera los 80°C
Muchas fuentes termales terrestres tienen
temperaturas próximas a la de ebullición,
mientras que las fumarolas hidrotermales,
pueden alcanzar temperaturas de 350 °C
o más.
Hipertermófilos en fuentes termales

En las fuentes termales en ebullición se
encuentra una gran variedad de
hipertermófilos, tanto especies de
quimioorganótrofos como de
quimiolitotrofos.
Algunas arqueas hipertermófilas tienen
temperaturas de crecimiento óptimas por
encima de 100 °C, pero no se conocen
especies bacterianas que crezcan por
encima de los 95 °C.
Los organismos más tolerantes al calor
que se conocen habitan en las fumarolas
hidrotermales.
Termófilos
Hay muchos termófilos presentes en
fuentes hidrotermales, pero también los
hay en otros muchos sitios. Por lo tanto,
se puede decir que:
1. Los organismos procariotas son
capaces de crecer a temperaturas
mucho más altas que los
eucariotas
2. Los procariotas más termófilos son
ciertas especies de arqueas
3. Los organismos no fotótrofos
pueden crecer a temperaturas más
altas que los fotótrofos
Estabilidad de las proteínas a altas
temperaturas
En los termófilos y los hipertermófilos sus
enzimas y otras proteínas son mucho más
estables frente al calor que las de los
mesófilos, por lo que su funcionamiento
es óptimo a altas temperaturas.
La sustitución de algunos aminoácidos en
solo unos pocos puntos clave permite a la
proteína plegarse de una manera especial
que la hace termoestable.
La estabilidad térmica de las proteínas de
los hipertermófilos también está reforzada
por un mayor número de enlaces iónicos
entre aminoácidos básicos y ácidos y el
interior de la proteína, a menudo muy
hidrófobo; todo ello combinado hace a las
proteínas más resistentes al
desplegamiento.
ciertos hipertermófilos producen en
grandes cantidades solutos como el
fosfato de diinositol, el fosfato de diglicerol
y el manosilglicerato, que parece ser que
ayudan a estabilizar las proteínas frente a
la desnaturalización térmica.
Estabilidad de las membranas a altas
temperaturas
Las membranas citoplasmáticas de los
termófilos y los hipertermófilos deben ser
termoestables.
En los termófilos, esto se contrarresta
construyendo membranas con cadenas
más largas, mayor contenido de ácidos
grasos saturados y menor de insaturados
que el de las membranas de los
mesófilos.
Los ácidos grasos saturados forman un
ambiente hidrófobo más fuerte que los
insaturados, y las cadenas más largas
tienen un punto de fusión más elevado
que las cortas.
Los hipertermófilos, arqueas en su
mayoría, no contienen ácidos grasos en
sus membranas, sino hidrocarburos C40
formados por unidades repetitivas de
isopreno unidas por enlaces éter a fosfato
de glicerol
3.5 POTENCIAL DE HIDRÓGENO (pH)
5.14 Efecto del pH en el crecimiento
microbiano (Libro)
Acidófilos
Los neutrófilos son los organismos que
crecen de manera óptima a un valor de
pH en el intervalo neutro (pH de 5,5 a
7,9).
Los acidófilos son los organismos que
crecen mejor a pH por debajo de 5,5.
Hay distintas clases de acidófilos
1. Los que crecen mejor a pH
moderadamente ácidos
2. Los que crecen a pH muy bajos
La mayoría de los acidófilos no pueden
crecer a pH 7, y muchos no pueden crecer
a valores de más de dos unidades por
encima de su pH óptimo.
Un factor fundamental para el carácter
acidófilo es la estabilidad de la membrana
citoplasmática
● Cuando el pH sube hasta valores
neutros, la membrana
citoplasmática de las bacterias
muy acidófilas se destruye y las
células se lisan.
Alcalófilos
Alcalófilos: microorganismos con
crecimiento óptimo a pH de 8 o más
Algunos procariotas alcalófilos extremos
son también halófilos (les gusta la sal), y
la mayoría de ellos son arqueas.
pH citoplasmático y tampones
El pH óptimo para el crecimiento de un
organismo se refiere únicamente al
ambiente extracelular; el pH intracelular
debe permanecer cerca de la neutralidad
para impedir la destrucción de las
macromoléculas.
Para impedir grandes variaciones de pH
durante el crecimiento microbiano en
cultivos discontinuos se suelen añadir
soluciones amortiguadoras (tampones) a
los medios de cultivo junto con los
nutrientes necesarios.
Halófilos y organismos relacionados
Los halófilos son microorganismos que
viven en ambientes con necesidad de
NaCl.
La concentración óptima de NaCl
observada varía con el organismo y
depende del hábitat.
Halotolerantes: organismos pueden
tolerar cierta concentración de solutos
disueltos, pero crecen mejor en ausencia
de solutos añadidos
Halófilos extremos: son capaces de
crecer en ambientes muy salinos
Osmófilos: organismos capaces de vivir
en ambientes con alta concentración de
azúcares
Xerófilos: organismos que pueden vivir
en ambientes muy secos (por ausencia de
agua más que por presencia de solutos
disueltos)
3.6. OXÍGENO
5.16 Oxígeno y crecimiento microbiano
(Libro)
Para muchos microorganismos, el
oxígeno (O2) es un nutriente esencial; ya
que sin él no pueden llevar a cabo el
metabolismo ni crecer.
Otros organismos, por el contrario, no
pueden crecer, e incluso pueden morir, en
presencia de O2.
Tipos de microorganismos con
relación al oxígeno

Aerobios: pueden crecer a tensiones
normales de oxígeno y respiran O2 en su
metabolismo
Microaerófilos: aerobios que pueden
usar O2 solo cuando está a una
concentración más baja que la del aire
Aerobios facultativos: en condiciones
adecuadas de nutrientes y cultivo puro
pueden crecer en ausencia de O2.
Los organismos facultativos crecerán por
todo el tubo, pero lo harán mejor en la
parte superior
Los microaerófilos crecerán cerca de la
parte superior, pero no exactamente en
ella
Los anaerobios crecerán solamente cerca
del fondo del tubo, donde no puede llegar
el O2.

Anaerobios: organismos que no pueden

respirar oxígeno
1. Anaerobios aerotolerantes:
pueden tolerar el O2 y crecen en
su presencia aunque no lo respiren
2. Anaerobios estrictos: a los que el
oxígeno inhibe o incluso mata

La anaerobiosis estricta es característica

de sólo tres grupos de microorganismos:
1. Bacterias y arqueas
2. Pocos hongos
3. Pocos protozoos
Técnicas de cultivo para aerobios y
anaerobios
Para el cultivo de los aerobios es
necesario asegurar una buena ventilación,
ya que el oxígeno consumido por los
organismos durante el crecimiento no se
reemplaza lo bastante rápido por simple
difusión del aire.
Un ejemplo de agente reductor es el
tioglicolato, que está presente en el
caldo de tioglicolato, un medio usado
normalmente para determinar los
requerimientos de oxígeno de un
organismo
Los aerobios estrictos solo crecerán en la
parte superior del tubo
(a) Aerobios estrictos: crecen solamente
cerca de la superficie.
(b) Anaerobios: crecen solo lejos de la
superficie.
(c) Aerobios facultativos: pueden crecer
tanto en presencia como en ausencia de
O2
(d) Microaerófilos: crecen lejos de la
zona más óxica.
(e) Anaerobios aerotolerantes: crecen
por todo el tubo. El crecimiento no es
mejor cerca de la superficie, porque estos
organismos solo pueden fermentar
¿Por qué el oxígeno es tóxico?
El oxígeno molecular (O2) no es tóxico,
pero se puede convertir en subproductos
tóxicos, que dañan o matan las células superóxido-dismutasas como con
que no son capaces de contrarrestar su catalasas.
efecto. Por ejemplo:
● Anión superóxido (O2− ), La superóxido-dismutasa es una enzima
● Peróxido de hidrógeno (H2O2) esencial para los aerobios.
● Radical hidroxilo (OH·).
Algunos anaerobios aerotolerantes
carecen de ella y en su lugar usan
complejos de manganeso no proteínicos

Algunas arqueas y bacterias anaerobias

estrictas no tienen superóxido dismutasa y
en su lugar es la enzima
Superóxido-dismutasa y otras enzimas superóxido-reductasa la que elimina el
que destruyen formas tóxicas de superóxido.
oxígeno
3.7. Luz
El anión superóxido y el peróxido de
hidrógeno son las especies tóxicas del 3.8. Nutrientes
oxígeno más abundantes, y las células
tienen enzimas para destruirlas

Las enzimas catalasa y peroxidasa atacan

el peróxido de hidrógeno, y forman O2 y
H2O

El anión superóxido es destruido por la

superóxido-dismutasa

La superóxido-dismutasa y la catalasa (o
la peroxidasa) trabajan así en serie para
convertir el anión superóxido en productos
inocuos

Los aerobios y los aerobios facultativos

normalmente cuentan tanto con