1.2.1 Etapas

           1.2.1.1. Etapa de digestión

Es la primera etapa de la determinación de proteínas por el método Kjeldahl tiene como objetivo
romper todos los enlaces de nitrógeno de la muestra y convertir todo el nitrógeno unido
orgánicamente en iones amonio (NH4 +).
En primer lugar, se prepara la muestra de un peso conocido en un tubo de digestión,
añadiendo a la muestra ácido sulfúrico H2SO4 y un catalizador, que contiene sulfato y
cobre potásico, estos compuestos aceleran el proceso de digestión. Pasar la muestra a un tubo
de digestión y llevar a calentar a 350-380 C° (a mas T° más rápido es la digestión) La
combinación de calor y medio ácido descompone la muestra y, de esta forma, libera el nitrógeno
que bajo estas condiciones se convierte en sulfato de amonio (una sal con la fórmula química
(NH4+)2SO4–))

Muestra Catalizador
Proteína (-N) + H2 SO4 (NH4 ) 2 SO4 + CO2 + H2 O

1.2.1.2. Destilación
Durante el proceso de destilación los iones amonio (NH 4 +) se convierten en amoniaco (NH3 )
mediante la adición de un álcali (NaOH). El amoniaco (NH 3 ) es arrastrado al vaso receptor por
medio de una corriente de vapor de agua.

El tubo de borosilicato es colocado en el destilador, donde es dosificado hidróxido de

sodio para la neutralización. El sulfato de amonio, presente en el tubo, en contacto con
el hidróxido de sodio dosificado y el vapor de agua de la caldera del equipo, es
transformado en hidróxido de amonio y, así, liberado en estado gaseoso.
Cuando el hidróxido de amonio es liberado, éste pasa por el sistema de destilación del
equipo y condensa dentro del Erlenmeyer que fue preparado previamente con ácido
bórico y el indicador, formando el borato de amonio en una coloración que pasa de rojo
pálido para verde. De esta forma, es finalizada la destilación de la muestra.
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1.2.1.3. Etapa de valoración 
La concentración de los iones amonio capturados puede determinarse por medio de dos tipos
de valoración:

Cuando se utiliza el ácido bórico como solución absorbente, el cual se da la valoración

ácido-base utilizando una solución estandarizada de ácido sulfúrico o clorhídrico y una
mezcla de indicadores. El rango de concentración de la solución utilizada varía entre
0,01N a 0,5N dependiendo de la cantidad de iones amonio presentes. El punto final de
la valoración también se puede determinar potenciométricamente con un electrodo
de pH. Esta valoración se llama valoración directa.

B(OH)4 - +HX ↔ X+ B(OH)3 + H2 O

HX= ácido fuerte (X= Cl -, etc.)

Cuando se utiliza una solución valorada de ácido sulfúrico como solución absorbente,
el ácido sulfúrico residual (es decir, el exceso que no reacciona con NH 3 ) se valora con
una solución estandarizada de hidróxido sódico y la cantidad de amoniaco se calcula
por diferencia. Esta valoración se llama valoración indirecta o por retroceso.
 H2 SO4 (residual) + 2NaOH SO4 2- + 2Na+ +2H2 O

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