UNIVERSIDAD DE CHILE

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACEUTICAS

DEPARTAMENTO DE QUIMICA ORGANICA Y FISICOQUÍMICA
LABORATORIO de FISICOQUIMICA_2021 Carrera Química

Actividad Asincrónica N° 1

EFECTO HIDROFÓBICO y ENERGÍA LIBRE DE TRANSFERENCIA

El objetivo de esta actividad es la evaluación del efecto de la presencia de diferentes

cosolventes en la transferencia de tolueno a la fase acuosa y su extrapolación a las
interacciones presentes en diversos medios, por ejemplo, en sistemas biológicos. Para
esto, se determina la concentración de tolueno realizando medidas de absorción UV-
Visible.

Los cosolventes son de interés biofísico debido a que son comúnmente utilizados para
la precipitación, plegamiento/desplegamiento y cristalización de proteínas.

La ecuación para la determinación de la Energía libre de Gibbs de la transferencia de

tolueno a la fase acuosa se muestra a continuación.

Trabajo Experimental
Se prepara el sistema bifásico (24 horas antes de realizar los experimentos)

Preparar 50 mL de cada solución stock de las siguientes concentraciones:

• Cloruro de guanidinio 6 M
• Cloruro de sodio 5 M
• Tiocianato de potasio 2 M
• Sacarosa 2 M

A continuación, preparar 10 mL de las siguientes diluciones a partir de las soluciones

stock previamente realizadas:
• Cloruro de guanidinio (1,2 ; 2,4 ; 3,6 ; 4,8 ; 6,0 M)
• Cloruro de sodio (1 ; 2 ; 3 ; 4 ; 5 M)
• Sacarosa (0,5 ; 1 ; 1,5 ; 2 M)

Preparar 20 mL de dilución de tiocianato de las siguientes concentraciones: 0,3 ; 0,66 ;

1,0 M

En un tubo de ensayo agregar los 10 mL de las diluciones preparadas de cada

compuesto, agregar 2 mL de tolueno y agitar vigorosamente. Dejar en reposo para
establecer el equilibrio al menos 24 horas.
Preparar blanco agregando a un tubo de ensayo 10 mL de agua destilada y 2 mL, agitar
vigorosamente. (Preparar por duplicado)
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Determinación de la concentración de tolueno en la fase acuosa.

Utilizando la Ley de Lambert-Beer es posible determinar la concentración de tolueno

transferido a la fase acuosa. Para esto realice el siguiente procedimiento:
Configurar el espectrofotómetro para realizar un barrido de 260-280 nm, y utilice cubeta
de cuarzo.
a) Realizar el blanco con agua (excepto para las soluciones de KSCN en donde se debe
utilizar como blanco cada dilución preparada).
b) Determinar la absorbancia del peak cercano a 268 nm.
c) Sea cuidadoso en la extracción de la fase acuosa, presencia de gotas de tolueno
perturbarán su determinación.
d) Ambientar la cubeta entre cada medición, la determinación de absorbancia se realiza
de menor a mayor contenido de tolueno esperado en la fase acuosa.

La información teórica y experimental, así como el tratamiento de datos e indicaciones

para abordar la discusión están contenidos en el material adicional (Joseph M. Serafin,
“Transfer Free Energy and the Hydrophobic Effect”, Journal of Chemical Education 80
(2003) 1194 y material suplementario)