BIOLOGIA CELULAR

UNIDAD UNO
 METODOS DE ESTUDIO DE LA
CÉLULA

1 LOS METODOS DE ESTUDIO DE LA CELULA SON FISICOQUIMICAS Y

MORFOLOGICAS

I) Técnicas de estudio fisicoquímico: II) Técnicas de estudio morfológico:

Determinar la composición química de Caracterizar forma, tamaño y estructura
la célula y su relación con las celular.
estructuras celulares.
Doc. René Copeticona
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CÉLULA

2 LOS METODOS FISICOQUIMICOS SE EMPLEAN PARA EL

AISLAMIENTO, LOCALIZACION E IDENTIFICACION DE SUSTANCIAS

Desventajas:

a) Los componentes de un ser vivo se

encuentran formando mezclas muy
complejas.
b) La mayoría de las sustancias que
encontramos en los seres vivos son,
a su vez, de una gran complejidad
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3 LAS TECNICAS FISICOQUIMICOS SON LA CENTRIFUGACION,

CROMATOGRAFIA, ELECTROFORESIS Y CULTIVOS

CENTRIFUGACION CROMATOGRAFIA ELECTROFORESIS CULTIVOS CELULARES

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4 LA CENTRIFUGACION PERMITE LA SEPARACION DE COMPONENTES

DE UNA MEZCLA POR DIFERENCIA DE VELOCIDADES (g)
Ultracentrifugas

1 FRACCIONAMIENTO 2. CENTRIFUGACION
HOMOGENEIZACION En ultracentrífuga se alcanza hasta 100.000 g. (1g=9,8 m/s2)
El material biológico, se fragmenta, Los materiales biológicos sometidos a estas g van al fondo
disgregado libera: orgánulos, membranas de los recipientes y depende: de su masa, su forma ,
celulares, núcleos, moléculas libres y agua. volumen y naturaleza del medio liquido de centrifugación
Svedberg ( S, Sv) coeficiente de sedimentación de una partícula o macromolécula cuando se centrifuga Doc. René Copeticona
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5 LA CROMATOGRAFIA PERMITE LA SEPARACION DE COMPONENTES

DE UNA MEZCLA POR DIFERENCIAS DE ABSORCIÓN

CROMATOGRAFÍA DE GASES
CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL:
Separa pequeñísimas cantidades (0,05 mg) de sustancias muy
Separa sustancias químicas de
propiedades parecidas. Ejemplo: clorofila parecidas químicamente; ejemplo: ácidos grasos, azúcares u
hormonas Doc. René Copeticona
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6 LA ELECTROFORESIS SEPARA MEZCLAS POR DIFERENCIA DE

POTENCIAL

Las sustancias que componen la mezcla se

desplazarán en función de su carga
eléctrica.

Ejemplo: sustancias con cargas eléctricas:

proteínas y ácidos nucléicos

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LOS CULTIVOS IN VITRO PERMITE MANTENER LINEAS CELULARES
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Ventaja:
Facilidad para el tratamiento del material
biológico y su estandarización.

Las células extraídas se cultiva en un medio

con las condiciones físicas y químicas
adecuadas, suministrándoles sustancias que
no son capaces de sintetizar.
Se venden medios de cultivo concretos para
cada tipo celular.
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8 LOS METODOS MORFOLOGICOS PERMITEN LA OBSERVACION DE

LA ESTRUCTURA CELULAR

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9 EL PODER DE RESOLUCION DEL MICROSCOPIO PERMITEN LA

OBSERVACION DE LA ESTRUCTURA CELULAR

El ojo humano puede distinguir a 25 cm dos objetos separados entre sí 0,2 mm.
El poder separador o poder de resolución del ojo se ve incrementado por el
microscopio hasta unos 0,01 mm que permite observar células de mamíferos Doc. René Copeticona
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10 PARA UNA BUENA OBSERVACION DE LA MUESTRA SE DEBEN

TOMAR ENCUENTA LOS PARAMETROS OPTICOS

Contraste
AUMENTO Poder de resolución Nº de campo Diferencia de
Distancia si dos puntos se Es el diámetro de la
absorción de luz
distinguen imagen observada a
través del ocular, Profundidad de foco entre el objeto y el
Mayor es la resolución, cuando medio
menor es la longitud de onda expresado en
Puede aumentarse
Mayor es la resolución, cuanto mas milímetros
grande es la apertura numérica con las tinciones
Mayor es la resolución con aceite Doc. René Copeticona
de cedro
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UNA OBSERVACION CON BUNOS PARAMETROS OPTICOS
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12 PARA LA OBSERVACION DEL MATERIAL BIOLOGICO REQUIERE DE

UNA PREPARACION PREVIA

1- CORTE. 4- TINCIÓN.
2- FIJACIÓN. 5- MONTAJE.
3-
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DESHIDRATACIÓN.
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13 EN EL MICROSCOPIO ELECTRONICO SON LOS ELECTRONES LO

QUE ES LAS ONDAS DE LUZ AL MICROSCOPIO OPTICO
Los microscopios electrónicos permiten
aumentos útiles que van de 2000 a 100.000
pudiendo llegar hasta 600.000.

1º) FIJACIÓN. Las células son fijadas en tetróxido de osmio

(OsO4), el formaldehído (HCHO) y el permanganato
potásico (MnO4K).
2º) DESHIDRATACIÓN e INCLUSIÓN. La pieza es
deshidratada e infiltrada mediante una resina o plástico
para su corte.
3º) CORTE. Los cortes se realizan mediante
ultramicrotomos de cuchilla de vidrio o de diamante. (0,03
μ) Doc. René Copeticona
depositados sobre un tamiz y observadas al microscopio.
 Tema 4: METODOS DE ESTUDIO
DE LA CÉLULA
Adaptado de: Supo

LOS METODOS
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