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MÓDULO INTRODUCTORIO -
MEDICINA
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TEMA 1: MÉTODOS DE ESTUDIO EN
BIOLOGÍA CELULAR
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2. Instrumentos de observación
El microscopio fue inventado, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Janssen, en opinión de
los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la
"Accademia dei Lincei", una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo
sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.

Sin embargo, las primeras publicaciones

importantes en el campo de la microscopía
aparecen en 1660, cuando Malpighi prueba la
teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea,
al observar al microscopio los capilares
sanguíneos y, en 1665, cuando Hooke publica su
obra “Micrographia”.
A mediados del siglo XVII, un comerciante holandés,
Leenwenhoek, utilizando microscopios simples de
fabricación propia, describió por primera vez
protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos
rojos. Este instrumento era de una sola lente de
forma convexa (lupa) que permitía un aumento de 50
a 270 veces.
Durante el siglo XVIII, diversos adelantos mecánicos aumentaron la estabilidad y facilidad de uso del
microscopio, aunque no se desarrollaron mejoras ópticas. Las mejoras más importantes de la óptica
surgieron en 1877, cuando Abbe publicó su teoría del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss, mejoró
la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos
de 2000 veces.

A principios de los años 30 del siglo XX, se había alcanzado el límite teórico para los microscopios
ópticos, no consiguiendo éstos aumentos superiores a 500 veces o 1000 veces; sin embargo, existía un
deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria... etc.).

El microscopio electrónico de transmisión (M.E.T.) fue el primer tipo de microscopio electrónico

desarrollado, que utiliza un haz de electrones, en lugar de luz, para enfocar la muestra, consiguiendo
aumentos de 100 000 veces. Fue ideado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania, en 1931.
Posteriormente, en 1942 se desarrolló el microscopio electrónico de barrido (M.E.B.).

Con el advenimiento de la microscopía electrónica, en los comienzos de la década de 1930, y sus

técnicas asociadas, pudo avanzarse, en gran medida, en el conocimiento de la compleja organización
celular. Por ello, el avance en el campo de la biología celular está directamente ligado a los adelantos
que se han logrado en el campo de la microscopía y en las técnicas de obtención de preparados
histológicos, ya que una variedad de métodos de tinción (proceso por el cual se tiñen tejidos) permitió
obtener el contraste suficiente como para hacer visibles las estructuras celulares, incoloras y
translúcidas.

Para poder apreciar el tamaño de las diferentes estructuras celulares, es necesario conocer las
unidades de medidas que se usan en relación con dichas estructuras.

Relacionando con la unidad de longitud, el metro, se establecen las siguientes equivalencias:

metro centímetro milímetro micra milimicra angstrom picometro

m cm mm µm mµ Å pcm

1m 10-2m 10-3m 10-6m 10-9m 10-10m 10-12m

El estudio de los sistemas biológicos se realiza en distintos niveles (órganos, tejidos, células, bacterias,
virus, moléculas, átomos), determinados por límites impuestos artificialmente por el poder de
resolución (ver más adelante) de los instrumentos utilizados para observarlos. El ojo humano sólo
puede resolver (discriminar) dos puntos separados por más de 0,1 mm (100 µm). La mayoría de las
células son mucho más pequeñas y, para estudiarlas, se necesita un instrumento de mayor poder de
resolución, como el microscopio óptico (0,2 µ m). Tanto para las células como para los organoides de
mayor tamaño (como la mitocondria y el núcleo) se define su medida con más facilidad en términos de
micras. Una célula hepática puede tener aproximadamente 20 µm de diámetro y una mitocondria cerca
de 2 µm de longitud. Pero, la mayor parte de las subestructuras celulares como ribosomas, lisosomas,
complejo de Golgi, etc. y moléculas como proteínas, ácidos nucleicos, etc. son más pequeñas aún y
sus tamaños se definen en términos de mµ (nm), Å o pcm, requiriendo para su observación la
resolución del microscopio electrónico u otros. En la figura 2 se indican aproximadamente los
tamaños de las células eucariotas, las bacterias, los virus y las moléculas, y los límites de resolución
del ojo humano, del microscopio óptico y el electrónico. Puede advertirse que el microscopio óptico
permite un aumento de 500 veces con respecto a la resolución del ojo, y el electrónico un aumento 500
veces mayor que el óptico.

Con respecto al peso de los componentes celulares, éste se expresa en picogramos (1pg = 10-12 gr) y
el de las moléculas en Dalton. Un Dalton (Da) es equivalente al peso de un átomo de hidrógeno, pero a
menudo se utiliza el múltiplo kilodalton (1 kDa = 1000 Da). Por ejemplo, una molécula de agua pesa 18
Da y una de hemoglobina 64,5 kDa.

Un instrumento óptico es, esencialmente, una lente o sistema centrado de lentes, cuya finalidad es
obtener una imagen aumentada de un objeto. Además, puede incluir prismas, espejos, armazón de
montaje y otros accesorios.

Las lupas son lentes o sistemas de lentes convergentes gracias a las cuales los objetos pueden ser
vistos con un ángulo mayor que el que permite la visión directa, lo cual posibilita al operador observar
una imagen con más detalles que los que le permite el poder de resolución de sus ojos.

Se utiliza para examinar objetos cuyo tamaño sea superior a 0,07 mm, lo que equivale a 70 µm. Con la
lupa se realiza un estudio macroscópico más detallado, así, por ejemplo, pueden utilizarse lupas
binoculares montadas en armazones de lentes para realizar cirugías oculares, neurocirugías, etc. Es
común también que los dermatólogos observen los detalles morfológicos de las lesiones de piel con la
ayuda de una lupa de mano. En el área de la biología, se la utiliza para la observación detallada de
insectos, artrópodos, huevos de anfibios, etc. Es importante destacar que los materiales a observar no
necesitan ninguna preparación especial previa y pueden ser vivos o muertos.

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Tabla De Contenidos

1. Introducción
2. Instrumentos de observación
3. Microscopio Óptico
4. Microscopio Electrónico
5. Técnicas de preparación del material biológico
6. Video explicativo: componentes, enfoques y cuidados de un Microscopio Óptico

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