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CÁTEDRA DE BIOQUÍMICA GENERAL Y BUCAL-FOUBA
1. Acetil~CoA + Oxalacetato +
Citrato Sintasa Condensación + Hidrólisis
H2O → Citrato + CoASH + H+
3. Isocitrato + NAD+ →
Oxidación +
α-cetoglutarato + CO2 + NADH + Isocitrato Deshidrogenasa
Decarboxilación
H+
4. α-cetoglutarato + CoASH +
Complejo αCetoglutarato Oxidación +
NAD+ →
Deshidrogenasa Decarboxilación
Succinil-CoA + CO2 +NADH + H+
8. L-malato + NAD+ →
Malato Deshidrogenasa Oxidación
Oxalacatetato + NADH + H+
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Fig. 7: Ciclo de Krebs. Las 8 enzimas que participan en el ciclo son: 1) citrato sintasa; 2)
aconitasa; 3) isocitrato deshidrogenasa; 4) a cetoglutarato deshidrogenasa; 5) succinato tio-
cinasa; 6) succinato-coenzima Q reductasa; 7) fumarasa y 8) malato deshidrogenasa.
1. Formación de citrato:
La condensación aldólica inicial de acetil CoA con oxalacetato para formar citrato es
catalizada por la enzima condensante, citrato sintasa (o sintetasa), que efectúa la síntesis de
un enlace carbono - carbono entre el metilo de la acetil CoA y el carbonilo del oxalacetato. Al
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La reacción es catalizada por la succinil CoA sintetasa que algunas veces se denomina
succinato tioquinasa. La ruptura del enlace tioéster del succinil CoA se acopla a la
fosforilación de guanosina difosfato (GDP). De esta manera se transfiere gran parte de la
energía libre del enlace tioéster al enlace anhidridofosfórico del GTP que se formó. Está
reacción es fácilmente reversible siendo su ∆G°= - 0.8 Kcal/mol.
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El ΔG que resulta de quitar 2H de carbonos vecinos para formar un doble enlace C=C
es menor que el G que se obtiene al quitar 2H de un carbono (uno de los cuales forma parte
de una función hidroxilo) para formar un grupo carbonilo (-C=O).
En la última etapa del CAT la malato deshidrogenasa cataliza la oxidación de malato para
formar oxalacetato. En esta reacción el NAD+ es el aceptor de H, formándose la tercera
molécula de NADH del CAT. El equilibrio de esta reacción se inclina hacia la formación de
malato porque su ΔG°= +7 kcal/mol. Sin embargo, el ∆G° total del ciclo es menor de cero y
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todo se dirige hacia la formación de oxalacetato. Por otro lado, los NADH que se formaron en
el ciclo son reoxidados rápidamente a NAD+ en la cadena respiratoria.
Resumiendo:
1. Ingresan al ciclo 2 átomos de carbono cuando se condensa una unidad de acetilo (del
acetil-CoA) con oxalacetato. Por decarboxilaciones sucesivas catalizadas por las
deshidrogenasas (isocitrato y alfa ceto glutarato) salen del ciclo 2 carbonos en forma de
CO2.
2. En las 4 reacciones de oxidación salen del ciclo 4 pares de átomos de hidrógeno. En
las decarboxilaciones oxidativas del isocitrato y alfa ceto glutarato se reducen 2 NAD+. En
la oxidación del succinato se reduce un FAD y en la oxidación del malato se reduce otro
NAD+.
3. Se genera un enlace fosfato de alta energía (en forma de GTP) a partir del enlace
tioéster altamente energético del succinil CoA.
4. Se consumen 2 moléculas de agua; una en la síntesis del citrato (por hidrólisis del
citril-CoA) y la otra en la hidratación del fumarato.
Si bien el balance de carbono por vuelta es tal que por cada grupo de dos
carbonos de la acetil-CoA que entran en el ciclo, se liberan dos moléculas de CO2. Los
dos carbonos de la acetil CoA que entran al ciclo no se pierden como CO2, sino que se
convierten en la mitad de la molécula simétrica de 4 carbonos, succinato, en la quinta
reacción. Las dos mitades de esta molécula simétrica son equivalentes químicamente.
De modo que en términos de rastreo de carbonos, los carbonos de la acetil CoA son
distribuidos uniformemente en las moléculas que surgen del succinato.
La mayor parte de la energía liberada en las reacciones del CAT se conserva en forma
de coenzimas reducidas: NADH y FADH2.
La oxidación de estas moléculas por la cadena de transporte de electrones, lleva a la
producción de ATP cuando se transfieren los electrones desde estos transportadores al
oxígeno, el aceptor final. Se forman 3 moles de ATP en la mitocondria por cada NADH,
mientras que por cada FADH2, se generan dos. Por lo tanto cuando se oxidan los 3 NADH y
un FADH2, se forman 11 moléculas de ATP. Además, se forma un enlace directo de alta
energía por cada unidad de acetilo que entra al CAT: es el GTP que se forma en la reacción
5. Este GTP es semejante al ATP ya que por la siguiente reacción se interconvierte
permanentemente:
GTP + ADP → GDP + ATP
Por lo tanto se forman 12 ATP por unidad de acetilo que se oxida completamente en
cada vuelta del ciclo.
Existe un control global del ciclo a través del aporte de los cofactores oxidados a las
deshidrogenasas. A su vez depende de la disponibilidad de ADP y por ende de la utilización
de ATP o lo que es lo mismo, de la carga energética de la célula. Hemos señalado que la
disponibilidad de acetil CoA es el primer punto de control de la velocidad del CAT y por ende
la regulación de las enzimas del complejo de la piruvato deshidrogenasa controlará el
suministro de los acetilos.
Además de este control, las propiedades de algunas enzimas del ciclo determinan que
dicho control puede ejercerse a nivel del propio ciclo.
En el encéfalo, tejido que depende de los hidratos de carbono para la síntesis de acetil
CoA, el control se ejerce a través de la piruvato deshidrogenasa y en el mismo ciclo el control
puede ejercerse mediante la inhibición alostérica de la citrato sintetasa por el ATP o el acil
CoA (cadena larga).
1. Citrato sintasa:
- Inhibidores alostéricos: el ATP y acil CoA de cadena larga. Disminuyen la afinidad de
la enzima por el acetil CoA.
- NADH y succinil CoA son también inhibidores.
- Activadores: oxalacetato.
2. Isocitrato deshidrogenasa:
- Inhibidores: NADH y ATP
- Activadores: NAD+, ADP y Ca++
Todos los miembros del ciclo desde el citrato hasta el oxalacetato son potencialmente
glucogénicos puesto que pueden dar lugar a la producción neta de glucosa en hígado y riñón,
órganos que poseen la maquinaria enzimática completa para la gluconeogénesis. La enzima
principal es la fosfoenol piruvato carboxiquinasa.
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moléculas esteroides. El acetil CoA es el sustrato para la biosíntesis de ácidos grasos; sin
embargo, el mismo se forma en la mitocondria debido a que el complejo de la piruvato
deshidrogenasa es mitocondrial y la biosíntesis de ácidos grasos ocurre en el citosol. La
célula necesita transportar acetil CoA a través de la membrana mitocondrial, la cual es
impermeable al acetilo. Esto se logra permitiendo la formación de citrato mitocondrial y
haciendo disponible al acetil CoA, extramitocondrialmente.
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