Facultad de Ciencias de la Salud

Escuela Académico Profesional de

Tecnología Médica en Laboratorio
Clínico y Anatomía Patológica
 Curso: LC5N1
 Bioquímica – Práctica.
 Tema:
 Reconocimiento de carbohidratos.
 Docente:
 Shigueta Chavarría, Carlos.
 Integrante:
 Taype Gonzales, Sharon.
 Banda Gavidia, Leidi Yuleisi
 Vicuña Porcel, Mirian Betty
 Cruz Estela, Elizabeth
 García Siccha, Juan Diego
 Lévano Vilcapoma Johan
 Vargas Pastrana, Meiboll

2023
Construcción de una tabla con los resultados obtenidos.
Soluciones:

1. glucosa al 2%
2. galactosa 2%
3. sol fuctosa 2%
4. sol sacarosa 2%
5. maltosa
6. sol ribosa 2%
7. sol arabiosa
8. glucógeno 1%
9. almidón 2

Resultados:
 Prueba de Molish

Son carbohidratos
  Reacción con Lugol

Reacción Positiva (Son monosacáridos)

Resultados:
reaccionaron en los tubos que contienen:
• Almidón: (reacciono color morado) se produce el color porque el yodo se introduce entre las
espiras de las moléculas de almidón.
• Glucógeno: (polisacárido animal) reacciona color rojizo en esta reacción.
• Maltosa, galactosa, glucosa, fructuosa: NO hubo reacción
 Técnica de Bénedict

ALMIDON NEGATIVO AZUL

(POLISACARIDO)
FRUTUOSA POSITIVO ROJO
LADRILLO (GRUPO
REDUCTORES LIBRES)
GALACTOSA POSITVO ROJO
LADRILLO (GRUPO
REDUCTORES LIBRES)
GLUCOSA POSITIVO ROJO
LADRILLO (GRUPO
REDUCTORES LIBRES)
MALTOSA POSITIVO ROJO
LADRILLO
 Técnica de Seliwanoff

ALMIDON NEGATIVO (ALDOSA)

FRUCTOSA SALMON (CETOSA)

GALACTOSA NEGATIVO (ALDOSA)

GLUCOSA NEGATIVO (ALDOSA)

MALTOSA NEGATIVO (ALDOSA)

  Técnica Bial

Esta prueba se basa en la formación de furfural, al hace reaccionar pentosas con HCl y
posteriormente con orcinol. El furfural es un aldehído electrofílico, en presencia de ácido,
adiciona fenoles (con pérdida de agua) produciendo sustancias altamente coloreadas, las
pentosas originan una coloración azul-verde
 Técnica de Barfoed

REACTIVO REACCCION NO REACCION

FRUCTUOSA, MALTOSA,
BRADFORD ALMIDON
GALACTOSA, GLUCOSA
 1. ¿Cómo se define una UI de actividad enzimática? ¿Cómo se expresa la
actividad enzimática en clínica?
 Cantidad de enzima capaz de convertir 1 µmol de sustrato por minuto en
condiciones enzimáticas óptimas.
 La actividad enzimática se expresa en Unidades Internacionales (UI) por
unidad de volumen, donde una UI es la cantidad de enzima que convierte un
micro mol de sustrato por minuto en condiciones estándar predeterminadas.
2. La actividad enzimática se debe medir en:
a. La fase lineal
b. La fase de agotamiento de sustrato c
c. La fase de retardo
d. Cualquiera de las respuestas anteriores es válido
3. Razone la respuesta que ha dado a la pregunta anterior.
Las concentraciones séricas de enzimas son muy bajas, sin embargo, debido a su alta
capacidad catalítica, se puede determinar su actividad y suponer que es proporcional a
su concentración. Por tanto, el estudio de las enzimas en el laboratorio se basa en la
demostración de la actividad catalítica “in vitro”.
La actividad enzimática se puede determinar analizando:
• La aparición de algún producto.
• La desaparición del sustrato.
• La variación de un cofactor o de algún componente de la reacción.
4. ¿Qué parámetro debe determinar experimentalmente para calcular la actividad
enzimática? ¿Cómo se lleva a cabo dicha determinación en el laboratorio?
La actividad de una enzima se mide mediante la determinación de la cantidad de
sustrato transformado por unidad de tiempo, en condiciones exactamente definidas y
estrictamente controladas se calcula la actividad Vmax (velocidad máxima) y Km
(constante de Michaelis) son dos parámetros cinéticos característicos de cada enzima,
que pueden determinarse experimentalmente.
La actividad catalítica de un enzima se determina midiendo la velocidad inicial de
reacción, que es la pendiente de la curva de progreso (curva de producto formado ó
sustrato transformado frente al tiempo) en el tiempo cero.
5. Si evaluáramos la aparición de NADPH ¿a qué longitud de onda deberíamos
trabajar? ¿Tendríamos que utilizar cubetas de cuarzo?
La actividad de las enzimas se evalúa mediante medidas espectroscópicas, por lo que
necesitamos rastrear el comportamiento de algunos elementos que participan en la
reacción, por supuesto, estos elementos deben absorber luz de cierta longitud de
onda.
 • Si un producto absorbe luz a cierta longitud de onda, podemos juzgar la
apariencia del producto observando el aumento en la absorción a esa longitud
de onda.
• Si el sustrato absorbe luz a cierta longitud de onda, podemos estimar la

descomposición del sustrato observando la disminución en la absorción a esa

longitud de onda.
• De la misma manera, podemos analizar el cambio del cofactor o cualquier
componente de la reacción. Por ejemplo, se suele utilizar la aparición o
desaparición de NADH o NADPH, se emplea las cubetas de cuarzo.
6. En el caso anterior la absorbancia ¿aumentaría o disminuiría?
Analizar cómo evoluciona la absorbancia, es decir la reacción, a lo largo del tiempo y
obtener un valor de A/min en este caso la absorbancia aumentaría.
7. La determinación de la actividad se lleva a cabo generalmente por métodos
cinéticos ¿por qué?
Por que consiste en medir varias veces con intervalo de minutos. Permite comprobar
que realmente estas en la zona lineal de la curva, zona ideal para la determinación. Si
se detectan desvíos de la linealidad se puede despreciar alguna de las medidas finales
de la absorbancia.
En muchas ocasiones las reacciones enzimáticas participan como cofactores los
complejos NAD-NADH o NADP – NADPH y en esta participación se basan los
métodos clínicos.