PROCESO SUSTANCI PROCEDIMIENT TIPO DE PROCESOS ELIMINACIÓN IMÁGEN

A QUE O ÁCIDO POSTERIORE DE

UTILIZA NUCLEIC S CONTAMINANT
O E
Purificación con El extracto celular ADN, Consta de las Hay que tratar la
solventes se mezcla con una elimina siguientes muestra con
orgánicos. Fenol- solución de fenol: ARN fases: La fase RNAasas, las
cloroformo y al superior es enzimas que
cloroformo,
centrifugarse se acuosa y degradan el RNA,
etanol, generan dos fases contiene el antes de precipitar
y una interfase. DNA y el RNA, las proteínas.
acetato de La fase inferior
sodio contiene el
fenol,
la interfase
gruesa y
blanquecina
Precipitación Detergente Se basa en la ADN Consta de 3 Se lavan los
con sales aniónico, precipitación de fases, contaminantes.
(salting-out). precipitación proteínas en Precipitación Se precipita el
salina, presencia de altas de proteínas, ADN con
isopropanol, concentraciones precipitación isopropanol.
etanol. salinas. de ADN ,
lavado y
resuspención
del ADN
Cromatografía Resina, El mecanismo ADN - Sistemas Lavados de la
de intercambio cloruro de básico es el ARN comerciales: columna por
iónico. sodio intercambio QIAamp spin centrifugación y
reversible de los columns de finalmente el ADN
iones en solución QIAGEN, es eluído con agua o
con los grupos Chelex de un tampón de
funcionales unidos BioRad. resuspención de
covalentemente a baja fuerza iónica a
una fase pH neutro o
estacionaria ligeramente
insoluble llamada alcalino.
resina.
Cromatografía Baja Se basa en la ADN – PCR, RT-PCR, Para eliminar las
de adsorción. concentració adsorción y ARN será QPCR, proteínas se utiliza
n de sales desorción de los eliminado secuenciación, una sal como el
(ligeramente ácidos nucleicos en mediante blotting, cloruro de sodio, de
alcalinos) o presencia de sales ARNasas clonaje, etc. forma que por el
simplemente caotrópicas propio intercambio
agua yoduro iónico, las proteínas
de sodio y se irán desuniendo.
con pHs
ácidos
Purificación Esferas Las esferas ADN Después de Son eliminados por
mediante magnéticas magnéticas se varios ciclos de pipeteo o
esferas añaden al lisado de resuspensión y decantación.
magnéticas. la muestra lo que lavado en los
permite su unión a que las esferas
 las moléculas de quedan
ADN.  retenidas por el
imán, el ADN es
eluído en un
tampón
adecuado.
Ultrafiltración. Agua Se eliminan todos ADN Se carga
los contaminantes directamente sobre
mientras que la la membrana de
muestra con los ultrafiltración y
ácidos nucleicos mediante vacío o
permanecen centrifugación, se
retenidos en la eliminan todos los
superficie de la contaminantes.
membrana.
Cloruro de Esta técnica se ADN Cromatografía
Purificación de cesio basa en el plasmídico de exclusión
plásmidos superenrollamiento por tamaño,
del ADN cromatografía
en
hidroxiapatito,
cromatográfico
s basados en
fase reversa o
intercambio
aniónico.
Purificación del Lisado, Lisar las células y ARN El ARN Tratar con la
ARN. alcohol , centrifugar para purificado se enzima DNasa para
agua. eliminar partículas separa del eliminar el ADN
grandes / residuos vidrio y se contaminante.
celulares recoge en un
tubo nuevo.