Histoquímica y Genética

TEMA: FUNDAMENTOS DE LA CITOGENETICA

1- ¿Cuál es la función del laboratorio de citogenética?

Los trastornos cromosómicos constituyen una categoría importante de

enfermedades genéticas. En el ámbito clínico, las anomalías
cromosómicas representan una gran parte de pacientes con
malformaciones congénitas, discapacidad intelectual e infertilidad o
aborto habitual.

Para los pacientes con neoplasias malignas hematológicas u

oncológicas, las pruebas citogenéticas desempeñan un papel clave en el
diagnóstico, el pronóstico, la selección y el seguimiento del tratamiento.
A medida que se identifican los marcadores tumorales y se crean los
tratamientos dirigidos, los resultados de las pruebas realizadas en el
laboratorio de citogenética son una valiosa adición a la información
clínica y patológica.

El laboratorio de citogenética ofrece servicios integrales de pruebas que

incluyen:

• Análisis cromosómico para muestras prenatales, sangre

periférica, médula ósea, linfomas y tumores sólidos

• Ensayos de FISH (hibridación in situ con fluorescencia) y muchas

investigaciones que solo están disponibles en el laboratorio de
citogenética especializados puntualmente.

• Ensayos de micromatriz para trastornos congénitos (anteriores y

posteriores al nacimiento)

2-En que consistes las pruebas genéticas?

La genética es, el estudio de los genes, la herencia y sus mecanismos. Son

útiles para confirmar un diagnostico en una persona que presenta ciertos
síntomas, para monitorear el pronostico de una enfermedad o la respuesta a un
tratamiento médico. Por ejemplo, puede usarse para confirmar un diagnostico
de enfermedad de Duchenne.

Pruebas diagnósticas genéticas: Estas pruebas son útiles para confirmar un

diagnóstico en una persona que presenta ciertos síntomas, para monitorear el
pronóstico de una enfermedad o la respuesta a un tratamiento médico.
Pruebas genéticas presintomáticas y pronosticas: Son útiles para identificar a
las personas que tienen riesgo de padecer una enfermedad antes de la
aparición de los síntomas, en especial en personas que tienen antecedentes
familiares de una enfermedad en concreto y existe un método de intervención
disponible para prevenir la aparición de dicha enfermedad o para minimizar su
gravedad. Es conocido el caso de diferentes tipos de cáncer que son
hereditarios, como es el cáncer de mama debido a mutaciones de los genes
BRCA1 y 2 en los que la identificación de una o más mutaciones genéticas en
una familia permite que otros familiares consanguíneos determinen si
comparten o no los mismos riesgos de padecer este tipo de cáncer hereditario.

Pruebas genéticas de portadores: Estas pruebas se realizan para saber si una

persona es portadora de un gen alterado por una enfermedad determinada. se
recomienda este tipo de pruebas a aquellas personas que tienen antecedentes
familiares de trastornos genéticos o a los miembros de un grupo étnico con un
mayor riesgo de tener ciertas enfermedades genéticas.

Pruebas genéticas prenatales: Sirven para detectar alteraciones genéticas de

un feto y son útiles para determinar los cuidados especiales que requieren el
embarazo y el parto con el objetivo de mejorar el desenlace clínico del bebé.
Durante el embarazo pueden realizarse dos tipos de pruebas prenatales,
pruebas de screening o de tamizaje y pruebas diagnósticas.

3-Desarrolle en breves palabras "EL PROYECTO DEL GENOMA HUMANO"

El Proyecto Genoma Humano (PGH) fue un proyecto internacional de

investigación científica con el objetivo fundamental de determinar la secuencia
de pares de bases químicas que componen el ADN e identificar y cartografiar
todos los genes de un genoma humano promedio desde un punto de vista
físico y funcional, incluyendo tanto los genes que codifican proteínas como los
que no.

4-Que entiende por Biotecnología Moderna?

El desarrollo de la biotecnología moderna, entendida como el conjunto de

técnicas de ADN recombinante que pueden aplicarse para obtener un producto
o beneficio para el hombre, Cuando se habla de vacunas de nueva generación,
de enzimas recombinantes o de cultivos transgénicos, se trata de productos en
los cuales se ha utilizado la información genética de los organismos para
diseñar el producto final, se considera a la genética como una de las ciencias
básicas sobre las que se asientan los desarrollos biotecnológico

5-Clonación de ADN y ADN recombinante: Explique en breves palabras en que

consiste la:
a-replicación de ADN: Hablamos de una cadena completa de ADN totalmente
duplicada. Esto sucede naturalmente en casos. La replicación del ADN es el
proceso mediante el cual se duplica una molécula de ADN. Cuando una célula
se divide, en primer lugar, debe duplicar su genoma para que cada célula hija
contenga un juego completo de cromosomas. Así, el producto de la
duplicación o replicación es una molécula de ADN que posee la misma
información genética que la molécula que le dio origen. ... El producto de la
replicación es una molécula de ARN

b-clonación: La clonación de ADN es una técnica de biología molecular que

hace muchas copias idénticas de un fragmento de ADN, como un gen. En un
experimento típico de clonación, se inserta un gen blanco en un fragmento
circular de ADN llamado plásmido. En un procedimiento típico de clonación de
ADN, el gen u otro fragmento de ADN de interés (tal vez el gen de una proteína
humana médicamente importante) se inserta primero en un fragmento circular
de ADN llamado plásmido. La inserción se realiza con enzimas que "cortan y
pegan" ADN y se obtiene una molécula de ADN recombinante, ADN
ensamblado de fragmentos provenientes de múltiples fuentes.

6-Tecnicas de Biología Molecular

Estas técnicas sirven para analizar ácidos nucleicos y para detectar, e

identificar tanto microorganismos, como diferentes genotipos dentro de una
misma especie y genes de resistencia al tratamiento farmacológico. Todas
estas técnicas necesitan un paso previo de extracción de ADN o ARN.

a-WestermBloot: Es una técnica que permite reconocer anticuerpos por

antígenos que se absorben en una membrana. Estos antígenos son
previamente separados en geles de poliacrilamida-dodecil sulfato de sodio y
luego transferidos a papel nitrocelulosa. Cuando se cuenta con un reducido
numero de muestras se realiza. Cuando se quiere determinar el peso
molecular de la proteína. Cuando se quieren observar cambios en el peso
molecular debido a modificaciones postraduccionales.

b-NorthemBloot: Es una técnica de laboratorio que se utiliza para detectar una

secuencia de ARN especifica en una muestra de sangre o de tejido. Las
moléculas de ARN en una muestra se separan por tamaño mediante
electroforesis en gel. Los fragmentos de ARN son transferidos del gel a la
superficie de una membrana.

c-InmunoBloot: El inmuno Blot se utiliza para establecer el diagnóstico de las

enfermedades ampollosas autoinmunes. Es una técnica usada en biología
celular y molecular para identificar proteínas especificas en una mezcla
compleja de proteínas, tales como la que se presenta en extractos celulares o
de tejidos

d-Enzimas de Restricción: Es una enzima aislada de una bacteria que corta la

molécula de ADN en secuencias específicas. El aislamiento de estas enzimas
es fundamental para el desarrollo de la tecnología de ADN recombinante
(ADNr) y la ingeniería genética.

e-PCR: La reacción en cadena de la polimerasa es una técnica de laboratorio

cuya reacción enzimática in vitro es amplificar millones de veces una secuencia
específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia
blanca es copiada fielmente. la reacción aprovecha la actividad de la enzima
ADN polimerasa que tiene la capacidad de sintetizar naturalmente el ADN en
las células.

7- En que consiste la marcación de ADN in situ: También conocida como

hibridación in situ, es un proceso de laboratorio que consiste en marcar una
hebra sencilla de ARN o ADN denominada sonda y permitir que se empareje
con su secuencia complementaria en el ARN o ADN presente en la muestra de
tejido de cromosomas.

8-Desarrolle la Técnica FISH: Es una técnica que detecta secuencias de ácidos

nucleicos o tejidos preservados mediante el empleo de una sonda marcada con
un fluorocromo, la cual va dirigida hacia un lugar específico del cromosoma y
que emite fluorescencia. La técnica se fundamenta en la capacidad que poseen
los ácidos nucleicos para hibridarse entre si, es decir, la existencia de
determinada secuencia de ADN o ARN que resulta complementaria con otra
secuencia a través de puentes de hidrógeno formados entre las base de
adenina-timina o uracilo y citosina-guanina.

9- Desarrolle Técnica RFLP: El 156110 es una secuencia dentro del ADN capaz
de transponerse a numerosos sitios sobre el cromosoma. Aunque se
desconoce la función exacta de los elementos de inserción, estos llevan
secuencias que codifican la producción de proteínas esenciales para
recombinaciones genéticas. Tales elementos están Eresentes en números y
posiciones diferentes, produ-ciendo patrones polimórficos particulares que
varfan de una cepa a otra (“huellas”) y que se pueden observar mediante el
análisis de RFLP.

El análisis de los polimorfismos del tamaño de los fragmentos de restricción

se ha usado principalmente para determinar las fuentes de infección en brotes
de tuberculosis nosocomial con resistencia a los medicamentos.

Es una técnica de biología molecular que nos permite detectar fragmentos de

ADN de diferentes longitudes. Esta técnica se basa en la acción de las enzimas
de restricción, las cuales reconocen secuencias específicas de nucleótidos del
ADN y hacen un corte en la cadena.

Si exponemos dos cadenas que tengan diferentes alelos, el corte de la misma

enzima nos va a producir fragmentos de ADN de diferentes longitudes. Ya que
los polimorfismos específicos de cada alelo modificarán el reconocimiento por
parte de la enzima y por ende, su capacidad de corte.