¿Ausencia de crecimiento?

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 26 09/09/2022

 Siembra en agar sólido
(agar inclinado o pico de flauta)

•La inoculación puede ser por estría recta o estría

ondulada.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 27 09/09/2022
 Inoculación en agar inclinado
(pico de flauta)

La inoculación puede ser con dispositivos como:

▪pipeta
▪asa bacteriológica
▪hisopo
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 28 09/09/2022
 Usos del cultivo en agar inclinado
(pico de flauta)
•Se emplea para conservar microorganismos por períodos cortos.

* Cultivo: desarrollo/crecimiento).
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 29 09/09/2022
 Cultivo en medio semisólido
•La forma de inoculación es por es por picadura con el
asa estéril.

•Sirve para ver la movilidad de los microorganismos y/o los requerimientos

de O2.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 30 09/09/2022
 Cultivo en medio líquido
• Se realiza en tubos, frascos o en matraces. Con o sin agitación.

Para su inoculación se emplea:

•pipetas serológicas
•asas bacteriológicas
•pipetas Pasteur
•hisopos

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 31 09/09/2022

Interpretación del crecimiento
en medio líquido

El crecimiento se puede manifestar de diferentes

formas, depende del microorganismo en estudio.

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 32 09/09/2022

 Cultivo en medio líquido

Ventajas
Características macroscópicas en •Agitación
los cultivos en medio líquido: •Homogenización
•Producción de gas
* color * turbidez * Sedimento
* Olor * película Desventajas
•No se detecta
contaminación
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 33 09/09/2022
 Resumen de las técnicas de inoculación o siembra
* Según el medio de inoculación:
. En medio líquido
. En medio sólido
. En medio semisólido
* Según el recipiente
. En tubo
. En placa
* Según el instrumento utilizado
. Con asa de platino
. Con pipeta
. Por contacto
* Según la procedencia del inóculo
. a partir de una colonia
. a partir de una suspensión bacteriana
. a partir de una muestra biológica
* Según la zona a inocular
. en superficie
- inoculación parcial
- inoculación total
. en masa
. en profundidad
- en picadura
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 34 09/09/2022
 Resumen de las técnicas de inoculación o siembra

* Según la procedencia del

inóculo
. a partir de una colonia
. a partir de una suspensión
bacteriana
. a partir de una muestra
biológica
* Según la zona a inocular
. en superficie
- inoculación parcial
- inoculación total
. en masa
. en profundidad
- en picadura

Consultar:
http://microexpfqunam.blogspot.mx/
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 35 09/09/2022
 Curva de Crecimiento

 Es la representación gráfica del logaritmo del número de

células frente al tiempo.
 La curva teórica sería una recta pues los microorganismos
estarían creciendo constantemente pero en la práctica
la curva presenta distintas fases como las que se
presentan a continuación.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 36 09/09/2022
 Curva de crecimiento

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 37 09/09/2022

 Fase de Latencia
• También conocida como fase
lag.
 Periodo de adaptación al medio
de cultivo.
 Puede ser breve o larga depende
de las condiciones de
crecimiento y de tipo de célula.
 Durante esta fase existe un
aumento en el metabolismo.
 Depende de edad del inóculo y
diferencia entre el medio de
cultivo de procedencia y el
nuevo

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 38 09/09/2022

 Fase de crecimiento exponencial

• También conocida como

fase log o fase
exponencial.
• Aumento regular de la
población que se duplica
a intervalos regulares de
tiempo.
• Ocurre la división celular
(duplicación) esta
influenciada por factores
ambientales
(temperatura,
composición del medio,
etc.

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 39 09/09/2022

 Fase estacionaria
• Cese del crecimiento
por acumulación de
productos tóxicos o por
agotamiento de
nutrientes, fuente de
energía. No hay
aumento ni disenso de la
población celular. En
ocasiones puede haber
un lento crecimiento
celular y muerte celular
(equilibrio). Disminuye el
nutriente esencial y hay
acumulación de
productos.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 40 09/09/2022
 Fase de muerte

 Disminución de la
población, debido a
que el número de
células que mueren es
mayor que el número
de células que se
dividen
 Puede ir acompañada
de lisis celular

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 41 09/09/2022

 Cepas de referencia
Son microorganismos con características fenotípicas y genotípicas
definidas y que son empleadas como control para diversas
determinaciones microbiológicas(medios, tinciones, etc.)
La norma ISO 17025:1999,
"Requisitos generales para la
competencia de
laboratorios de prueba y
calibración", es una norma
internacional que demuestra
que los laboratorios de
prueba y calibración utilizan
un sistema de calidad, son
técnicamente competentes
y son capaces de generar
resultados técnicamente
válidos.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 42 09/09/2022
 Cepas de referencia
Es un material biológico de control certificado que
proporcionan los ceparios.
Hay en FQ (UNAM), ENCB, España, EU, entre otros.

El cepario certifica que se proporciona un cultivo puro

identificado por diferentes métodos.
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 43 09/09/2022
 ¿Por qué emplear cepas
de referencia?
•Validar y comprobar la reactividad de los medios de cultivo.
•Comparar los resultados obtenidos por distintos laboratorios.
•Control de calidad de reactivos, medios de cultivo y diversos
procedimientos

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 44 09/09/2022

 Ejemplo: ATCC
ATCC: American Type Culture Collection. Rockville, EU

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 45 09/09/2022

 Ceparios
La organización y mantenimiento del cepario, permite
disponer de una serie de cepas de referencia con una
información confiable para la utilización en las diferentes
áreas de la ciencia y la tecnología. Su almacenamiento
permite tener estabilidad y reproducibilidad de
características típicas, morfológicas, bioquímicas, fisiológicas
y serológicas de cada una de ellas.

•Centros de referencia epidemiológica

•Universidades
•Hospitales
•Instituciones privadas

http://www.wfcc.info/
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 46 09/09/2022
 Microsistemas
(semiautomatizados – automatizados)

¿?
Presentación con fines didácticos Sem.23/I 47 09/09/2022
 Residuos Peligrosos Biológico Infecciosos
(RPBI)

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 48 09/09/2022

Ver los siguientes vídeos:
15_Preparación de material para su esterilización | Media Campus (unam.mx)

Preparación de material para su esterilización

Un aspecto de suma importancia para el trabajo en el laboratorio de microbiología

es utilizar material estéril, para lo cual primero se debe preparar como se indica en
este video ya sea poniendo torundas, envolviéndolo o colocándolo en cilindros de
forma tal que esté listo para someterse a esterilización y quedar protegido al
concluir el proceso; esto es, que se mantenga estéril hasta su empleo con los
microorganismos.

20_Siembra por picadura

https://mediacampus.cuaieed.unam.mx/node/4252

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 49 09/09/2022

Presentación con fines didácticos Sem.23/I 50 09/09/2022