BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA.

LICENCIATURA EN FARMACIA.
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL.
PRÁCTICA 9: CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS GRAM
NEGATIVOS EN DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO.
NRC: 54129.
NRC: 25155

EQUIPO 3:
Mary Cruz Mora López.
Irán Michelle Olmos Prieto.
Oscar Artemio Martínez Rojas.
Saúl Chimal Villanueva.
Edgar Manuel Maldonado Martínez.
DOCENTE:
M.C Lorena Guadalupe Cardona Fuentes.
Fecha: 23 de Marzo del 2023.
 A. CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS GRAM NEGATIVOS
EN DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO.
B. INTRODUCCIÓN.

Los medios de cultivo EMB (Eosin Methylene Blue), VB (Violet Red Bile) y MC
(MacConkey) son comúnmente utilizados para el aislamiento y crecimiento de
bacterias gram negativas, incluyendo la Klebsiella.

En el caso específico de Klebsiella, estas bacterias tienen la capacidad de fermentar la

lactosa, lo que las convierte en excelentes candidatos para ser cultivados en medios de

cultivo que contienen este azúcar como fuente de carbono.

En el medio EMB, las colonias de Klebsiella aparecen como colonias mucoides, de

color rosa o violáceo oscuro, debido a la producción de ácido láctico y la acidificación

del medio. Además, el color oscuro de la colonia indica la presencia de eosina y azul

de metileno, que inhiben el crecimiento de otras bacterias gram positivas.

En el medio VB, la presencia de sales biliares y cristal violeta inhibe el crecimiento de

bacterias gram positivas y selectivamente favorece el crecimiento de bacterias gram

negativas, como Klebsiella. Las colonias de Klebsiella en el medio VB aparecen como

colonias rojas o rosadas, debido a la fermentación de la lactosa.

Finalmente, en el medio MC, la presencia de sales biliares y cristal violeta inhibe el

crecimiento de bacterias gram positivas y selectivamente favorece el crecimiento de

bacterias gram negativas que fermentan la lactosa. Las colonias de Klebsiella en el

medio MC aparecen como colonias rojas o rosadas, debido a la fermentación de la

lactosa.

En resumen, la capacidad de Klebsiella de fermentar la lactosa es la razón principal por

la que estas bacterias crecen en los medios de cultivo EMB, VB y MC. Además, la

composición de estos medios de cultivo favorece selectivamente el crecimiento de

bacterias gram negativas e inhibe el crecimiento de bacterias gram positivas.

C. GLOSARIO.
1. Microorganismos: Seres vivos de tamaño microscópico, como las
bacterias.
2. Gram negativos: Bacterias que se tiñen de color rojo-naranja en la técnica
de tinción de Gram, debido a la estructura de su pared celular.
3. Klebsiella: Género de bacterias Gram negativas que se encuentra en el
tracto gastrointestinal y puede causar infecciones en humanos.
4. Medios de cultivo: Sustancias que contienen los nutrientes necesarios
para el crecimiento de los microorganismos.
5. EMB: Medio de cultivo que contiene eosina y azul de metileno y se utiliza
para el aislamiento de bacterias Gram negativas.
6. Fermentación: Proceso metabólico en el que se descompone un
compuesto orgánico en ausencia de oxígeno para obtener energía.
7. Lactosa: Azúcar presente en la leche que algunas bacterias pueden
fermentar.
8. Ácido láctico: Producto de la fermentación de la lactosa por bacterias.
9. Acidificación: Proceso por el cual se reduce el pH de un medio debido a
la producción de ácidos por los microorganismos.
10. Colonias: Agrupación de microorganismos que se desarrollan a partir de
una célula individual en el medio de cultivo.
11. Mucoides: Consistencia gelatinosa o viscosa que tienen algunas colonias
de bacterias.
12. Cristal violeta: Colorante que se utiliza en la tinción de Gram para teñir
las bacterias de color púrpura.
13. Sales biliares: Compuestos presentes en el medio de cultivo que inhiben
el crecimiento de las bacterias Gram positivas.
14. Selectivamente: Capacidad de un medio de cultivo para favorecer el
crecimiento de un tipo de microorganismo en particular.
15. Colonias rojas o rosadas: Coloración que presentan las colonias de
Klebsiella en los medios de cultivo con lactosa.
16. Azul de metileno: Colorante que se utiliza en tinciones para teñir bacterias
de color azul dependiendo de las paredes celulares
17. Pared celular: Estructura que rodea a las células bacterianas y les
proporciona soporte y protección.
18. Gram positivos: Bacterias que se tiñen de color morado en la técnica de
tinción, debido a la estructura de su pared celular.
19. Infecciones: Enfermedades causadas por la invasión y multiplicación de
microorganismos en el cuerpo humano.
20. Respiraciones: Klebsiella es una bacteria anaerobia facultativa, con
respiración aerobia como anaerobia.
D. OBJETIVO.
 Manejar los medios de cultivo adecuados para bacterias Gram negativas e
interpretar los cambios bioquímicos presentados en ellos.
E. MATERIALES.
● Placas de Petri preparadas con los medios de cultivo: Mac Conkey, EMB,
Verde brillante y sulfito de bismuto.
● Mechero Bunsen.
● Asa bacteriológica.
● Cepas de bacterias Gramnegativos.

F. METODOLOGÍA.
1.- La profesora nos hizo entrega de las placas Petri con una muestra de Klebsiella en
distintos medios como: EMB, VB, MC.
2.- Prendimos el mechero bunsen y colocamos las muestras cerca.
3.- Empezamos a observar la morfología de cada una de las muestras.
4.- Después de observar detalladamente la morfología procedimos a desechar nuestras
muestras.
G. METODOLOGÍA EN FLUJO.
 H. RESULTADOS.

Microorganismo. Medio de Fuente de Características Imagen.

cultivo. carbono. morfológicas.

LUZ: opaca.

TAMAÑO:
grande.
Lactosa y FORMA:
EMB. Sacarosa fusiforme.

TEXTURA: lisa.

ELEVACIÓN:
plana.

LUZ: brillante.

TAMAÑO:
Lactosa y pequeño.
Klebsiella.
VB. sacarosa FORMA:

TEXTURA:

ELEVACIÓN:

LUZ: opaca.

TAMAÑO:
grande.

MC. Lactosa y FORMA: circular.

Sacarosa
TEXTURA: Lisa.

ELEVACIÓN:
plana.
I. DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
La práctica realizada requirió la observación e identificación de microorganismos, en
este caso bacterias, gram negativas. Para ello se tomaron en cuenta características
morfológicas de la muestra, tales como luz, tamaño, forma, textura y elevación, las
cuales gracias a prácticas anteriores conocemos a detalle y las hemos estudiado a lo
largo del curso.
No obstante, es de alta relevancia mencionar que nuestra muestra fue una Klebsiella
pseudomona, una bacteria gram negativa en forma de bacilo, la cual genera infecciones
menores en humanos sanos hasta infecciones graves en personas con sistema
inmunológico bajo o comprometido. Algunas infecciones que podría generar esta
bacteria son: neumonía, infecciones en el tracto urinario, infecciones en el torrente
sanguíneo e infecciones en heridas quirúrgicas, durante el desarrollo de esta pudimos
conocer sus características y cómo las observamos en diferentes agares en base a las
propiedades de estos.
Finalizamos la práctica discutiendo nuestros puntos de vista entre el equipo para llegar
a resultados concisos y claros y poder tener un mejor estudio de nuestra bacteria gram
negativo.

J. CONCLUSIÓN.
Tras el análisis de nuestra bacteria podemos concluir que:
El estudio de crecimiento de microorganismos gram negativos, como Klebsiella
pneumoniae es importante ya que nos permite identificar especies en diferentes medios
de cultivo y así poder observar bajo qué condiciones específicas puede proliferar.
También detectamos a que tipo de resistencia a antibióticos puede generar o observar
cuales de estas ya tiene. De esta forma determinamos qué tipos de antibióticos son
efectivos en contra de ellas.
A su vez aprendemos a observar y controlar infecciones hospitalarias, ya que al conocer
su forma de crecimiento y resistencia nos permite implementar medidas de control
efectivas como aislamiento de pacientes y usos de específicos de esterilización.
K. REFERENCIAS.
● Gil, M. (2019, febrero 5). Agar verde brillante: qué es, fundamento,

preparación, usos. Lifeder. https://www.lifeder.com/agar-verde-brillante/

● Previsto, U. (s/f). BD EMB Agar (Eosin Methylene Blue Agar), Modified.

Www.bd.com. Recuperado el 24 de marzo de 2023, de

https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8765