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PRÁCTICA Nº1: DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
INTRODUCCIÓN ¹,²
La excreción de ácido úrico en orina representa el 10% , en plasma se presenta como urato
monosódico el cual es insoluble por lo que a concentraciones superiores a 6,4 mg/dl
produce la formación de cristales de urato que precipitan.
Su principal fuente es el metabolismo endógeno de las purinas. Las dietas ricas en purina
pueden modificarla.
Varía mucho entre individuos y está influida por el sexo, función renal, factores genéticos y
ambientales.
La hiperuricemia es causada por una menor excreción renal del ácido úrico, un aumento de
la producción de ácido úrico o combinación de las dos anteriores.
En relación a los niveles de ácido úrico podemos encontrarnos otras dos enfermedades muy
frecuentes. En primer lugar, la gota, la cual está causada por una respuesta inflamatoria al
depósito de cristales de urato monosódico en las articulaciones. En segundo lugar, los
cálculos renales, los cuales se producen cuando existe una producción excesiva de urato
junto con una hiperexcreción de ácido úrico, se pueden formar cálculos renales de ácido
úrico en orinas ácidas.
El ácido úrico puede medirse en plasma, suero u orina. en este caso la medición se va a
realizar sobre el plasma. La determinación consiste en 2 reacciones consecutivas del ácido
úrico catalizadas por diferentes enzimas que dan como producto final la quinonimina, la cual
se medirá en el espectrofotómetro.
OBJETIVO
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MATERIAL
METODOLOGÍA²
PATRÓN 25 μL
MUESTRA 25 μL
(PLASMA)
CONTROL 25 μL
NEGATIVO
CONTROL 25 μL
POSITIVO
Es un indicador de deterioro del reactivo: Absorbancia (A) del blanco a 520 nm≥0,16.
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MUESTRAS BLANCO PATRÓN MUESTRA CN CP
muestra de plasma
CONCLUSIÓN
La práctica se desarrolló según lo previsto, sin ninguna dificultad y realizando todos los
pasos indicados.
Todos los resultados entran dentro de los valores establecidos, excepto el del control
negativo.
En otras prácticas daríamos los resultados como no válidos y realizaríamos la prueba otra
vez, sin embargo, esta vez identificamos rápidamente nuestro error.
La detección de ácido úrico se basa en un método colorimétrico, por lo que al mezclar los
reactivos con la muestra y controles la solución debe cambiar a un tono rosa-rojizo.
Todas nuestras muestras se cambiaron, en mayor o menor medida, a ese color, excepto
una, el control negativo. Decidimos esperar a pesar de que, al comparar nuestro control con
el de otros grupos, el color del nuestro fuera demasiado claro.
Una vez obtenidos los resultados nuestras sospechas se confirmaron, había un error de
pipeteo en el control negativo haciendo que este se coloreara menos y dando un resultado
menor al medirlo al espectrofotómetro.
Por lo tanto concluimos que los resultados obtenidos son válidos, no obstante se podría
repetir la prueba para asegurarnos de que el error ha sido nuestro y el paciente no presenta
ninguna enfermedad.
BIBLIOGRAFÍA
1. Apuntes
2. [Internet]. Spinreact.com. 2021 [cited 26 February 2021]. Available from:
https://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS45_URIC_LIQ_2016.pdf
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PRÁCTICA Nº2: DETERMINACIÓN DE CREATININA
INTRODUCCIÓN¹,²
Es una prueba que mide los niveles de creatinina en la sangre o en la orina. La creatinina es
un producto de desecho generado por los músculos como parte de la actividad diaria.
Normalmente, los riñones filtran la creatinina de la sangre y la expulsan del cuerpo por la
orina. Cuando hay un problema con los riñones, la creatinina se puede acumular en la
sangre y sale menos por la orina. Los niveles anormales de creatinina en la sangre (suero o
plasma) o en la orina (orina 24h) pueden ser signo de enfermedad renal.
La prueba de creatinina se usa para averiguar si los riñones están funcionando bien. A
menudo, se solicita junto con otra prueba de riñón llamada prueba de nitrógeno ureico en
sangre (NUS) o como parte de un panel metabólico completo. Un panel metabólico
completo es un grupo de pruebas que entrega información sobre diferentes órganos,
aparatos y sistemas del cuerpo. Se suele incluir como parte de un chequeo de rutina.
Los valores normales en plasma en hombres va de 0.7 a 1.3 mg/dL , y en mujeres de 0.6 a
1.1 mg/dL
En orina 24 horas, en hombres va de 10 - 20 mg/Kg/24 h, y en mujeres de 8 -18 mg/Kg/24 h
Las mujeres con frecuencia tienen niveles de creatinina más bajos que los hombres. Esto se
debe a que ellas frecuentemente tienen menor masa muscular. El nivel de creatinina varía
con base en la talla y la masa muscular de una persona.
OBJETIVO
MATERIALES
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METODOLOGÍA²
PATRÓN 100 μL
MUESTRA 100 μL
(PLASMA)
CONTROL 100 μL
NEGATIVO
CONTROL 100 μL
POSITIVO
ORINA 24H
Hombres 10 - 20 mg/Kg/24 h 88 - 177 µmol/Kg/24 h
Mujeres 8 -18 mg/Kg/24 h 71 - 177 µmol/Kg/24 h
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Control Normal: 1,66 - 2,20 mg/dL
Control Patológico: 4,65 - 6,15 mg/dL
RESULTADOS
(𝐴)𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 0,011
➔
(𝐴)𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛
×2 →
0,077
×2 = 0,30 mg/dL x 50* = 15mg/dL→ concentración de la
muestra de orina
(𝐴)𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 0,024
➔
(𝐴)𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛
×2 → 0,077
×2 = 0,62 mg/dL → concentración de la muestra de plasma
(𝐴)𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 0,032
➔
(𝐴)𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛
×2 → 0,077
×2 = 0,83 mg/dL → concentración del control negativo
(𝐴)𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 0,089
➔
(𝐴)𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛
×2 → 0,077
×2 = 2,31 mg/dL → concentración del control positivo
*Se multiplica la concentración de orina por 50 para hallar la concentración total, debido a
que antes de realizar la práctica que ha diluido a 1/50
ACLARAMIENTO DE LA CREATININA
CONCLUSIÓN
La práctica se desarrolló según lo previsto. A pesar de esto los únicos valores que nos
entran dentro de los valores de referencia son las muestras de plasma y orina, los controles
no.
El hecho de que no salgan los controles dentro de los rangos normales nos puede indicar
un reactivo en mal estado o un fallo humano por nuestra parte (mal pipeteo, mal medición..)
A pesar de que lo fácil sería atribuirnos el fallo a nosotras; el hecho de que las muestras
salgan dentro de los valores, nos hace pensar que el fallo está en los controles. Es decir,
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que los controles estén en mal estado y por tanto no reaccionen de manera correcta con el
reactivo.
Aun así esta práctica se daría como no válida y habría que repetir de nuevo todo el proceso
para confirmar los resultados. Eso sí, se repetiría utilizando un reactivo nuevo, unos
controles nuevos y la misma muestra de plasma y orina.
BIBLIOGRAFÍA
1. Principal P, médica E, sangre E. Examen de creatinina en la sangre: MedlinePlus
enciclopedia médica [Internet]. Medlineplus.gov. 2021 [cited 26 February 2021]. Available from:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003475.htm
2. [Internet]. Spinreact.com. 2021 [cited 26 February 2021]. Available from:
https://spinreact.com/files/Inserts/SERIE_SPINLAB_180/Bioquimica/BSIS62_Crea-J_2016.pdf
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PRÁCTICA Nº3: DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA
INTRODUCCIÓN¹,²
OBJETIVO
MATERIALES
METODOLOGÍA²
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3. Pipetear en una cubeta:
CN
BILIRRUBINA 200 1 2 200
TOTAL
CP
BILIRRUBINA 200 1 2 200
TOTAL
CN
BILIRRUBINA 200 1 2 200
DIRECTA
CP
BILIRRUBINA 200 1 2 200
DIRECTA
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VALORES DE REFERENCIA DE LOS CONTROLES NORMALES:
Bilirrubina total→ 1,37-1,93 mg/dL
Bilirrubina directa→ 0,92-1,30 mg/dL
RESULTADOS
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CONCLUSIÓN
Para la realización de esta práctica necesitamos una muestra de plasma, esto es importante
destacarlo ya que el plasma que teníamos estaba hemolizado pudiendo influir en los
resultados obtenidos.
Como podemos observar ninguno de los resultados entran dentro de los valores
establecidos, e incluso alguno sale con valor negativo.
Intentamos hacer los cálculos cambiando los resultados a positivo ya que a veces el
espectrofotómetro sufre de efecto fatiga y los valores pueden salir alterados.
A pesar de intentar remediarlo de esta manera los resultados obtenidos seguían estando
muy alejados de los valores normales.
Otro aspecto a mencionar, y por el cual no damos la práctica y los resultados como válidos,
es que ningún valor de los controles entra dentro del rango. Si estos valores fueran
correctos podríamos intentar hacer una aproximación diagnóstica de los valores de
bilirrubina, pero como los controles tampoco tienen un resultado válido se debe realizar la
práctica de nuevo entera.
Intuimos que los resultados obtenidos pueden ser por un error humano en el pipeteo, fallos
a nivel del espectrofotómetro y la utilización del plasma hemolizado. Por otro lado,
descartamos que el reactivo estuviera en mal estado ya que no se observan ninguno de los
indicativos de deterioro que se mencionan anteriormente en el apartado de metodología.
BIBLIOGRAFÍA
1.Apuntes
2. [Internet]. Spinreact.com. 2021 [cited 26 February 2021]. Available from:
https://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS03_T&D_J_2011.pdf
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PRÁCTICA Nº4: DETERMINACIÓN DE LAS TRANSAMINASAS
INTRODUCCIÓN¹
Las transaminasas son enzimas que se producen en las células de distintas partes del
cuerpo, sobretodo en el hígado, pero también en los músculos, los riñones, el corazón o el
cerebro. Su función es la de intervenir en la producción de diversos aminoácidos, las
pequeñas moléculas de las proteínas que son necesarias para el desarrollo del organismo.
Aunque su trabajo se realiza dentro de las células también son liberadas a la sangre.
La prueba de la enzima alanina aminotransferasa (ALT, por sus siglas en inglés) suele
formar parte de las pruebas de cribado inicial que se practican para detectar enfermedades
hepáticas.
El hígado desempeña varias funciones importantes: almacena la energía procedente de los
alimentos, fabrica proteínas y ayuda a eliminar las toxinas del organismo. El hígado también
fabrica bilis, un líquido que ayuda a hacer la digestión. Existen unas proteínas,
denominadas “enzimas”, que ayudan al hígado a construir y a descomponer otras proteínas.
La enzima ALT (alanina aminotransferasa), es una de esas enzimas. Se encuentra en
grandes cantidades en el hígado y desempeña un papel fundamental en el metabolismo, el
proceso que transforma los alimentos ingeridos en energía.
Por lo general, la enzima ALT se encuentra en el interior de las células hepáticas. Pero,
cuando el hígado se inflama o se lesiona, libera esta enzima en el torrente sanguíneo. La
determinación de la concentración de ALT en sangre proporciona a los médicos una
información importante sobre el funcionamiento del hígado, al permitirles saber si una
enfermedad, un proceso inflamatorio, un medicamento u otro tipo de problema están
afectando a dicho órgano
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La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinada
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de AST en la muestra
ensayada. La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el músculo
del corazón, las células del hígado, las células del músculo esquelético y en menores
cantidades en otros tejidos. Aunque un nivel elevado de AST en suero no es específico de
enfermedad hepática se emplea principalmente para su diagnóstico y seguimiento, junto
con otras enzimas como la ALT y ALP. También se emplea en el control post-infarto, en
pacientes con desórdenes del músculo esquelético, y en otras afecciones. El diagnóstico
clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
Cuando hay transaminasas altas quiere decir que está en curso un proceso inflamatorio en
el hígado. La inflamación en el hígado implica que hay destrucción de las células hepáticas
encargadas de liberar estas enzimas a la sangre.
OBJETIVO
MATERIALES
METODOLOGÍA
CN 1 100 CN 1 100
CP 1 100 CP 1 100
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RESULTADOS
MUESTRA CN CP
MUESTRA CN CP
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CÁLCULOS A 25ºC: multiplicamos los resultados por el factor de conversión que es 0,55
para GPT y 0,48 para GOT.
∆𝐴 𝑀𝑈𝐸𝑆𝑇𝑅𝐴 𝐺𝑃𝑇 =24, 5 𝑈/𝐿 × 0, 55 = 13, 47 𝑈/𝐿
∆𝐴 𝑀𝑈𝐸𝑆𝑇𝑅𝐴 𝐺𝑂𝑇 =50, 75 𝑈/𝐿 × 0, 48 = 24, 36 𝑈/𝐿
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
1. ¿Qué son las transaminasas? [Internet]. infosalus.com. 2021 [cited 26 February 2021].
Available from:
https://www.infosalus.com/salud-investigacion/noticia-son-transaminasas-20150831080032.ht
ml
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PRÁCTICA Nº5: TIRA REACTIVA DE ORINA
INTRODUCCIÓN
Las tiras reactivas de urianálisis (orina) son tiras de plástico en las cuales se han fijado
parámetros en áreas separadas de reactivos. La prueba es para la detección
semi-cuantitativa de uno o más de los siguientes analitos en la orina. Las Tiras Reactivas de
Urianálisis (Orina) pueden ser leídas visualmente y automáticamente con un analizador de
orina.
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pigmentos biliares derivados de la Bilirrubina están presentes en el espécimen de orina y
que posiblemente están enmascarando la reacción de la Bilirrubina.
Sangre: Cualquier mancha verde o el desarrollo de un color verde en el área reactiva en 60
segundos es significativo y el espécimen de orina debe seguir siendo examinado. La sangre
frecuentemente se puede encontrar, pero no invariablemente, en mujeres cuando
menstrúan.
OBJETIVOS
MATERIALES
● Tira de orina
● Bote donde se encuentran las tiras para
METODOLOGÍA*
*Se puede realizar también sumergiendo la tira reactiva en el bote de orina pero nosotras
decidimos hacerlo con gotas para poder ir cronometrando el tiempo mejor ya que el
cuadradito reactivo tiene un tiempo diferente.
RESULTADOS E INTERPRETACIÓN
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CONCLUSIÓN
En base a los resultados tan aumentados que obtuvimos pensamos que el diagnóstico
podría ser una posible infección, tal y como se detalla en la interpretación de la tira de orina,
e intuimos que dicha infección podría venir dada por un traumatismo en los riñones u otros
órganos excretores.
Otra de nuestras opciones para explicar tales resultados era que el paciente tuviera alguna
patología o fallo renal o tuviera diabetes.
Tras discutir en clase todos los resultados de los grupos y casi convencidos de que el
paciente tenía varias patologías como una infección y diabetes, la profesora nos confesó
que era una orina adulterada con sangre, glucosa y otros elementos.
En base a este nuevo dato los resultados que obtuvimos concordaban con esos
compuestos y por tanto la realización de la práctica se había realizado de manera correcta.
BIBLIOGRAFÍA
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