TÍTULO DE LA PRÁCTICA: Tinciones FECHA: 17/03/22

Elaboró:
García Betancourt Inde Cecilia, Rojas Brandao Ema

Resultados
Se realizaron diferentes tinciones para distintas muestras con el fin de clasificar el
microorganismo por su morfología microscópica. Las muestras presentes en el laboratorio
fueron: E. coli, S. aureus, Mycobacterium, y Bacillus sp.

E. coli es una bacteria Gram negativa y S. aurerus es una Gram positiva, por lo que para
estas muestras se utilizó la técnica de tinción de Gram. Mientras que para Mycobacterium
se realizó una tinción de Ziehl Neelsen con una prueba control: S. aurerus. Finalmente,
las tinciones de endospora y cápsula fueron positivas para la prueba con Bacillus sp.

En las tablas siguientes se presentan los resultados para cada microorganismo con su
respectiva morfología, así como fotografías tomadas durante las tinciones. Asimismo, se
muestran los esquemas de diagrama de trabajo.

Todas las muestras fueron observadas a través del microscopio con una resolución óptica
de 10x, 40x y 100x.

Tabla 1. Microscopía óptica de E. coli con tinción de Gram.

Fecha: 3/03/22

Muestra: E. coli

Tinción: Gram

Aumento: 100x

Descripción: Bacilos individuales color

rosa
Tabla 2. Microscopía óptica de S. aureus con tinción de Gram.

Fecha: 3/03/22

Muestra: S. aureus

Tinción: Gram

Aumento: 100x

Descripción: Cocos en forma de racimo

color violeta.

Tabla 3. Microscopía óptica de Mycobacterium con tinción de Ziehl Neelsen.

Fecha: 3/03/22

Muestra: Mycobacterium

Tinción: Ziehl Neelsen

Aumento: 100x

Descripción: Bacilos largos y curvos

color rosa.

Tabla 4. Microscopía óptica de Bacillus sp. con tinción de endospora.

Fecha: 3/03/22

Muestra: Bacillus sp.

Tinción: Endospora

Aumento: 100x

Descripción: Bacilos con endospora

deformante terminal color verde.
Tabla 5. Microscopía óptica de muestra de pulque con tinción negativa de cápsula.

Fecha: 3/03/22

Muestra: Pulque

Tinción: Cápsula

Aumento: 100x

Descripción: Bacilo con una periferia

oscura e interior transparente

Esquema de diagrama de trabajo.

Figura 1. Diagrama de flujo para la tinción de Gram.
Figura 2. Diagrama de flujo para la tinción de Ziehl Neelsen.

Figura 3. Diagrama de flujo para la tinción de cápsula.

Figura 4. Diagrama de flujo para la tinción de endospora.

Discusión/Conclusión

E. coli es una enterobacteria Gram negativa que posee fimbrias adhesivas y una
pared celular que consiste en una membrana externa que contiene lipopolisacáridos,
un espacio periplásmico con una capa de peptidoglicano y una membrana
citoplásmica interna; dadas las características de su estructura, estas bacterias
presentan un color rosa una vez finalizada la tinción de Gram. Mientras que S. aureus
es una bacteria de la familia Staphylococcaceae, con morfología de cocos
conjuntamente alineados en forma de racimo; al ser Gram positiva, es capaz de
retener el primer colorante gracias a que presenta una capa gruesa de peptidoglicano
en su estructura, la cual se conserva después de la adición de alcohol/acetona, dando
como resultado, un color violeta en las bacterias teñidas.

La tinción de Ziehl Neelsen es una tinción diferencial para identificar a los

microorganismos acidorresistentes de los no resistentes. El principio de esta tinción
es la solubilización del material lipídico de la membrana al agregar calor y fucsina, la
cual penetra hasta el citoplasma y tiñe la célula; la decoloración (con ácido) es el
punto clave para la diferenciación, pues los microorganismos acidorresistentes tienen
material lipídico que no se solubiliza en ácido, mientras que los no resistentes no
presentan este material y el ácido entra para decolorar la fucsina. El microorganismo
que se observó fue una micobacteria, que se ve de color rosa porque es resistente al
ácido y no se elimina el color de la fucsina con el contacto al alcohol ácido.

Las endosporas son estructuras de resistencia que utilizan las bacterias para
sobrevivir a condiciones extremas. Contienen un revestimiento de keratina que las
protege de ADN nucléico y otros factores, lo que las permite germinar como células
vegetativas. Debido a esta resistencia, se deben utilizar técnicas de tinción en donde
se use el calor como mordente, pues permite forzar el colorante verde malaquita a la
endospora. Una vez teñida, no se decolora por sus características. Esta tinción es
importante para identificar a las bacterias patógenas, pues la endospora es una
estructura muy común entre ellas que les permite sobrevivir incluso a ciertos
medicamentos.

La tinción de cápsula es una técnica que tiene como objetivo resaltar el material
polisacárido que rodea a ciertas bacterias; se fundamentó en crear un contraste entre
el fondo del preparado con la cápsula impenetrable del microorganismo, por lo que la
tinta china funciona como colorante oscuro. Las cápsulas son estructuras resistentes
que protegen a los microorganismos de la fagocitosis, lo que la hace prácticamente
impenetrable. Si el microorganismono posee cápsula, no se observaría nada más que
negro porque las células se pintarían del mismo color; por otra parte, si se muestra la
célula de color transparente, entonces los microorganismos son capsulados ya que
esta estructura no dejó pasar el colorante. Es muy importante el manejo cuidadoso de
las muestras ya que una agitación vigorosa o la aplicación de calor pueden afectar la
cápsula y alterar los resultados.
 Conclusión

Basándonos en el fundamento para cada una de las técnicas de tinción realizadas en

el laboratorio de Microbiología, las pruebas fueron positivas para las muestras de E.
coli, S. aureus, Mycobacterium y Bacillus sp. ya que las tinciones realizadas para
cada muestra presentaron los resultados consultados en la literatura referentes al
color y morfología de cada microorganismo.

Bibliografía
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