UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA

CARRERA DE MEDICINA

MICROBIOLOGÍA PRÁCTICA

NOMBRE: ISABEL PALACIOS

FECHA: 29/11/2022

PARALELO: A

TIPOS DE TINCIONES

Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el

laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Hay una gran

variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los

diferentes agentes infecciosos en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos.

Se distinguen tres tipos de tinciones dependiendo del resultado que se busca

obtener y lo que se desea identificar:

Simples: Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra

se tiñe del mismo color y se utiliza un sólo colorante, posterior a la fijación de la

misma, permitiendo la visualización de la morfología bacteriana. Hay tres pasos

básicos a seguir cuando se realiza una tinción simple: calentar, teñir y

enjuagar/secar.

Azul de metileno: Es uno de los colorantes más indicados ya que actúa rápida y

suavemente sobre todas las células bacterianas y no oscurece los detalles

celulares. Además, es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en

muestras naturales puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.

Cristal violeta: Es el colorante simple más utilizado. Es un colorante básico que tiñe

las células de color púrpura. Es la tinción primaria utilizada en el procedimiento de

tinción de Gram. Colorea de púrpura la pared celular de las bacterias

Gram-positivas y Gram-negativas.

Fucsina básica: Tiñe las bacterias acidorresistentes de rojo o rosa, mientras que la

safranina tiñe de verde a todas las demás bacterias.

Diferenciales: Para estas tinciones se necesitará fijación previa generalmente por

calor, además se utilizarán dos colorantes, siendo el último el colorante de

contraste. Una de las características más importantes es que además de visualizar

la morfología, permite observar la composición de la pared bacteriana, resistencia a

la decoloración ácida, etc.

Tinción de Gram: Es el método capital para diferenciar grandes grupos

microbianos por microscopía en función de la distinta composición de su pared

bacteriana y el más empleado en bacteriología gracias al cual las bacterias se

pueden clasificar en 2 grandes grupos (Gram +, Gram -). Esto es debido a la distinta

composición de la pared de las células bacterianas. Se basa en el empleo de un

primer colorante básico (cristal violeta) que teñirá de color azul todas las bacterias.

Posteriormente, un mordiente (lugol) aumentará la afinidad del primer colorante a

las células; finalmente, un agente decolorante en el que solamente un tipo de

bacterias serán teñidas. Gram+ (aquellas que no han sido decoloradas y quedan

teñidas con cristal violeta de color azul violáceo). Gram- (aquellas bacterias que han

sido decoloradas y son teñidas con el colorante de contraste, la safranina; con un

rosa-rojo).

Tinción de Ziehl-Neelsen: Se ha demostrado que algunas bacterias contienen un

alto porcentaje de sustancias lipídicas o serosas, por lo que se tiñen con dificultad

por procedimientos usuales como Gram. Se usa especialmente para la identificación

de Mycobacterium tuberculosis o Mycobacterium leprae.

La tinción se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparación ligeramente

para solubilizar las ceras, lípidos y otros ácidos grasos de la pared celular para que

permita el paso libre del colorante, el cual tiene una enorme afinidad por los ácidos

micólicos presentes en la pared, Al enfriar con agua, los componentes de la pared

vuelven a solidificar, resistiendo la acción abrasiva del alcohol-ácido, y el azul de

metileno se utiliza como colorante de contraste.

Selectivas: Se utilizan para incrementar el contraste en las células microbianas y

revelan estructuras particulares, entre las que se incluyen en los flagelos, las

esporas y las cápsulas.

Tinción de cápsulas: En este tipo de tinción se prescinde de la fijación por calor, se

deja secar la preparación y se observan los microorganismos brillantes sobre un

fondo oscuro.Esta técnica utiliza cristal violeta y tinta india o nigrosina. El cuerpo

bacteriano toma el color púrpura del cristal violeta debido a que está cargado

negativamente, en tanto que la nigrosina colorea el fondo del frotis. Si la bacteria

tiene cápsula, ésta se verá como un halo transparente alrededor del

microorganismo.

Tinción de esporas: El método más empleado es el de Schaeffer-Fulton donde la

suspensión de microorganismos se tiñe en caliente con el colorante verde

malaquita, un colorante soluble en agua por cuya razón no se utiliza habitualmente

en tinciones convencionales. El calor modifica la permeabilidad de la endospora y

permite la entrada del colorante a través de las capas externas de la endospora. A

continuación, el lavado con abundante agua produce la decoloración de las formas

vegetativas, así como de los extremos de las bacterias esporuladas, que se tiñen

por último con un colorante de contraste, la safranina.

Tinción de flagelos: Los distintos métodos de tinción utilizan combinaciones de

mordientes y metales para engrosar los flagelos, así como colorantes para teñirlos.

Una de estas técnicas es la tinción de flagelos de Leifson, en la cual se cubre la

preparación con una mezcla de ácido tánico y el colorante rosanilina. El ácido tánico

engruesa los flagelos y la rosanilina los tiñe.

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Tinciones Simples: Que es, Características, Tipos, Usos Y Más. (2022, septiembre

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