Universidad El Bosque

Biología General
Laboratorio #2- Reconocimiento a partir de reactivos para Carbohidratos y extracción
de Ácidos Nucleicos
Acosta Leon Valentina, Arbelaez Cardona Nicolas Alexander, Aristizabal Pareles Juan
Manuel, Ballen Zambrano Loren Jineth, Cante Gómez Sally Alejandra, Galvis
Cifuentes Carol Heley, Gómez Fernández Nicol Violeta.
Leonardo Andres Padilla Moreno
Bogotá D.C, 15 de noviembre de 2022

RESUMEN:
Durante el laboratorio se pudo realizar el reconocimiento de los diferentes carbohidratos que
se hacían presentes en una variedad alimentos, y se realizó el reconocimiento de ácidos
nucleicos como el ADN que se encuentra en la fresa. Los cuales son los que constituyen el
material genético de los organismos y son necesarios para el almacenamiento y la expresión
de la información genética (Navarro & Mena, n.d.). Teniendo en cuenta lo obtenido, se dió
inicio macerando los alimentos sólidos con cierta cantidad de agua como la de la arepa, la
salchicha entre otros, agregando reactivos como el lugol y el benedict a las soluciones
obtenidas en los tubos de ensayo. Los reactivos tienen la función de detectar la presencia de
azúcares reductores (benedict) y de el almidón (lugol). Se puede distinguir que los
carbohidratos o glúcidos se encuentran presentes en la mayoría de alimentos que son de
consumo humano para la obtención de ATP o energía. Estas moléculas orgánicas están
compuestas principalmente por hidrógeno, oxígeno y carbono (Dennis, n.d.). Concluyendo
que las biomoléculas se pueden detectar de forma experimental añadiendo reactivos con los
cuales se puede determinar la presencia de estos dentro de los alimentos, que cumplen
funciones imprescindibles para el organismos.
Anexo 1: #4; Gómez Violeta elaboró métodos y
La participación en la preparación y materiales.
presentación del informe de cada uno de
los integrantes se organizó de tal manera: INTRODUCCIÓN O MARCO
Acosta Valentina realizó los objetivos, TEÓRICO:
parte de la introducción y parte del Este trabajo de laboratorio está dispuesto
análisis; Arbelaez Nicolas se encargó de la para el estudio de biomoléculas presentes
introducción y resultados; Aristizabal Juan en alimentos y bebidas. Las biomoléculas
Manuel elaboró el análisis de los están presentes en los organismos vivos y
resultados, Ballen Loren realizó el están compuestos por diferentes elementos
resumen y las conclusiones #1; Cante químicos, como carbono, hidrógeno,
Sally recopiló información a las tablas de oxígeno, nitrógeno, sulfuro y fósforo.
resultados; Galvis Carol, se encargó de las Para la identificación de las biomoléculas
conclusiones y nuevos aportes a la tabla presentes se usará el reactivo Lugol,
porque esta sustancia absorbe el yodo
produciendo una coloración azul intensa,
coloración que desaparece al calentar, ya
que se rompe la estructura que se ha
producido, pero vuelve a aparecer al
enfriar. Y el reactivo Benedict que radica
en un medio alcalino, el ion cúprico se
reduce por efecto del grupo aldehído del
azúcar (-CHO) a su forma de Cu+.
Formando un precipitado rojo ladrillo
correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
Además se hizo el reconocimiento del
ADN (Ácido desoxirribonucleico)
compuesto por nucleótidos, desoxirribosa
como azúcar, el nucleico que es el ácido
que se forma con un fosfato y una base
nitrogenada (adenina, timina, guanina o
citosina). En este caso se hizo el
reconocimiento de ADN en la fresa, esta
cuenta con variedad de genomas y hasta
ocho copias de cada cromosoma.
OBJETIVOS:
General:
● Identificar presencia de
biomoléculas como carbohidratos y
ácidos nucleicos, en alimentos de
origen animal, artificial y vegetal.
Específicos:
● Determinar la presencia de almidón
en una muestra de papa utilizando
Lugol de yodo diluido.
● Identificar la existencia de almidón
en distintos alimentos y bebidas,
usando el Lugol concentrado.
● Reconocer qué tipo de azúcares
reductores se presentan en distintos
alimentos y bebidas, haciendo la
implementación del Benedict.
● Conocer los procesos de
extracción de ácidos nucleicos
como el ADN a través soluciones
líticas, aplicadas en una fruta como
la fresa.
MATERIALES Y MÉTODOS
PRIMER
OBJETIVO:
● Reactivo Lugol de yodo diluido
● Muestra de papa
● Lámina
● Microscopio
El método que se desarrolló para el primer
objetivo fue: Extraer muestra de papá en
rodajas muy finas para así proceder a
colocarla sobre la lámina. Posteriormente
se le aplica 3 gotas de reactivo de lugol
diluido, para así luego realizar el análisis
por medio de un microscopio. Cabe
mencionar que en este procedimiento no se
hizo uso de laminillas, solo se empleó la
muestra sobre la lámina.
MATERIALES Y MÉTODOS
SEGUNDO OBJETIVO:
● 6 Tubos de ensayo
● Reactivo Lugol concentrado
● 2 ml muestras de:
Agua, Aguardiente con azúcar,
Bebida energética (vive 100),
Salchicha, Papa y Arepa.
El método que se desarrolló para el
segundo objetivo (Prueba polisacáridos):
En primera instancia se agregaron 3 gotas
de reactivo lugol concentrado en cada una
de las muestras de Agua-Aguardiente con
azúcar-Vive100-Salchicha-Papa-Arepa.
Luego, se homogeneizó vigorosamente
para poder observar el cambio de
coloración en las muestras (color morado
oscuro o violeta). Si se tiene presencia de
almidón la reacción da un color azul-
violeta. Si no se tiene almidón la
coloración es amarilla o naranja.
MATERIALES Y MÉTODOS
TERCER OBJETIVO:
● 8 Tubos de ensayo
● Reactivo Benedict
● 2 ml de muestra de Agua,
Aguardiente sin azúcar,
Aguardiente con azúcar, Cerveza,
Bebida energética (vive 100),
Almidón de papa , Almidón de
salchicha y Almidón de arepa
El método que se desarrolló en el tercer
objetivo (Determinación de azúcares
reductores):
Se realizó de nuevo la toma de 2ml de
cada solución de alimento y se le
agregaron unas 5-7 gotas del reactivo de
Benedict, se toma el tubo de ensayo
con una pinza y se procede a calentar
hasta hervir, sin calentar el fondo del tubo
(teniendo precaución). Se observa lo que
ocurre, es positivo cuando el color azul
inicial cambia a un color rojo
ladrillo y se forma un precipitado de
este mismo color.
RESULTADO DE OBJETIVO 1
MATERIALES Y MÉTODOS
CUARTO OBJETIVO:
● 4 fresas
● Jabon liquido
● Bolsas ziplock
● Alcohol antiséptico frío
● Sal de cocina
● Papel filtro
El método que se desarrolló para el cuarto
objetivo (Extracción de ADN):
Para esta práctica se maceró unos trozos de
fresa con precaución de no hacerlo
fuertemente; se preparo una solucion de
jabon liquido con agua y sal, teniendo
cuidado de no formar burbujas
produciendo una solución de lítica, luego
se agregó a el macerado de fresa y se dejó
reposar. Se procedió a pasar la mezcla por
el papel filtro de modo que los trozos no
triturados de fresa se quedaran en el filtro
y el líquido pasará al recipiente. Se agregó
el alcohol previamente frío, al líquido
filtrado y se esperó 5 minutos. Después de
esto se extrajo las fibras formadas por los
conglomerados de ADN de las células de
la fresa y se depositaron en alcohol etílico
frío
 PRUEBA DE LUGOL DILUIDO EN MUESTRA DE PAPA

Se observa por medio del microscopio

una muestra de papa antes de aplicarle
el reactivo Lugol diluido en el lente
10x.
F F= Amiloplastos

Juan Manuel A. (2022)-Imagen muestra una papa

en el microscopio.

F
Las células están teñidas de color
violeta, producto del Lugol y se
presenta una estructura esférica,
denominada amiloplasto.Obervado en
el lente 40x.

F= Amiloplastos

Juan Manuel A. (2022)- Imagen después de la

reacción al aplicar el reactivo Lugol.
Tabla #1. Reacción de Lugol diluido en muestra de papa.

RESULTADO DE OBJETIVO 2
 PRUEBA DE REACTIVO LUGOL CONCENTRADO

Tubo de ensayo 1:Agua.

Tubo de ensayo 2:Aguardiente con azúcar.
Tubo de ensayo 3:Bebida energizante (vive 100).
Tubo de ensayo 4:Salchicha.
Tubo de ensayo 5:Papa.
Tubo de ensayo 6:Arepa.

Juan Manuel A. (2022)- Imagen antes de la

reacción del Lugol en cada tubo de ensayo.

Tubo de ensayo 1:Cambió a color ambar.

Tubo de ensayo 2: Cambió a color ambar.
Tubo de ensayo 3:Cambió a amarillo paja.
Tubo de ensayo 4:Cambio a color tierra siena
natural.
Tubo de ensayo 5:Cambió a amarillo de marte.
Tubo de ensayo 6: Cambió a color sepia oscura.

Juan Manuel A. (2022)-Reacción del Nota: Blog del periodo,(2016) Tonos del color
reactivo Lugol en cada tubo de ensayo. amarillo.

PRUEBA DE REACTIVO LUGOL CONCENTRADO

Tubo de ensayo Color Sin color

#1 Agua SI

#2 Aguardiente con azúcar SI

#3 Bebida energizante “Vive 100” SI

#4 Salchica SI

#5 Papa SI

#6 Arepa SI
Tabla #2. Prueba reactivo Lugol concentrado.

RESULTADO DE OBJETIVO 3
 PRUEBAS DE REACTIVO BENEDICT
Juan Manuel A. (2022)- Imagen antes de la
reacción de Benedict en cada tubo de ensayo.
Juan Manuel A. (2022)-Reacción de reactivo
Benedict en cada tubo de ensayo.
Juan Manuel A. (2022)- Imagen de los tubos
de ensayos en el baño maria despues de 2
min
Tubo de ensayo 1.2:Agua
Tubo de ensayo 2.2:Aguardiente sin azúcar
Tubo de ensayo 3.2:Aguardiente con azúcar
Tubo de ensayo 4.2:Cerveza
Tubo de ensayo 5.2:Bebida energética (vive
100)
Tubo de ensayo 6.2:Papa Macerada
Tubo de ensayo 7.2:Salchicha Macerada
Tubo de ensayo 8.2:Arepa Macerada
Tubo de ensayo 1.2:Cambió a color azul bebe
Tubo de ensayo 2.2:Cambió a color azul bebe
Tubo de ensayo 3.2:Cambió a color azul bebe
Tubo de ensayo 4.2:Cambió a color verde
helecho
Tubo de ensayo 5.2:Cambió a color verde
jade
Tubo de ensayo 6.2:Cambió a color azul
francia
Tubo de ensayo 7.2:Cambió a color azul
Tiffany
Tubo de ensayo 8.2:Cambió a color azul
capri
Nota:Esty habla español, (2013) Tonos de
color azul y verde
Juan Manuel A. (2022)- Imagen los tubos de
ensayos en el baño maria despues de 4 min
 Juan Manuel A. (2022)- Imagen los tubos de Juan Manuel A. (2022)- Imagen los tubos de
ensayos en el baño maria despues de 6 min ensayos en el baño maria despues de 8 min

PRUEBA REACTIVO BENEDICT (BAÑO MARIA)

TUBO DE COLOR
ENSAYO

#1.2 Agua Azul bebe NO NO NO

#2.2 Aguardiente Azul bebe NO NO NO

sin azucar

#3.2 Aguardiente Azul bebe NO NO NO

con azúcar

#4.2 Cerveza Verde helecho Amarillo Paja Amarillo Indio Amarillo Cromo

#5.2 Bebida Verde jade Amarrillo Amarillo Naranja

energizante (Vive Paja
100)

#6.2 Papa Azul francia NO NO NO

Macerada

#7.2 Salchicha Azul tiffany Azul tiffany Amarillo Claro Ambar

Macerada

#8.2 Arepa Azul Capri Verde Clorofila Amarillo verdoso

Macerada Amarillento

TIEMPO 2 MIN 4 MIN 6 MIN 8 MIN

Tabla #3- Prueba de reactivo Benedict.
 Las coloraciones de los tubos
de ensayo después de
añadirles el reactivo de
Benedict permite saber semi
cuantitativamente cuántos
azúcares reductores hay
disueltos.

Fuente:Thebiologyprimer
https://www.lifeder.com/wp-content/uploads/2020/01/Benedicts_test_for_Sugars.png
Figura #1- Colorimetria y porcentaje azúcares reductores

RESULTADOS DE OBJETIVO 4

ESTRUCTURA DE ADN DE LA FRESA

Se puede identificar el ADN de la fresa

como una nube de una tonalidad blanca
y viscosa que se ubica en la parte
superior de la mezcla.

Carol G. (2022)-ADN de la fresa en el vaso

precipitado

Visualización de la extracción del ADN

de la fresa en la mezcla y el
procedimiento para el trasladó a un tubo
de ensayo con alcohol.

Carol G. (2022)-Extracción del ADN de la

fresa en la mezcla a un tubo de ensayo.
Tabla #4. Estructura de ADN de la fresa
ANÁLISIS DE OBJETIVO 1
Para identificar la presencia de almidón en
papa se utilizó el lugol diluido en yodo que
cumple la función de identificar
polisacáridos como lo es el almidón.
El lugol reacciona con la amilosa que
resulta en color azul y con la amilopectina
que resulta en color rojo.
Produciendo así un color azul o violeta que
indica la presencia del almidón
(Coloración intensa debido a la cantidad
de almidón)en la misma y que al calentar
desaparece debido a que se rompe la
estructura que se produjo ya que por la
temperatura el yodo se libera.
Proceso que se hizo evidente en la
respectiva obtención de imágenes a través
del microscopio en la práctica
experimental ya que como se ve en las
tabla #1 (Tabla #1. Reacción de lugol
diluido en muestra de papa.) los
aminoplastos encargados de almacenar el
almidón presente reaccionan tornandose de
color violeta con el lugol.
ANÁLISIS DE OBJETIVO 2
En la identificación de polisacáridos, se
dió paso al uso de reactivo de Lugol
concentrado permitió reconocer la
presencia de almidón en alimentos,
la coloración producida por Lugol se
dio en este caso en los tubos de ensayo con
salchicha, arepa y papa, debido a la
“interacción del yodo en los
espacios intermoleculares de las capas de
almidón” Universidad de la salle, (2017).
Si se tiene presencia de almidón la
reacción da un color azul-violeta. Si no
se tiene almidón la coloración es amarilla
o naranja. El almidón al ser un
polisacárido se forma a partir de largas
cadenas de glucosa que forman hélices,
cuando se suministra Lugol, el yodo que lo
compone se introduce entre estas cadenas
dando dicha coloración. Por tanto, no debe
considerarse esta reacción como Química,
sino una reacción física puesto que
únicamente se alteran este tipo de
propiedades. De esta forma cuando se
sometió al calor estas muestras perdieron
el color violeta porque el yodo abandonó
las hélices de glucosa Órganos de
Palencia, (2021).
ANÁLISIS DE OBJETIVO 3
Con el objetivo de determinar azúcares
reductores, se vio necesario el uso del
reactivo Benedict, dado que este contiene
sulfato de cobre. El cobre se une al
oxígeno del grupo aldehído o cetona libre
formando un óxido de cobre
(LabsterTheory, s. f.), debido a que este
tipo de azúcares estructuralmente poseen
su carbono anomérico libre y son capaces
de sufrir reacciones de óxido reducción en
su grupo OH. Al ser tratados con Benedict
el color azul inicial de estos reactivos
cambia a un color rojo ladrillo y
“se forma un precipitado de este mismo
color característico del óxido de cobre
(Cu2O), Este grupo OH libre es
característico de los monosacáridos y
algunos disacáridos” (Piragauta P.(2021).
Por otra parte, es de gran importancia
saber que dependiendo de tonalidad que
toma la sustancia con el Benedict, se logra
saber el porcentaje de la concentración de
azúcares reductores que tiene dicha
sustancia y la relación de los colores y los
porcentajes se puede evidenciar en
(Figura #1- Colorimetría y porcentaje de
azúcares reductores).
Sabiendo lo anterior se puede analizar la
(Tabla #3- Prueba de reactivo Benedict)
en donde es evidente que los tubos de
ensayo con agua, aguardiente sin azúcar,
aguardiente con azúcar y la papa macerada
no tuvieron ningún tipo de precipitado, lo
que quiere decir que no reaccionaron a la
oxidación de Benedict, que podrían ser
azúcares no reductores como el almidón de
la papa, o que no tienen ningún carbono
anomérico libre.
Por otra parte, al analizar las sustancias
que sí reaccionaron al Benedict, es notorio
ver que la cerveza, según su color tiene
una concentración de 1.6-2.5% de azúcares
reductores y que su color se intensifica al
pasar de los minutos en el baño maría. Al
continuar con la siguiente sustancia que
reacciona encontramos a la bebida
energizante, la cual tiene unas tonalidades
amarillas a los pocos minutos de ponerla
en baño maría, pero que al final, adquiere
una tonalidad naranja, lo que indica que
tiene una concentración de 2.6 - 3.5% de
azúcares reductores, luego sigue la
salchicha macerada, la cual al principio
tenía tonalidades azules, pero con el paso
del tiempo, tomo tonalidades amarillas, lo
que quiere decir que su concentración es
igual a la de la cerveza. Finalmente, se
encuentra la arepa macerada, la cual en un
principio tenía una tonalidad azul, pero
durante el paso del tiempo, obtuvo una
tonalidad verde, lo que indica que tiene
una concentración de 1.1-1.5% de azúcares
reductores en su composición.
ANÁLISIS DE OBJETIVO 4
En la extracción de ADN en la fresa se
comenzó preparando una solución lítica
entre jabón líquido y sal para romper las
membranas y envolturas nucleares de las
células de la muestra. Comparando con el
método de extracción de ADN de la
entidad Bio-Rad (SF), se siguieron los
mismos pasos y materiales, aunque en el
otro método se extrajo el material genético
de una muestra de saliva. Se coincidió en
el uso de la solución de jabón y sal pues su
función es disociar las capas lipídicas de
ambas envolturas de las células con un
disolvente apolar como el jabón. La sal en
cambió su función radica en hacer al ADN
menos soluble y favorecer la unión de los
ácidos nucleicos para que sean mucho más
visibles. Al igual que en el método de Bio-
Rad se añade alcohol frío a la muestra
dónde se comenzó a notar que la solución
se separa en 2 fases. La fase al fondo del
recipiente era de color rojo, mientras que
en la parte superior comenzará a formarse
una especie de solución viscosa
transparente, esta capa superior era el
ADN que se precipito debido a que este
mucho menos soluble en alcohol, y entre
más baja es la temperatura el alcohol,
menos solubilidad hay, permitiendo la
visualización de ADN reunido en fibras
por la gran cantidad de material genético
encontrado en solo una fresa..
CONCLUSIONES PRIMER
OBJETIVO:
● La coloración azul-violeta que se
presenta en los reactivos da
positivo para almidón en los
alimentos.
● Los amiloplastos son los
responsables de contener el
almidón de distintas células
vegetales.
CONCLUSIONES SEGUNDO
OBJETIVO:
● La coloración amarilla o naranja en
las muestras es positivo para
ausencia de almidón
● El lugol diluido expuesto a altas
temperaturas libera la cantidad de
yodo presente.
CONCLUSIONES TERCER
OBJETIVO:
● Las tonalidades de las soluciones
con el reactivo benedict se tornan
de diferente color debido al
porcentaje de azúcares reductores
iniciando con un azul.
● El reactivo al ser sometido a calor
evidencia con mayor exactitud los
porcentajes de carbohidratos o
glúcidos.
CONCLUSIONES CUARTO
OBJETIVO:
● El alcohol permite la precipitación
del ADN con respecto a la solución
restante.
● El jabón cumple la función
principal en este proceso, pues
permite la extracción del ADN de
la célula.
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