1.

- Principios y características de electroforesis

Su principio básico es en que consiste en la migración de las moléculas a través
de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual por acción de un
campo eléctrico serán separadas conforme a su tamaño o peso y sus
características son de gel poroso (tridimensional interno), al igual que tiene que
permitir el paso de moléculas y no puede estar cargado.
2.- Cual es el principio de separación para la electroforesis, electroforesis
capilar y isoelectroenfoque
En el caso de principio de electroforesis es la migración de las moléculas a través
de un gel u otro por acción de un campo eléctrico, en la electroforesis capilar es
que los analitos se separan en un capilar que contiene únicamente una solución
amortiguadora y pues es una técnica donde la separación ocurre debido a los
distintos componentes de la muestra migran como bandas discretas con diferentes
velocidades y para finalizar en isoelectroenfoque este consiste que en el caso de
gel (poliacrilamida) posee un gradiente de pH en su estructura, esto se consigue
incluyendo en su preparación moléculas ionizables con valores de pK diferentes.
3.- Usos principales de electroforesis
Este nos permite separa las hebras de ADN permitiendo identificar sus
componentes, al igual que separa el ARN o proteínas en función de su tamaño y
carga eléctrica, la principal aplicación e3s la caracterización y análisis cuantitativo
de moléculas biológicas principalmente proteínas, péptidos y aminoácidos, al igual
que la separación mencionada con anterioridad y las aplicaciones de los geles de
policramida en electroforesis es la separación de moléculas circulares ADN y
lineales como el acetileno.
4.- Diferencias entre electroforesis, SDS-PAGE e isoelectroenfoque
Electroforesis:
 Son de alta sensibilidad, eficacia, poder de resolución y versatilidad
 Visualización de las bandas de ARN o ADN de patógenos
 Detectar cambios o mutaciones
Isoelectroenfoque:
 Separa componentes usando un gradiente de PH
 El poder resolutivo del método es muy elevado
 Su aplicación de voltajes elevados durante largo tiempo requiere de
refrigeración
SDS-PAGE:
 Tiene dos geles con diferentes concentraciones, compuesto de
poliacrilamida
 Corrida vertical
 Un proceso complejo
 Condiciones desnaturalizantes
 Separa 5-250,000 da proteínas
 Su concentración es de 6-15%
5.- ¿Cuál es el efecto del pH sobre la separación de aminoácidos por
electroforesis? ¿Porqué?
Se puede decir que al pH al que se realiza la electroforesis, los aminoácidos
neutros se quedaran en el origen, los aminoácidos ácidos emigraran al ánodo y los
aminoácidos básicos emigran al catado
6.- ¿Qué es el flujo electroosmótico, por qué ocurre?
Cuando se aplica un campo eléctrico a través del capilar relleno con solución
amortiguadora se genera un flujo de disolvente dentro del capilar que se denomina
flujo electroosmótico (EOF), el mismo es un fenómeno que existe en un sistema
elctroforetico el mismo se genera debido a que los capilares utilizados están
constituidos por silice fundida por lo tanto la superficie interna del capilar esta
constituida por grupos silanoles (Si-OH), los cuales pueden presentar múltiples
grados de ionización por lo tanto a todos los grupos silanoles se ionizan o
hidrolizan en un buffer electrolito acuoso, generado u originado como resultado
una superficie interna del capilar negativa. Básicamente es el movimiento de un
fluido a través de un conducto de muy pequeño diámetro como un capilar o un
microcanal cuando se aplica un campo eléctrico.