Microbiología

Escherichia Enterococcus
Amigdalas Agar Celular Sangre
coli faecalis

Materiales Materiales Materiales Materiales Materiales Materiales

Medio de cultivo: -Pipeta Medio cultivo : Agar

Agar nutritivo
- Caja petris con
medios de
cultivo
- Mechero de
bunsen
- Hisopo
- Portaobjetos
- Microscopio
- Papel
- Materiales para
realizar la
tinción de Gram
(metanol,cristal
violeta, lugol,
alcohol-acetona
y safranina)
- Agua destilada
-Guantes
-Bata
Procedimiento
-Con un hisopo, tomaremos una muestra
de la boca del paciente (lengua, mejillas,
encía, dientes, etc.)
-Abrir la caja petri y colocar la muestra
realizando un frotis sobre el agar, en forma
de zig zag.
-Tirar el hisopo en RPBI.
-Colocarle tus datos en la parte de la orilla
de la caja petri (nombre, subgrupo, fecha,
nombre del paciente).
-Colocarla en la incubadora 1 semana.
-Sacar la caja petri de la incubadora.
-Con el asa esteril a rojo vivo, esperar a
que no esté caliente( se puede comprobar
tocando el agar donde no haya muestra),
con mucho cuidado abrir la caja petri cerca
del mechero y hacer una recolección de la
muestra.
-Realizar un frotis horizontal en el
portaobjetos.
-Colocar el asa sobre el fuego para
esterilizarla.
-Realizar la tinción de Gram:
1.Poner portaobjetos en el puente de
tinción.
2.Metanol (quitar rápido, hasta que
evapore).
3.Azul de metileno (1 minuto, enjuagar).
4.Lugol (Yodo) 1 minuto, enjuagar.
5.Alcohol acetona (quitar rápido).
6.Safranina (1 minuto, enjuagar).
7.Dejar que se seque.
-Observar en el microscopio
En esta práctica observaremos las
bacterias que podemos encontrar en la
boca , como lo son los Streptococcus,
Staphylococcus y Actinomyces.
Se encontraron tanto Gram positivas, como
negativas.
Medio de cultivo: Medio de cultivo: Agar Medio de cultivo: Agar
-Matraz nutritivo
Hemocultivo nutritivo nutritivo
-Agua -Hisopo
-Cajas petri con medio -Cajas petri con medio de
-Mechero de bunsen -Cajas petri con medio de
destilada
de cultivo cultivo
-Asa bacteriológica cultivo
-4g de agar
-Hisopo -Muestra de bacteria E.Coli
-Celular -Muestra de bacteria
-Autoclave
-Torniquete -Asa bacteriológica
-Cajas petri con medio Enterococcus faecalis
-Cajas petri
-Jeringa (3 ml) -Hisopo
de cultivo -Hisopo
-Guantes
-Torundas -Mechero de bunsen
-Portaobjetos -Portaobjetos
-Bata
-Frasco hermético con -Portaobjetos
- Microscopio -Materiales para realizar la
Procedimiento tapa roja -Materiales para realizar la
- Papel tinción de Gram (metanol,
-Mechero de bunsen tinción de Gram (metanol,
- Materiales para Solución de Azul de
-Depositamos en el matraz los -Portaobjetos Solución de Azul de metileno,
realizar la tinción de metileno, lugol,
4g de agar, posteriormente -Materiales para realizar lugol, alcohol-acetona y
Gram alcohol-acetona y safranina)
vertemos 80 ml de agua la tinción de Wright safranina)
(metanol,cristal -Papel
destilada, para hacer un (Metanol, eosina y azul -Papel
violeta, lugol, -Agua destilada
aproximado de 4 cajas petri. de metileno ) -Agua destilada
alcohol-acetona y -Microscopio
-Calentar y agitar -Papel -Microscopio
safranina) -Guantes
frecuentemente hasta el punto -Agua destilada -Guantes
- Agua destilada -Bata
de ebullición durante 1 minuto -Microscopio -Bata
-Guantes
para disolverlo por completo, -Guantes
-Bata
seguir con el proceso hasta Procedimiento Procedimiento
-Bata
tener un aspecto de gelatina.
-Con un hisopo, tomaremos una muestra de la -Con un hisopo, tomaremos una muestra de la
-Esterilizar en autoclave a Procedimiento
bacteria E.Coli. bacteria Enterococcus faecalis.
121°C (15 lbs de presión)
-Frotar el hisopo por todas las superficies del -Abrir la caja petri y colocar la muestra -Realizar un frotis horizontal en el portaobjetos.
durante 45 min. -Preparar al paciente para realizar la extracción sanguínea.
celular. realizando un frotis sobre el agar, en forma de -Tirar el hisopo en RPBI.
-Cuando pase por la -Colocarle el torniquete en la parte superior del brazo.
-Colocar la muestra del hisopo en la caja petris pentágono, terminando con zig zag. -Realizar la tinción de Gram:
esterilización, podemos verter -Detectar la vena que se utilizará.
cerca del mechero en forma de zig zag. -Tirar el hisopo en RPBI. 1.Poner portaobjetos en el puente de tinción.
el agar sobre las cajas petri, -Desinfectar el sitio
-Tirar el hisopo en basura común. - Colocarle tus datos en la parte de la orilla de la 2.Metanol (quitar rápido, hasta que evapore).
colocarlo hasta que se llene la -Se introduce una aguja en la vena.
-Colocarle tus datos en la parte de la orilla de caja petri (nombre, subgrupo, fecha). 3.Azul de metileno (1 minuto, enjuagar).
-Se recoge la sangre en un frasco hermético.
base. Colocarla con la tapa la caja petri (nombre, subgrupo, fecha).
-Colocarla en la incubadora 1 semana. 4.Lugol (Yodo) 1 minuto, enjuagar.
-Tirar la jeringa en RPBI.
hacia abajo, dejarlas en la -Colocarla en la incubadora 1 semana.
-Sacar la caja petri de la incubadora. 5.Alcohol acetona (quitar rápido).
-Con un hisopo, tomaremos una muestra de la sangre del paciente.
incubadora. -Sacar la caja petri de la incubadora.
-Con el asa esteril a rojo vivo, esperar a que no 6.Safranina (1 minuto, enjuagar).
-Abrir la caja petri y colocar la muestra realizando un frotis sobre el agar, en
-Con el asa esteril a rojo vivo, esperar a que no esté caliente( se puede comprobar tocando el 7.Dejar que se seque.
forma de zig zag.
esté caliente agar donde no haya muestra), con mucho -Observar en el microscopio
-Tirar el hisopo en RPBI.
(se puede comprobar tocando el agar donde cuidado abrir la caja petri y hacer una En esta práctica observaremos que la bacteria
- Colocarle tus datos en la parte de la orilla de la caja petri (nombre, subgrupo,
no haya muestra), con mucho cuidado abrir la recolección de la muestra. Enterococcus faecalis, son microorganismos
fecha, nombre del paciente).
caja petri cerca del mechero y hacer una -Realizar un frotis horizontal en el anaerobios facultativos grampositivos, que habita el
-Colocarla en la incubadora 1 semana.
recolección de la muestra. portaobjetos. tracto gastrointestinal de humanos.
-Sacar la caja petri de la incubadora.
-Realizar un frotis horizontal en el -Colocar el asa sobre el fuego para Tiñe de color púrpura en la tinción de Gram ( Gram
-Realizar un frotis horizontal en el portaobjetos.
portaobjetos. esterilizarla. positiva).
-Realizar la tinción de Wright:
-Colocar el asa sobre el fuego para -Realizar la tinción de Gram:
1.Poner portaobjetos en el puente de tinción.
esterilizarla. 1.Poner portaobjetos en el puente de tinción.
2.Metanol (quitar rápido, hasta que evapore).
-Realizar la tinción de Gram: 2.Metanol (quitar rápido, hasta que evapore).
3.Eosina ( 1 minuto, enjuagar).
1.Poner portaobjetos en el puente de tinción. 3.Azul de metileno (1 minuto, enjuagar).
4.Azul de metileno (1 minuto, enjuagar).
2.Metanol (quitar rápido, hasta que evapore). 4.Lugol (Yodo) 1 minuto, enjuagar.
5.Dejar que se seque.
3.Azul de metileno (1 minuto, enjuagar). 5.Alcohol acetona (quitar rápido).
-Observar en el microscopio
4.Lugol (Yodo) 1 minuto, enjuagar. 6.Safranina (1 minuto, enjuagar).
En esta práctica observaremos que la sangre no tiene bacterias, pero si
5.Alcohol acetona (quitar rápido). 7.Dejar que se seque.
pueden entrar desde el exterior, por alguna cortada, una herida abierta, al
6.Safranina (1 minuto, enjuagar). -Observar en el microscopio
momento de realizar una prueba de laboratorio puede surgir una
7.Dejar que se seque. En esta práctica observaremos que la bacteria
contaminación cruzada. En la presencia de bacterias en la sangre
-Observar en el microscopio Escherichia coli es una bacteria miembro de la
(bacteriemia) que a menudo ocurre con infecciones graves. También conocida
En esta práctica observaremos las bacterias familia de las enterobacterias (bacilo) y forma
como sepsis, la septicemia es una respuesta grave y potencialmente mortal a
que podemos encontrar en el celular, como lo parte de la microbiota del tracto
una infección que empeora de forma muy rápida (es un caso en el cual
son los Streptococcus y Bacillus,también gastrointestinal. Tiñe de color rosado en la
podemos encontrar bacterias en la sangre).
podemos encontrar hongos, porque se llevan tinción de Gram ( Gram negativa).
los celulares a lugares con mucha humedad,
Luis Antonio Guzmán Bodart
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como lo son los baños.
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Se encontraron tanto Gram positivas, como
negativas.