5 Artículos de investigación Practica de cultivo bacteriano

Practica De Cultivo

Bacteriano.

Valery Páez, MVZ1, Gerson Bonilla, MVZ1, Natalia Duran, MVZ, Cristian Morantes, MVZ

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Cooperativa de Colombia,

Bucaramanga Colombia.

Resumen. Se realizó cerebro-corazón).

una práctica de cultivo
bacteriano en laboratorio, Palabras clave: cultivo bacteriano, agar sangre
con el fin de comprender los
procesos de crecimiento It practices bacterial crop for the identification
bacterianos, en medios de of the morphology
cultivos específicos. Abstract. Introduction: We performed a bacterial
Métodos: La técnica se culture practice in the laboratory, in order to
basó en la siembra de una understand the bacterial growth processes, in
muestra por agotamiento en specific culture media. The technique was based
superficie realizada en una on the sowing of a sample by surface exhaustion
caja de agar sangre, made in a blood agar box, using and burning the
utilizando y quemando el handle after each use. Subsequently, a surface
asa después de cada uso. depletion seeding was performed on a
Posteriormente; se realizó MACKONKEY agar box. The crop in the
una siembra por aforementioned agar box was used to perform a
agotamiento en superficie massive sowing (with sterile swab) lateral to the
en una caja de agar previous one.
MACKONKEY. El cultivo
realizado en la caja de agar
mencionada se usó para
realizar una siembra masiva
(con hisopo estéril) lateral a
la anterior. En la segunda
practica se realizó una
siembra en una caja de agar
sangre, de un cultivo
bacteriano contenido en un
tubo con caldo BHI (infusión
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.

Práctica de cultura bacteriana para a

identificação da morfología
Resumo. Introdução: Foi realizada uma prática de
cultura bacteriana em laboratório, a fim de
compreender os processos de crescimento
bacterianos, em meios de cultura específicos.
Métodos: A técnica baseou-se na semeadura de
uma amostra por exaustão em superfície realizada
em uma caixa de agar sangue, utilizando e
queimando a alça após cada uso. Posteriormente,
foi efectuada uma sementeira por exaustão à
superfície numa caixa de agar MACKONKEY. A
cultura realizada na caixa de ágar mencionada foi
usada para realizar uma semeadura maciça (com
esfregaços estéril) lateral à anterior.

INTRODUCCIÓN punto de vista metabólico. Además, los

microorganismos requieren energía metabólica con el
Se denomina cultivo al proceso de propagar los
objetivo de sintetizar macromoléculas y conservar los
microorganismos, proporcionándoles las condiciones
gradientes químicos esenciales a través de sus
ambientales adecuadas. Los microorganismos en
membranas. Durante el crecimiento se deben regular
fase de crecimiento realizan réplicas de sí mismos y
los factores nutricionales (carbono, nitrógeno, azufre y
requieren de los elementos que se encuentran en su
fósforo, elementos trazas y vitaminas) y los factores
composición química. Se le deben brindar los
físicos (pH, temperatura, oxígeno, humedad, presión
elementos nutritivos en una forma accesible desde el
hidrostática, presión osmótica y radiación).
Materiales y métodos
Debido al pequeño tamaño, las bacterias no Cultivo Bacteriano
pueden estudiarse como individuos aislados, Muestra y siembra en la caja
sino como poblaciones. Estas poblaciones Se tomó una muestra de cera con un hisopo
deben cumplir con el requisito de provenir de estéril para posteriormente realizar la siembra
una sola célula. Para obtenerlas debemos ser por agotamiento en superficie en una caja de
capaces de cultivarlas, utilizando medios de agar sangre.
cultivo con los nutrientes necesarios y en Posteriormente se tomó la caja de agar
cantidades apropiadas a los requerimientos MACKONKEY, y con el asa muy caliente se
específicos de los microorganismos para los dividió el agar en dos (Fig. 1). En la primera
que ha sido diseñado. [1]. parte del agar MACKONKEY se hizo una
siembra por agotamiento y en la segunda parte
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de la misma caja, se hizo una siembra masiva Fig. 3. Incubadora .

en superficie con hisopo estéril.

Fig. 1. Agar Sangre y Agar MACKONKEY Coloración de Gram: En el centro de una lámina
portaobjetos se colocó una gota de solución
SIEMBRA EN TUBO salina fisiológica, en la cual con un asa
Recibimos un agar en tubo con agar recto (sim: previamente quemada se distribuyó una colonia
sulfuro-indol-motilidad) donde realizamos del cultivo bacteriano sembrado (Fig. 4).
siembra en picadura con asa recta. (figura.2) Se fijó la muestra con calor inmediato, y se
esto permite verificar movilidad, producción de procedió a realizar la tinción de Gram.
indol y sulfuro, especialmente en
enterobacterias.

Fig. 4. Recolección de colonia bacteriana.

Tinción del frotis

Figura.2. Siembra en cubo Previamente fijado al calor, se realizó tinción

Se realizó una incubación de los agares
sembrados a 37°C con límite de tiempo entre 24
a 48 horas (Fig. 2). Posteriormente se realizó la
lectura de resultados.
con Cristal violeta (Fig. 5) durante 1 minuto en la
cual todas las células se tiñen de color azul-
violeta.

Fig. 5. Tinción con Cristal violeta.

Añadir Lugol
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La segunda parte. de la observación en
Inmediatamente se añadió el Lugol y se dejó
actuar por 2 minutos. Todas las células
mantenían la coloración de azul-violeta.

Tinción de contraste

Posteriormente, se añadió alcohol por 20

segundos en las cuales las células Gram (+)
mantenían su color.
Y finalmente, se dejó actuar Safranina durante 2
minutos la cual tiñe de rosado las bacterias microscopio de nuestra lámina, se enfocó en
Gram (-). examinar las características morfológicas de las
bacterias, para así poder seleccionarlas como
Resultados
Cocos o Bacilos.
Cultivo Bacteriano
Después de realizar todo un proceso de Cultivo Consecuente a esto, concluimos que no solo se
y crecimiento bacteriano, La primera trataba de un Coco Gram positivo, sino que en
observación se basó en la coloración de las nuestro cultivo crecieron colonias de bacterias
bacterias, ya que estas tiñeron de azul-violeta de genero Staphylococcus sp. Y Streptococcus
(Fig. 6), lo cual nos permitió determinar que sp. (Fig.6)
pertenecían a bacterias Gram positivas, ya que
estas, gracias a la distribución de peptidoglicano Fig. 6. Bacterias Gram (+)
que tienen, según la literatura, tiñen de este
color. Discusión
Esta investigación estandarizó una técnica de de las especies animales. Con esto podemos
cultivo bacteriano que nos permiten conocer las determinar la importancia del estudio de estos
distintas morfologías de colonias bacterianas. géneros de bacterias en Medicina Veterinaria.
La técnica permitió confirmar la presencia de
Streptococcus sp. Y Staphylococcus sp. Referencias
Los estreptococos son microorganismos [1] Senberg HD. Clinical microbiology
comunes en todos los animales y en las procedureshandbook. Washington,
personas. Son bastante específicos de cada American Society for Mi
especie, aunque no lo son por completo. La
especie principal es Streptococcus suis, muy
extendida en las poblaciones porcinas.2
Las bacterias del género Staphylococcus son
bacterias patógenas oportunistas en la mayoría