Guía de Laboratorio Toxicologia

Laboratorio de Toxicología
Universidad Central de Venezuela

Facultad de Farmacia
Cátedra de Toxicología Forense
ii
Introducción
Bienvenidos al Laboratorio de Toxicología.
En este laboratorio se acercarán al análisis toxicológico

básico donde aprenderán lo relativo a la determinación
de contaminantes ambientales, drogas de abuso,
alcohol, metales pesados y otros tóxicos, bien a través
de pruebas individuales o a través de lo que se conoce
como una “marcha analítica”. Estos análisis se hacen
tanto en muestras ambientales como en muestras
biológicas, así como también en nuestros preparados
directamente en el laboratorio.
La aproximación al paciente intoxicado también está

contemplado en este programa. La elaboración de
fichas toxicológicas mediante la consulta de la
bibliografía correspondiente, así como la presentación
y discusión de casos clínicos constituyen las bases
fundamentales de esta tarea. Igualmente, el
conocimiento del procedimiento de la atención al
paciente a través del Centro de Información y
Asesoramiento Toxicológico contribuye a la formación
de ustedes en los aspectos generales de la Toxiología,
una disciplina que contribuye a la salud no solamente a
través del trabajo de laboratorio como tal sino también
a través de la atención al paciente y, muy importante,
por los avances logrados mediante la investigación
científica en esta disciplina.
La Toxicología, una ciencia al servicio de la humanidad.

iii
Guía de Trabajos Prácticos
Prof. Maddalena Liuzzi
Prof. Diego Piña
Régimen Anual, 2002
Prof. Marilú Escorche
Prof. Gladys Venegas
Prof. Gladys R. Gali
Prof. David Toring
Prof. Juan Rodrigues
Prof. Ligia Peña
Prof. María Eugenia Pineda
Prof. Daniela Pasqualatto
Editora: Prof. Margarita Salazar-Bookaman

iv
Tabla de Contenido
Ciclo 1 Toxicología asistencial, ambiental y determinación de

drogas de abuso en muestras no biológicas
Ciclo 2 Manejo de animales de experimentación, toma de

muestras biológicas, valoración de alcohol por el
método de microdifusión, marcha analítica
Ciclo 3 Valoración del Monóxido de Carbono en sangre por

el método de microdifusión, determinación de Plomo
en muestras atmosféricas. Discusión casos clínicos
Casos Clínicos 1al 30

v
Esquema y recomendaciones
para elaborar el informe
de las prácticas ejecutadas
en el laboratorio:
1. Introducción.
2. Marco teórico, conceptual o referencial.
3. Objetivo.
4. Fundamento de la Práctica.
5. Reactivos y Equipos utilizados.
6. Procedimiento y desarrollo de la técnica.
7. Cálculos.
8. Descripción literal de los datos cuantitativos,

tomando en cuenta a la literatura de referencia.
Conclusiones.
9. Referencias bibliográficas, según normas de

Vancouver.
10. Anexos: folletos de instrumentos, bases de datos,

fotografías, tablas, gráficos u otros documentos que
ayuden a complementar el informe de la práctica de
laboratorio.

vi
1
Toxicología asistencial y
ambiental y determinación
Ciclo de drogas de abuso
Recomendaciones
para trabajar
en el Laboratorio
de Toxicología
1. Llegar puntualmente al laboratorio.
2. Usar bata larga y, en caso necesario, utilizar guantes ya

que existen tóxicos que se absorben por la piel.
3. Mantener rigurosamente limpios los útiles a emplear en

el análisis; las impurezas pueden falsear un resultado o
enmascarar una reacción.
4. Seguir buenas prácticas de laboratorio a fin de obtener

los mejores resultados en la práctica.
5. Respetar las condiciones de un método o de una

reacción. Cualquier modificación o agregado
incorrecto de reactivos, calentamiento excesivo,
agitación inadecuada, tiempo de reposo insuficiente,
dificulta la obtención del resultado correcto.
6. Mantener la paciencia y la prudencia adecuadas. Estas

cualidades son necesarias en Toxicología; casi todos
los métodos analíticos requieren tiempo y son
minuciosos.
7. Utilizar una pipeta diferente para cada reactivo.

Cualquier contaminación de un reactivo con otro
puede alterarlo, con la consecuente repercusión en el
análisis.
8. Lavar y secar bien los útiles después de usarlos.

Vii
1
Recomendaciones
para trabajar
en el Laboratorio
de Toxicología
9. Los análisis toxicológicos, para ser veraces y

confiables deben ser realizados conjuntamente con la
muestra desconocida, un blanco y un patrón del tóxico
que se investiga.
10. Los ensayos biológicos deben realizarse de acuerdo a

las instrucciones de los profesores, sin maltrato ni
miedo hacia los animales.
11. Al terminar la práctica debe dejar todo el material

utilizado en las mismas condiciones como lo encontró.
12. Concentrarse en el trabajo que realizó para evitar

errores en los procedimientos y accidentes en el
laboratorio.

Viii
1
Toxicología asistencial,
de drogas de abuso
Ciclo
1
Objetivos
Generales
Con la información obtenida durante el desarrollo de las

prácticas del Laboratorio de Toxicología del Primer Ciclo,
el futuro farmacéutico podrá:
1. Ofrecer información y/o asesoramiento toxicológico a

nivel de oficinas de farmacia, de hospitales o clínicas
privadas y de centros de información y asesoramiento
toxicológico, basándose en el manejo bibliográfico,
visitas a centros especializados y resolución de casos de
intoxicaciones tomados del archivo de dichos centros o
de la literatura internacional.
2. Efectuar el muestreo biológico y ambiental y realizar el

análisis toxicológico usando técnicas generales y
específicas, cualitativas o cuantitativas, o usando
modelos experimentales en animales.
3. Recomendar el tratamiento para casos de intoxicación,

basándose en el mecanismo de acción del agente
tóxico implicado.
4. Determinar la presencia de drogas de abuso en

muestras no biológicas.

2
1
Objetivos
Específicos:
Una vez concluido el ciclo de prácticas, el estudiante

estará en capacidad de:
1. Consultar y manejar bibliografía especializada para la

elaboración de fichas toxicológicas.
2. Aplicar la información obtenida de la bibliografía

especializada para la interpretación y resolución de los
casos de intoxicación.
3. Recolectar y analizar muestras ambientales según el

contaminante involucrado.
4. Determinar la presencia de drogas de abuso mediante

reacciones de coloración en muestras no biológicas.

3
1
Primer Ciclo
Lunes 1. Toxicología Asistencial:
1.1 Charla sobre SIMET (Servicio de Información de
Medicamentos y Tóxicos) a cargo del personal de
dicho servicio.
Martes o Jueves 1.2 Investigación bibliográfica de la toxicidad de

productos comerciales y/o de sustancias
químicas.
Consulta e interpretación de textos especiales.
Elaboración de fichas toxicológicas.
Ficha control de asesoramiento y referencia

toxicológica en la oficina de farmacia.
Martes o Jueves 2. Muestreo para el análisis toxicológico:

2.1 Muestras biológicas y materiales (muestras no
biológicas).
2.2 Muestras ambientales: Gases, vapores y material

particulado.
2.2,1 Detección de gases y vapores.

4
1
Toxicología de
Emergencia
Ciclo
Primer Ciclo
Lunes y Martes Manejo del libro Clinical Toxicology of
Commercial Products1 como Fuente Especial
de Información:
1.Contenido:
Sección I (páginas rosadas): Primeros Auxilios
Sección II (páginas azules): Índice de Ingredientes
Sección III (páginas blancas): Índice Terapéutico
Sección IV (páginas verdes): Tratamiento de Soporte
Sección V (páginas amarillas): Índice de Productos

Comerciales
Sección VI (páginas blancas): Formulaciones Generales
Sección VII (páginas rosadas): Casas Fabricantes y/o

representantes, nombres
y direcciones.
2.Procesamiento de las fichas con base en este

libro:
A) En caso de tener el Nombre Comercial de un

producto, se procede de la siguiente manera:
a) Busque el nombre de dicho producto en la

Sección V: (páginas amarillas); los nombres
están en orden alfabético. Allí usted
encontrará:

Cátedra de Toxicología Forense1Gosselin, R.E., Smith, R.P.; Hodge, H.C., Braddock, J.E.: Clinical Toxicology of Commercial Products.
Fifth Edition. Williams & Wilkins CO. Baltimore/London, 1984.
5
1
Toxicología asistencial,
1. La composición química del producto con el o

los ingredientes parciales o totales,
marcándose con un asterisco (*) el o los
ingredientes más activos toxicológicamente.
2. Cantidades en % de los respectivos

ingredientes.
3. Forma y uso comercial del producto.
4. Nombre de la casa Fabricante o del

Representante.
b) En la Sección II: (páginas azules), busque el

compuesto químico señalado con el asterisco,
allí encontrará la información necesaria acerca
del mismo.
c) En la Sección III: Indice Terapéutico (páginas

blancas) busque toda la información sobre la
toxicidad clínica y la terapia correspondiente al
compuesto químico.
d) En la Sección IV: (páginas rosadas), busque

la dirección y teléfono de la casa fabricante o
representante del producto.

6
1
Esquema para el manejo
del libro Clinical Toxicology
Ciclo of Commercial Products
Nombre comercial conocido Nombre comercial desconocido,
Composición exacta
desconocida
Uso conocido
Sección V Sección VI
Índice de Productos Formulaciones generales

comerciales.
Posibles ingredientes y
Ingredientes, % y * composición
Páginas amarillas. Páginas blancas
Sección II
Índice de ingredientes
Ingredientes
conocidos Grado de toxicidad
Páginas azules
Sección III
Índice terapéutico
Universidad Central de Venezuela Páginas blancas
7
1
Escala de Toxicidad
Ciclo
Según el libro Clinical Toxicology

of Commercial Products
Grado de Toxicidad Dosis letal humana probable

mg o g/Kg de peso corporal
6 Super tóxico Menos de 5 mg
5 Extremadamente tóxico 5mg - 50 mg
4 Muy tóxico 50 mg 500 mg
3 Moderadamente tóxico 500 mg 5 g
2 Poco tóxico 5 g 15 g
1 No tóxico Mayor que 15 g

8
1
Modelo de Ficha Toxicológica
Ciclo
NOMBRE COMERCIAL DEL PRODUCTO:
EMPRESA FABRICANTE O DISTRIBUIDORA:
DIRECCIÓN:
TELÉFONO:
NOMBRE QUIMICO DEL (LOS) PRINCIPIO(S) ACTIVO(S):
COMPOSICIÓN:
USO:
9
1
Ciclo
DL50 Y GRADO DE TOXICIDAD DE LOS INGREDIENTES

POTENCIALMENTE MÁS TÓXICOS DEL PRODUCTO:
SINTOMATOLOGÍA:
TRATAMIENTO:
INFORMACIÓN AL PERSONAL MÉDICO Y PARAMÉDICO:
INFORMACION AL PÚBLICO:

10
1
Ciclo
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO:
OBSERVACIONES:
BIBLIOGRAFÍA:

11
Ficha de Control de
Ciclo1 Asesoramiento Toxicológico

a Nivel de la Oficina
de Farmacia
Nº
Farmacia:
Dirección:
Teléfono:
e-mail:
NOMBRE DEL SOLICITANTE:
EDAD: SEXO:
PROFESIÓN:
OCUPACIÓN:
DIRECCIÓN:
TELÉFONO:
Forma de solicitud:
Personal ( )
Telefónica ( )
Por Escrito ( )
12
Ciclo1 1. Naturaleza del solicitante:
a) Profesionales:
Médicos ( )
Farmacéuticos ( )
Docentes ( )
Otros ( )
b) Procedencia:
Institutos oficiales y privados: Clínicas ( )
Hospitales ( )
Universidades ( )
Liceos ( )
Escuelas Primarias ( )
C) Otros ( )
2. Asesoramiento solicitado:
3. Asesoramiento ofrecido:
4. Referido por: Hospital ( )

Clínica privada ( )
Consultorios médicos particulares ( )
Universidades: ( )
Universidad Central de Venezuela Otras ( )

13
Ciclo1 5. Dirección, teléfono y Apartado Postal de la institución/persona

que hizo la referencia:
6. Antídotos o medicamentos recomendados para la intoxicación:
7. Responsable del asesoramiento:
Hora
Fecha

14
1
Toma de muestras para
el análisis toxicológico
Ciclo
Martes o Jueves Objetivo
Recolectar y analizar muestras ambientales según el

contaminante involucrado.
Las muestras susceptibles de análisis toxicológico pueden

dividirse en dos grupos:
1. Muestras biológicas
2. Muestras ambientales
1. Muestras biológicas:
Serán estudiadas durante el segundo ciclo del

laboratorio.
2. Muestras ambientales:
Durante esta actividad práctica, se estudiarán algunas

técnicas para la toma de muestras ambientales,
además de las contempladas en el tema “Muestras
para el análisis Toxicológico”. Se indicarán algunas
técnicas especiales para que las muestras estén aptas
para las determinaciones analíticas correspondientes.
Los criterios para la toma de muestras ambientales

deben considerar:
1. Tamaño de la muestra:
Las muestras deben ajustarse al tamaño requerido,

al tipo de estudio que se requiere y al fundamento
Universidad Central de Venezuela químico-analítico del proceso.
15
1
Ciclo
Martes o Jueves
2. Total ausencia de contaminantes:
Tanto los reactivos como el recipiente donde se toma

la muestra deben estar libres de contaminantes; por
lo tanto, los reactivos deben ser destilados y
purificados.
3. Generalmente, las determinaciones de los

contaminantes ambientales se realizan con equipos
de alta precisión, debido a la gran exactitud que
reclaman los métodos analíticos.
4. Tiempo de muestreo:
Debe ser fijado de acuerdo al tóxico involucrado, las

circunstancias de la exposición y la sensibilidad del
método analítico.
En la práctica profesional, para la obtención de la muestra
ambiental es necesario que los participantes en esta
actividad tengan un amplio conocimiento especializado
acerca de las sustancias que se van a investigar, para así
tomar las precauciones debidas y evitar que los resultados
reflejen situaciones no correctas del ambiente en donde se
toma la muestra. Además, la toma de muestras puede
presentar serios problemas, ya que a veces se necesita
actuar en lugares difíciles de penetrar y hasta peligrosos.
Para la realización de esta actividad práctica los

estudiantes serán debidamente informados sobre el agente
a recolectar, datos sobre la fuente de emisión, riesgos y
peligros inherentes al proceso de toma de muestra y otros
aspectos vinculados a la toma de muestra.
16
1
Ciclo
Martes o Jueves Procedimiento para una correcta

toma de muestra
Hacer un reconocimiento previo del lugar donde va a

realizarse la evaluación.
a. Conocer los posibles tipos de contaminantes que se

van a muestrear.
b. Localizar la fuente donde se genera el tóxico.
c. Obtener una muestra representativa y adecuada.
d. Tener información previa acerca del método

analítico que se va a emplear, con el fin de fijar el
tamaño de la muestra y su conservación.
Es necesario destacar que es indispensable tener un alto

grado de responsabilidad y conciencia de la labor que se
está realizando pues hay que tener presente que "Nunca un
buen análisis mejorará una mala toma de muestra".
Las muestras ambientales en los

sitios de trabajo comprenden:
a. La zona respiratoria del trabajador
b. La fuente donde se genera el tóxico
c. El ambiente general del lugar

17
1
Ciclo
Martes o Jueves Equipos empleados para la toma

de muestras ambientales:
Para llevar acabo la toma de una muestra ambiental, se

debe emplear equipos muy específicos que permitan
obtener los compuestos a determinar. Entre los equipos y
aparatos más comúnmente utilizados en la toma de
muestras pueden mencionarse los siguientes:
1. Ampolla de vacío
2. Bolsas plásticas adecuadas
3. Filtros Millipore
4. Midget impinger y Big impinger
5. Precipitador electrostático
6. Equipo para la toma de muestras instantáneas
Será necesario anotar los datos relacionados con esta

actividad, en una hoja que se designa como "Acta de Toma
de Muestra", la cual permitirá que se reconozcan las
condiciones indispensables para darle una correcta
interpretación a los resultados del análisis.

18
1
Acta de la toma de las
muestras
Ciclo
Ubicación del sitio donde se obtuvo la muestra:
Lugar donde se obtuvo la muestra:
Tipo de Muestra:
Fecha:
Cantidad muestreada:
Sustancia tóxica que se sospecha:
Determinación que se desea realizar:
Observaciones:
Persona que tomó la muestra:
Instrucciones para el envío de las

muestras:
a. Las muestras deben ser envasadas adecuadamente, y
deben ser enviadas en recipientes de vidrio (tubos de
centrífuga, tubos de ensayo) o de polietileno (bolsas,
frascos y tubos).
19
1
Acta de la toma de las
muestras
Ciclo
Instrucciones para el envío de las

muestras:
b. No se debe añadir preservativos, pues estos

interfieren con muchos análisis; por ejemplo: el
alcohol interfiere con el reconocimiento del fósforo
blanco de los saltapericos y algunos raticidas; sin
embargo, se puede usar en ciertos casos. En
muestras de grasa, en la cuales se va a determinar
insecticidas organoclorados, se puede añadir gotas
de formol al 10%. En todo caso, siempre que se
recurra a un preservativo, bajo la justificación de
enviar la muestra a sitios lejanos, debe declararse
cual preservativo fue usado y la cantidad añadida.
c. Los envases que contienen las muestras deben ser

herméticamente cerrados, para evitar el escape de
tóxicos volátiles y gaseosos. Si es posible, como en el
caso de sangre envasada en tubos de ensayo, la
tapa del envase debe ser recubierta con parafina.
d. Los envases deberán ser rotulados con una clave o

con cualquier indicación que corresponda o indique
a quien pertenece, la fecha y el nombre del remitente.
e. Las muestras deben refrigerarse como el medio más

seguro de preservación y para evitar la pérdida de
tóxicos volátiles. Si hubiese que enviar las muestras
desde un lugar lejano al laboratorio, éstas deberán
ser empacadas con hielo seco para garantizar la
temperatura de preservación.

20
1
Análisis de drogas de abuso
en muestras no biológicas
Ciclo
Viernes Objetivo:
Determinar, mediante técnicas analíticas cualitativas,

sustancias empleadas como drogas de abuso. Entre ellas
tenemos: Cocaína, morfina, metiléndimeto-
ximetanfetamina (MDMA o Éxtasis) y marihuana.
Materiales:
Placas de oquedades
Pipetas de 1 ml
Goteros
Beakers de 250 mL
Embudos de filtración
Cápsula de porcelana
Microscopio
Portaobjetos
Reactivos
Reactivo de Bouchardat:
Yodo bisublimado 2 gramos
Yoduro de potasio 2 gramos
Agua destilada c.s.p 100mL
Reactivo de Marquis:
Formaldehído 1 mL
Ácido Sulfúrico concentrado 9 mL
UniversidadCentral
Universidad Central
dede
Venezuela
Venezuela
Facultad
Facultad de
deFarmacia
Farmacia
Cátedra
Cátedra de
deToxicología
Toxicología
Forense
21
1
Ciclo
Viernes Reactivos
Reactivo de Ghamrawy:
Paradimetil-amino-benzaldehído 1 gramo
Ácido sulfúrico concentrado 5 mL
Agua destilada 1 mL
Solución de tiocianato de cobalto al 1% en alcohol

metílico.
Muestras:
Muestra #1: Un polvo supuestamente empleado
como droga de abuso, el cual debe analizarse según
los puntos 1 y 2.
Muestra #2: Un material vegetal supuestamente

empleado como droga de abuso el cual debe
analizarse según el punto 3.
Técnicas:
1. Investigación de los alcaloides:
Sobre una placa de oquedades coloque 1 pequeña

cantidad (miligramos) de la muestra en polvo
supuestamente usada como droga de abuso y añada 1
o 2 gotas del reactivo de Bouchardat. En caso de una
reacción positiva, se obtendrá un precipitado marrón
oscuro. Prepare un blanco de reactivos y un patrón
positivo en las mismas condiciones de la muestra.
Nota: Si obtuvo un resultado positivo, haga la

determinación de cocaína y de morfina mediante las
reacciones de coloración indicadas en los puntos 1.1 y
Facultad de Farmacia 1.2.
22
1
Ciclo
1.1. Determinación de cocaína:
Sobre una placa de oquedades coloque algunos

miligramos del polvo sospechoso y añádale tres
(3) gotas de la solución al 1% de tiocianato de
cobalto en alcohol metílico. En caso positivo se
obtendrá un color azul. Prepare un blanco de
reactivos y un patrón positivo en las mismas
condiciones de la muestra. La confirmación de la
coloración azul requiere de un tiempo de espera
de 10 minutos.
1.2. Determinación de Morfina:
Sobre una placa de oquedades coloque algunos

miligramos de polvo sospechoso y añádale dos o
tres (2 ó 3) gotas del reactivo de Marquis. En caso
de una reacción positiva se obtendrá una
coloración violácea. Prepare un blanco de
reactivos y un patrón positivo en las mismas
condiciones de la muestra.
2. Determinación de Metilén-dimetoxi-metanfe-
tamina:
En una placa de oquedades coloque una pequeña

cantidad de la muestra. A la misma, agregue dos o tres
(2 ó 3) gotas del reactivo de Marquis. En caso de una
reacción positiva se obtendrá una coloración verde.
Prepare un blanco de reactivos y un patrón positivo en
las mismas condiciones de la muestra.
Nota: En caso de duda en cuanto a los resultados

obtenidos, consulte la bibliografía disponible en el
laboratorio con la finalidad de sugerir o realizar una
Facultad de Farmacia prueba confirmatoria adicional.
23
1
Ciclo
3. Determinación de la Marihuana: Reconocimiento

Macroscópico Microscópico y químico.
3.1. Reconocimiento Macroscópico:
Tallo: Acanalado longitudinalmente, con nudos.
Hojas: Digitadas compuestas, con 5 a 11 folios,

linealmente lanceoladas y muy aserradas.
Semillas: Desnudas, vacías, del tamaño de los

granos de trigo, ovaladas, ligeramente aplanadas,
lomos circulares, superficie parda moteada, venas
blancas, aspecto verrugoso.
Frutos: Blancos.
3.2. Reconocimiento Microscópico:
Epidermis de las hojas:
Inferior: Paredes verticales onduladas con estomas

ovalados, pelos glandulares con tallos
unicelulares cortos, y otros con tallos largos
multicelulares en forma de lengua.
Prueba de los cistolitos:
CaCO 3 + 2 HCl CO2 + H2O + CaCl2
El carbonato de calcio está en los cistolitos.
El dióxido de carbono se libera de la reacción

y es lo que se ve en el microscopio como
Facultad de Farmacia burbujas.
24
1
Ciclo
3.3. Reconocimiento Químico:
Tome aproximadamente un gramo del material

sospechoso, realice una extracción con éter de
petróleo de la siguiente manera: Coloque el
material sospechoso en un embudo de filtración
cubierto con papel de filtro Whatman Nº 1. Añada
10 mL de éter de petróleo, recoja el filtrado en una
cápsula de porcelana y vierta el filtrado de nuevo
sobre el material sospechoso. Repita este
procedimiento cuatro (4) veces. Realice las
reacciones de coloración sobre el filtrado.
Reacciones de Coloración:
Al extracto de éter de petróleo obtenido en el punto

3.3, agregue cuatro (4) gotas de reactivo Ghamrawy y
caliente en baño de María. La resina de Cannabis
produce primero un color castaño rojizo que al enfriarse
vira al rojo púrpura. Luego, agregue algunas gotas de
agua; el color debería virar al azul o al índigo, color
que persiste después de una dilución.
Nota: Reporte lo encontrado en la muestras problema e

indique el porqué de sus conclusiones.

25
1
Bibliografía
Ciclo
Casarett, L., and Doull, J.: Toxicology The Basic Science of

Poisons. Primera a 5ta. Edición. McGraw-Hill.
U.S.A.(1975, 1980, 1986, 1991, 1996, 2001).
Dreisbach, R.H.; Robertson, W.O.: Manual de Toxicología

Clínica. Sexta Edición. Editorial El Manual Moderno, S.A.
de C.V. México, D.F. 1988 y 1999.
First, M. W. Air. Sampling and Analysis for Contaminants in

Work Place. En American Conference of Governmental
Industrial Hygienists. 4taed. pp A-1:A- 10, 1972.
Goldfrank, L. R.: Toxicologic Emergencies. Second Edition.

Appleton- Century-Crofts/New York, 1982.
Gosselin, R.E., Hodge, H.C.; Gleason, M.N.: Clinical

Toxicology of Commercial Products. Fourth edition, The
Williams & Wilkins Co. Baltimore, 1976.
Gosselin, R.E., Smith, R.P.; Hodge, H.C., Braddock, J.E.:

Clinical Toxicology of Commercial Products. Fifth Edition.
Williams & Wilkins Co. Baltimore/London, 1984.
King, L y McDermott, S. Drugs of Abuse. En Galichet, L(ed)

.Clarke's Analysis of Drugs and Poisons in Pharmaceuticals,
Body Fluids and Postmortem Material. 3 Ed.
Pharmaceutical Press London. 2004. pp. 37-52
Klaasen, C.D. Principios de Toxicología y Tratamiento de la

Intoxicación, en Las Bases Farmacológicas de la
Terapéutica, Brunton, LL, Lazo, JS y Parker, KL (Editores)
11ª. Edición, McGraw-Hill, Nueva York, 2006, pp.
1739-1775.

26
1
Bibliografía
Ciclo
Lárez, A.; Piña, D; Montes, A; Liuzzi, M. Guía de Trabajos

Prácticos Toxicología Forense. Caracas. Universidad
Central de Venezuela. 1985.
Muestreo de Contaminantes Químicos. En Manual de

Higiene Industrial fundación MAPFRE. España. Editorial
MAPFRE. 1991. pp.163-186.
Repetto, M.: Toxicología Fundamental. Editorial científico-

médica. Capítulos XI y XII, Barcelona, España, 1981. pp.
166 - 190
Robert, G. K. Direct Reading Instruments for Determining

Concentrations of Aerosols, Gases and Vapors. En
National Institute for Ocupational Safety and Health. The
Industrial Environmental its Evaluation & Control.
Washington, 1973, pp. 181-195
Toseland, P. A. Samples and sampling. En Moffat, A. C.,

Jackson, J. V.; Widdop, B, editores. Clarke's Isolation and
Identification of Drugs. The Pharmaceutical Press, Londres
1986. pp. 111-117
Villanueva, C. E.; Martínez, P. A. Investigación Toxicológica.

En Calabuig, G. J. A. Medicina Legal y Toxicología.
Ediciones Científicas y Técnicas, España. 1991, pp.
576-591
19/10/2006

27

Laboratorio
Ciclo 2
2
Laboratorio
Ciclo
Anexo 1
A continuacion se les presenta un cuadro referencial de
signos desencadenados en animal de experimentación,
ante la administración de una sustancia a estudiar en la
praxis del laboratorio.
Recomendaciones:
Elaborar un glosario, el cual le afianzará la identificación

conceptual de los terminos.
Actividad sobre el Sistema Nervioso y estudio de la toxicidad aguda en animales de experimentación ( ratón/rata )
Atención Humor Actividad Motora Excitación Del SNC Postura I ncoord. Motora Tono muscular Reflejos Sistem a Nervioso Autónomo Misc
Frecuencia respir atoria

Respuestas sorpresiva
Tono de los miembros
IFR (r eflejo ipsilateral

Actividad Espontánea
Acicalar ( Gromming)
Frecuencia cardiaca
Respuesta al Dolor
Localización Visual
Apertur a palpebral
Postur a del cuerpo
Respuesta al tacto
Marcha anormal
enderezamiento
Tono abdominal
Tamaño pupilar
Ar queamientos
Color de la piel
Postura de las
Fuerza prensil
Tono corporal
extremidades
Convulsiones
Acomodación
Vocalización
L agrimación
Estereotipia
Piloerección
Irritabilidad
Reactividad
Exoftalmos
Hipotermia
Salivación
Reflejo de
Reflejo de
Retor sión
Pasividad
Descanso
Temblor
(ataxia)
Corneal
Micción
Trem or
flexor)
Alerta
Miedo
Pinna
La tabla de puntuación [Irwin, 1959 ]
Bibliografía:
Turner, Robert A. Screening Métodos in Pharmacology.

Academic Prs.New and London.1965

29
2
Segundo Ciclo de Laboratorio
Casos Clínicos
Ciclo
Segundo Ciclo
A continuación se les presenta treinta casos clínicos de
situaciones reales, tomadas de la praxis médica de centro
de referencia de carácter Nacional.
Su análisis y discusión le permitirá interactuar sus

conocimientos teóricos y prácticos afianzando su futura
praxis profesional.
La presentación y discusión de los casos clínicos se

realizará en el tercer ciclo.
Recomendaciones técnicas para la discusión

de los casos clínicos.
A. Se hará presentación del caso clínico, aplicando la
técnica del seminario oral con soporte audiovisual y
respectivo manuscrito utilizando la metodología de
Vancouver.
B. Empleo de bibliografía y/u otras fuentes de información

científica reconocida de acuerdo a las normas de
Vancouver.

30
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 1
Se trata de paciente masculino de 34 años de edad,
natural y procedente de Caucagua, Estado Miranda,
quien en horas de la noche, posterior a discusión con
pareja y bajo efectos del alcohol, decide con intención
suicida ingerir aproximadamente 180cc de un contenido
liquido, presentando inmediatamente episodios eméticos
incoercibles, motivo por el cual 30 minutos después de la
ingestión es llevado a un centro asistencial rural donde le
fue realizado lavado gástrico, y posteriormente referido a
un centro hospitalario de la Capital, donde se mantuvo en
área de hospitalización por 15 días con lesiones ulcerosas
en mucosa oral (bucofaríngea) y disfagia progresiva.
Entre los paraclínicos realizados, el funcionalismo renal y

transaminasas hepáticas reportaron elevados a sus
parámetros normales, a pesar de presentar taquipnea y
estando contraindicado la administración de Oxígeno,
las radiografías de tórax de inicio y controles no
reportaron incidencia de toxicidad pulmonar, realizando
la prueba de ditionito de sodio en orina, en laboratorio
toxicológico, en cinco muestras desde su ingreso
encontrándose las dos (2) primeras muestras positivas (+)
y el resto negativas, alcoholemia (cualitativa) de ingreso:
positiva.

31
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 2
Varias personas acudieron al servicio de emergencia, por
presentar clínica gastrointestinal desencadenado por
vómitos precedido de nauseas, diarreas y dolor
abdominal tipo cólico, después de la ingesta de alimentos
tipo pescados y mariscos, siendo tratados con hidratación
parenteral, reposición de electrolitos séricos y
antiespasmódicos, cesando sintomatología. Veinticuatro
horas posteriores, cinco de estos pacientes iniciaron
cuadro clínico neurológico con predominio de cefalea,
astenia generalizada y debilidad muscular que
imposibilitaban estar de pies o caminar, acuden de nuevo
al servicio médico y son referidos a centro de toxicología,
donde uno de ellos presento crisis convulsiva, y el resto de
los pacientes se evidencio al examen físico, parestesias en
labios y extremidades inferiores, alteraciones de la
sensibilidad térmica, alucinaciones e hipertensión arterial y
arritmia cardiaca. Se ingresan a cuidados intermedios
para tratamiento y control exhaustivo de la clínica
neurológica.

32
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 3
Se recibe en la unidad de emergencia de centro
hospitalario, paciente masculino de 22 años de edad,
quien fue encontrado por familiar en su habitación,
inconciente con presencia de vómitos y evacuaciones
liquidas. Antecedentes importantes aportados por familiar
al interrogatorio: paciente sano sin ninguna patología
previa, hallándose cerca del mismo un vaso con poco
líquido que no aparenta ser agua pura, conjuntamente 2
sobres vacíos sin identificación, y con historial de reciente
despido laboral.
Al examen físico de ingreso: paciente en regulares

condiciones generales, pupilas mióticas, abundante
salivación (sialorrea), fasciculaciones en cara, miembros
superiores e inferiores, piel fría y diaforética, abundante
secreción bronquial y evidencia de relajación de esfínteres
por constante evacuación diarreica.
Entre los paraclínicos positivos al ingreso se encontró:

bradicardia en el electrocardiograma (ECG), y laboratorio
toxicológico: actividad de acetilcolinesterasa de 0,1
Unidad Colinesterasa (UC).
Se ingresa a la emergencia con medidas de

descontaminación y abordaje terapéutico egresando el
quinto día en condiciones clínicas estables y reporte de
actividad de colinesterasa cada 24 horas en: 0,9 UC, 1,20
UC, 2,0 UC, y 2,0 UC.

33
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 4
Se recibe llamada de facultativo a centro de
asesoramiento toxicológico, por caso de paciente
masculino, agricultor, de 44 años de edad, que estando 8
horas en el área de hospitalización reingresa a Unidad de
Cuidados Intensivos (UCI) por decremento de presión
arterial, fasciculaciones musculares, diarrea, secreciones
bronquiales excesivas, disnea, depresión del centro
respiratorio y coma. Después de ser manejado y tratado en
dicha UCI por 96 horas, extubado de la ventilación
mecánica (ventilación respiratoria asistida), dado a la
mejoría del cuadro clínico por el diagnóstico de
intoxicación por insecticida y controles de parámetros
toxicológicos: actividad de la enzima acetilcolinesterasa
favorables en ascenso, hasta llegar dos controles de 2,0
UC, se sugirió nuevo control de la actividad enzimático al
reingreso a UCI, reportando 0,2 UC.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 5
En emergencia pediátrica (12:00 m.) se recibe preescolar
masculino de 4 años de edad, natural de Barcelona,
procedente del Junco, quien según informa la madre en
horas de la noche, aproximadamente 11 p.m., el paciente
despertó con llanto fuerte y señalización de dolor en la
mano derecha, no encontrando la madre ningún hallazgo
posible de traumatismo ni picadura en dicha zona
anatómica. Inmediatamente presentó un vómito contenido
alimentario y persistencia del llanto, a los pocos minutos
repite vómitos profusos, situación que hace a los padres
salir al centro asistencial más cercano. Entre los hallazgos
clínicos: sialorrea, diaforesis, debilidad generalizada,
taquípnea, taquicardia, tensión arterial elevada y
priapismo. Reportes de laboratorio general de ingreso:
amilasa pancreática: 500 U, glicemia: 200 mg/mL. Se
administra antídoto y se monitorea clínica y paraclínicos.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 6
Se atiende llamado de familiar para asesoramiento
médico, el solicitante refiere que al visitar a su madre, de
76 años de edad, quien estaba bajo cuidado de
doméstica, la encontró somnolienta, desorientada en
tiempo, lugar y persona, con ideas delirantes, disartria,
confusión, con intensa rubicundez facial, sequedad de
todas las mucosas, hipertermia al tacto, y no recuerda
ningún otro episodio hasta la toma de café. El familiar se
percata, al indagar sobre lo sucedido, que la doméstica no
se encuentra en casa y existen evidencias de robo.
Sugerencias emitidas: acudir a centro de emergencia para
evaluación por facultativo para tratamiento y estudios
paraclínicos como electrocardiograma, enzimas
cardíacas, análisis de laboratorio general y monitoreo de
signos vitales, toma de muestras biológicas
inmediatamente, para procesar los análisis toxicológicos
pertinentes.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 7
Es abordado por bomberos paciente adolescente que al
encontrarse en concierto musical en el Poliedro de
Caracas, inició de forma súbita agitación psicomotriz con
daños a terceros en objetos y en el propio sujeto, euforia
exacerbada, agresividad, alucinaciones visuales, tactiles e
ideas de persecución. Al examen físico relatan los
bomberos cifras tensiónales 210/100 mmHg, frecuencia
cardiaca (Fc): 160 latidos/minuto; deciden administrar
solución 0,45% y traslado a centro hospitalario,
percatándose de lesiones necróticas en trayectos de vías
venosas a predominio de miembros superiores. Llegando
a la emergencia paciente en malas condiciones generales,
pupilas puntiformes, cianosis y depresión respiratoria, TA:
60/30 mmHg, Fc: 30 latidos/minuto, hallazgo de lesiones
necróticas en trayecto de vías sanguíneas a predominio de
miembros superiores. Se realiza análisis de laboratorio
toxicológico: screening de depresores del SNC negativos;
se toma muestra de orina para determinar presencia de
drogas de abuso y se esperan resultados.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 8
Se trata de paciente lactante mayor femenina de 12 Kg,
quien es llevada a centro asistencial de emergencia
pediátrica por su madre, por presentar de forma súbita,
sudoración, desvanecimiento, vómitos, temblor distal e
incoherencia. Entre los antecedentes importantes;
hipertermia de 39°C de 72 horas de evolución, que hizo
que la madre le administrara un supositorio de Tachipirin
R
de 250 mg, cada dos a tres horas por veintiséis horas.

Dado a que no descendía la temperatura,
concomitantemente le administró de forma no precisa
R
varias cucharada sopera de Tempra jarabe, sugerido por
vecina. Al presentar vómitos y dolor abdominal, la madre
decide acudir a facultativo, encontrándose al examen
físico: temperatura 36,5°C, peso: 12 Kilogramos,
hipotensión, letargo y dolor a la palpación superficial y
profunda del epigastrio e hipocondrio derecho. Dado a la
clínica anteriormente descrita, se decide su ingreso para
estudio y tratamiento, entre laboratorio clínico de
emergencia se realizó pruebas de funcionamiento
hepático (SGTO SGPT) y bilirrubina reportando
elevadas a su valor normal, niveles hemáticos de
acetaminofen 152 µ/mL. Dado a lo anteriormente
expuesto se decide ingreso a cuidados intermedios para el
manejo y control de dicha intoxicación.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 9
Médico de centro privado llama a centro de
asesoramiento toxicológico refiriendo caso de una
paciente adolescente traída por amigos quienes se
encontraban en una fiesta, y de forma súbita presentó
convulsiones, al interrogatorio niegan haber ingerido
bebida alcohólica, niegan consumo de drogas de abuso,
único antecedente es haber ingerido una tableta con
figura recreativa administrada por la actual pareja de la
paciente con el fin bailar toda la noche. Entre otros
parámetros importantes: Tensión arterial, frecuencia
cardiaca, frecuencia respiratoria, y temperatura
aumentadas, deshidratada y alucinando. Se realizó
análisis toxicológico a través de fluido biológico orina
descartando escopolamina y metabolitos de cocaína.

39
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 10
Se realiza asesoramiento toxicológico a facultativo, por
caso de paciente femenina de 45 años de edad quien llega
a la emergencia de un centro asistencial con siguiente
cuadro clínico: inconsciente, sin respuesta a estímulo
dolorosos ni tendinosos, la respuesta al estímulo faríngeo
es débil, la presión arterial y la respiración con tendencia a
disminuir, pupilas midriáticas, e hipotermia de 36ªC.
R
Médico tratante administro ampollas de Flumazenil y
Naloxona no teniendo mejoría significativa del cuadro
clínico.
Antecedentes importantes, fue encontrada en su cama por

amiga, con quien comparte la vivienda y según lo que
manifiesta la misma es que: “la paciente refería tres meses
de insomnio y se notaba muy ansiosa”; junto a ella se
encontraron varios blisters de medicamentos distintos.
Entre las sugerencias emitidas, entre otros estudios

paraclÍnicos, toma de muestra biológica para análisis de
screening de depresores del Sistema Nervioso Central.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 11
Es llevado a emergencia hospitalaria paciente masculino
de 50 años de edad, natural y proveniente de Gramoven
Catia, quien en horas de la madrugada al encontrarse
dormido, fue envenenado por animal que no precisa,
presentando a los 30 minutos, adormecimiento peri
bucal, marcha inestable y dificultad en la acomodación
visual. Se evidencia al examen físico, dos horas posterior al
accidente, apnea, nistagmus, sialorrea e hipotonía
muscular. Paraclínicos tiempo de tromboplastina (PTT), pro
trombina (PT) y fibrinógeno incoagulable, Fosfoquinasa de
creatina (CK) y Lactato Deshidrogenasa (LDH) elevados.
Se administra antivenina específico e ingresa en área de
emergencia.
Caso 12
Se hace seguimiento de caso de pre-escolar masculino,
quien está hospitalizado en emergencia pediátrica desde
hace cinco días por síntomas: Depresión del Sistema
Nervioso Central (SNC), convulsiones, daño hepatorenal
e hipoglicemia, posteriores a recibir infusión de planta,
administrada por su madre, por varios días con el fin de
tratar parasitosis. Refiere pediatra tratante que a pesar de
corregir desequilibrio hidroelectrolítico, no ha mejorado
clínica neurológica, evidenciándose deficiencia en la
misma. Se descarto; lesión de ocupación de espacio
cerebral, igualmente hemorrágica e isquemia en dicha
zona anatómica. Se sugiere mantener indicaciones,
Universidad Central de Venezuela tratamiento sintomático y de sostén.
41
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 13
Se trata lactante de 14 meses de edad, a quien la madre le
automedica jarabe por presentar tos, recibiendo cuatro
dosis de 1cc cada 6 horas, presentando al examen físico:
somnolencia, miosis, vómitos, dificultad para respirar y
cianosis peribucal. Se ingresa de emergencia
asegurando vía aérea adecuada, la administración de
antídoto, y la espera de metabolitos de drogas de abuso.
Caso 14
Se ingresa en emergencia pediátrica de centro
hospitalario, a escolar de 9 años de edad quien al padecer
de pediculosis capitis, la madre le aplico en cuero
cabelludo un preparado compuesto por un polvo rojo y
aceite de coco, envolviendo turbante en dicha zona
anatómica. Al poco tiempo es llevada a centro asistencial
por presentar clínica de convulsión y lesiones purpúricas
en cara, miembros superiores y tórax antero posterior.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 15
Se recibe llamada de facultativo de centro asistencial
privado, solicitando asesoramiento toxicológico, sobre
caso de lactante masculino de 9 meses de edad, quien
según dice la madre había presentado presunta clínica de
convulsión en su casa, evidenciándose al examen físico de
emergencia los siguientes hallazgos: nistagmus vertical,
llanto, irritabilidad e hipotermia. Entre los antecedentes
importantes, la madre le administró infusión de anís
estrellado con el fin de mejorar cólico gastrointestinal,
aproximadamente 2 onzas cada tres horas, por
veinticuatro horas.
Caso 16
Acude paciente femenina de 24 años de edad a la
especialidad de Medicina Laboral, por presentar clínica,
desde hace una año y medio, de desprendimiento fácil o
caída de cabello, cefalea, alteraciones en la memoria
(respuestas más lentas para el patrón de memoria),
desvanecimiento, mialgia y astenia, Por motivo laborales
no acudió antes al médico; solo se autoadministró poli
vitaminas por seis meses. Al no sentir mejoría decide ir a
centro asistencial Entre antecedentes paraclínicos
importantes: Hemoglobina 8,0 g /dl, funcionalismo renal:
urea / creatinina elevados. Por antecedente laboral, se
decide toma de muestra urgente de fluidos biológicos
(sangre y orina por 24 horas) para realizar análisis
toxicológico: metales pesados, y entre los hallazgos
importantes al examen físico se evidencia pigmentación de
Universidad Central de Venezuela color grisáceo en mucosas gingival, con disminución de
Facultad de Farmacia los reflejos osteotendinosos.
43
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 17
Centro de Información Toxicológica recibe llamada de
centro hospitalario del área metropolitana, presentando
facultativo siguiente caso clínico: ingresa a la emergencia,
hace poco tiempo, paciente masculino de 35 años de
edad, con antecedente de clínica de cefalea tipo pulsante,
nauseas, vómitos, dolor abdominal tipo cólico y
ocasionalmente disminución precoz de la agudeza visual.
Al examen físico los signos vitales dentro de los límites
normales (DLN), pupilas midriáticas y no reactivas a la luz,
entre los parámetros de laboratorio presencia de una
acidosis metabólica con el HCO3 en 20 mEq/l, potasio en
3,6 mEq/l., y al interrogatorio clínico manifiesta como
antecedente importante, hace 8 horas, la ingestión hasta
llegar a la embriaguez, de una mezcla de jugos de frutas
Caso 18
En un hospital ingresaron 14 pacientes cuyas edades
comprendían entre 10 y 76 años cuyo único antecedente
importante es haber recibido por tratamiento la ingestión
de un jarabe en dosis no reportadas. Las manifestaciones
clínicas que se presentaron entre los 4-5 días post-
ingestión del jarabe fueron: vómitos, diarreas,
sangramiento gastrointestinal, rigidez y distensión
abdominal. Los siguientes 2-3 días presentaron oliguria,
anuria, acidosis e hipotensión. Cuatro de los pacientes
fallecieron.
44
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 19
Pre escolar masculino, ingiere accidentalmente una
cantidad desconocida de una suspensión para uso
dermatológico a base de aceite alcanforado. Dos horas
post-ingestión presentó nauseas, vómitos y súbitamente
convulsión tónica en miembros inferiores con desviación
de la mirada. Ante esta manifestación clínica, la madre
decide llevarlo al centro de emergencia pediátrica. Al
ingreso se evidencia nueva convulsión con iguales
características, temperatura de 37° C, signo de apnea
respiratoria, lesiones eritematosas en mucosa oral y
faringe, aliento alcanforado, hipertonía en miembros
inferiores. Paraclínicos: hemograma 15,100
leucocitos/mm 3, segmentados 10%, linfocitos 89%,
monocitos 1%; sedimento urinario normal, electrolitos,
calcio y glucosa séricos normales; examen del LCR
(Líquido cefalorraquídeo) DLN (Dentro de valores
normales) Se realiza desintoxicación con protección de
vía respiratoria, y se hospitaliza en cuidados intermedios
bajo estricta vigilancia médica para tratamiento.

45
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 20
Paciente masculino de 28 años de edad natural y
procedente de Pereira, Colombia, que es llevado el día 19
de Junio en horas de la tarde por funcionarios del CICPC
a emergencia de Centro Hospitalario, debido a que el
mismo manifiesta haber ingerido cuerpos extraños
contentivos de presunta droga de abuso el día 16 del
mismo mes. Al haber expulsado seis de los mismos, refirió
temor ante la situación y se entrega al cuerpo judicial. Al
examen físico de emergencia se aprecia paciente en
aparentes regulares condiciones generales, hidratado,
afebril, consciente, orientado en tiempo, espacio y
persona, lenguaje coherente marcha estable, pupilas
isocóricas normoreactivas a la luz, mucosa oral húmeda,
no sialorrea.
Cardiopulmonar: Ruidos cardiacos rítmicos y simétricos,

frecuencia cardiaca 80 latidos por minuto.
Murmullo vesicular audible en ambos campos

pulmonares, sin agregados.
Abdomen blando, depresible, no doloroso, se palpan

depresiones a nivel de asas intestinales, sugestivas de
cuerpo extraños.
Extremidades eutróficas. Resto sin alteraciones.
Se realizó Rayos X: abdomen simple, donde reporta

múltiples imágenes densas, de morfología tubular en todo
el abdomen a todo lo largo del tracto gastrointestinal, en
probable relación a cuerpos extraños. Por no contar en
centro hospitalario con reactivos para determinar
metabolitos de drogas de abuso, se sugiere a los
funcionarios (CICPC) la realización de los mismos en
Cátedra de Toxicología Forense centro privado , no procesándose.
46
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 20
Se decide su ingreso en observación, para la
administración de tratamiento hasta la expulsión de
cuerpos extraños, con un custodio de la División Nacional
contra Drogas.
04 horas de su ingreso: Paciente expulsa 26 dediles, a

los cuales efectivos realizan test de narcótico (Narcotest)
apreciaciándose coloración azul, en uno de los dediles
tomados al azar.
10 horas de su ingreso: Se acude a llamado de

enfermería, ya que el paciente presenta agitación
psicomotriz y convulsiones. Se indica Diazepam
endovenoso, se yugula la convulsión, se administra
oxígeno y se coloca cánula de Mayo.
14 horas de su ingreso: Paciente repite igual cuadro

clínico, se yugula de nuevo convulsión, se realiza
electrocardiograma el cual reporta taquicardia
supraventricular, se administra amiodarona.
17 horas de ingreso: Persistencia de convulsiones tónico

clónicas, que no ceden con neurolépticos, malas
condiciones generales, hemodinámicamente inestable,
hipotenso, con trastorno del ritmo cardiaco, frecuencia
169 latidos por minuto, Glasgow de 6 puntos, es evaluado
por cirujano cuya sugerencia “no puede ser llevado a
mesa operatoria hasta estabilizar cuadro clínico”
18 horas y 20 minutos de ingreso: Paciente vuelve a

presentar convulsiones tónico-clónicas generalizadas.
Agitación psicomotriz, presenta paro cardiaco. Se realizan
maniobras de reanimación sin éxito. Se realiza
electrocardiograma y se pide autopsia médico-legal.
47
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 21
Fueron referidos a la emergencia pediátrica de centro
hospitalario, un grupo de pacientes en número de seis,
cuyas edades comprendían entre 8 y 16 años, que
posterior a extraer frutos maduros de un árbol de la familia
Euforbiaceae, deciden comer cantidad no precisa de las
mismas, presentando al poco tiempo clínica de dolor
abdominal tipo cólico, náuseas, vómitos persistentes,
diarrea sanguinolenta, sed y debilidad generalizada. Se
realiza de emergencia laboratorio general, reportando en
todos los pacientes, desequilibrio hidroelectrolíticos;
análisis coprológico negativo para bacterias y parásitos,
uremia elevada, decidiendo urgente administrar antídoto
con la dosis correspondiente a cada paciente, hasta
mejorar clínica y conjuntamente monitorear
alcoholemia, glicemia y corrección de electrolitos en
cada uno.
Caso 22
Se ingresan a la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) dos
pacientes adultos quienes después de comer tubérculo
con poca cocción presentaron convulsiones. Al examen
físico de ingreso a la emergencia, se evidencia los
siguientes signos y síntomas en ambos pacientes: pérdida
de la consciencia, respiración irregular, hipotensión
arterial, bradicardia, cianosis en labios, aliento almendra
amarga, pupilas dilatadas poco reactivas a la luz,
defecación y micción involuntaria, opistótonos. Se toma
muestra de sangre para análisis de laboratorio general,
gases arteriales reportando acidosis respiratoria y
laboratorio toxicológico, metahemoglobinemia , con el
fin de administrar tratamiento con antídoto especifico.
48
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 23
Escolar masculino de 8 años de edad, el cual se
encontraba zambulléndose en un tanque de agua, cuando
de pronto presentó múltiples picaduras de un ataque
masivo de abejas, siendo trasladado de emergencia a
centro hospitalario donde de inmediato realizan medidas
de descontaminación por raspado de piel, retirando
aproximadamente más de 300 aguijones en todo el
cuerpo a excepción del área genital, al encontrarse con
clínica de depresión del Sistema Nervioso Central y
dificultad para respirar se procede a proteger la vía
respiratoria mediante intubación endotraqueal y es
trasladarlo a la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI)
encontrándose recluido por 7 días, donde los hallazgos
clínicos tratados fueron: insuficiencia renal aguda,
insuficiencia respiratoria, lesiones cutáneas severas;
egresa en buenas condiciones generales con persistencia
de ptosis bipalpebral, decidiendo evaluación ambulatoria
por consulta externa para la evaluación cronológica de
este signo clínico.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 24
Fue ingresada a centro Toxicológico escolar femenina, de
7 años de edad, quien presenta desde hace 12 horas de
evolución dolor abdominal, vómitos, diarrea profusa
liquida y sed. Al examen clínico de ingreso se encuentra
paciente ansiosa, álgida, con deshidratación moderada y
leve tinte ictérico en escleras, dolor a la palpación en
epigastrio, no signos de irritación peritoneal. Se solicitan
pruebas de funcionalismo hepático que muestran; SGOT
(ALAT) en 150 U/L y la SGPT (ASAT) en 80 U/L, tiempo de
protrombina (PT) en 15 segundos, el tiempo parcial de
tromboplastina en 42 segundos y reporte hematológico
normal, se toma muestra para prueba de hepatitis viral,
aunque la madre refiere haberse encontrado previamente
en buenas condiciones generales. Al interrogatorio la niña
manifiesta la ingestión de salta perico, fuegos artificiales
obsequiado por el tío por celebración de fiestas
decembrinas. A las veinticuatro horas post-ingesta, se
exacerba el cuadro clínico conjuntamente con los
paraclínicos, obteniendo un reporte de bilirrubina total
aumentada a predominio de la bilirrubina indirecta con un
valor de 25 mg/dL, la ALAT (amino transferasa de alanina)
en 650 UI y ASAT (aspartato amino transferasa) en 450 UI
y acenso dos veces de los valores normal de urea y
creatinina, desencadenando clínica de encefalopatía
hepática. Se decide traslado a la Unidad de Cuidados
Intensivo, se realiza biopsia hepática y se continúa con
tratamiento.

50
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 25
Paciente femenina procedente de Filas de Mariches,
Estado Miranda, quien realizando labores de jardinería
refirió hincada en cara lateral del pie izquierdo,
presentando dolor moderado y ardor local, decide tomar
medicamento (AINES) para el dolor y reposa en su casa. A
las seis horas posteriores refiere aumento progresivo del
dolor, aumento del diámetro del pie que abarca hasta la
rodilla y limitación funcional; concomitantemente, de
forma espontánea presenta sangramiento en encías y en
los puntos de la herida, evidencia equimosis a distancia del
sitio de la lesión. Acude a centro hospitalario donde se
realiza laboratorio general, encontrándose incoagulables
la pantalla de coagulación, fibrinógeno no detectable,
isoenzimas CK (creatin fosfoquinasa) y LDH (lactato
deshidrogenada) elevadas, Urea: 60 mg/100 mL,
Creatinina: 3mg/100 mL., el laboratorio toxicológico
Sulfato de Amonio positivo (+++). Dado a la clínica y
paraclínicos que presenta la paciente se decide su
ingreso para abordaje y tratamiento.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 26
Se trata de paciente masculino de 48 años de edad con
antecedente importante de alcoholismo desde los 14 años
con ingesta de licor grado 35º y 40º, acentuando ingesta
diaria desde hace un año y medio, por pérdida de la
estabilidad laboral. Fue trasladado por bomberos por
encontrarse en acera de una avenida con crisis
convulsivas. Al examen físico se evidencia paciente
desorientado en tiempo, espacio y persona, tensión
arterial de 220 / 100 mmHg, frecuencia cardiaca de 110
latidos por minuto, respiración de 23 por minuto,
agitación psicómotriz acentuada, rubicundez facial,
exaltación de reflejos osteo tendinosos, alucinaciones
visuales y táctiles, reporte de alcoholemia; negativo y
parámetros de laboratorio alterados, leucopenia; Hg de 8
g/dL, tiempo de tromboplastina (PTT), protrombina (PT)
incoagulables y fibrinógeno limite inferior al rango
normal, la gammaglutamiltranspeptidasa (GGT) cinco
veces por encima de lo normal, amilasas elevadas. Se
ingresa en unidad de cuidados intermedios, con
contención mecánica para abordaje terapéutico.

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2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 27
Se trata de pre escolar femenina de seis años de edad
natural de Valle de la Pascua (Edo. Guárico) a quien madre
refiere inicio de enfermedad actual en horas de la noche
cuando es envenenada por ofidio en tobillo izquierdo,
presentando vómitos de contenido alimentario en número
de tres, es llevada al Hospital de Valle de la Pascua donde
le administran frasco de suero antimicrúrico y un equipo
de suero antiofídico polivalente siendo referida a centro
toxicológico de la capital.
Al examen físico de ingreso:
Tensión arterial: 85/62 mmHg.
Frecuencia cardiaca: 90 latidos por minuto.
Frecuencia respiratoria: 30 respiraciones por minuto.
Peso: 20 Kilogramos.
Entre los hallazgos clínicos positivos: Paciente consciente,

orientada en persona, con disminución de la agudeza
visual referido por la misma, ptosis bipalpebral, se aprecia
dos puntos de inoculación de 2 milímetros de separación
en cara externa de 1/3 distal de pierna izquierda, sin
signos de flogosis, disminución de la fuerza muscular
generalizada con un puntaje de IV/ V.
Laboratorio de ingreso:
Le u c o c i t o s : 9 7 0 0 c o n n e u t r o f i l i a : 9 1 . 2 % .
Glicemia: 128 mg/ dL.
Universidad Central de Venezuela CK (fosfoquinasa de creatina) 235 mg/dL

53
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 27
LDH (lactato deshidrogenada) 427 UI/L
Perfil de coagulación: normal
Examen de orina: normal.
TCM (Test de coagulación manual): firme a los doce

minutos que se hizo friable a los veinte minutos.
Urea: 19 mg/dL
Creatinina: 0.5 mg/dL
Se ingresa a Unidad de Cuidados Intensivos, con la

administración de tratamiento, vigilancia de la clínica
neurológica y completar estudios paraclínicos.

54
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 28
Se recibe llamada de centro hospitalario del estado
Aragua, por paciente femenina de 48 años de edad
quien ingirió con fines suicidas tabletas de estricnina,
presentando posteriormente convulsiones tónico clónicas,
rigidez muscular a predominio en cara y posición
opistótonos, a pesar de haber realizado medidas de
descontaminación y haber administrado 2 gramos de
R
Diazepam y Epamin; persisten las convulsiones y se
evidencia que la frecuencia aumenta por estímulos de
cualquier orden; concomitantemente, reporta acidosis
respiratoria por parámetro de gases arteriales.
Caso 29
Paciente femenina de 17 años de edad con siete semanas
de embarazo, ingresó a centro de emergencia hospitalario
con clínica de coma neurológico, el cual según familiar
ingirió cantidad no precisa de medicamentos mixtos a
base de benzodiacepina y antidepresivos por aparente
intento de suicidio. Ingresa a la Unidad de Cuidados
Intensivos para abordaje médico y tratamiento.

55
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 30
Paciente masculino de 41 años de edad, quien se
encontraba el fin de semana en zona boscosa y bajo
efectos de licor presenta sin causa aparente aumento de
volumen en pierna derecha, presencia de flictenas y zona
necrótica en región dorsal de pie derecho. Acude a
facultativo privado quien indica tratamiento a base de
antibióticos. Al no presentar mejoría, acude 48 horas
posterior a centro toxicológico, donde se aprecia al
examen físico dos puntos no sangrantes en región
inframaleolar interna de pies derecho, zona hipercrómica,
necrótica con flictenas en cara interna de tercio distal de
pierna derecha y en tercio medio de cara lateral externa,
edema que abarca tres segmentos con signo de flogosis y
lesión eritematosa lineal en cara interna de muslo
ipsilateral. Se realiza pantalla de coagulación reportando
parámetros dentro del rango normal. Se ingresa a
observación para control y tratamiento con
antibioticoterapia, con diagnóstico presuntivo:
Posterior a su ingreso paciente refiere un episodio de
coluria y empeoramiento de cuadro clínico del miembro
afectado, con adenopatías inguinales, persistencia de
lesión necrótica, flictenas rotas, con secreción
serofibrinosa, eritema perilesional, con presencia de lesión
ulcerada en talón derecho que impresiona escara por
apoyo.
Estudios paraclínicos importantes realizados en la
hospitalización:
Leucocitosis con elevación de segmentados.
Glicemias elevadas que se mantuvieron hasta siete días de
hospitalización.
56
2
Casos Clínicos
Ciclo
Caso 30
Transaminasa pirúvica (TGP) y transaminasa oxalacética
(TGO) elevadas.
Bilirrubina total, directa e indirecta, se mantuvieron dentro
de limites normales hasta su egreso.
Urea elevada hasta el quinto día de hospitalización.
Creatinina: 1.1 mg/dL, valor que se mantuvo hasta su
egreso.
CK (fosfoquinasa de creatina) elevadas hasta el sexto día
de hospitalización.
LDH (Lactato deshidrogenasa) elevada hasta un mes de
egresado.
GGT (Gammaglutamiltranspeptidasa) elevada hasta el
sexto día de hospitalización.
PT (tiempo de protombina) dentro de parámetros normales
hasta su egreso.
PTT (tiempo de tromboplastina) dentro de parámetros
normales hasta su egreso.
Fibrinógeno: reporte diario 1726 mg / dL, 1220 mg/ dL,
866 mg/ dL, 761mg/ dL, 589mg/ dL, 300mg/ dL, 189
mg/ dL.
Proteína C reactiva se mantuvo en 11,63 mg/L hasta su
egreso.
Es evaluado por cirugía quien realiza fasciotomía, se
realiza ECO DOPPLER donde reporta insuficiencia venosa
superficial, no hay evidencia de trombosis venosa
profunda, se descarta enfermedad obstructiva arterial.
Dado a las alteraciones locales y antecedente
epidemiológico se diagnostica accidente por arácnido.
57
2
Laboratorio
Ciclo
Segundo Ciclo
Lunes 1. Entrega de los casos clínicos. Estos casos serán
preparados por los estudiantes y serán discutidos en el
Tercer Ciclo de Prácticas.
2. Técnicas experimetales básicas:
2.1 Manejo de animales de experimentación.
2.1.1 Administración de tóxicos por diferentes

vías: intraperitoneal, subcutánea,
intravenosa, oral.
2.1.1 Toma de muestras biológicas (sangre).
3. Determinación de alcohol
3.1 Determinación de alcohol mediante la técnica de

microdifusión.
Martes 1. Determinación de alcohol
1.1 Método de destilación al vacío.
Jueves y Viernes Marcha analítica

58
2
2. Técnicas experimentales
básicas
Ciclo
Manejo de animales de Introducción

experimentación
Aún cuando por razones de diversa índole: morales,
éticas, económicas, científicas y logísticas, hoy en día han
adquirido gran auge los métodos alternativos para los
estudios de toxicidad de los agentes químicos. En
toxicología sigue siendo imprescindible la
experimentación en animales ya que para conocer los
mecanismos de acción, efectos clínicos, cambios
bioquímicos e histológicos ocasionados por un tóxico
determinado es necesario realizar ensayos en animales de
laboratorio. Por ello se requiere recurrir a estudios en
animales usados como modelo para reproducir los
cuadros de intoxicaciones que se presentan en el ser
humano, a fin de profundizar los conocimientos acerca del
tóxico, la intoxicación que produce y su tratamiento, y así
poder realizar una mejor prevención o un tratamiento más
adecuado.
Son estas las razones para que el toxicólogo o un

investigador en Toxicología maneje y conozca los
animales más utilizados en experimentación: la rata y el
ratón, aunque en los estudios toxicológicos para el
desarrollo de nuevos fármacos, se hace necesario usar
otras especies animales. De igual manera se procede en
el estudio toxicológico de cualquier sustancia.
En el Laboratorio de Toxicología, se trabajará con la rata

(Ratus ratus).

59
2
básicas
Ciclo
Vías de penetración de 1. Vía Oral

los tóxicos
En experimentación, la vía oral, “por deglución”, es la
más sencilla, segura y económica. Las sustancias
deglutidas llegan al estómago y al intestino, desde
donde los principios activos o tóxicos pasan al torrente
circulatorio, a través de una gran superficie de
absorción.
La administración oral de tóxicos a animales pequeños

(ratas, ratones), puede hacerse introduciendo la
solución o suspensión del tóxico directamente en el
estómago mediante una cánula con punta roma, o sea,
por gavaje.
Procedimiento:
1. Se toma el animal con la mano izquierda, cuidando
que la cabeza y, por ende, la boca del animal se
sostenga de manera que el esófago esté en la
posición más recta posible.
2. Con la mano derecha introduzca la cánula o sonda

acoplada a una inyectadora que contiene el
material a administrar en la boca del animal y
busque el esófago con movimientos suave laterales
hasta que la cánula se deslice fácilmente sin
oposición del animal y sin provocarle tos.
3. La cánula o sonda debe estar bien fija a la

inyectadora y ésta debe sostenerse entre los dedos
meñique y anular con la palma de la mano derecha
mientras se mueve la cánula con los dedos índice y
pulgar.
Universidad Central de Venezuela 4. El aire de la inyectadora debe ser eliminado previo

al acoplamiento de la misma a la cánula.
60
2
básicas
Ciclo
Vías de penetración de
Contraindicaciones en el uso de la vía oral:
los tóxicos
a. Cuando se trata de sustancias irritantes para la
mucosa gástrica y que provocan émesis.
b. Si la sustancia es degradada por el pH ácido del

estómago, por la flora bacteriana y/o por enzimas
presentes en el tracto gastro-intestinal (la insulina,
por ejemplo, se inactiva si es suministrada por vía
oral).
c. Un factor limitante lo constituye el hecho que

muchas sustancias se encuentran en forma ionizada
al pH de los diferentes segmentos del tracto gastro-
intestinal (estómago, intestino delgado) y de esta
manera son difícilmente absorbidos.
2. Vías Parenterales
Las vías parenterales incluyen la intravenosa (I.V.), la
intramuscular (I.M.), la subcutánea (S.C.) y la
intraperitoneal (I.P.), la intraarterial, la intrarticular y la
intratecal.
2.1 Vía Intravenosa
Es la vía de elección para la administración de

soluciones acuosas, especialmente para aquellas
que son irritantes por otras vías.
En la rata y el ratón, la solución a administrar se

inyecta en las venas caudales.
61
2
básicas
Ciclo
Procedimiento:
1. Inmovilice el animal en una cámara adecuada
que deje libre la cola.
2. Limpie la piel suprayacente a la vena para

facilitar la inyección.
3. En caso necesario provoque vasodilatación

de la vena de la cola usando pequeñas
cantidades de xileno (xilol), o introduciéndola
unos minutos en agua ligeramente caliente.
4. Introduzca la aguja de una inyectadora estéril,

en la vena en un ángulo de 45°.
5. Administre el contenido total de la

inyectadora.
2.2 Vía Intraperitoneal:
Esta vía es de uso muy común para administrar

compuestos a animales pequeños. Es una vía
bastante rápida dada la gran área de absorción
que representa el peritoneo; es muy utilizada para
sustancias liposolubles.
La administración de compuestos por esta vía

presenta tres inconvenientes:
a. Como la mayor parte del material entra a la

circulación portal puede ser inactivado en el
hígado antes de que llegue a su sitio de acción.
62
2
básicas
Ciclo
b. Por esta vía se puede alcanzar concentraciones

elevadas de la sustancia en el hígado, por lo
que se puede provocar daño hepático si se
tratara de un agente tóxico.
c. Si el volumen de la solución a administrar es

elevado, especialmente en animales pequeños,
puede provocar cambios no relacionados con
las propiedades farmacológicas o toxicológicas
de las sustancias a ensayar.
En este laboratorio, se usarán ratas de la cepa

Sprague-Dawley, provenientes del Bioterio del
Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel”.
Otras cepas de ratas muy usadas en
experimentación en animales son: las ratas Wistar,
Long Evans, Charles River, entre otras.

63
2
Manejo de las ratas para
la administración de tóxicos
Ciclo
Procedimiento:
1. Con la mano derecha protegida por un guante de
látex, sujete la rata por la cola, agarrándola tan cerca
del cuerpo como sea posible y sujete el cuerpo del
animal con la mano izquierda protegida con un guante
grueso como se indica en la figura 1.
Figura 1
2. Con la mano izquierda, (protegida con un guante
grueso), inmovilice el animal cruzando las patas
anteriores de la rata, como se indica en la figura 2.
Figura 2
Universidad Central de Venezuela 1Fotografías: Cortesía de la Profs. Geraldine Guerrero y María Eugenia Pineda
64
2
Ciclo
Procedimiento:
3. Inyección intraperitoneal: Inyecte la solución del
tóxico en uno de los dos cuadrantes inferiores del
abdomen usando una inyectadora de 1 mL, colocando
la aguja en posición casi perpendicular al abdomen
(Figura 3). Aspire la solución en la inyectadora para
estar seguro que la aguja no haya penetrado en un
vaso sanguíneo, o en una asa intestinal (Véase la
Figura 3) 1.
Figura 3
4. Inyecte el volumen total de la solución.
Recomendaciones:
Se recomienda usar guantes desechables de látex, en

el laboratorio, a fin de evitar el contacto con sustancias
tóxicas.
En el caso de la rata, el volumen de la solución a

inyectar es 0,1 mL/100 g de peso corporal.
Universidad Central de Venezuela 1Fotografías: Cortesía de la Profs. Geraldine Guerrero y María Eugenia Pineda
65
2
Ciclo
Recuerde:
Si ocurre algún accidente con una sustancia tóxica o de
origen desconocido, lave inmediatamente la zona con
abundante agua y jabón, e infórmelo a su profesor.
Observaciones:
Coloque los animales en sus respectivas jaulas o en frascos
boca ancha para observar los cambios que provocan las
sustancias administradas, y haga sus anotaciones:
1. A l t e r a c i o n e s d e l c o m p o r t a m i e n t o :
Agresividad, intranquilidad, somnolencia.
2. Cambios del equilibrio: Movimientos

incoordinados, ataxia.
3. Cambios en la piel y las mucosas. Observe la

mucosa bucal, la conjuntival y las patas:
Un color azulado es índice de cianosis, un color
rojizo es índice de eritema o inflamación aguda,
piloerección.
4. Presencia de convulsiones o de ptosis parpebral.
2.3 Vía Intramuscular:
Las sustancias pueden ser suministradas en solución

o en suspensión. Ellas penetran en el músculo,
permitiendo una absorción gradual del tóxico. Es
una vía útil cuando se desea un efecto prolongado.
1. Inmovilice el animal de la misma manera como se
procede para la administración por vía
intraperitoneal.
66
2
Ciclo
2. Introduzca la aguja de la inyectadora en el

músculo de uno de los miembros posteriores
previa eliminación del aire.
3. Aspire para cerciorarse que la aguja no haya

penetrado en un vaso sanguíneo.
4. Inyecte el contenido total de la inyectadora.
2.4 Vía Subcutánea: Se utiliza para sustancias no

irritantes. La absorción por esta vía es generalmente
rápida, pero en el caso de compuestos que producen
vasodilatación local, como los anestésicos locales
debe incorporarse un agente vasoconstrictor para
retardar la absorción del compuesto. El sitio más
comúnmente utilizado es la parte posterior del cuello
porque la piel es laxa y permite elevarla fácilmente
para inyectar intradérmicamente.
Procedimiento:
1. Inmovilice el animal como se procede para la
administración por vía intraperitoneal.
2. Mantenga sujeto el animal y colóquelo en

posición horizontal sobre el mesón del
laboratorio.
3. Levante la piel de la parte posterior del cuello del

animal entre los dedos pulgar e índice de la mano
izquierda, introduzca la aguja de la inyectadora
por debajo de la piel y por encima del músculo,
inyecte lentamente.

67
2
Bibliografía
Ciclo
Ecobichon Donald J.: The Bases of Toxicty Testing. Cap. 2.

CRC Press, inc. USA 1992 pp.36-42.
Fazzini Alesandro: Le vie de somministrazzione dei farmaci.

En Dolara P., Franconi F., Mugelli A.: Farmacología e
Tossicología Sperimentale. Pitagora Editrice. Bologna,
Italia. 1989. pp. 57-64.

68
2
básicas
Ciclo
Muestras Biológicas Introducción

La selección de las muestras adecuadas para el análisis y
su correcta conservación son requisitos indispensables en
una investigación toxicológica.
Las muestras para el análisis toxicológico deben recogerse

teniendo en cuenta las condiciones particulares de cada
caso y las referentes a la distribución y metabolismo del
tóxico.
El conocimiento del metabolismo y vías de eliminación de

los tóxicos, es un factor importante en la determinación de
la muestra a tomar y el análisis toxicológico a realizar.
Ante cualquier análisis toxicológico surgen las siguientes

preguntas:
1. ¿Qué buscar? Dependiendo de la intensidad y el

tipo de metabolismo, un tóxico puede aparecer en
los fluidos o tejidos del organismo en su forma
original o como productos de la biotransformación
(metabolitos).
2. ¿Dónde buscar? Las propiedades físico-químicas

del tóxico y sus metabolitos pueden ser muy distintas.
Ello determina una distribución característica según
los casos y la conveniencia de realizar la
investigación en la orina, la sangre, la bilis y tejidos
corporales.
3. ¿Cómo buscar? Una vez que se sabe qué

compuestos hay que investigar y dónde se ha de
realizar su búsqueda, se pueden elegir las
condiciones óptimas para su extracción: Medio
Facultad de Farmacia ácido o básico, disolventes, técnica de extracción,
Cátedra de Toxicología Forense entre otros.
69
2
básicas
Ciclo
La extensa variedad de las muestras exige que el abordaje

del análisis toxicológico adquiere características muy
diferentes. Ello también obliga a seleccionar
adecuadamente las muestras, prepararlas y
acondicionarlas apropiadamente y remitirlas al
laboratorio de forma tal que no pierdan utilidad para el fin
para el cual se les destina.
Para fines docentes se clasificarán las muestras destinadas

al análisis toxicológico en:
1.Muestras para Toxicología Clínica.
2.Muestras sanguíneas con destino a la determinación de

alcoholemia.
3.Muestras de interés:
Provenientes de sujetos vivos.
Provenientes de una autopsia.
Provenientes de una exhumación.
4.Muestras para toxicología industrial.
5.Muestras para doping.
Sin embargo, como una muestra puede no ser exclusiva

del área donde se toma, la selección de las muestras
adecuadas para el análisis y su correcta conservación son
requisitos indispensables en una investigación
toxicológica.
Las muestras para el análisis toxicológico deben recogerse

teniendo en cuenta las condiciones particulares de cada
caso.
70
2
básicas
Ciclo
Principales muestras biológicas para el análisis

toxicológico:
Las muestras usadas con mayor frecuencia para el análisis
toxicológico son: contenido gástrico, orina, sangre,
hígado, bilis, cerebro y riñones.
1. Contenido gástrico:
1.1 Estas muestras incluyen, vómitos, aspirado

gástrico o lavado estomacal. Es importante
obtener las primeras muestras del lavado gástrico
ya que las últimas muestras pueden considerarse
diluidas. A menudo, en las muestras se puede
encontrar cápsulas o tabletas enteras, y el
producto puede ser identificado. A través de las
mismas.
1.2 En cuanto al tamaño de la muestra, 50-100 mL de

contenido gástrico es aceptable y una vez tomada
la muestra no se debe añadir preservativos a la
misma. Las muestras deben conservarse
refrigeradas (0-4°C) hasta el análisis.
1.3 Si el tóxico penetró por vía oral y no han

transcurrido más de 5-6 horas desde la ingestión,
las concentraciones del tóxico serán muy elevadas
en el estómago, lo cual facilita su detección. Un
resultado negativo del análisis del contenido
gástrico puede indicar que el tóxico no entró por
vía oral o ha transcurrido un tiempo excesivo
desde la ingestión.
71
2
básicas
Ciclo
2. Orina:
2.1 La orina representa una muestra idónea para
realizar una gran variedad de ensayos
preliminares, es de fácil obtención, y
generalmente contiene concentraciones
detectables de los tóxicos.
2.2 Las mayores ventajas de esta muestra son que la

concentración de un tóxico en este fluido puede
llegar a ser hasta 100 veces mayor que en la
sangre y, además, la orina está exenta de
proteínas, por lo que la interferencia de estas
moléculas es mínima. En la orina, generalmente
se encuentran los metabolitos del tóxico, los
cuales pueden ser identificados mediante técnicas
analíticas adecuadas.
2.3 Aproximadamente, 50 mL de la muestra es

suficiente para una serie de pruebas. Es
aconsejable no añadir preservativos, ya que
podrían interferir en el análisis posterior. Las
muestras deben conservarse refrigeradas a 0-4ºC
hasta el análisis.
3. Sangre:
Por lo general, se considera que la sangre proporciona
la valoración más precisa de la exposición. Sin
embargo, con sustancias volátiles de vida media corta,
la variación de la concentración sanguínea puede ser
considerable.
3.1 Debe tenerse en cuenta el hecho de la distribución
del tóxico en la sangre. La mayor parte de los
tóxicos orgánicos se disuelve en el plasma o están
unidos a las proteínas plasmáticas, mientras que
Facultad de Farmacia son pocos los que se transportan unidos a los
72
2
básicas
Ciclo
hematíes. Por ello, la sangre total y el plasma son

las muestras más representativas. Usando sangre
total se asegura que tanto los tóxicos que se
concentran en los eritrocitos como los que se unen
a las proteínas plasmáticas podrán ser detectados
en la muestra analizada.
3.2 Desde el punto de vista analítico, el plasma resulta

más cómodo ya que en el análisis se presentan
menos interferencias de los pigmentos de la
sangre y, adicionalmente, se evita la formación de
emulsiones con los disolventes orgánicos, como
sucede frecuentemente con la sangre total. Es de
mencionar que hay compuestos cuya detección
requiere sangre completa tales como plomo,
carboxihemoglobina, metahemoglobina y
cianuro.
3.3 Lo más recomendable es tomar aproximadamente

entre 5-10 mL de sangre y, en caso necesario, se
debe adicionar un anticoagulante adecuado,
debiendo conservarse refrigerada (0-4°C) hasta el
análisis.
4. Hígado:
4.1 Es el órgano donde se lleva a cabo la
biotransformación de la mayoría de los tóxicos y,
de hecho, los niveles de tóxicos en este tejido son
generalmente superiores a los de la sangre. En
Toxicología Forense se considera que una muestra
de hígado es la más importante para la detección
de cualquier tipo de tóxico; sin embargo, en la
actualidad su uso ha decrecido a medida que se
ha incrementado la sensibilidad de las técnicas
Universidad Central de Venezuela analíticas que permiten trabajar
Cátedra de Toxicología Forense satisfactoriamente con la sangre.
73
2
básicas
Ciclo
4. Hígado:
4.2 El hígado es de gran utilidad cuando se trata de
cuerpos exhumados o en un avanzado estado de
descomposición, casos en los que se dificulta
obtener muestras de sangre.
4.3 Al extraer el hígado es aconsejable evitar la

contaminación por la bilis, por lo que es
aconsejable extraer la vesícula biliar antes de
tomar la muestra de hígado.
4.4 Se considera que una muestra de 250 g es

suficiente. Al igual que con otras muestras de
tejidos, no deben adicionarse conservadores que
puedan contaminar o producir interferencias en el
análisis. La muestra deben mantenerse
refigeradas (0-4°C) hasta el análisis.
5. Otro tejidos y fluidos: Cerebro, riñón, bilis:

5.1 El cerebro es muy útil cuando se trata de muerte
por inhalación de solventes (tolueno, cloroformo)
debido a las altas concentraciones que alcanzan
estas sustancias en este tejido, donde son
retenidas tras la muerte. Las muestras de cerebro
son especialmente útiles para determinar la
concentración de alcohol en aquellos caos en que
no se dispone de una muestra de sangre
adecuada. Debido a que el cerebro resiste la
putrefacción postmorten, esta muestra es muy útil
para el análisis de tóxicos cuando el cuerpo ha
sido encontrado varios días después de la muerte.
5.2 El riñón es el tejido de elección en casos de

Universidad Central de Venezuela intoxicaciones por metales y otros tóxicos que se
74
2
básicas
Ciclo
5. Otro tejidos y fluidos: Cerebro, riñón, bilis:

acumulan específicamente en el mismo. En caso
de intoxicación por metales pesados, el riñón
muestra daños histológicos debidos al metal.
5.3 La bilis es importante para el análisis de sustancias

que se eliminan por vía biliar. Es particularmente
útil en el caso de muestras obtenidas de individuos
con sobredosis de opiáceos, ya que contiene altas
concentraciones de glucurónidos de dichos
compuestos. Debe extraerse la vesícula biliar
intacta y remitirse por separado en un recipiente
adecuado.
Todas las muestras deben mantenerse bajo
refrigeración (0-4°C) hasta el análisis.

75
2
Valoración de alcohol
Ciclo
Martes Objetivos:
Al finalizar la práctica, el estudiante estará en capacidad
de determinar los niveles de etanol en sangre mediante el
método de microdifusión de Conway y el método de
Newman (destilación al vacío). (Modificado de L. Clavel).
Método de Microdifusión de Conway. Determinación

cualitativa.
Fundamento:
La determinación de etanol se basa en su volatilidad y su
potencial redox. Ambas propiedades son utilizadas en este
método. En el compartimiento central de la celda de
microdifusión de Conway (figura 1), se coloca el
dicromato de potasio (agente absorbente), y en el otro
compartimiento se coloca la muestra y carbonato de
potasio (agente liberador). Si el etanol está presente en la
muestra, éste difunde fuera de la misma y reacciona con
el dicromato de potasio, de acuerdo a la siguiente
reacción:
3CH3CH2OH + 2 K2Cr2O7 + 8 H2SO4 3 CH3COOH + 2 Cr2(SO4)3 + 11 H2O +2 K2SO4
Una coloración verde azulado indica la presencia de

etanol.
Figura 1: Celda de microdifusión de Conway
Universidad Central de Venezuela Tomado de Stewart and Stolman. Toxicology.Vol II. 1961
76
2
Ciclo
Martes Materiales:
Celdas de Microdifusión de Conway con sus tapas
Pipetas volumétricas de 1 y 2 mL.
Silicona o Vaselina.
Cilindro graduado de 10 mL.
Reactivos:
Solución de Carbonato de potasio:
Solución saturada de dicromato de potasio:
Disuelva 3,7 g de dicromato de potasio en 150 mL

de agua destilada. Añada, con precaución, 280 mL
de ácido sulfúrico concentrado. Deje enfriar.
Complete con agua hasta un volumen de 650 mL.
Procedimiento:
Tome 1 mL de sangre de una rata previamente intoxicada
con alcohol (etanol de 95º), tal como se indica en
“procedimiento para la toma de la muestra en sangre de
ratas” (Páginas 65-66 de esta guía).

77
2
Ciclo
Martes Determinación Cualitativa:
1. En el compartimiento central de la celda de Conway

coloque 2 mL de la solución dicromato de potasio.
2. En el compartimiento exterior coloque 1 mL de

solución de carbonato de potasio.
3. Aplique silicona o vaselina en el borde superior de la

pared externa de la celda (borde del compartimiento
externo), coloque la tapa y deje una pequeña porción
del compartimiento externo destapado.
4. En el mismo compartimiento externo coloque 0,8 mL

de la muestra de sangre o de agua (para el blanco)
y cierre rápidamente la celda.
5. Mezcle el contenido moviendo la celda suavemente

en forma rotatoria siguiendo el procedimiento
anterior.
6. Coloque y deje la celda en una estufa a 90ºC

durante 30 min, para permitir la difusión de los
vapores de alcohol en la celda.
7. La aparición de un color verde azulado, indica la

presencia de etanol.
8. Prepare una curva patrón de etanol siguiendo las

instrucciones de su profesor.

78
2
Bibliografía
Ciclo
Benson, R. Technic for determination of blood alcohol by

means of Conway cell. Rev Fr Etrud Clin Biol. 1(10): 1150-
1151, 1956.
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Sunshine ed. CRC Press, Inc. Florida. P.145-146. 1978.
Feldstein M. Microdiffusion Analysis as applied to

Toxicology. En Stewart, C .P; Stolman, A. Toxicology
Mechanisms and Analytical Methods. Vol. I. New York and
London. Academic Press. 1961. p. 640- 642.
Microdiffusion Analysis. En Handbook of Analytical

Toxicology. Irving Sunshine ed The Chemical Rubber. Co.
1969. p. 1015-1018.
Stewart, C .P; Stolman, A. Toxicology Mechanisms and

Analytical Methods. Vol. II. Academic Press. New York and
London. 1961. p.128-129.
Villanuevas, C.E; Martínez, A. P; Jerez, H. A. F. Investigación

Toxicológica. En Calabuig, G. J. A. Medicina Legal y
Toxicología. 5ta. Edición. Ediciones Científicas y Técnicas.
España. 1998. p. 698-701.

79
Ciclo 2
Determinación de la presencia de alcohol en
sangre por el método de Newman (destilación
al vacío) modificado.
Fundamento:
Determinar la cantidad de alcohol, mediante la oxidación
con el dicromato de potasio, el cual deberá estar en exceso
para que reaccione con el yoduro de potasio, y así liberar
el yodo el cual se titulará con tiosulfato de sodio 0,025 N
según la siguiente reacción:
Materiales:
1 Balón Erlemeyer (Recipiente A) de 50 mL.
1 Balón.
Tubos capilares.
1 Midget impinger.
Tubos de destilación.
(Recipiente B).
1 Fiola Yódometrica de 250 mL.
1 Bureta de 100 mL.
1 Mechero.
Reactivos:
Sulfato de Sodio Anhidro.
Mezcla sulfocrómica:
Está formada por 2,5 mL de solución de dicromato
de potasio 0.1 N medido exactamente y 2,5 mL de
ácido sulfúrico concentrado. Para preparar esta
solución debe introducirse previamente el recipiente
(B) en un baño de hielo. Se agrega el dicromato de
Universidad Central de Venezuela potasio y cuando este esté frío, se añade lentamente
Facultad de Farmacia el ácido sulfúrico.
80
Ciclo 2
Solución Yoduro de potasio al 20%
Solución de Tíosulfato de Sodio 0,025 N
(previamente preparada)
Solución saturada de almidón
Muestra de sangre:
Procedimiento:
1. A un balón Erlenmeyer (A) de 50 mL se conecta un
tubo capilar que permite la entrada de aire, y un tubo
de destilación que sirve para conducir los vapores de
alcohol al seno de la mezcla sulfocrómica que se
encuentra en el recipiente (B).
2. Coloque 5 mL de mezcla sulfocrómica en el

recipiente (B) el cual está conectado al aparato de
destilación descrito en el punto 1, antes de añadir la
muestra de sangre en el recipiente (A).
3. Coloque el balón Erlenmeyer (A) en un baño de

hielo e introduzca 2 g de sulfato de sodio anhidro y
añada de 0,5 a 1 mL de sangre de una rata
previamente intoxicada con alcohol (etanol 95º), tal
como se indica en el procedimiento para la toma
muestra de sangre de la rata (página de la guía). El
sulfato de sodio se usa para deshidratar la sangre.
Es necesario tomar en cuenta que la sangre cuando

se pone en contacto con el sulfato de sodio anhidro
da origen a una reacción exotérmica que podría
ocasionar pérdida de alcohol, pero esto no debe
suceder porque el sulfato de sodio debe estar frío en
el momento en que se añade la sangre.
4. Abra la llave del vacío lentamente hasta lograr 5

Facultad de Farmacia burbujas/seg.
81
Ciclo 2
5. Seguidamente, el recipiente (A) se coloca, en un
baño de agua hirviendo. Destile el alcohol
contenido en la muestra por 15 min., después de lo
cual transvase la mezcla sulfocrómica a una fiola
yodométrica de 250 mL.
6. Lave con agua destilada las paredes del recipiente
(B), hasta completar 95 mL. Añada 5 mL de solución
de yoduro de potasio al 20% a la fiola yodométrica y
tápela. Coloque la fiola en la oscuridad durante 5 a
10 minutos. Luego, titule el yodo liberado con
solución de tiosulfato de sodio 0,025 N. Coloque 8
gotas de solución de almidón como indicador (a la
mitad de la titulación).
7. Titule hasta el punto final práctico, el cual
corresponde a un color ligeramente azul violáceo.
8. Efectúe los cálculos de acuerdo al volumen tiosulfato
de sodio 0,025 N (mL) usado.
NOTA: Haga un blanco de reactivos: Coloque en la fiola
yodométrica 95 mL de agua destilada y 5 mL de la solución
de yoduro de potasio al 20%. Continúe con el punto 6.
Cálculos:
(n - n') x 0,2875 x 100
= mg de alcohol % mL
Volumen de muestra mL.
n: mL de solución de tiosulfato de sodio 0,025 N usados en

el blanco.
n': mLde solución de tiosulfato de sodio 0,025 N usados en
la titulación de la muestra.
Si prefiere hacer los cálculos por miliequivalentes, hay que
Universidad Central de Venezuela tomar en cuenta que el miliequivalente del etanol es =
Facultad de Farmacia PM/4.
82
Ciclo 2
Ecuación 1:
2 K2 Cr2O7 + 8 H2SO4 + 3 CH3CH2OH 2 Cr2(SO4)3 + 2 K2SO4 + 11H2O + 3CH3COOH
K2 Cr2O7 + 7 H2SO4 + 6 KI 4 K2SO4 + 7 H2O + Cr2(SO4)3 + 3 I2
I2 + 2 NaS2O3 2 NaI + Na2S4O6
Cálculos del Peso Equivalente del CH3 CH2 OH
2 K2 Cr2O7 Oxidan 3 CH3CH2OH
1K2 Cr2O7 Desprende 6I

Desprenderán
2 K2Cr2O7 12 I
Es decir:
3 CH3CH2OH Se corresponderán 12 I
1 CH3CH2OH Se corresponderán 4 I
Se corresponderán1 I
1/4CH3CH2OH
En cosecuencia el PE= PM/4

83
2
Marcha Analítica
Ciclo
Jueves y Viernes Objetivo:

Al finalizar la práctica el estudiante estará en capacidad de
aplicar técnicas analíticas para determinar, en forma
cualitativa, sustancias tóxicas en muestras de orina y de
sangre.
Investigación de tóxicos por descarte

en muestras de orina humana:
En las muestras de orina se puede determinar un número
de sustancias, compuestos intactos, pero
fundamentalmente metabolitos. Los procedimientos son
variados, por ejemplo: Los tóxicos orgánicos se pueden
determinar mediante extracción con el solvente orgánico
adecuado previa acidificación o alcalinización,
dependiendo de la naturaleza de la sustancia a investigar.
Los tóxicos metálicos pueden ser investigados por
mineralización de la muestra.
Procedimiento:
Usted recibirá una muestra de orina en la que determinará
paraquat, salicilados, fenotiazinas y acetona. Observe la
muestra cuidadosamente y registre lo siguiente en su
cuaderno de laboratorio:
1. Condiciones en que recibe la muestra
(Características del recipiente).
2. Características organolépticas (color, olor) de la

muestra.
3. Volumen y pH de la muestra de orina.

85
2
Marcha Analítica
Ciclo
Jueves y Viernes Análisis del Blanco y el Patrón:

Prepare un blanco de reactivos (control negativo), y un
patrón (control positivo) para cada uno de los tóxicos a
investigar: acetona, fenotiazina, paraquat, salicilados y
analícelos de la misma manera que la muestra.
-Identifique claramente cada uno de los tubos como

blanco (B), muestra (Mx) y patrón (P).
BLANCO: Mida un volumen de agua igual al volumen

indicado para la muestra.
PATRÓN: Mida 0,1 mL de la solución patrón para cada

uno de los tóxicos a determinar y llévelo con agua
destilada al mismo volumen indicado para la muestra.
Reacciones de Identificación
de los Tóxicos
Investigación de Paraquat:
Tome 1 mL de orina y añádale 1 a 2 perlas de hidróxido de

sodio (NaOH). Observe, sin agitar, que alrededor de la
perla se desarrolla un color azul. Luego, agite hasta
homogeneizar el color. La aparición del color azul se
considera como una reacción positiva.
Investigación de Salicilados:
Tome 1 mL de orina y añádale 0,5 mL de solución de

cloruro férrico al 1%. En caso de una reacción positiva
Facultad de Farmacia aparecerá un color púrpura violáceo.
86
2
Marcha Analítica
Ciclo
Jueves y Viernes Investigación de Fenotiazinas:
A 1 mL de orina, añada 1 mL de reactivo FPN. La

aparición de una serie de colores que van desde el rosado,
rojo anaranjado, violeta a azul indican la presencia de
fenotiazinas.
Reactivo FPN:
Mezcle 5 mL de solución de cloruro férrico al 5 % p/v con

45 mL de solución de ácido perclórico al 20% p/p y 50 mL
de ácido nítrico concentrado.
Investigación de Acetona:
Sature 1 mL de orina con algunos cristales de sulfato de

amonio y añádale 3 gotas de solución concentrada de
amoníaco y algunas gotas de solución de nitroprusiato de
sodio al 5 % recientemente preparada. Si está presente la
acetona, se desarrollará una coloración púrpura.
Resultados:
Al finalizar la práctica, reporte por escrito los resultados de

la investigación de tóxicos en orina y sangre.
Elabore, el informe correspondiente, el cual constará de:

la ficha del o los tóxicos encontrados en la muestra.
Este informe debe ser entregado dentro de una

semana después de la realización de la práctica.
UniversidadCentral
Universidad Central
dede
Venezuela
Venezuela
Facultad
Facultad de
deFarmacia
Farmacia
Cátedra
Cátedra de
deToxicología
Toxicología
Forense
87
2
Marcha Analítica
Ciclo
Jueves y Viernes Investigación de tóxicos en la sangre de la rata.
1. Tome de una rata e identifíquela.
2. Administre por la vía peritoneal 1mL de una solución

problema que le será entregada por el profesor.
3. Coloque la rata en una jaula y obsérvela durante

media hora, vigile su comportamiento. Anote en la
planilla que está en la página siguiente, cualquier
signo que observe en cuanto a la conducta del
animal y el tiempo cuando éste se produce después
de la inyección.
4. Transcurridos 30 minutos, proceda como se indica

en la siguiente sección para la toma de la muestra de
sangre.

88
2
Marcha Analítica
Ciclo
Signos y tiempo de aparición de los mismos después de la

administración del tóxico
Signos Tiempo de Aparición

después de la
administración del
Tóxico
Piloerección
Efectos respiratorios
Ptosis parpebral
Excitación
Ataxia
Convulsiones
Relajación de las Esfínteres
Micción
Defecación
Lagrimeo
Aumento de la Secreción Nasal
Temblores
Otros Signos
Nota: Ver anexo pág. 29

89
Procedimiento para la toma
Ciclo 2 de la muestra de sangre
1. Coloque la rata en un recipiente de vidrio de boca

ancha con tapa, que contiene un anestésico (éter o
cloroformo) como se indica en la figura 1.
Figura 1
2. Transcurrido el tiempo necesario para lograr una

anestesia profunda (disminución de los signos vitales
como la frecuencia cardíaca, de los reflejos) coloque
inmediatamente la rata en la tabla de operaciones y
fije las extremidades a la mesa con cinta adhesiva.
Como se muestra en la figura 2.

Facultad de Farmacia Figura 2
90
3. Limpie la zona ventral del animal con un antiséptico

que no interfiera en la investigación.
4. Con una tijera quirúrgica, rápidamente haga una

incisión longitudinal desde la porción abdominal
baja hasta la región torácica (figura 3).
Figura 3
5. Separe las vísceras hacia un lado.
6. Localice la arteria aorta abdominal situada en la

parte anterior de la columna vertebral.
7. Introduzca la aguja hipodérmica (Nº 21) de una

jeringa de 10 cc, la cual debe contener 1 mL de NaF
al 7% como anticoagulante, y extraiga el mayor
volumen de sangre posible.
8. Coloque la sangre en un tubo de ensayo,

previamente identificado, que contenga 1 mL de NaF
al 7%.
9. Mantenga la muestra de sangre bajo refrigeración

Universidad Central de Venezuela (0-4ºC) hasta el análisis.
91
1. Tome un embudo de separación e identifíquelo.

Añada 20 mL de solución de ácido clorhídrico 0,01
N. Agregue toda la muestra de sangre y agite
suavemente.
2. Agregue 10 mL de tetracloruro de carbono puro,

luego agite suavemente. Si se formó una emulsión
espere que se rompa y filtre el tetracloruro de
carbono a través 2 g de sulfato de sodio anhídro y
0,1 de carbón activado y consérvelo para la
investigación de salicilados. Repita la extracción con
el solvente orgánico una vez más.
3. Fracción acuosa: Pase la fracción acuosa a un

beaker de capacidad adecuada y añada un volumen
de solución de ácido tricloroacético al 20% igual al
de la muestra de sangre. Caliente en baño de María
por 5 minutos.
4. Enfríe y filtre a través papel de filtro Whatman No 1,

recogiendo el filtrado en un recipiente adecuado. En
tubos de ensayos de aproximadamente 15 mL de
capacidad, no olvide taparlo o en un envase de vidrio
con tapa.
5. Tome alícuotas de (Vol ¿ ) del filtrado y determine la

presencia de los tóxicos siguientes: acetona, alcohol
metílico, paranitrofenol.

92
2
de los Tóxicos
Ciclo
Fase orgánica: Investigación de Salicilados:

Tome 5 mL de la fase orgánica y colóquelos en una
cápsula de porcelana. Evapore a sequedad en baño de
María. Añáda 0,5 mL de solución de cloruro férrico al 1%.
Un color púrpura permanente, indica la presencia de
salicilados.
Investigación de Acetona:
Tome 1 mL de la solución acuosa ácida filtrada colóquelo

en un tubo de ensayo. Agregue cristales de sulfato de
amonio hasta la saturación.
Añada 3 gotas de solución concentrada de amoníaco y 3

gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 5 %
recientemente preparada.
Una coloración púrpura indica la presencia de acetona.
Investigación de alcohol Metílico:
Tome 1 mL de la solución acuosa ácida filtrada colóquela

en un tubo de ensayo. Añáda 1 gota de reactivo de
permanganato de potasio; previamente preparada.
Agite y deje oxidar por 2 minutos.
Decolore el exceso de permanganato de potasio con

algunos cristales de bisulfito de sodio y añada una pizca de
ácido cromotrópico.
Agregue 2 mL de ácido sulfúrico concentrado, mezcle

suavemente y observe. En caso de una reacción positiva se
desarrollará una coloración violácea que se hace máxima
Facultad de Farmacia a los 20 minutos.
93
2
de los Tóxicos
Ciclo
Fase orgánica: Investigación de Salicilados:

María. Añáda 0,5 mL de solución de cloruro férrico al 1%.
salicilados.
Investigación de Paranitrofenol
Tome 1 mL de la solución acuosa ácida filtrada y colóquelo

en un recipiente adecuado. Alcalinice con NaOH al 20% y
obtenga un pH superior a 8. La aparición de una
coloración amarilla indica la presencia paranitrofenol
libre, lo que sugiere la presencia de organofosforados tipo
paratión.
Investigación de Salicilados

María. Añada 0,5 mL de solución de cloruro férrico al 1%.
salicilados.

94
2
Bibliografía
Ciclo
Larez, A; Piña, D; Montes, A; Liuzzi, M. Guía de Trabajos

Prácticos de Toxicología Forense. Caracas. Universidad
Central de Venezuela. 1985.

95
Trabajos prácticos

Ciclo 3
3
Valoración del Monóxido
de Carbono en Sangre por
Ciclo el Método de Microdifusión
Tercer Ciclo Objetivo:
Jueves Al finalizar la práctica el estudiante estará en capacidad de

determinar los niveles de monóxido de carbono en sangre
mediante el método de microdifusión de Conway.
Fundamento:
El monóxido de carbono liberado por acidificación de la
sangre reacciona con una solución de cloruro de paladio
que se reduce formándose ácido clorhídrico y paladio
metálico, según la reacción:
PdCl 2 + CO + H2 O CO2 + 2HCl + Pd
El ácido clorhídrico formado es titulado y por éste se

deduce la oxicarbonemia
Materiales:
Tubos de ensayo de vidrio de tapón esmerilado.
Celdas de microdifusión.
Pipetas de 1 mL de 0,01 decimales.
Pipetas de 2 y 5 mL.
Vidrio de reloj mediano.

97
3
Reactivos:
Agua destilada recién hervida.
Acido Sulfúrico 5N
Solución de Cloruro de Paladio 0,01 N.
0,88 g de Cloruro de Paladio.
5 g de Cloruro de Magnesio.
100 mL de Ácido Clorhídrico 0,01 N.
Agua destilada C.S.P. 100 mL.
Disuelva en caliente el Cloruro de Paladio en

solución ácida, añada luego el Cloruro de Magnesio
y complete con agua destilada.
Solución acuosa de NaOH al 0,01 N.
Solución acuosa de bromofenol al 0,25 %.

98
3
Técnicas:
1. En un tubo de ensayo de vidrio y con tapón esmerilado
de 10 mL. introduzca 6 mL de agua destilada fría recién
hervida, luego 2 mL de sangre no coagulada. Agite por
inmersión varias veces, hasta hemólisis total.
2. En un celda de microdifusión, coloque en el

compartimiento interior 1 mL de solución de cloruro de
Paladio 0,01 N.
3. Aplique silicona o vaselina en el borde superior del

compartimiento externo de la celda de microdifusión de
Conway.
4. En el compartimiento exterior, coloque 2 mL de la

dilución sanguínea y en el mismo compartimiento en
posición diametralmente opuesta coloque 0,5 mL de
solución de ácido sulfúrico 5N.
5. Cubra la celda de microdifusión rápidamente, mezcle

moviendo suavemente la celda en forma rotatoria de
manera de poner en contacto la solución ácida con la
dilución sanguínea, pero al mismo tiempo evitando
mezclar los líquidos de los dos compartimientos de la
celda.
6. Haga un blanco en las mismas condiciones,

reemplazando los 2 mL de la dilución sanguínea por 2
mL de agua destilada fría, previamente hervida.
7. Coloque en la estufa a 90º C durante 5 minutos.
8. Tome 0,8 mL del líquido contenido en el

compartimiento interior de la celda y viértalo en un
vidrio de reloj, añádale 0,1 mL de solución acuosa de
Azul de Bromofenol al 0,25%.
99
3
Técnicas:
9. Luego, utilizando una pipeta de 1mL (0,01 decimal),
añada solución acuosa de NaOH 0,01 N gota a gota,
hasta obtener un viraje de coloración que va del
amarillo al azul violáceo.
10. Calcule la oxicarbonemia por 100 mL de acuerdo a la

fórmula siguiente:
mg CO / 100 mL = (N- N') X 28
N: # de mL de NaOH 0,01N utilizado para el ensayo
N': # de mL de NaOH 0,01N gastado para el blanco.
NOTA: Cuando la oxicarbonemia es elevada deberá

utilizarse una dilución sanguínea 1:8 ó 1:16
Entregue un informe con los cálculos y los resultados

correspondientes.

100
3
Determinación de Plomo
en Muestras Atmosféricas
Ciclo
Viernes Objetivo:
determinar tanto cualitativa como cuantitativamente el
plomo en muestras atmosféricas por el método de
extracción con ditizona.
Fundamento del método:

La muestra sometida a sequedad es diluida con ácido
nítrico al 5% y el plomo es extraído de la solución
previamente alcalinizada con solución clorofórmica de
ditizona. El color del ditizonato de plomo es leído en un
espectrofotómetro a 510 nm La absorbancia del
ditizonato de plomo sigue la Ley de Beer.
Materiales:
Beaker de 250mL
Cilindros graduados de 10, 50 y 100 mL
Pipetas de 1; 5 y 10 mL
Embudos de separación de 250 mL
Plancha de calentamiento regulable
Espectrofotómetro
Nota: Todos los recipientes y demás materiales deben ser

de vidrio libre de plomo, los cuales se lavarán con mezcla
sulfocrómica, agua, solución nítrica, agua destilada y
agua bidestilada antes de ser usados.
101
3
Determinación de Plomo
en Muestras Atmosféricas
Ciclo
Viernes Reactivos:
Ácido nítrico al 5%.
Citrato de amonio al 40%.
Amoníaco concentrado.
Solución indicador Rojo Fenol al 1%
Cianuro de potasio al 10%
Clorhidrato de hidroxilamina al 20%
Ácido nítrico al 1:99
Solución clorofórmica de ditizona al 16 mg/L
Solución clorofórmica de ditizona al 8 mg/L
Solución buffer pH 3,4 (se usa para la determinación
cuantitativa, si se va a separar bismuto de la
muestra). Preparación: Diluya 500mL de ácido nítrico
bidestilado con 500 mL de agua bidestilada en un
matraz de 1L, adicione 5 gotas de bromo fenol, lleve
a pH 3,4 con amoníaco bidestilado, adicione buffer
de ftalato ácido de potasio ácido clorhídrico
(coloque 6,105 g de ftalato de potasio complete a
1 L y añada 25 mL de ácido clorhidrico 0.2N,
agregue cantidad suficiente de agua bidestilada a
20ºC para obtener 250mL).
Mezcla de amonio cianurada (para la determinación
cuantitativa). Preparación: Mezcle 200 mL de
solución de cianuro de potasio al 10% con 150mL de
hidróxido de amonio bidestilado y lleve a 1000mL
con agua bidestilada. (ESTA SOLUCIÓN DEBE SER
PREPARADA BAJO CAMPANA).
NOTA: Todos los reactivos deben destilados y/o
purificados con el fin de liberarlos del plomo que pudiere
estar presente. El agua que se utilice en la preparación
deben ser bidestilada.
102
Ciclo 3
Técnicas:
Determinación Cualitativa:
1. Una vez recolectada la muestra de aire en un
impinger que contiene 25 mL de ácido nítrico 1:99,
trasvásela a un beaker de 100 mL.
2. Coloque el beaker en una plancha de temperatura

regulable, a una temperatura no mayor de 300˚C y
evapore hasta sequedad. Deje enfriar.
3. Agregue 25 mL de solución de ácido nítrico al 5% p/v

y caliente hasta ebullición. Deje enfriar.
4. Transfiera cuantitativamente la solución nítrica a un

embudo de separación, añada 10 mL de citrato de
amonio y 1 mL de clorhidrato de hidroxilamina.
5. Añada 2 gotas de solución indicadora de rojo fenol y

titule con hidróxido de amonio hasta un color rojo.
Verifique con un papel indicador para estar seguro
que la solución tiene un pH superior a 9.
6. Añada 10 mL de cianuro de potasio y agite, luego

agregue 5 mL de solución clorofórmica de ditizona al
16 mg/L. Se evidenciará una separación de fases, la
aparición de una coloración que va del azul al
púrpura en la fase clorofórmica indicará la presencia
de plomo.
Determinación Cuantitativa:
1. Recolectada la muestra de aire trasvásela a un
beaker de 100 mL.
2. Coloque el beaker en una plancha de temperatura
regulable, a una temperatura no mayor de 300˚C, y
Facultad de Farmacia evapore hasta sequedad. Deje enfriar.
103
Ciclo 3
3. Agregue 25 mL de solución de ácido nítrico al 5%
p/v.
4. Transfiera cuantitativamente la solución nítrica a un

embudo de separación, añada 10 mL de citrato de
amonio y 1 mL de clorhidrato de hidroxilamina.
5. Añada 2 gotas de solución indicadora de Rojo Fenol

y titule con hidróxido de amonio hasta un color rojo.
Verifique con un papel indicador para estar seguro
que la solución tiene un pH superior a 9.
6. Añada 10 mL de cianuro de potasio y agite, luego

agregue 5 mL de solución clorofórmica de ditizona al
16 mg/L. Se evidenciará una separación de fases, la
aparición de una coloración que va del azul al
púrpura en la fase clorofórmica indicará la presencia
de plomo.
7. En un segundo embudo de separación, coloque 30

mL de una solución de ácido nítrico 1:99.
8. Transfiera la fase clorofórmica de ditizona de 16
mg/L (numeral 6) al segundo embudo de separación.
Lave nuevamente la fase acuosa (numeral 6) con 5

9. mL de solución clorofórmica de di tizona de 16 mg/L.
Incorpore este lavado de solución clorofórmica al
segundo embudo de separación (numeral 8).
Repita el lavado con la ditizona de 16 mg/L en la fase

10. acuosa (numeral 6) hasta que la solución
clorofórmica tenga color verde. Esta última
extracción también se debe transferir al segundo
104
Ciclo 3
embudo (numeral 8). La aparición del color verde
indica que todo el plomo ha sido extraído.
11. Agite fuertemente por 2 minutos el segundo embudo.

La solución clorofórmica de ditizona de 16 mg/L
debe tener color verde.
12. Deseche la fase clorofórmica de ditizona de 16 mg/L

en el recipiente indicado por el profesor.
13. Añada 6 mL de la mezcla amonio-cianuro al segundo

embudo y agite por unos dos (2 minutos).
14. Añada 15 mL de la solución clorofórmica de ditizona

de 8 mg/L y agite por dos minutos.
15. Separe la capa clorofórmica que contiene el

ditizonato de plomo en un tubo limpio y seco.
16. Lea la absorbancia a 510nm. Anote la lectura.
17. Realice los cálculos necesarios para determinar la

concentración de plomo en la muestra empleando
una curva patrón o con una solución referencia de
plomo de concentración exactamente conocida.
18. Después de leer la absorbancia, descarte la solución

clorofórmica de ditizona de 8 mg/L en el recipiente
indicado por el profesor.

105
Ciclo 3
Preparación de la Curva patrón:
Colocar en un embudo de separación volúmenes
crecientes de una solución de plomo de 2 µg/mL (0,1 a 2
µg de plomo). Añadir agua bidestilada en csp para 25mL.
Continúe con el numeral 4 hasta el numeral 16. Haga
paralelamente un blanco de reactivos. Construya la curva
estándar.
Preparación de la solución estándar de plomo: Prepare

una solución madre de plomo disolviendo en un matraz
volumétrico aforado, 1,5984 g de la sal y desecada a
105ºC en 1000mL de ácido nítrico 1:99. Esta solución
contiene 1mg Pb/mL. A partir de esta solución prepare
las soluciones de trabajo.
Determinación de Arsénico:
Objetivo:
determinar arsénico por el método de dietiltiocarbamato
de plata.
Fundamento del método:

Previa oxidación de la materia orgánica, el arsénico
obtenido es reducido a arsina y la arsina es atrapada en la
solución de dietiltiocarbamato de plata, la cual es leída
espectrofotométricamente a 525nm.

106
Ciclo 3
Materiales:
Pipetas de 2,5 y 10 mL.
Beaker de 250 mL.
Lana de vidrio.
Cilindros de 10 mL.
Generador de arsina y tubo de absorción.
Espectrofotómetro.
Reactivos:
Ácido clorhídrico.
Cloroformo.
Zinc.
Hidróxido de sodio.
Solución de yoduro de potasio al 15%: Disolver 15 g

de yoduro de potasio en 100 Mª. de agua destilada.
Almacenar en un envase color ámbar.
Solución de Dietilditiocarbamato de plata: Disolver

1 g de dietilditiocarbamato de plata en 200 Mª de
piridina. Almacenar en un envase color ámbar.
TRABAJAR BAJO CAMPANA
Solución de cloruro estannoso al 40%: Disolver 40 g

de cloruro estannoso en 100 mL. de ácido clorhídrico
concentrado.
107
Ciclo 3
Reactivos:
Solución de acetato de plomo: Disolver 10 g de
acetato de plomo en 100 mL. de agua destilada.
Solución de patrón de Arsénico: Disolver 1,320 g de

trióxido de arsénico en 10 mL de agua destilada que
contiene 4 g de hidróxido de sodio y diluir a 1 litro con
agua destilada.
Técnica:
Tratamiento de la muestra:
1. Transfiera con una pipeta 35 mL de la muestra de
orina a la botella del generador de arsina, la cual
debe estar limpia y seca.
2. A ñ a d a s u c e s i v a m e n t e y m e z c l a n d o
cuidadosamente luego de cada adición, 5 mL de
ácido clorhídrico concentrado, 2 mL de solución
de ioduro de potasio al 15% y 3 - 5 gotas de
cloruro estannoso.
3. Dejar en reposo por 15 minutos para que el

arsénico se reduzca a su estado trivalente.
Preparación del Depurador y del Absorbente:
4. Coloque una torunda de lana de vidrio

impregnada con la solución de acetato de plomo,
sin que quede demasiado húmeda ya que el agua
penetrará en la solución del reactivo.
5. Tr a n s f i e r a c o n u n a p i p e t a 4 m L d e
dietilditiocarbamato de plata en el tubo
Universidad Central de Venezuela absorbente.
108
Ciclo 3
Generador de arsina y medición:
6. Añada 3 g de zinc al generador y conecte
inmediatamente el depurador absorbedor ya
montado. Debe asegurarse que todas las
conexiones están convenientemente ajustadas.
7. Espere 30 minutos para la evolución completa de

la arsina.
8. Caliente el generador ligeramente para

asegurarse que toda la arsina ha sido liberada.
9. Al finalizar transfiera la solución a 535 nm, usando

el blanco como referencia.
10. Trate porciones de solución trabajo que

contengan 0,1,2,5,10 g de arsénico de igual
forma que la muestra.
11. Elabore un gráfico de absorbancia contra la

concentración de arsénico en el patrón.
Expresión de los resultados:
El contenido de arsénico en la muestra se calcula

mediante la siguiente expresión:
Mm g As / I = Mm g
As
mL de muestra
Donde: Mm g As = microgramos de arsénico leídos en

la curva patrón.
109

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Laboratorio de Toxicología

Universidad Central de Venezuela

Bienvenidos al Laboratorio de Toxicología.

En este laboratorio se acercarán al análisis toxicológico

La aproximación al paciente intoxicado también está

La Toxicología, una ciencia al servicio de la humanidad.

Universidad Central de Venezuela

Guía de Trabajos Prácticos

Prof. Maddalena Liuzzi

Prof. Diego Piña

Régimen Anual, 2002

Prof. Marilú Escorche

Prof. Gladys Venegas

Prof. Gladys R. Gali

Prof. David Toring

Prof. Juan Rodrigues

Prof. Ligia Peña

Prof. María Eugenia Pineda

Prof. Daniela Pasqualatto

Editora: Prof. Margarita Salazar-Bookaman

Universidad Central de Venezuela

Ciclo 1 Toxicología asistencial, ambiental y determinación de

Ciclo 2 Manejo de animales de experimentación, toma de

Ciclo 3 Valoración del Monóxido de Carbono en sangre por

Casos Clínicos 1al 30

Universidad Central de Venezuela

2. Marco teórico, conceptual o referencial.

5. Reactivos y Equipos utilizados.

6. Procedimiento y desarrollo de la técnica.

8. Descripción literal de los datos cuantitativos,

9. Referencias bibliográficas, según normas de

10. Anexos: folletos de instrumentos, bases de datos,

Universidad Central de Venezuela

1. Llegar puntualmente al laboratorio.

2. Usar bata larga y, en caso necesario, utilizar guantes ya

3. Mantener rigurosamente limpios los útiles a emplear en

4. Seguir buenas prácticas de laboratorio a fin de obtener

5. Respetar las condiciones de un método o de una

6. Mantener la paciencia y la prudencia adecuadas. Estas

7. Utilizar una pipeta diferente para cada reactivo.

8. Lavar y secar bien los útiles después de usarlos.

9. Los análisis toxicológicos, para ser veraces y

10. Los ensayos biológicos deben realizarse de acuerdo a

11. Al terminar la práctica debe dejar todo el material

12. Concentrarse en el trabajo que realizó para evitar

Universidad Central de Venezuela

Con la información obtenida durante el desarrollo de las

1. Ofrecer información y/o asesoramiento toxicológico a

2. Efectuar el muestreo biológico y ambiental y realizar el

3. Recomendar el tratamiento para casos de intoxicación,

4. Determinar la presencia de drogas de abuso en

Universidad Central de Venezuela

Una vez concluido el ciclo de prácticas, el estudiante

1. Consultar y manejar bibliografía especializada para la

2. Aplicar la información obtenida de la bibliografía

3. Recolectar y analizar muestras ambientales según el

4. Determinar la presencia de drogas de abuso mediante

Universidad Central de Venezuela

Martes o Jueves 1.2 Investigación bibliográfica de la toxicidad de

Consulta e interpretación de textos especiales.

Elaboración de fichas toxicológicas.

Ficha control de asesoramiento y referencia

Martes o Jueves 2. Muestreo para el análisis toxicológico: