Guía de prácticas de análisis toxicológico

3B-2
GUA DE PRCTICAS
Unidad acadmica: EAP DE FARMACIA Y BIOQUMICA
TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL
Autor: Mg. Jess Victor Lizano Gutierrez
2017
F-CV3-3B-2 Rev. Junio 2007

INTRODUCCIN
La Toxicologa es una nueva ciencia que tiene diferentes reas, ya no es solamente la Toxicologa
Forense, actualmente han cobrado importancia las reas de la Toxicologa ambiental, ocupacional,
industrial, clnica, medicamentosa, cosmtica, alimentaria, de urgencia, la ecotoxicologa, la
espacial, etc., por ello se da a conocer la presente Gua de Practicas del curso de Toxicologa y
Qumica Legal, como un instrumento que facilite la enseanza experimental. Con ella queremos
trasmitir a nuestros alumnos nuestra experiencia sobre los anlisis toxicolgicos bsicos en lo que se
refiere a la extraccin, deteccin, identificacin y cuantificacin de las principales sustancias
qumicas que causan intoxicaciones, ya sea en muestras biolgicas y no biolgicas, teniendo en
cuenta sus propiedades fisico quimicas, las cuales, pueden producir intoxicacin aguda o cronica;
individual, colectiva o contaminacin del medio ambiente que ocasione riesgo a la poblacin.
Anlisis toxicolgico
Se define como el conjunto de medios tcnicos y humanos donde se identifican, cuantifican y

controlan los efectos de los txicos, teniendo en cuenta las propiedades qumicas, fsicas y
biolgicas de la sustancia estudiada.
Importancia del anlisis toxicolgico
El anlisis toxicolgico es de gran importancia en clnica no slo como ayuda al mdico en el

diagnstico y pronstico de una intoxicacin sino en la evolucin del tratamiento, ya que con
anlisis de control subsiguientes dar idea al mdico si el txico permanece en el organismo o ha
desaparecido. En medicina legal igualmente es de suma importancia para la comprobacin de un
envenenamiento el identificar y cuantificar el txico en vsceras u otras muestras biolgicas, ya que
una intoxicacin por accidental que parezca puede tener implicaciones mdico-legales u obrero-
patronales cuyo resultado depende de un anlisis realizado o de una autopsia.
Los laboratorios de toxicologa se han especializado al igual que las reas que cubre la Toxicologa,
por lo tanto existen varias clases como son:
El laboratorio de toxicologa ambiental, desarrolla sus anlisis en la identificacin y

cuantificacin de sustancias txicas presentes en un ecosistema que puedan directa o
indirectamente ocasionar riesgo a las personas, involucra anlisis de aguas, alimentos, suelos y aire.
El laboratorio de toxicologa industrial u ocupacional, que investiga las sustancias

potencialmente txicas involucradas en los procesos de produccin de empresas formales o
informales, que de forma directa o indirecta puedan producir lesiones al individuo o afectar a la
comunidad. En salud ocupacional es igualmente importante, ya que en esta poca de gran
desarrollo industrial cabe destacar la gran responsabilidad del laboratorio para detectar y

cuantificar numerosos txicos de trabajadores expuestos por medio de examen de orina o sangre en
su fase pre clnica, y en general en todo lo referente a las enfermedades profesionales.
Laboratorio de toxicologa forense, que investiga las sustancias txicas que causan la muerte, o
investiga los hechos legales donde se involucran sustancias Txicas.
El laboratorio de toxicologa clnica, realiza los anlisis bsicos para l diagnostico de sustancias
qumicas que causan intoxicaciones agudas las cuales deben ser procesadas en el laboratorio clnico
de Toxicologa a travs de un anlisis que permitan identificarlas en un tiempo corto para poder
hacer un pronto diagnostico que permita dar un rpido tratamiento antidotico y salvar la vida del
paciente intoxicado.
Las intoxicaciones y procedimientos ms comunes en nuestro medio son:
- Deteccin de sustancias utilizadas con fines delictivos (Escopolamina, Benzodiacepinas,

Fenotiacinas, GHB).
- Deteccin de Plaguicidas rgano Fosforados, rgano Carba micos y rgano Clorados.
- Anlisis de Colinesterasa en casos de intoxicacin por plaguicidas Organofosforados y
carbamatos como prueba indirecta.
- Drogas de abuso (Cocana Cannabinoides, Opiceos, Anfetaminas).
- Etanol, Metanol, Formaldehdo.
- Anlisis de medicamentos como Barbitricos, Fenobarbital, Carbamazepina, Fenitoina, Acido
Valproico.
- Deteccin de Monxido de Carbono, (Carboxihemoglobima).
- Anlisis de AINES y Antidepresivos Triciclicos.
- Anlisis de otras sustancias como Cianuro; Metales como Plomo, Mercurio, Talio, Cromo,
Arsnico.
- Identificacin de txicos o del Animal Venenoso.
- Sustancias Corrosivas: cidos y lcalis (Blanqueadores y Detergentes).
Los Anlisis Qumico Toxicolgico trabajan en dos campos de Accin:
LOS URGENTES: Cuyo anlisis no es superior a un tiempo de cuatro horas y sus reportes son
inmediatos, generalmente van dirigidos a mdicos o instituciones de salud que estn manejando un
paciente intoxicado agudo.
LOS DE MONITOREO O DIAGNSTICO: Cuyo tiempo puede llevar de 1 a 5 das generalmente son
anlisis de mayor complejidad y se realizan como apoyo de diagnstico diferencial, de control
teraputico o investigacin de campo, en estos casos no est de por medio la vida de una persona.

SISTEMATICA ANALITICA TOXICOLOGICA (SAT)
Una Sistemtica Analtica Toxicolgica (SAT) puede definirse como el conjunto de procedimientos
analticos, concisos, bien planeados, encaminados a poner de manifiesto la presencia o ausencia de
sustancias de relevancia toxicolgica, en una muestra determinada.
Comprende varias etapas:
1. Pre tratamiento de las muestras: homogeneizacin, desproteinizacin, hidrlisis de

conjugados, etc.
2. Extraccin - purificacin: extraccin lquido-lquido (LLE), en fase slida (SPE), en el espacio
en cabeza (HSE), micro extraccin en fase slida (SPME), etc.
3. Anlisis instrumental.
Es deseable que la sistemtica sea compatible con un elevado nmero de sustancias potencialmente
txicas, aunque lo usual en un laboratorio de nivel superior es que para abordar el anlisis de
sustancias de muy diversa naturaleza como medicamentos, drogas de abuso, metales, plaguicidas,
alcoholes, etc, se realicen ms de una SAT, pues existen muchas sustancias no detectables
mediante un nico procedimiento. Los txicos ms numerosos son compuestos orgnicos que pueden
poseer carcter cido, bsico o ambos a la vez o ser sustancias neutras. Los txicos ms voltiles
(Alcohol etlico, metlico, etilenglicol, hidrocarburos derivados del petrleo y monxido de
carbono), requieren unos procedimientos analticos especiales y distintos tambin de la SAT para los
txicos inorgnicos (metales y aniones). Los diversos procedimientos analticos se aplicaran segn
requerimiento del caso.
Por ello la presente Gua de Practicas proporcionara a los alumnos los conocimientos bsicos
terico. Practico para la identificacin y cuantificacin de los principales txicos que estn
ocasionando intoxicaciones agudas y que ponen en peligro la salud de las personas.
I. PRCTICA No. 1 y 2 ANALISIS TOXICOLOGICO. MANEJO DE LA MUESTRA

PROBLEMA.
TOMA, ENVIO Y RECEPCION
1.1 Marco terico

El Peritaje Toxicolgico de vsceras y tejidos es de gran inters criminalistico, requiere de un
adecuado procedimiento en la toma de la muestra, en su fijacin o preservacin, embalaje y
envo con la solicitud especfica de lo que se desea determinar en el examen a informar,
porque sus resultados servirn para una buena administracin de justicia.
1.2 Competencias
Explicarar al alumno los objetivos e implicancias del Anlisis Qumico Toxicolgico as como los
diferentes tipos de muestras problemas y su procesamiento.
Emplear el mtodo descriptivo de asesora permanente.
-Identificar el tipo de intoxicacin. Toma de las muestras para el anlisis toxicolgico

-Envar y recepcionar las muestras. Preparar los protocolos de envo y recepcin de las
muestras. Actitud del perito.
- Procesamiento de los diferentes tipos de muestra para el anlisis toxicolgico adquiriendo los
conocimientos para diferenciar los tipos de agentes txicos que pueden causar intoxicaciones.
Cumplir y hacer cumplir las medidas de bioseguridad.
1.3 Materiales y equipos
- Campana extractora.
- Frascos de vidrio de boca ancha.
- Equipo de diseccin.
- Cinta adhesiva.
- Muestras de alimentos, lquidos biolgicos y otros.
- Equipos de conservacin en fri porttiles.
1.4 Procedimiento
El Peritaje Toxicolgico de vsceras y tejidos de inters criminalistico, requiere de un adecuado

procedimiento en la toma de la muestra, en su fijacin o preservacin, embalaje y envo con la
solicitud especfica de lo que se desea determinar en el examen a informar, para ello se hace
necesario considerar lo siguiente:
a.- Toda muestra de pieza anatmica, vsceras, fragmentos de tejido, rganos, cogulos
sanguneos, etc. debe tener un tamao significativo y remitirse al Laboratorio.
b.- En el caso de Exmenes Anatomopatolgicos, todas las muestras como restos placentarios,
embrin, feto, rganos completos, etc. Deben remitirse fijados en formol al 1% que
resulta de mezclar una parte de formol puro vendido al 40% con nueve (09) partes de agua
corriente. El volumen del lquido fijador debe ser mayor que el de la muestra cubrindola
con exceso.
Si el rgano o vscera es de gran volumen puede cortrsele con cuchillo para facilitar el
proceso de fijacin.

c.- Cuando se solicita Examen Toxicolgico debe remitirse por separado muestra de vsceras,
estmago y contenido gstrico sin agregarle ninguna sustancia como preservador o fijador,
ya que estas sustancias tienen poder de interferencia en los anlisis toxicolgicos.
d.- El recipiente para cualquier muestra debe ser de vidrio o de plstico inerte de boca ancha y
con tapa esmerilada o de rosca cerrado y sellado con cinta adhesiva o esparadrapo, lacrado
y/o sellado. No utilizar recipientes metlicos.
Las muestras de sangre donde se determinara el Dosaje Etlico y Sustancias Estupefacientes
y/o drogas afines; se enviarn en frasco vial llenos con tapa a presin y rotulado con cinta
adhesiva.
e.- En el oficio de remisin debe consignarse, nombre, edad, sexo de la persona o del cadver;
naturaleza y tamao aproximado de la muestra y regin del cuerpo humano, de donde
procede la muestra. Sealar necesariamente en forma sumaria datos referenciales o
antecedentes del hecho.
Si se ha practicado necrpsia es indispensable el Protocolo de Necrpsia o en su defecto los
diagnsticos macroscpicos y conclusiones finales. Si el paciente hubiera estado en algn
Centro de Salud enviar la hoja clnica.
f.- Para el embalaje, el recipiente debe colocarse en una caja de madera o cartn grueso
rodeado de viruta, telas o papeles para evitar el movimiento y la consiguiente ruptura o
derrame de la muestra.
g.- Las muestras debern ser transportados por Agencia o por un Efectivo Policial o el perito
toxiclogo debidamente acreditado, por ningn motivo enviar con personal civil ya que se
pondr en duda la identidad de las muestras.
1. Condiciones para la toma de muestra
- Lquido biolgico (Anlisis de Emergencia).
- Alimentos.
- Vsceras.
2. Condiciones para el envo de la muestra
- Envase.
- Sellado.
- Etiquetado.
- Conservadores.
3. Condiciones de recepcin de la muestra

- Envase.
- Sello.
- Protocolo.
4. Tcnicas de cuarteo de la muestra
- Mdico-legal

* 50 % devolver.
* 50 % anlisis.
- 25 % Anlisis cuantitativo.
- 5 % Ensayos preliminares.
- 5 % Txicos Voltiles y gaseosos.
- 5 % Txicos. Orgnicos Fijos.
- 5 % Txicos Metlicos y no Metlicos.
- 5 % Dirimencia.
- Anlisis general
* 50 % Anlisis cuali-cuantitativo.
* 50 % Contramuestra.
MUESTRAS REQUERIDAS EN EL EXAMEN TOXICOLGICO
a.- VICTIMA CON VIDA:
Vmitos.
Sangre (de 15 a 50 mL).
Lavado estomacal (Todo lo posible).
Orina (de 200 a 300 mL, muestra en 24 horas).
Grasa corporal (biopsia).
Pelos (Todo lo posible).
A PARTIR DE OTRAS SUSTANCIAS:
Alimentos (Todo lo posible).

Races (Todo lo posible).
Tierras (Todo lo posible).
Gaseosas (Todo).
Vinos (Todo).
Jarabes (Todo).
b.- VICTIMA SIN VIDA:
Muestra Cantidad Mnima Venenos Que Se Estudian En La Muestra
Orina
Toda Valiosa en casi todos los tipos de txicos

Estomago y
Contenido Casos en que el toxico es conocido o ha sido ingerido
Todo
por va oral pocas horas antes de la Muerte.
Contenido
Casos en que el toxico ha sido tomado uno o dos das
Intestinal Alrededor de 150 G
antes de la muerte
Para venenos gaseosos.

Sangre
Determinacin de meta hemoglobina,
Alrededor de 30 mL
Carboxihemoglobina
Sulfonamidas, bromuros, sumersin.
Barbitricos, alcaloides, venenos voltiles y
Cerebro Alrededor de 500 G
gaseosos, alcoholismo agudo
Hgado Metales, barbitricos, fluoruros, oxalatos, fulfonal
Alrededor de 500 G
y otros.
Riones Uno entero Metales especialmente mercurio, sulfonamida.
Plomo, Arsnico, Radio: especialmente por
Huesos Alrededor de 200 G
intoxicacin crnica.
Pulmn Uno entero Txicos por inhalacin.
Cabellos
Tanto como sea Intoxicacin crnica por arsnico y drogas como la
Posible que producen dependencia
Casos de intoxicaciones agudos y rganos
Msculo Alrededor de 200 G
Internos en putrefaccin.
Liquido cfalo
raqudeo Todo lo posible Alcoholismo agudo.
1.5 Resultados
Los alumnos deben traer en la siguiente prctica una muestra correctamente embalada de
acuerdo a las caracteristicas de la muestra, del anlisis solicitado y de las normas legales para un
anlisis toxicolgico.
1.6 Cuestionario
1. Normas legales que rigen el anlisis toxicolgico.
2. Procedimiento en caso de la exhumacin de un cadver.
3. Responsabilidad legal del profesional Qumico-Farmacutico en el anlisis toxicolgico.
1.7 Fuentes de informacin
1- Loomis, T. Fundamentos de Toxicologia. Acribia. Espana. 1982

2- Gisbert, J. Medicina Legal y Toxicologa. 5ta. Edicin. Masson.
Espaa. 2001
3- Fabre R, Truhaut R Tatado de Toxicologa. Paraninfo 1977 Madrid Espaa.
4- Cdigo de Procedimientos Penales
5- www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/ seminarios/parte_1/toxicos_volatiles.html
6- html.rincondelvago.com/ puntos-de-ebullicion_destilacion.html
7- C:\Documents and Settings\Linda Chavita\Escritorio\Toxicos volatiles y gaseosos.htm

II. PRCTICA No. 3 y 4 ANALISIS PRELIMINAR, ANALISIS ORGANOLEPTICO Y
PAPELES SENSIBLES
1.1 Marco terico

El Anlisis Organolptico sirve como ayuda en la orientacin del anlisis toxicolgico de la misma
manera que la tcnica de los Papeles Sensibles.
1.2 Competencias
Practicar y evalar el ingreso de los txicos para conocer las diferentes
caractersticas organolpticas de una muestra problema y su significancia.
Dar a conocer las tcnicas de los Papeles Sensibles y su interpretacin, para ello:
- Realizar los anlisis preliminares y organolpticos.
- Preparar, ejecutar e interpretar los resultados de los papeles sensibles
- Aplicar las normas de bioseguridad al evaluar la separacin de las muestras para el
anlisis toxicolgico y la aplicacin de las tcnicas preliminares

a. Muestra problema de la prctica.
b. Tiras para determinar el pH.
c. Tiras reactivas
c.1. Tira Picrosodada (Acido. Pcrico 1%, luego Na2CO3 10%).
c.2. Tira de Acetato de Plomo (Acetato de Plomo 10%).
c.3. Tira de Hematoxilina. (Hematoxilina 2%).
c.4. Tira de Nitrato de Plata. (AgNO3 10%).
4. Acido Tartrico 10%.
1.4 Procedimiento
1.4.1. Se pocede a realizar el reconocimiento de todas aquellas
Caractersticas reconocibles por los sentidos:
a. Olor.
b. Color.
c. Sabor (cuando se pueda, por no ser recomendado en toxicologa).
d. Aspecto.
e. Consistencia.
f. pH.
1.4.2. Todos estos datos se anotarn en un protocolo de anlisis.
1.4.3. Se colocar la muestra, finamente picada, en un frasco de boca ancha y poner las tiras
reactivas humedecidas en el borde del frasco sin tocar la muestra ni entre ellas, aadir cido
tartrico sin que contamine las tiras reactivas y tapar inmediatamente en forma hermtica.
Esperar 15.
Interpretar los resultados.

1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la prctica e indicar en el informe de la prctica que txicos tenia la
muestra, el informe es individual.
1.6 Cuestionario
a. Aparte de los ejemplos organolpticos mencionados en clase, mencione otros hallados en la
bibliografa.
b. Puede el anlisis indicar otra patologa adems de una intoxicacin?, ejemplos.
c. Mecanismo de reaccin de las pruebas de las tiras reactivas.
1.7 Fuentes de informacin.

1. Calabrese, A y Astolfi E; Toxicologa. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2. Dreisbach, R; Toxicologa Clnica. Manual Moderno. Mxico D.E.1989.
3. Loomis, T; Fundamentos de Toxicologa. Acribia, Zaragoza. Espaa. 1982.
4. Pineda, E; Toxicologa Alimentaria, Plaguicidas. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5. Simonin C; Medicina Legal Judicial. Juhs, Barcelona, Espaa.. 1982.
6. Gisbert Calabuig, J; Medicina Legal y Toxicologa; 5ta Edicin. Masson. Barcelona. 1998.
7. Albert, L; Introduccin a la Toxicologa Ambiental; Centro Panamericano de Ecologa
Humana y Salud OMS / Gobierno del Estado de Mxico. Secretara de Ecologa Metepec,
Mxico D.E. 1997.
III. PRCTICA No. 5 MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS GASEOSOS

Y VOLATILES, y No. 6 MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE
TOXICOS METALICOS

PRCTICA No. 5 MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS GASEOSOS
Y VOLATILES
1.1 Marco terico
Los Txicos gaseosos y voltiles son un grupo importante dentro de las sustancias que causan dao
debido a sus particulares propiedades de all que sea vital su extraccin sin prdidas.
1.2 Competencias
Extraer los txicos voltiles de una muestra con un mnimo de prdida
Emplear el mtodo conductivista de participacin permanente

Separar los txicos voltiles y gaseosos a travs de la destilacin simple y por arrastre de vapor, en
medio cido y en medio alcalino.
Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y gaseosas, empleando
equipos y materiales de seguridad.

. Tubos de prueba de 13 x 100 mm.
. Equipo de microdestilacin.
. Bao Maria.
. Tira indicadora de pH.
. NaOH 10 %.
. HCl 10 %.
. H2O destilada.
. Acido Tartrico 10 %.
. Pipetas de 1mL y 5 mL.
1.4 Procedimiento
- Se proceder a hacer una destilacin en pH cido (por adicin de Acido Trtrico c.s. y se recibir
en un volumen. adecuado de NaOH 5 %.
- Luego, la misma muestra cida se llevar hasta pH alcalino con c.s. de Hidrxido de amonio 10% y
se recibir en un volumen adecuado de HCl 5 %.
- Ambos destilados (cido y alcalino) se guardarn para futuras prcticas.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la prctica e indicar en el informe de la prctica que txicos tenia la
muestra, el informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Txicos que se pueden hallar en al destilado cido.

. Txicos que se pueden hallar en el destilado alcalino.
. Precauciones al realizar la micro destilacin.

1. Simonin C; Medicina Legal Judicial. Juhs, Barcelona, Espaa. 1982.
Mxico D.E. 1997.
4. Martnez, A; Romieu, Isabelle; Introduccin al Monitoreo Atmosfrico; Centro
Panamericano de Ecologa Humana y Salud OMS / Gobierno del Estado de Mxico.
Secretara de Ecologa, Metepec, Mxico D.E.1997.
PRCTICA No. 6 MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS METALICOS

6.1 Marco terico
Los txicos metlicos causan una serie de enfermedades a nivel laboral y ambiental de all su
importancia toxicolgica y el valor de su determinacin en una muestra problema.
1.2 Competencias
Aprender los diferentes mtodos en el aislamiento de los txicos metlicos en muestras problemas
Realizar el Ensayo de lminas Metlicas. Realizar la destruccin de la materia orgnica para aislar
los txicos metlicos y no metlicos para llevarlos a su forma ionizada por el mtodo de la va
hmeda.
Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y gaseosas, empleando
equipos y materiales de seguridad.
Emplear el mtodo constructivista con participacin permanente.
. Erlenmeyers de 200 mL.
. Muestras problemas variadas.
. Campana extractora.
. Cocinilla elctrica.
. Pipetas de 1mL y 5 mL.
. HNO3 q.p.
. H2SO4 q.p.
. HClO4 q.p.
1.4 Procedimiento
Se explicar los diferentes tipos de tratamiento de las muestras problemas para aislar los txicos
metlicos en base a las caractersticas de estos
- Destruccin de la Materia Orgnica (DMO) (Tcnica. Kahane)
Trabajar en campana extractora
* Muestra problema 05-10 G.
* HNO3 Q.P. 10 mL.
* HClO4 Q.P. 0,5 mL.
* H2SO4 Q.P. 1 mL.
* Calor hasta disolucion total.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la prctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y

desventajas de los diferentes mtodos de destruccin de la materia orgnica. El informe es
individual.
1.6 Cuestionario

. Precauciones para la extraccin de los txicos metlicos.
. Funcin de cada reactivo en la tcnica empleada.

Mxico D.E. 1997.
8. Martnez, A; Romieu, Isabelle; Introduccin al Monitoreo Atmosfrico; Centro
Panamericano de Ecologa Humana y Salud OMS / Gobierno del Estado de Mxico.
Secretara de Ecologa, Metepec, Mxico D.E.1997.
IV. PRCTICA No. 7 y 8 MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE

TOXICOS ORGANICOS FIJOS
1.1 Marco terico
Los Txicos Orgnicos Fijos son el grupo ms numerosos dentro de la Toxicologa, causan
intoxicaciones tanto de tipo intencional, homicidio, como por abuso, de all que sea importante su
correcta extraccin y aislamiento
1.2 Competencias
Extraer los txicos orgnicos fijos de una muestra con un mnimo de prdida.
Extraer y separar los diferentes txicos orgnicos fijos de acuerdo a sus propiedades fsico qumicas,
en txicos cidos fuertes, cidos dbiles, neutros y bsicos.
Evaluar los diferentes residuos obtenidos para su posterior identificacin.
Valorar la importancia de la separacin de los txicos orgnicos fijos al mas alto grado de pureza
por ser estos los que causan el mayor porcentaje de intoxicaciones y ser los mas hbiles.
Emplear el mtodo conductivista de participacin permanente.
. Tubos de prueba de 13 x 100 mm., con tapn.
. Matraces de 100 mL.
. Bao Maria.
. Peras de separacin.
. Centrfuga.
. Tiras indicadoras de pH.
. Tungstato de sodio 10%.
. NaOH 10%.
. H2O destilada.
. NH4OH q.p.
. HCl q.p.
. Eter dietlico o cloruro de metileno o cualquier solvente inmiscible con el agua.
1.4 Procedimiento
- Se proceder a hacer una desproteinizacin segn el mtodo de Curry obteniendose un filtrado
limpio. (Las cantidades son proporcionales).
* Muestra Problema (Vsceras) 100 G.

* Na2WO4 10% 120 mL.
* H2O d 180 mL.
* NaOH 10% 20 mL.
* H2SO4 2/3N 100 mL.
Bao maria hirviente por 15, filtrar.

- Luego se har una extraccin con solventes orgnicos a pH cido 3,5 ( HCl Q.P.) Eter Etilico o con
un solvente inmiscible, se guarda la fase orgnica.
- Luego, el mismo filtrado, se llevar a pH alcalino con el NH4OH Q.P. (9.5) y se extraer con otra
alcuota de Eter Etilico u otro solvente organico, se guarda la fase orgnica.
- La fase organica de la primera extraccin (Acida) servira para separar los toxicos organicos acidos
fuertes, acidos debiles y neutros.
- Las fases orgnicas servirn para futuras prcticas.

1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la practica e indicar en el informe de la practica las ventajas y

desventajas de los diferentes metodos de extraccin de los toxicos organicos fijos. El informe es
individual.
1.6 Cuestionario
. Txicos que se pueden hallar en el residuo cido
. Txicos que se pueden hallar en el residuo alcalino
. Precauciones en la desproteinizacin y separacin en residuos

Mxico D.E. 1997.
8. Martnez, A; Romieu, Isabelle; Introduccin al Monitoreo Atmosfrico; Centro Panamericano
de Ecologa Humana y Salud OMS / Gobierno del Estado de Mxico. Secretara de Ecologa,
Metepec, Mxico D.E.1997.

V. PRCTICA No. 9 DETERMINACION DE MONOXIDO DE CARBONO EN SANGRE Y
ACIDO CIANHIDRICO Y PRCTICA No. 10 DETERMINACON DE
ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y
METANOL
PRACTICA No 9 DETERMINACION DE MONOXIDO DE CARBONO

1.1 Marco terico
El Monxido de carbono es uno de los txicos gaseosos ms comunes y abundante del medio
ambiente razn por la que puede causar intoxicaciones de tipo agudo
1.2 Competencias
Extraer e identificar el txico gaseoso monxido de carbono.
Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicacin y el tratamiento de urgencia a

realizar.
Mostrar las diferentes tcnicas de determinacin de Monxido de Carbono en sangre

. Frasco de vidrio transparente con tapa hermtica.
. Equipo de toma de muestra de sangre venosa.
. Un ratn pequeo.
. 2 jeringas de tuberculina.
. Una luna de vidrio de 20 x 20 cm.
. Guantes desechables.
. Tubos de 13 x 100 mm.
. NaOH 10%.
. Ac. Tnico 1 %.
. Agua destilada.
1.4 Procedimiento
Se proceder a producir la muerte del ratn por asfixia para obtener sangre con
carboxihemoglobina, posteriormente se someter sta muestra a diversas pruebas (Rx. Alcalina, Rx
al Ac.Tnico) contra datos de un standard.
- Producir la muerte del ratn por asfixia. (Dentro de un frasco con tapa hermtica, donde se
genera CO).
- Toma de muestra de sangre por puncin cardaca.
- Rx Alcalina.

* A un vol. de sangre agregar 4 Vol. de agua y un Vol. de NaOH 10%, anotar el tiempo en que llega
a color chocolate
- Rx del Ac. Tnico
* A un vol. de sangre se le agregar 4 Vol. de agua destilada y luego 3 de Ac. Tnico 1%.
- Comparar los resultados contra datos de standard.

1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e indicar el probable nivel de intoxicacion.
El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Fundamento de las reacciones de la prctica
. Posibles interferencias de las reacciones de la prctica, procedimientos

para detectarlas
1 Calabrese, A y Astolfi E; Toxicologa. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; Toxicologa Clnica. Manual Moderno. Mxico D.E.1989.
3 Loomis, T; Fundamentos de Toxicologa. Acribia, Zaragoza. Espaa. 1982.
4 Pineda, E; Toxicologa Alimentaria, Plaguicidas. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5 Simonin C; Medicina Legal Judicial. Juhs, Barcelona, Espaa. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; Medicina Legal y Toxicologa; 5ta Edicin. Masson. Barcelona. 1998.
7 Albert, L; Introduccin a la Toxicologa Ambiental; Centro Panamericano de Ecologa
Mxico D.E. 1997.
8 Martnez, A; Romieu, Isabelle; Introduccin al Monitoreo Atmosfrico; Centro Panamericano
DETERMINACION DE HCN Y DERIVADOS
1.1 Marco terico
El Acido Cianhdrico actualmente no se emplea como tal, pero si sus derivados y adems puede ser
producido de manera natural por algunas plantas (Glicsidos Cianogenticos.
1.2 Competencias
Extraer e identificar el txico gaseoso Acido Cianhidrico.

Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicacin y el tratamiento de urgencia a
realizar.
Demostrar la presencia de HCN o sus derivados en diferentes muestras .
Mostrar las diferentes tcnicas de determinacin de Acido Cianhidrico en sangre y visceras.
. Pipetas de 1 y 5 mL.
. Muestras (Pepas de manzana, guindones, agua de frijoles).
. Bao maria.
. NaCN 10% (como standard).
. Acido Pcrico, solucin saturada.
. FeSO4 2% (de preparacin reciente).
. HCl q.p.
. NaOH 5%.
1.4 Procedimiento
Se proceder a realizar un machacado con las muetras problemas y posteriormente se decantar, en
el decantado se identificar la presencia de derivados del HCN mediante
- Rx de Grignard:
* Destilado (ligeramente alcalino) 5 mL.
* Ac. Pcrico (sol.saturada) V gotas.
* Calor hasta aparicin de color rojizo.
- Rx del Sulfato ferroso:
* Destilado 5 mL.
* FeSO4 2% V gotas.
* FeCl3 5% V gotas.
* HCl q.p. V gotas.
Comparar resultados contra standard.

1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e indicar el probable nivel de intoxicacion.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacin de las pruebas efectuadas.
. Posibles interferencias y procedimiento para detectarlas.

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PRCTICA No. 10 DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS.
DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL
1.1 Marco terico
El Etanol es una de las causas ms frecuentes de intoxicacin intencional, de accidentes de transito
y de abuso, asi mismo es comn la adultarecin de bebidas alcohlicas con Metanol que es un
alcohol mucho ms txico.
1.2 Competencias
Determinar la alcoholemia e interpretar los resultados, evaluar los grados de ebriedad.
Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicacin y tratamiento de urgencia a realizar.
Emplear el mtodo constructivista de asesoria permanente.
. Muestras problemas diversas de bebidas alcohlicas.
. Bao de hielo.
. Bao Maria.
. Espectrofotmetro visible.
. Mezcla sulfocrmica (K2CrO7 al 2.5 % en H2SO4 al 50%).
. Ac. Cromotrpico q.p.
. H2SO4 q.p.
1.4 Procedimiento
Se proceder a destilar la muestra problema para obtener los alcoholes presentes, posteriormente
se les identificar y diferenciar mediante las reacciones respectivas
- Destilacin de la muestra problema
- Reaccin de Nicloux
* Destilado 5 mL.
* Mezcla Sulfocrmica 5 mL.
* Observar la coloracin que aparece (se puede cuantificar leyendo a 450 nm).
- Diferenciacin mediante Rx con el Ac. Cromotrpico.
* A los tubos anteriores agregar 10 mg de Ac. Cromotrpico y luego H2SO4 Q.P. en

Zona.
* Observar coloracin.
- Comparar con los resultados de los standares.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la prctica e indicar en el informe de la prctica las ventajas y

desventajas de los diferentes mtodos de identificacin e indicar el grado de alcoholemia y su
implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de las pruebas de la prctica.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.

Mxico D.E. 1997.

VI. PRCTICA No. 11 y 12 DETERMINACION DE INSECTICIDAS ORGANO
FOSFORADOS, CARBAMICOS Y CLORADOS
1.1 Marco terico
Los Insecticidas y raticidas muchas veces son causantes de intoxicaciones en el hogar ya sea por
descuido o intencionalmente y son las sustancias quimicas que causan el mayor porcentajes de
muertes.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Insecticidas en diferentes muestras problemas.
Extraer, purificar e identificar por cromatografa en capa fina los plaguicidas organo fosforados,
organo carbmicos y organo clorados. -Evaluar los diferentes mtodos de extraccin, purificacin e
identificacin de los plaguicidas.
Adquirir destreza para extraer e identificar rpidamente los plaguicidas para darle el tratamiento
respectivo por ser los txicos que causan la mayor incidencia de muertes.

. Placas cromatogrficas de 20 x 20 cm de Silicagel G.
. Cmara de revelado cromatogrfico.
. Sistema de solventes Benceno:acetona 5:1 o Hexano:Acetona 4:1.
. Cloruro de Paladio 1% (I.O.F.).
. Azul de Bromofenol (I.O.F.).
* Azul de Bromofenol 0,05 G.
* Acetona 10 mL.
* AgNO3 1% (en H2O:acetona,3:1) csp 100 mL.
. Difenilamina 0.2% (en etanol) (I.O.Cl.).
. p-Dimetilaminobenzaldehido 1% (EtOH) (I.O.C.).
. Acido Actico 5%.
1.4 Procedimiento
Se trabajar con el residuo neutro de la prctica de aislamiento de los T.O.F., pero tambien se
puede trabajar con muestras problemas sin tratar mediante las tcnicas de extracin rpida (M.P.
ms n-Hexano csp cubrir, agitar por 30 y separar).
La determinacin de los Insecticidas se realiza por c.c.f. y revelado diferencial con diferenes
reveladores.
- En una cromatoplaca de 20 x 20 cm estriada sembrar las muestras a una distancia superior a la del
nivel del sistema de solventes.
- Colocar la placa en la cmara de revelado y dejar correr aproximadamente el 70%.

- Sacar la placa y dejar secar, aplicar a cada zona los diferentes
reveladores y observar la coloracin.
- Cloruro de Paladio : Manchas amarillas o rojas.
- Azul de Bromofenol : (previo rociado con Acido Actico 5%) Manchas

azules o marrones sobre fondo amarillo.
- Difenilamina : Manchas verdes, castaas o violetas.
- p-Dimetilaminobenzaldehido : Manchas amarillas.
- Comparar los colores contra standares.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes mtodos de identificacin e indicar el plaguicida encontrado y su
implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Valores txicos de los insecticidas estudiados
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas

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VII. PRCTICA No. 13 DETERMINACION DE PLOMO Y No. 14 DETERMINACION DE
MERCURIO.
No. 13 DETERMINACION DE PLOMO
1.1 Marco terico

El Plomo es uno de los metales ms usados por el hombre, de all que su extraccin sea continua, lo
que origina problemas de contaminacin ambiental, ocupacional y accidental.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Plomo en las muestras orgnicas previa DMO.
Extraer y cuantificar expectrofotomtricamente el plomo de lquidos biolgicos. Interpretar
toxicolgicamente las concentraciones en lquidos biolgicos, alimentos y medio ambiente.
Adquirir destreza para extraer y cuantificar el plomo teniendo en cuenta las medidas de
bioseguridad.
Emplear el mtodo cosntructivo de asesoria permanente.

. Residuo de la DMO.
. Pipetas de 1, 5 y 10 mL.
. Peras de separacin de 100 mL.
. NH4 Citrato 40%.
. NH4OH 20%.
. KCN 10%.
. Hidroxilamina 20%.
. Ditizona extractora 16 mg% (CHCl3).
. Buffer 3-4:
* HNO3 q.p. 4.05 mL.
* H2O d 2.5 mL.
* Azul de Bromofenol 0.05 %.
* NH4OH q.p. csp pH 3-4.
* Solucin A:
- Tartrato cido de Potasio 1.021 G.
- HCl 0.2 N 5 mL.

- H2O csp 50 mL.
* H2O csp 500 mL.
. Ditizona standard 8 mg% (CHCl3):
. Solucin Amonio Cianurada:
* KCN 10% 20 mL.
* NH4OH q.p. 15 mL.
* H2O csp 100 mL.
1.4 Procedimiento
La Determinacin de Plomo se lleva a cabo por la Tcnica Espectrofotometrica de Bambach y
Burkey, y comprende 3 etapas.
1. Extraccin incial:
- M.P. (de DMO) 20-30 mL.

- NH4 Citrato 40% 15 mL.
- Rojo de Fenol Tres gotas
- NH4OH 20% csp pH 7-8.
- KCN 10% 5 mL.
- Hidroxilamina 20% 1 mL.
- Ditizona extractora 16 mg. % 5 mL.
- Agitar y separar la Ditizona.
2. Purificacin:
- Ditizona.
- Sol Buffer 3-4 50 mL.
- Agitar y separar la fase acuosa.
3. Extraccin final:
- Fase acuosa.
- Ditizona standard 8 mg% 15 mL.
- Sol. Amonio Cianurada 7 mL.
- Agitar y separar la fase orgnica.
Leer a 520 nm contra blanco de CHCl3.

1.5 Resultados

desventajas de los diferentes mtodos de identificacin e indicar que significa la concentracin
encontrada y su implicancia legal. El informe es individual
1.6 Cuestionario
. Explique la funcin de cada reactivo en la tcnica
. Valores normales y txicos de Plomo

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PRCTICA No. 14 DETERMINACION DE MERCURIO
1.1 Marco terico
El Mercurio, en base a su caracterstica de volatilidad, puede evaporarse a temperatura ambiente lo
que ha ocasionado casos de intoxicacin aguda (Caso Cajamarca).
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Mercurio en el residuo de la DMO en frio.
Extraer y cuantificar expectrofotomtricamente el mercurio de lquidos biolgicos. Interpretar

toxicolgicamente sus concentraciones en lquidos biolgicos, alimentos y medio ambiente.
Adquirir destreza para extraer y cuantificar mercurio teniendo en cuenta las medidas de
bioseguridad.
Emplear el mtodo constructivo de asesoria permanente.
. Residuo de la DMO en frio.
. Azul de Timol.
. HNO3 Q.P.
. Hidroxilamina 20%.
. Ditizona extractora 16 mg% (en CHCl3).
. HCl 0.25N.
. KBr 40%.
. Buffer 6.
. Ditizona standard 8 mg% (en CHCl3).
1.4 Procedimiento
La determinacin de Mercurio se lleva a cabo mediante la Tcnica Rspectrofotometrica de Jacobs y
Golman y comprende 3 fases.
1. Extraccin inicial:
- M.P. 20 mL.
- Azul de Timol II Gtas.
- HNO3 q.p. csp pH 1.5.
- Hidroxilamina 20% 2 mL.
- Ditizona extractora 16mg% 5 mL.
- Agitar y separar la fase orgnica.
2. Purificacin:

- Fase Orgnica.
- HCl 0.25N 50 mL.
- KBr 40% 5 mL.
- Agitar y separar la fase acuosa.
3. Extraccin final:
- Fase acuosa.
- Buffer 6 10 mL.
- Ditizona standard 8 mg% 15 mL.
- Agitar y separar la fase orgnica y leer a 490 nm.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e indicar que significa la concentracin
encontrada y su implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Fundamento de la reaccin.
. Funcin de cada reactivo de la tcnica.
. Valores normales y txicos del Hg.

Mxico D.E. 1997.

VIII. PRCTICA No. 15 y 16
PRIMERA EVALUACION PRACTICA

IX. PRCTICA No. 17 DETERMINACION DE ARSENICO Y
No. 18 DETERMINACION DE CROMO Y TALIO
PRCTICA No. 17 DETERMINACION DE ARSENICO

1.1 Marco terico
El Arsnico comunmente se encuentra asociado con otros metales por lo cual al purificar estos
metales se liberan cantidades de As contaminando el medio ambiente.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Arsnico en una muestra.
Determinar espectrofotomtricamente el Arsnico. Interpretar toxicolgicamente la concentracin
en lquidos biolgicos, alimentos y medio ambiente.
Adquirir destrezas para realizar los anlisis quimico-toxicolgicos y respetar las normas de
bioseguridad y tica.
. Equipo de Microdestilacin.
. M.P.
. HCl q.p.
. KI 15%.
. SnCl 40%.
. CuSO4 2%.
. Zn metlico.
. Dietilditiocarbamato de plata 0.5% (en Piridina).
. Equipo de Vasac y Sedivec.
1.4 Procedimiento
- Colocar la M.P. en el equipo de Vasac y Sedivec.
- HCl q.p. 5 mL.
- KI 15% 2 mL.
- SnCl 40% VIII Gtas.
- reposo por 15.
- CuSO4 2% 1 mL.
- Zn metlico 3 granallas.

- reposo por 30.
- Recibir en Dietilditiocarbamato de plata 0.5% 3 mL.
- Leer 540 nm.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e indicar que significa la concentracin
encontrada y su implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Funcin de cada reactivo.
. Valores normales y txicos de As.

Mxico D.E. 1997.
PRCTICA No. 18 DETERMINACION DE CROMO Y TALIO
DETERMINACION DE CROMO
1.1 Marco terico
El Cromo es un metal que produce irritacin a nivel drmico en personas expuestas, tambin se le
ha asociado con Cncer drmico.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Cromo en una muestra problema.

Determinar el Cromo e Interpretar toxicolgicamente su concentracin en lquidos biolgicos,
alimentos y medio ambiente.
. Bao Maria.
. AgNO3 1%.
. K2S2O8.
. HCl 0.1%.
. H3PO4 q.p.
. H2SO4 q.p.
. Difenilcarbazida 1% (en EtOH).

1.4 Procedimiento
El Cr se reconoce por la Tcnica de Cazeneuve.
- M.P. 5 mL
- AgNO3 1% I Gta.
- K2S2O8 0.01 G.
- Bao maria hirviente por 15.
- HCl 0.1% V Gtas.
- Bao maria hirviendo por 15.
- Enfriar
- H3PO4 q.p. II Gtas.
- H2SO4 q.p. II Gtas.
- Difenilcarbazida 1% (EtOH) V Gtas.
- Observar la coloracin.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e indicar la presencia o ausencia del Cromo
en la muestra problema. El informe es individual.
1.6 Cuestionario

. Valores normales y txicos del Cr.

Mxico D.E. 1997.
DETERMINACION DE TALIO
1.1 Marco terico
El Talio es un metal que se utiliza como raticida y que ocasiona intoxicaciones accidentales.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de Talio en una muestra problema.
Determinar el Talio e Interpretar toxicolgicamente su concentracin en lquidos biolgicos.

. Bao Maria.
. HCl p,a.
. gua de bromo.
. Acido sulfosalicilico 10 %.
. Cristal violeta 0.2 %.

. Benceno p.a.
1.4 Procedimiento
El Tl se reconoce por la Tcnica Espectrofotometrica de Pompei.
- M.P. 1 mL.
- HCl p.a 0.1 mL.
- gua de bromo 0.2 mL.
- Reposo por 2.
- Acido sulfosalicilico 10% 0.2 mL.
- Cristal violeta 0.2 % 0.2 mL.
- Benceno p.a. 5 mL.
- Agitar y leer a 590 nm.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e interpretar la concentracin encontrada.
1.6 Cuestionario
. Valores normales y txicos del Tl.

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X. PRCTICA No. 19 DETERMINACION HIDROCARBUROS, CLOROFORMO Y
SOLVENTES ORGANICOS VOLATILES Y PRCTICA No. 20 DETERMINACION DE
AINEs
No. 19 DETERMINACION HIDROCARBUROS, CLOROFORMO Y SOLVENTES

ORGANICOS VOLATILES
1.1 Marco terico

Los Hidrocarburos y los Solventes Orgnicos Voltiles son usados ampliamente en la industria como
disolventes de diferentes sustancias como lacas, pinturas, pegamentos, etc. de all que sean
causantes de intoxicaciones ocupacionales o, peor an, intencionales.
1.2 Competencias
Determinar la presencia de S.O.V. en diferentes muestras problemas.
Extraer, purificar e identificar el benceno y cloroformo. Evaluar su presencia en lquidos biolgicos.
Valorar su importancia como agente txico causal de intoxicaciones, y proponer medidas de

prevencin y tratamiento.
Emplear el mtodo constructivo permanente.
. Tubos de prueba de 13 x 100 mm.
. Muestras problemas (pegamentos de contacto).
. Bao Maria.
. Piridina qp.
. NaOH 20%.
. Rvo de dragendorff.
1.4 Procedimiento
Se realizar una destilacin de las muestras problemas para obtener los solventes orgnicos
contenidos en las mismas (Tener bastante cuidado porque la mayoria son inflamables) y
posteriormente se les reconocer por:
- Rx de Fujiwara (trabajar en campana extractora).
* Muestra problema 5 mL.
* NaOH 20% 1mL.
* Piridina q.p. 1mL..
* Bao maria hirviente/2.
- Rx de p-Nitrofenol (por I.O.Fosforados)

* NaOH 10% 5 mL.
* Bao maria hirviente/2.
- Determinacin de Alcaloides voltiles
* Rvo de Dragendorff 2 mL.
* Observar formacin de precipitado.
- Comparar los datos contra standard.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e interpretar las reacciones. El informe es
individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de las pruebas de la prctica.
. Posibles interferencias y manera de detectarlas.

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PRCTICA No. 20 DETERMINACION DE AINEs
1.1 Marco terico
Los AINEs son frmacos que muchas veces, por no decir siempre, se comercializan sin receta
mdica, por lo cual pueden originar intoxicaciones por automedicacin y sobredosis.
1.2 Competencias
Determinar los diferentes tipos de AINEs en la muestra procesada en la prctica de Aislamiento de
T.O.F.
Extraer e identificar los derivados de las pirazolonas y el paracetamol por cromatografa en capa
fina. Extraer, purificar, identificar y cuantificar los salicilatos e interpretar toxicolgicamente su
concentracin en lquidos biolgicos.
Valorar su importancia como agente txico causal de intoxicaciones, y propone medidas de

prevencin y tratamiento.
Emplear el mtodo descriptivo de asesoria permanente.
. Diferentes estandares de AINEs (Salicilatos, Paracetamol, Pirazolonas).
. Extractos de la prctica de aislamiento de T.O.F.
. FeCl3 5%.
. Rvo de Trinder:
* HgCl2 40 G.
* HCl 1N 120 mL.
* Fe(NO3)3 40 G.
* H2O csp 1000 mL.
. AgNO3 10%.
. HCl 5N.
. NaNO2 q.p.
. HCl q.p.
. o-Cresol 1%.
. NH4OH 4M.
. Etanol q.p.
. Silica gel para la ccf.

1.4 Procedimiento
Se trabajar en el residuo cido de la prctica de extraccin de T.O.F., el residuo se reconstituye
con Etanol y se realizarn las Sgtes. determinaciones
- Determinacin de Salicilatos
* M.P. 5 mL.
* FeCl3 5% 2 mL.
* Observar la coloracin.
- Cuantificacin de Salicilatos.
* M.P. 1 mL.
* Rvo Trinder 5 mL.
* Agitar por 5 y leer a 540 nm contra Standard de 5 mg %.
- Determinacin de Pirazolonas:
* M.P. 1 mL.
* AgNO3 10% 0.5 mL.
* HCl 5N 1 mL.
* NaNO2 q.p. 1 mg.
* Observar el color.
- Determinacin de Paracetamol:
* M.P. 1 mL.
* o-Cresol 1% 1 mL.
* NH4OH 4M 2 mL.
- Comparar los resultados contra los standares.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e interpretar las reacciones y la
concentracin de salicilato encontrado. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de las pruebas efectuadas.
. Concentraciones txicas de las sustancias determinadas.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas

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XI. PRCTICA No. 21 y 22 DETERMINACION DE DEPRESORES DEL SNC:
BARBITURICOS, BENZODIAZEPINAS Y FENOTIAZINICOS
1.1 Marco terico
Los Depresores del SNC pueden causar depresin de tipo selectivo o no selectivo y adems
sinergisarse con otros depresores lo que aumenta su toxicidad.
1.2 Competencias
Reconocer los diferentes depresores centrales ms frecuentes en casos de intoxicacin.
Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados barbitricos. Su dependencia y su
implicancia social.
Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados benzodiazepnicos. Su dependencia y su
implicancia social.
Toxicidad de los derivados fenotiaznicos. Tratamiento en casos de intoxicaciones.
. Diferentes standares (Barbitricos, benzodiacepinas, fenotiazinas).
. Bao maria de glicerina.
. HCl q.p.
. NaNO2 0.1%.
. Sulfamato de Amonio 0.5%.
. N-Naftiletilendiamino.HCl 0.1%.
. Co(NO3)2 5% (en Etanol).
. Isopropilamina 5% (en Etanol).
. CuSO4 0.5%.
. Piridina 5% (en cloroformo).
. Rvo FPN:
* FeCl3 5% 5 mL.
* HClO4 20% 45 mL.
* HNO3 50% 50 mL.
1.4 Procedimiento

Se usarn los extractos obtenidos en el aislamiento de los T.O.F. y se proceder a realizar las
diferentes reacciones de reconocimiento.
. Rx de reconocimiento de Barbitricos:
- Rx de Parry-Coppangy
* M.P. 5 mL.
* Co(NO3)2 5% en EtOH III Gts.
* Isopropilamin 5% en EtOH IV Gts.
- Rx de Zwiker:
* M.P. 5 mL.
* CuSO4 0.5% 0.5 mL.
* Agitar fuertemente
* Piridina 5% (CHCl3) 0.5 mL.
* Observar coloracin de la fase orgnica.
. Rx de reconocimiento de Benzodiacepinas.
- Rx de Bretton-Marshall :
* M.P. 1 mL.
* HCl 6N. 5 mL.
* Bao maria de Glicerina a 125 *C/ 45.
* NaNO2 0.1% 0.25 mL.
* Agitar y reposo por 3.
* NH4 Sulfamato 0.5% 0.25 mL.
* Agitar y reoposo por 3.
* N-Naftiletilendiamino.HCl 0.1% 0.25 mL.
* Observar la coloracin (Se puede cuantificar leyendo a 550 nm).
3. Rx de reconocimiento de Fenotiazinas.
- Rx de Forrest:
* M.P. 5 mL.
* Rvo FPN V gotas.

1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e interpretar las reacciones encontradas.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de cada prueba.

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XII. PRCTICA No. 23 y 24 EXPOSICION DE SEMINARIOS DE TOXICOLOGIA
AMBIENTAL, ECOTOXICOLOGIA, OCUPACIONAL, INDUSTRIAL, ALIMENTARIA,
MEDICAMENTOSA, SOCIAL, FORENSE, COSMETICA Y DE URGENCIA POR
TODOS LOS ALUMNOS
XIII. PRCTICA No. 25 DETERMINACION DE SUSTANCIAS CAUSTICAS Y

CORROSIVAS Y PRCTICA No. 26 DETERMINACION DE
MARIHUANA
No. 25 DETERMINACION DE SUSTANCIAS CAUSTICAS Y CORROSIVAS
14.1 Marco terico

Las Sustancias Custicas y Corrosivas causan fuertes irritaciones a nivel de la piel y mucosas
causando intoxicaciones agudas muchas veces con descenlace fatal.
14.2 Competencias
Determinar la presencia de Corrosivos y Custicos.
Extraer e identificar de las sustancias casticas y corrosivas.
Adquirir destrezas para identificar las diferentes sustancias causticas y corrosivas teniendo en
cuenta las normas de bioseguridad y tica.

. Muestras problemas.
. H2O destilada.
. BaCl2 2 %.
. AgNO3 1%.
. Acetato de Cobre 3 %.
. Brucina q.p.
. Hematoxilina q.p.
. Acido clorhdrico.
. Acido sulfrico.
. Acido ntrico.
. Amoniaco,
14.4 Procedimiento
- Macerar la muestra problema en H2O por 30 aproximadamente.
- Realizar las determinaciones de los diferentes corrosivos y custicos.

- Determinacin de H2SO4.
* M.P. 5 mL.
* BaCl2 2% 2 mL.
* Observar la formacin de precipitado.
- Determinacin de HCl.
* M.P. 5 mL.
* AgNO3 1% 1 mL.
* Observar la formacin de precipitado.
- Determinacin HNO3.
* M.P. 5 mL.
* Brucina 5 mg.
* Observar coloracin
- Determinacin de NH4OH
* M.P. 5 mL.
* Hematoxilina 5 mg.
* Observar coloracin
14.5 Resultados

14.6 Cuestionario
. Fundamento de la determinacin de cada corrosivo y custico.
. Diferencias entre una corrosin por cidos y lcalis.


Mxico D.E. 1997.

PRCTICA No. 26 DETERMINACION DE MARIHUANA
14.1 Marco terico
La Marihuana es una de las drogas de abuso ms comun en nuestro medio, consumida por amplios
grupos de la sociedad, adems es causa de un gran mercado negro
14.2 Competencias
Determinar la presencia de Marihuana en diferentes muestras
Identificar la marihuana por el mtodos macroscpicos y microscpicos. Extraer, purificar e
identificar por cromatografa en capa fina y colorimtricamente los cannabinoides en lquidos
biolgicos y en la planta de marihuana.
Adquirir destrezas para identificar los principios activos de la marihuana en lquidos biolgicos y la
planta teniendo en cuenta las normas de bioseguridad y tica.
. Microscopio.
. Cocinillas.
. Mecheros.
. Tubos de centrifuga.
. Gradillas.
. Pipetas de 1, 2, 5, 10 mL.
. Placas de vidrio de 10 por 10 cm.
. Rociador.
. Cuba de ccf
. Capilares.
. Muestras sospechosas de Marihuana.
. Acido clorhdrico al 20 %
. Cloroformo.
. Etanol.
. Silica gel para ccf.
. Rvo de Duquenois:
* Vainillina 0.4 G.
* Acetaldehido IV Gts.

* Etanol (96) 20 mL.
. Benceno q.p.
. Bencidina Diazotada:
A. Bencidina 0.5 G.
HCl q.p. 1.5 mL.
H2O csp 100 mL.
B. NaNO2 10%.
14.4 Procedimiento
. Determinacin de Marihuana.
- Rx de Duquenois.
* M.P. mas Rvo de Duquenois csp cubrir, hacer un machacado y

luego decantar, trabajar con el lquido decantado.
* HCl q.p. 2 mL (en zona).
* Observar.
* CHCl3 2 mL.
* Agitar (La Marihuana debe pasar a la fase clorofrmica).
- c.c.f.
Sembrar la muestra en la cromatoplaca y correr en Benceno.
* Revelar con Bencidina Diazotada (mezclar A. y B. y rociar).
* Observar la coloracin y Rf.
- Cannabidiol Amarillo naranja 0.12.
- Delta9-THC Rojo naranja 0.71.
- Cannabinol Rojo castao 0.38.
14.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin e interpretar las reacciones
encontradas.
14.6 Cuestionario
1. Mecanismos de reaccin de las pruebas efectuadas en la prctica.
2. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.

3. Otras tcnicas de determinacin.
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XIV. PRCTICA No. 27 DETERMINACION DE ALCALOIDES: ESTRICNINA, BERUCINA,
ATROPINA, CODEINA Y MORFINA. No 28 DETERMINACION DE COCAINA EN
LIQUIDOS BIOLOGICOS Y EN MUESTRAS SOLIDAS
PRCTICA No. 27 DETERMINACION DE ALCALOIDES: ESTRICNINA, BERUCINA,

ATROPINA, CODEINA Y MORFINA.
1.1 Marco terico

Los alcaloides son sustancias que se encuentran en las plantas principalmente y algunos animales.
Muchos de stos son usados como frmacos y otros como venenos segn la dosis ingerida. En la
presente prctica vamos a identificar los ms txicos y los que producen dependencia.
1.2 Competencias
Reconocer los diferentes alcaloides que generan intoxicaciones y dependencia ms frecuentes.

Evaluar las intoxicaciones producidas por la estricnina, brucina y atropina.
Evaluar la dependencia que producen la morfina y codena.
Tratamiento en casos de intoxicaciones.
Emplear el mtodo constructivo de asesora permanente.
. Pipetas de 1, 2, 5 y 10 mL.
. Diferentes estandares al 1% de: Estricnina, Brucina, Atropina, Codena y Morfina.
. Placas de toque.
. Capsulas.
. Gradillas.
. Vaguetas.
. Placas de vidrio 10 por 10 cm. Para cromatografia em c.f.
. Rociador.
. Cuba para c.c.f.
. Cocinillas.
. Mecheros.
. Capilares.
. METANOL.

. Acetona.
. Trietanolamina.
. Reactivo de Dragendorff.
. Reactivo de Bouchardat.
. Reactivo de Valser y Mayer.
. Acido ntrico concentrado.
. Cloruro estannoso AL 10%
. Acido sulfrico.
. Cristales de bicromato de potaseo.
. Vanadato de amnio al 1% en cido sulfrico.
. Acidi ntrico fumante.
. Hidroxido de potasio al 10% en alcohol.
. p-Dimetilamino benzaldehido al 1% em cido sulfrico.
. Molibdato de amnio al 1% em cido sulfrico.
. Formol al 1% em cido sulfrico.
. Vainillina al 0.3% em cido clorhdrico
- Silica G para cromatografia em capa fina.
1.4 Procedimiento
Se usarn los extractos obtenidos en el aislamiento de los T.O.F. y se proceder a realizar las
diferentes reacciones de reconocimiento.
. Rx de reconocimiento de Beucina:
- Rx con el cido nitrico de coloracin roja intensa, mas una gota de cloruro estannoso el color
vira al violeta.
. Rx. De reconocimiento de la estricnina:
. Disolver el residuo en un mL de cido sulfrico y colocarle un cristal de bicromato de potasio,

deslizar el cristal y aparecer una lnea azul a violeta.
. Tratar el residuo con gotas de vanadato de amonio en cido sulfrico, aparecer una
coloracin violeta intensa.
. Rx de reconocimiento de Atropina:
. Tratar el residuo con 0.5 mL de cido ntrico, mas calentar suavemente hasta evaporar.
Enfriar y aadir una gota de potasa alcoholica, aprece una coloracin violeta.

. Tratar el residuo con gotas de PDAB, aparece una coloracin roja violcea.
. Rx. De reconocimiento de la morfina:
. Tratar el residuo con gotas de molibdato de amonio en sulfrico aparece una coloracin
violeta.
. Tratar el residuo con formol en sulfrico, aparece una coloracin violeta que pasa al azl.
. Rx. De reconocimiento de la codeina:
. Tratar el residuo con gotas de molibdato de amonio en sulfrico, no aparece ninguna

reaccin.
. Tratar el residuo con formol en sulfrico, aparece una coloracin violeta que pasa al azl.
- Determinacin de alcaloides por cromatografa en capa fina.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la prctica e indicar en el informe las ventajas y desventajas de los
diferentes metodos de identificacin e interpretar las reacciones encontradas. El informe es
individual.
14.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de cada prueba.

Mxico D.E. 1997.

PRCTICA No. 28 DETERMINACION DE COCAINA
14.1 Marco terico
La Cocana es una de las drogas de abuso ms comn en nuestro medio, consumida por un amplio
grupos de la sociedad, adems son causa de un gran mercado negro.
14.2 Competencias
Determinar la presencia de Cocana en diferentes muestras.
Identificar la Cocana por mtodos colorimtricos, cristalogrficos y por cromatografa en capa fina
en muestras de trfico ilcito de drogas y lquidos biolgicos.
Adquirir destrezas para identificar la cocana, fibras y pelos para transformar los indicios en
pruebas de delito.

. Pipetas de 1, 2, 10 y 5 mL.
. Baguetas.
. Rociador.
. Capilares.
. Porta objetos.
. Cubre objetos.
. Microscopios.
. Mecheros.
. Cocinillas elctricas.
. Placas de vidrio 10 por 10 cm.
. Cubeta de ccf
. Beaker de 50 mL
. Capsulas de porcelana.
. Placas de toque.
. Muestras sospechosas de Cocana.
. Silica gel para ccf.
. Sistema de solventes MeOH:Acetona:trietanolamina, 100:100:0.3.
. Rvo Dregendorff.
. SnCl2 40%.

. NaNO2 0.1%.
. H2SO4 q.p.
. Tiocianato de Cobalto.
. Acido pcrico saturado.
. Permanganato de potasio al 1%
. Tricloruro de fierro al 5%
. Reactivo de lugol.
. Acido brico.
. Etanol.
. Metanol.
. Acido sulfrico.
. Acido clorhdrico al 10 %
. Cloruro de bario al 10 %
. Reactivo de Aldrich
14.4 Procedimiento
Determinacin de Cocaina.
- Reacciones Generales de alcaloides
- Reaccin con el Tiocianato de Cobalto
- Rx del Tiocianato de cobalto, da coloracin azul.
. Formacin de los cristales de picrato de cocana.
. Formacin de los cristales de permanganato de cocana.
. Determinacin de harina.
. Determinacion de boratos.
. Determinacion de carbonatps.
. Determinacin de salicilatos.
. Determinacin de anestesicos sinteticos.
- c.c.f.
* Cromatoplacas de 20 x 20 de Silicagel G.

* Sistema de solventes MeOH:Acetona:Trietanolamina, 100:100:0.3.
* Revelador : Rvo Dragendorff.
* Observar coloracin y Rf.
14.5 Resultados

14.6 Cuestionario
. Mecanismos de reaccin de la pruebas efectuadas en la prctica.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.
. Otras tcnicas de determinacin.

4 Simonin C; Medicina Legal Judicial. Juhs, Barcelona, Espaa.. 1982.
6 Klaassen, C Casarett and Doulls. Toxicology: The basic Science of poisons. 6 Ed. Nueva York.
Pergamon Press. New York. 2001.

XV. PRCTICA No. 29 DIFERENCIACION DE MANCHAS DE SANGRE Y ESPERMA y
No. 30 DETERMINACION DE CABELLOS, PELOS
PRCTICA No. 29 DIFERENCIACION DE MANCHAS DE SANGRE Y ESPERMA
14.1 Marco terico

Es importante la diferenciacin de los rastos encontrados en diferentes escenarios de un crimen,
como son las manchas de sangre y de esperma que tienen gran implicancia legal.
14.2 Competencias
Identificar las manchas de sangre, esperma y calostro en diferentes soportes por mtodos
colorimtricos, cristalogrficos y por cromatografa en capa fina.
Adquirir destrezas para identificar las manchas de sangre, semen y calostro para transformar los
indicios en pruebas del delito..
MANCHAS DE SANGRE
. Muestras problemas de manchas de sangre y esperma.
. Microscopio con micrometro.
. Reactivo de Adler.
. Reactivo de Kastle Scheede Meyer.
. Reactivo de Teichmann.
. Reactivo de Bertrand.
. Reactivo de INPE.
. Reactivo de takayama.
. Reactivo de Nina Adsvadurova.
. Metanol Acido acetico (99-1).
MANCHAS DE ESPERMA
. H2SO4 p.a.
. Lmpara de UV.
. Reactivo de Florence.
. Reactivo de Barberio.
. Reactivo de de May Grunwald Giemsa.
. HCl 0,1 M.

. Ninhidrina 0,2 % en etanol.
14.4 Procedimiento
Diferenciacin de las manchas de sangre y de esperma con los diferentes reactivos.

Se har un montaje en los portaobjeto para observacin microscopica de los diferentes cristales que
se obtienen de las extractos de las muestras de sangre y esperma.
Se realisara la diferenciacin por cromatografa en capa fina de las muestras de sangre y esperma.
14.5 Resultados

desventajas de los diferentes mtodos de identificacin y diferenciacin. Interpretar las reacciones
y los resultados, y su implicancia legal. El informe es individual.
14.6 Cuestionario
. Caractersticas de los cabellos, fibras y pelos.
. Implicancias legales.

PRCTICA No. 30 DETERMINACION DE CABELLOS, PELOS Y FIBRAS
1.1 Marco terico

Es importante la diferenciacin de los rastros encontrados en diferentes escenarios de un crimen
que pueden pasar de indicios a pruebas del delito,
1.2 Competencias
Diferenciar los cabellos, pelos y fibras.
Diferenciar las fibras animales y vegetales. Identificar y diferenciar los pelos.
Adquirir destrezas para identificar las fibras y pelos para transformar los indicios en pruebas de
delito.

. Muestra problema de cabellos, pelos y fibras.
. Microscopios con micrometro.
. Porta y cubreobjetos.
. Sodio metalico p.a.
. Nitroprusiato de sodio p.a.
. p Dimetilamino benzaldehido 5% en solucion clorhidrica.
. Carbonato de sodio 10 %.
. Etanol p.a.
. Acido sulfurico p.a.
. Cloroformo.
. Esmalte de uas transparente.
. Gradillas.
. Pipetas de 1, 2, 5, 10 mL
1.4 Procedimiento
Diferenciacin de fibra vegetal y animal con el nitroprusiato de sodio.

Se har un montaje en los portaobjeto para observacin microscopica.
Se deber comparar los ndices medulares para diferenciacin.
Diferenciacin de las diferentes clases de cuticula.

Diferenciacin de los diferentes canales medulares.
1.5 Resultados

desventajas de los diferentes metodos de identificacin y diferenciacin. Interpretar las reacciones
y los resultados, y su implicancia legal. El informe es individua.
1.6 Cuestionario
. Caractersticas de los cabellos, fibras y pelos.
. Implicancias legales.

XVI. PRCTICA
No. 31 Y 32 SEGUNDA EVALUACION

PRACTICA.

Guía de prácticas de análisis toxicológico

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- Frascos de vidrio de boca ancha.

- Muestras de alimentos, lquidos biolgicos y otros.

- Equipos de conservacin en fri porttiles.

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4. Tcnicas de cuarteo de la muestra

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- 5 % Txicos Voltiles y gaseosos.

- 5 % Txicos. Orgnicos Fijos.

- 5 % Txicos Metlicos y no Metlicos.

MUESTRAS REQUERIDAS EN EL EXAMEN TOXICOLGICO

a.- VICTIMA CON VIDA:

A PARTIR DE OTRAS SUSTANCIAS:

Alimentos (Todo lo posible).

b.- VICTIMA SIN VIDA:

Muestra Cantidad Mnima Venenos Que Se Estudian En La Muestra

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Para venenos gaseosos.

1.7 Fuentes de informacin

1- Loomis, T. Fundamentos de Toxicologia. Acribia. Espana. 1982

F-CV3-3B-2 Rev. Junio 2007

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- Realizar los anlisis preliminares y organolpticos.

- Preparar, ejecutar e interpretar los resultados de los papeles sensibles

- Aplicar las normas de bioseguridad al evaluar la separacin de las muestras para el

anlisis toxicolgico y la aplicacin de las tcnicas preliminares

1.3 Materiales y equipos

b. Tiras para determinar el pH.

c.1. Tira Picrosodada (Acido. Pcrico 1%, luego Na2CO3 10%).

c.2. Tira de Acetato de Plomo (Acetato de Plomo 10%).

c.3. Tira de Hematoxilina. (Hematoxilina 2%).

c.4. Tira de Nitrato de Plata. (AgNO3 10%).

4. Acido Tartrico 10%.

1.4.2. Todos estos datos se anotarn en un protocolo de anlisis.

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