Diseño de Bioreactores Departamento de Ingeniería Bioquímica

Nov 11, 2019

Taller de practica Unidad 3 y 4.

El taller se debe entregar solucionado hasta el 18 de Nov antes de las 11:59am, ese mismo día se hace la
retroalimentación para la cual se sacarán aleatoriamente estudiantes para que solucionen un ejercicio en el
tablero. El principal propósito de esta actividad es que la tarea 3 ayude a los estudiantes con su
preparación para el tercer parcial.
Indicaciones
 El taller será entregado online en Moodle en grupos de 3 personas.
 Las respuestas deben ser solucionadas a mano, esto incluye las gráficas.
 Esta estrictamente prohibido dividirse las preguntas del taller. Es decir, los 4 estudiantes deben
sentarse juntos para solucionar punto por punto.
 Muchos puntos requieren hacer suposiciones, lo importante es que las indique y las justifique.

Estrategia: Antes de solucionar los problemas, intente identificar o hacer un diagrama cualitativo de los
resultados esperados.

Enunciado 1: Reactor enzimático (10 puntos)

En un reactor batch de 0.6L se lleva a cabo la conversión enzimática de urea a amonio y dióxido de carbono.

La concentración inicial de urea es 0.1mol/l, y la concentración de ureasa es 0.001g/l. La reacción se llevará

a cabo isotérmicamente a 50ºC, y para estas condiciones Vmax=2.66*10 -4 mol/l s y Km=0.0266 kmol/ m3.

Preguntas

1) Calcule el tiempo requerido para convertir enzimáticamente 99% de urea a amonio y dióxido de

carbono (5 puntos).

2) Como cambiaria este tiempo si se emplea 6g/l de enzima (5 puntos).

Enunciado 2: Reactor enzimático (20 puntos)

La urea es descompuesta por la enzima ureasa, empleando la siguiente reacción:

Recientemente, un grupo de Ingenieros Bioquímicos (en colaboración con la Facultad de Medicina) en la Universidad
Icesi, ha propuesto el concepto de “Riñon artificial”, el cual podría remover la urea presente en la sangre evitando
así que los pacientes con falla renal se hagan diálisis periódicamente en el hospital, y por tanto mejorando
significativamente su calidad de vida.
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El concepto propuesto por los Ingenieros se basa en el uso de ureasa encapsulada en un volumen de reacción que se
puede implantar en el brazo del paciente, tal cual lo presenta la figura 1. Considere que este reactor se puede modelar
como un CSTR en estado estacionario, y responda las preguntas en Moodle.
Figura 1. La sangre entra al “Riñon artificial”, reacciona, y sale tratada a las venas.

Preguntas

1.1 Suponga que las enzimas encapsuladas siguen una cinética de inhibición acompetitva por sustrato, que
estas están confinadas en un espacio con buen mezclado, y que las limitaciones de transferencia de masa
son despreciables. Plantee la ecuación de balance molar general para este reactor, y empleando las
suposiciones hechas, y la cinética determine la ecuación de diseño del reactor (5 puntos).
1.2 Suponga que la concentración de urea en la sangre que entra al dispositivo es de 12mM, con un flujo
sanguíneo de 1L/min y la ureasa (EC 3.5.1.5) encapsulada (1.33mol m-3) posee un numero de recambio de
3970 s-1 , un Km de 1.3mM, y un Ks de 26.1mM a un pH fisiológico de 7, y una temperatura basal de 37°C.
Calcule el volumen de reacción (en litros, un solo decimal) necesario para alcanzar una concentración final
de urea en la sangre de 1.2mM (constante). (8 puntos)
1.3 ¿Considera usted que este reactor desde el punto de vista conceptual podría funcionar?, tenga en cuenta en
su análisis el volumen de reacción requerido. (4 puntos)
1.4 Con el fin de mejorar el diseño se decide encontrar nuevas ureasas que sean más eficientes. Suponga que el
volumen deseado de reacción es 5ml, y determine, la velocidad de reacción requerida por la enzima
(𝑚𝑚𝑜𝑙𝑚 𝑠 ) con el fin de disminuir el volumen al valor deseado. (3 puntos)
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Enunciado 2: Reactor Batch con crecimiento celular (20 puntos)

Una cepa de células humanas inmortales HeLa ha sido manipulada genéticamente para producir hormonas humanas
de uso médico, ver figura 2. Un cultivo Batch es iniciado inoculando 12 g de células en un bioreactor de columna de
burbujeo de 100L que contiene 60 g l-1 de glucosa. El cultivo presenta una fase lag despreciable. La velocidad
especifica de crecimiento celular máxima de las células es 0.13 h -1; el rendimiento de biomasa a partir del sustrato es
0.575 g g-1.

Figura 2. Celulas HeLa modificadas y teñidas con anticuerpos: actina, vimentina y ADN.

Preguntas
1.1 ¿Considera usted que es una buena idea usar un reactor de columna de burbujeo para cultivar estas células,
o preferiría usar un reactor de tanque agitado? (3 puntos)
1.2 Para este proceso, se prefiere emplear un reactor Batch o un reactor en continuo?.
1.3 Cuando la concentración de glucosa cae por debajo de 0.4 g l-1, las células inmortales HeLa pueden entrar
en fase estacionaria. Estime, ¿cuánto tiempo (h, un solo decimal) se requiere para alcanzar la fase
estacionaria? (6 puntos)
1.4 ¿Cuál será la concentración celular (g/l, un solo decimal) si el bioreactor es detenido después de consumir
el 70% del sustrato disponible? (6 puntos)
1.5 Cuanta biomasa se puede producir si el reactor se opera durante un año? (5 puntos)