Hoja de Ejercicios Biotecnologa Industrial

Esterilizacin
1. Se va a esterilizar un producto de inters en baches en un autoclave a 120C por 10 minutos. Se ha
aproximado que cada bache contiene 10 5 clulas bacterianas, 103 esporas bacterianas y 105 partculas de
virus. a 120C las constantes de muerte son, 10, 0.5 y 5 min -1 respectivamente. Sin considerar las etapas
de calentamiento y enfriamiento, calcular cual es el riesgo que un bache resulte contaminado, cul es la
causa ms probable de dicha contaminacin?
2. Se necesita disear un esterilizador continuo para esterilizar jugo. El jugo debe ser mantenido a 110C
por lo menos 15 segundos y la lnea debe ser llenada con 5000 cartones de un litro por hora. Se puede
asumir que el jugo tiene las mimas propiedades que el agua. Se ha calculado que el mnimo numero de
Reynolds necesario para una buena homogenizacin del fluido debe ser 100,000. Qu largo y que
dimetro de tubo se necesita?
Cul es la presin mnima necesaria en la tubera para asegurarse que no hierva el fluido?
Viscosidad del jugo: 2.5 10-4 kg/m/s (=N s/m2)
3. Se va a esterilizar leche en un proceso continuo para eliminar la bacteria TB. La planta opera 10hr/da,
procesa 20,000 litros de leche por da y se puede asumir que todo se embasa en cartones de 500 ml. La
TB bovina es lo suficientemente riesgosa que se necesita menos de 1 cartn en 10,000,000 que este
infectado con la bacteria. Anlisis muestran que se encuentra la bacteria en una concentracin de 1000
bacterias por ml en la leche cruda. La leche se va a mantener a 72C y la constante de muerte del TB a esa
temperatura es de 3 min-1. Si asumimos que se mantiene un numero de Reynolds de 50,000 para una
transferencia de calor efectiva y ensuciamiento mnimo. Cul es el largo y el dimetro recomendado?
4. Se puede usar radiacin de una fuente de Cobalto 60 para esterilizar sistemas. La relacin entre la dosis
total recibida (d, en unidades de Gray (Gy) equivalente a 1 J absorbido por kg) y la fraccin de clulas
que sobreviven, Sf es la siguiente:

Se planea usar esta tecnologa en sachets plsticos de comida. La empresa manufacturera cree que el
conteo total de clulas por sachet cuando se cierra no excede 10 4 por sachet. La empresa manufacturera
no quiere ms de 1 sachet en 1000 que resulte contaminado. Qu dosis de radiacin necesita recibir cada
paquete?
Por un error en la empresa cada sachet recibi solo 10 Gy, cual es la probabilidad que un sachet salga
contaminado?
=1 cGy-1 =10 cGy-2

Cintica microbiana
1. Un CSTR (reactores continuos perfectamente agitados) ha sido llevado a condiciones estacionarias para
varias tasas de dilucin usando un flujo de entrada constante con una concentracin de 0.5 mg/ml.
Determinar si esta informacin sigue cintica de Monod, del ser as determinar los parmetros de la
ecuacin de Monod. El reactor tiene un volumen activo de 10 dm 3.
Flujo

Sustrato

Clulas

Flujo

Sustrato

Clulas

m3/s

mg/ml

/ml

m3/s

mg/ml

/ml

0.0429
0.0667
0.100
0.150
0.233

320000
303300
280000
245000
186700

-7

110
210-7
510-7
110-6
210-6

0.00101
0.00204
0.00526
0.0111
0.0250

349000
348600
346300
342200
332500

-6

310
410-6
510-6
610-6
710-6

Determinar el coeficiente de rendimiento de clulas/sustrato y aproximar el flujo al cual el lavado del

tanque ocurrir.
2. Se ha decidido hacer cerveza en un proceso continuo. Una levadura Saccharomyces a sido seleccionada
para que crezca con glucosa como el sustrato limitante. Se ha determinado que la velocidad de
crecimiento mximo para la levadura es de 0.5 hr-1 y la constante de saturacin es 25 mg/dm3. El
coeficiente de rendimiento para la levadura es de 10 5 clulas/mg, y el coeficiente de rendimiento para
producir etanol de glucosa es de 0.2 mg EtOH/ mg glucosa.
Disear un reactor que producir aproximadamente 1 m 3 de cerveza por da a un grado alcohlico de
4.5%v/v alcohol (aproximadamente 36 mg/ml) y con un contenido de azcar por debajo de 10 mg/dm 3.
Asumir que no hay prdidas en el embotellado y dems procesos despus de la fermentacin
(downstream).
Qu volumen activo necesita el reactor?
Cul concentracin de entrada de glucosa se debe usar?
Cul va a ser la concentracin de clulas en la cerveza cruda del reactor?
Cul va a ser la tasa de dilucin expresada como un porcentaje de la tasa de dilucin en lavado
(washout)?

3. Un simple experimento de bacteria aerbica en un fermentador batch que crece en metanol da los
siguientes resultados:
Tiempo (h)
0
2
4
8
10
12
14
16
18

Cn (g/L)
0.2
0.211
0.305
0.98
1.77
3.2
5.6
6.15
6.2

Cs (g/L)
9.23
9.21
9.07
8.03
6.8
4.6
0.92
0.077
0

Calcular:
a. max
b.yx/s
c. Tiempo de duplicacin (td) tiempo en el que se duplica la cantidad de clulas
d. Constante de saturacin (ks)
e. cuando t=10 h

4. Durante la fase estacionaria la clula cataboliza las reservas intracelulares para su mantenimiento. Esto
es llamado metabolismo endgeno. Por tal razn las siguientes ecuaciones representan la prdida de masa
celular consumida en este metabolismo o tambin la prdida de masa celular por lisis de la clula durante
la fase estacionaria:

4.La siguiente informacin fue obtenida para determinar el efecto de la temperatura en la produccin
fermentativa de cido lctico por medio de Lactobacillus delbrueckii. De esta informacin calcular el
valor de la energa de activacin del proceso. Es este valor tpico o no para este tipo de conversin
biolgica?
Temperatura (C)
40.4
36.8
33.1
30.0
25.1

Constante de velocidad
(mol/Lhr)
0.014
0.0112
0.0074
0.0051
0.0036

5. Un ingeniero bioqumico a determinado en su laboratorio que la productividad ptima de un antibitico

cotizado industrialmente se obtiene cuando el nutriente de carbono, en este caso melasa, es alimentado al
fermentador a una tasa proporcional a la tasa de crecimiento. Sin embargo, no puede implementar su
descubrimiento en la planta de antibitico pues no hay una forma confiable de medir la tasa de
crecimiento (dCn/dt) o la concentracin de biomasa (Cn) mientras la fermentacin est en curso. Se
sugiere que un analizador de oxgeno se instale en los fermentadores para que el OUR (tasa consumo de
oxgeno, g/L hr) sea medido.
a. Derivar una serie de expresiones que se puedan usar para aproximar C n y dCn/dt usando la informacin
de OUR y tiempo, asumiendo que un modelo simple de rendimiento y mantenimiento se pueda usar para
describir la tasa de consumo de oxgeno.
b. Calcular valores de rendimiento (
) y mantenimiento (
) de la siguiente informacin:
Tiempo
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21

OUR (g/hr)
0.011
0.008
0.084
0.153
0.198
0.273
0.393
0.493
0.642
0.915
1.031
1.12
1.37
1.58
1.26
1.58
1.26
1.12
1.20
0.99
0.86
0.90

Cn (g/L)
0.60
0.63
0.63
0.76
1.06
1.56
2.23
2.85
4.15
5.37
7.59
9.40
11.40
12.22
13.00
13.37
14.47
15.37
16.12
16.18
16.67
17.01

6. Pseudomonas sp. tiene un tiempo de duplicacin de 2.4 hr cuando crece en acetato. La constante de
saturacin usando este sustrato es 1.3 g/L (inusualmente alto) y el rendimiento de clulas con acetato es
0.46 g cell/g acetato. Si se opera un quimiostato con un flujo de entrada que contiene 38 g/L de acetato
encontrar:
a. Concentracin de clulas cuando la tasa de dilucin es la mitad del mximo
b. Concentracin de sustrato cuando la tasa de dilucin es 0.8 D max
c. Tasa de dilucin mxima
d. Productividad de la clula a 0.8 Dmax

Cintica encimtica
1. Considere la siguiente reaccin:

Desarrolle una expresin apropiada de la tasa de formacin de producto (v=ks(CES)2) usando

a) asuncin de equilibrio instantneo
b) asuncin de rES=0

2. Considere la reaccin reversible de formacin de producto por medio de una reaccin catalizada por
enzimas.

Usando las mismas asunciones de Briggs Haldane, derive una expresin para la tasa de formacin de
producto y demuestre que

en la cual

3. La enzima fumarasa tiene las siguientes constantes cinticas:

a. Cul es el valor de la constante de Michaelis para la encima?

b. A una concentracin de enzima de 10 -6 M, cul sera la tasa de formacin de producto inicial a una
concentracin de sustrato de 10-3 M?