Manual Lab. Bqi - 2023

LABORATORIO BIOQUÍMICA I
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1
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CALENDARIZACIÓN DE PRÁCTICAS DEL LABORATORIO
NO. DE
NOMBRE DE LA PRÁCTICA FECHA
PRÁCTICA
0 NORMAS DE LABORATORIO 09-13 DE ENERO
1 MANEJO DE SOLUCIONES FISIOLÓGICAS 16-20 DE ENERO
2 USO DE POTENCIÓMETRO 23-27 DE ENERO
3 RELACIÓN ENTRE ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE UNA PROTEÍNA 30 ENERO-3 DE FEBRERO
4 MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE MONOSACÁRIDOS Y ALMIDÓN 6-10 DE FEBRERO
HT HOJA DE TRABAJO 13-17 DE FEBRERO
PRIMER EXAMEN PARCIAL TEORÍA 20-24 FEBRERO
5 PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS DEL ALMIDÓN 27 FEBRERO-3 MARZO
6 IDENTIFICACIÓN DE PENTOSAS Y CETOSAS 6-10 DE MARZO
EXAMEN PARCIAL LABORATORIO 13-17 DE MARZO
7 INTRODUCCIÓN A LA ESPECTROFOTOMETRÍA 20-24 DE MARZO
CC CASO CLÍNICO NO. 2 27-31 DE MARZO
SEMANA MAYOR 3-7 DE ABRIL
CC CASO CLÍNICO NO. 2 10-14 DE ABRIL
SEGUNDO EXAMEN PARCIAL TEORÍA 17-21 DE ABRIL
8 DETERMINACIÓN DE GLUCOSA SANGUÍNEA 24-28 DE ABRIL
9 CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA 2-5 DE MAYO
10 HEMOGLOBINA GLUCOSILADA 8-12 DE MAYO
ACT INTEGRACIÓN DEL METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS 15-19 DE MAYO
EXAMEN FINAL DE LABORATORIO 22-26 DE MAYO
ENTREGA Y REVISIÓN DE ZONAS DE LABORATORIO 29 MAYO –2 DE JUNIO
EXÁMENES FINALES 5-9 DE JUNIO
EVALUACIÓN DE RECUPERACIÓN 14-17 DE JUNIO
* PRÁCTICAS EN COLOR ROJO SON PRESENCIALES
2
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INDICE
NUESTROS VALORES 4
Practica No. 0 5
INTRODUCCIÓN AL TRABAJO DENTRO DEL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA NORMATIVA DE COMPORTAMIENTO
Y DE TRABAJO 5
Práctica No. 1 12
Manejo de Soluciones Fisiológicas 12
Practica No. 2 15
Uso del potenciómetro para medición del pH 15
Practica No. 3 17
Relación entre estructura y función en una proteína 17
Practica No. 4 20
Métodos de identificación de monosacáridos y almidón 20
Practica No. 5 22
Propiedades físicas y químicas del almidón 22
Practica No. 6 24
Identificación de Pentosas y Cetosas 24
Practica No. 7 28
Introducción a la Espectrofotometría y Curvas de calibración 28
Practica No. 8 38
Determinación de glucosa en muestra sanguínea 38
Práctica No. 9 41
Curva de tolerancia a La glucosa 41
Práctica No. 10 43
Prueba de la Hemoglobina Glucosilada (HbA1) como control del nivel de glucosa en sangre 43
3
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NUESTROS VALORES
Integridad
Respeto
Actuar
Profesional
Espíritu de Nuestros Valores

servicio
Excelencia
Ciudadanía
Innovación
4
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Practica No. 0
INTRODUCCIÓN AL TRABAJO DENTRO DEL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
NORMATIVA DE COMPORTAMIENTO Y DE TRABAJO
Introducción
Trabajar dentro de un laboratorio de cualquier índole supone un grado de responsabilidad del cual
muchos estudiantes no están conscientes. Es necesario que cualquier persona que se encuentre dentro de
las instalaciones del laboratorio sepa comportarse de forma adecuada. Un mal comportamiento no
solamente tendrá implicaciones disciplinarias, sino podría también tener serias implicaciones de salud y
seguridad. Es absolutamente necesario que tanto el instructor como el estudiante que trabaja dentro del
laboratorio sepan que una acción fuera del comportamiento adecuado puede desencadenar un serio
accidente que puede afectar tanto la salud y seguridad propia como la de los demás. Para evitar este tipo
de situaciones, se ha diseñado una práctica de introducción para dar a conocer al estudiante lo que se
espera de él o ella durante el transcurso de los laboratorios.
Se dará a conocer al estudiante varios documentos que incluyen las reglas generales de comportamiento
dentro del laboratorio. La siguiente semana se hará una prueba corta escrita sobre el contenido de estos
documentos y se evaluará también el cumplimiento de los reglamentos expuestos.
Objetivos
Que el estudiante:
1. Conozca la responsabilidad que adquiere al trabajar en del laboratorio de Bioquímica I.

2. Conozca el trabajo que se espera de él o ella antes, durante y después de realizarse un laboratorio
de Bioquímica
3. Se comprometa con los Laboratorios del Instituto a guardar compostura tanto en su rendimiento
académico como en su comportamiento personal, de manera que pueda obtener el mayor provecho
de su experiencia en el laboratorio.
Alcance
Que el estudiante:
1. Conozca la forma de trabajo y evaluación dentro del laboratorio

2. Esté consciente de las consecuencias de su calidad de trabajo en el laboratorio.
3. Conozca a cabalidad los aspectos que se tomarán en cuenta en la evaluación del laboratorio como
parte del curso de Bioquímica.
5
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Reglamento para el estudiante
Para que un estudiante tenga derecho a participar en las sesiones del Laboratorio de Bioquímica, debe
cumplir con las siguientes reglas:
1. Estar inscrito en el curso teórico de Bioquímica I.

2. Guardar un comportamiento adecuado en las actividades virtuales y presenciales del laboratorio,
adhiriéndose completamente al REGLAMENTO DEL LABORATORIO establecido. El faltar al buen seguimiento
de las normas tiene consecuencias que pueden llegar hasta el retiro definitivo del laboratorio.
3. Asistir al laboratorio de manera PUNTUAL. El alumno que no se presente puntualmente a la puerta del
laboratorio, perderá el derecho de presentar examen corto. El alumno que se presente después de
haberse presentado las instrucciones para el laboratorio, perderá el derecho de ingresar a la práctica.
4. De no asistir o participar en una práctica, el alumno pierde automáticamente el derecho a presentar
todos los componentes de la nota de esa práctica, teniendo un cero inmediato. Sin embargo, si el
alumno justifica su ausencia (razones médicas o por luto) con reconocimiento y autorización de
Coordinación de la carrera, la nota de ese laboratorio será eliminada del promedio para obtener la nota
final. Independientemente que su ausencia sea justificada o no, es responsabilidad del alumno ponerse
al día con el contenido de la práctica perdida.
5. Haber cumplido con las tareas preparativas de cada práctica, las cuales incluyen, pero no se limitan a,
una lectura a conciencia de la práctica y cualquier investigación previa que se haya solicitado (ya sea
escrita o no). Se practicará un examen corto al inicio o durante la práctica para asegurar que el alumno
conoce el tema a tratar. Queda a discreción del instructor permitir la participación de un alumno que
evidentemente no maneja el conocimiento previo requerido.
6. Utilizar su equipo de protección personal todo el tiempo que se encuentre dentro de las instalaciones
del laboratorio. Como equipo de protección personal se incluye: bata larga (siempre cerrada), de
manga larga, sin bolsas en los costados y deberá contar con su respectivo nombre y logo de la
Universidad, mascarilla, anteojos de seguridad y zapatos cerrados. El no cumplir con esta regla es causa
justificada para retirar a un alumno del laboratorio del día, perdiendo el derecho a presentar examen,
práctica y reporte. De reincidir, el alumno incluso puede ser retirado definitivamente de laboratorio.
7. No llevar consigo bolsas, mochilas ni artículos de uso personal (celulares, localizadores, joyas etc.). De
descubrirse que un alumno porta consigo una de estas pertenencias, ésta se confiscará y se devolverá
al final de la práctica. No utilice su teléfono móvil como calculadora; lleve la propia. El laboratorio no
se hace responsable de guardar ninguna pertenencia personal de los alumnos durante la práctica. Es
responsabilidad del estudiante asegurar sus pertenencias personales ANTES de llegar al laboratorio.
• Trabajo antes de llegar al laboratorio: El Pre-Lab
El laboratorio es un lugar donde nunca debe llegarse a improvisar. Es necesario asegurar que el
estudiante esté familiarizado con el tema a tratarse en el laboratorio, así como con el procedimiento que
se seguirá. Como ayuda al estudiante, se ha diseñado un cuestionario que llamaremos Pre-lab. Responder
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el Pre-lab a conciencia tiene la ventaja de ayudar a un mejor rendimiento para el examen corto que se
realizará en cada práctica al inicio de la misma.
El Pre-lab es un cuestionario que queda bajo la responsabilidad del estudiante el resolver a conciencia
para asegurarse que se comprenderá el trabajo que se va a realizar durante el laboratorio. La resolución
escrita del Pre-Lab deberá entregarse al Instructor antes de empezar la práctica del día.
Para la presentación del Pre-Lab se deberá incluir:

- Cuestionario
- Referencias Bibliográficas
• Trabajo dentro del Laboratorio
Como se indicó anteriormente, se espera que el estudiante haga su mejor esfuerzo para aprovechar al
máximo las actividades que se proponen en el laboratorio. El trabajo que se realice durante del laboratorio
deberá ser registrado por cada estudiante a manera de poder comprobar qué se hizo, cómo se hizo y cuándo
se hizo. Luego de comprender lo solicitado como parte de la práctica el alumno deberá realizar a cabalidad
dichas actividades.
o Examen Corto
Al inicio, durante o al final de cada laboratorio se realizará un examen corto que evidenciará el
conocimiento con el que se preparó el estudiante para la práctica. El alumno pierde el derecho a esta
prueba si no se presenta a las actividades programadas para el laboratorio
o Formato de resultados y anotaciones (prácticas presenciales)

Este está diseñado para cumplir con evidencia del trabajo que se ha realizado durante cada práctica de
laboratorio. Lo más valioso es el contenido pues de ello dependerá la apropiada comprensión, análisis y
discusión de los resultados, que deberán ser plasmados en los reportes o actividades de entrega que se
soliciten al final de cada práctica.
Un formato que no puede leerse simplemente no tiene validez alguna, por lo que se espera que el
estudiante tenga un cuaderno tan ordenado como sea posible, y sobre todo, legible. No se permitirá el uso
de lápiz o de corrector en el mismo.
El estudiante será responsable de llevar impreso al menos 3 hojas del formato para poder registrar la
información obtenida durante la realización de los procedimientos de la práctica.
• Trabajo posterior al laboratorio

La principal forma de evaluación del trabajo hecho durante el laboratorio, así como la comprensión
obtenida después de realizado el laboratorio, es la elaboración de documentos solicitados o un reporte del
mismo. En estos de evidencia el nivel de comprensión y la calidad del trabajo realizado por el estudiante.
Si la evidencia solicitada consiste en un reporte, este deberá cumplir con las siguientes condiciones:
o Reporte del Laboratorio

El reporte de laboratorio tiene doble función: permite al estudiante entrenarse en el arte de la escritura
científica y le brinda la oportunidad de demostrar qué tanto aprendió durante la realización de la práctica.
Para presentar un buen reporte de laboratorio, el estudiante debe esforzarse en varios aspectos. Primero,
debe asegurarse que el contenido del reporte sea acorde al tema que se trató en el laboratorio. Segundo,
7
2,023
es necesario que muestre tanto una buena redacción como una buena ortografía. Como futuros médicos,
es importante que los estudiantes ejerciten su habilidad de escribir bien, ya que forma parte de la buena
formación de todo profesional.
El reporte debe contener las siguientes secciones:
Sección Contenido Valor1

Carátula Debe llevar claramente toda la información de identificación --
del estudiante y de la práctica
Resumen o Sumario Como su nombre lo dice, debe resumir lo realizado durante 10
la práctica, incluyendo el o los principales resultados y
conclusiones. No debe cubrir más de 10 líneas de escritura.
Datos, Cálculos y Debe presentar de la manera más ordenada posible, los 20
Resultados datos, cálculos y resultados obtenidos en la práctica. De
preferencia, debe hacerse en tablas de fácil lectura, a
manera que alguien que no haya estado en el desarrollo de
la práctica pueda entenderlo con facilidad.
NO se aceptan datos, cálculos y resultados escritos a mano.
De presentarlos así, se calificará con un cero esta sección.
Es la sección en donde el estudiante puede poner en práctica 30
Discusión de el aprendizaje que haya obtenido. Debe discutirse posibles
resultados fuentes de error y posibles formas de mejorar la ejecución y
el rendimiento de la práctica. No se trata de culpar a nadie
por los errores cometidos, sino más bien buscar las
soluciones para evitarlos en futuras ocasiones.
Conclusiones Como regla, no se puede concluir teoría ni un asunto que no 20
haya sido incluido en la discusión. Es necesario haber
discutido un punto para poder concluir al respecto
Anexos Debe incluir cualquier dato, cálculo, tabla, gráfica, imagen o 10
información que apoye lo que discute. Deberá ser citado
apropiadamente en la discusión, de no ser así obtendrá 0
pts.
De no existir anexos pertinentes o solicitados, la nota se
añadirá a los puntos de la discusión de resultados.
Bibliografía Numeradas y escritas en formato VANCOUVER. 10
Nota total del reporte de laboratorio 100
1Valor: Algunos rubros no tienen valor asignado, ya que su presencia no agrega puntos de nota al laboratorio. Sin
embargo, su ausencia sí resta puntos de la nota.
Formato para entregar el REPORTE DE LABORATORIO:
• Hojas tamaño carta.

• Fuente: Calibri 11.
• Interlineado sencillo (1.0).
• Entrega en formato PDF.
• Título de las tablas “Entre comillas”.
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2,023
• Fuente de los datos obtenidos, Calibri 8.

• Las conclusiones, se deben escribir con viñetas.
• Si incluye imágenes en la sección de ANEXOS debe colocar el número de la figura, nombre y
fuente.
El reporte o documento solicitado como evidencia de la realización de las actividades de laboratorio

debe ser entregado en el espacio asignado en plataforma y durante el período de tiempo indicado. No se
recibirán documentos por otras vías, como correo electrónico o mensajes personales, así como no se
recibirán fuera del tiempo asignado.
Toda aquella persona que se haya ausentado por cualquier motivo de una práctica, NO TIENE DERECHO
a entregar un reporte, sin importar si la falta ha sido justificada o no. De ser justificada, la nota de dicho
laboratorio se eliminará, a manera de no ser tomada en cuenta en el cálculo de la nota final. Sin embargo,
esto no quiere decir que el estudiante se libere de la evaluación del tema de la práctica durante las pruebas
finales del laboratorio del curso. ES RESPONSABILIDAD DEL ALUMNO investigar el tema tratado durante la
práctica que faltara, independientemente si la falta ha sido justificada o no.
IMPORTANTE: NO se tolerará ningún tipo de copia en los reportes de laboratorio, entre grupos del
mismo laboratorio o entre grupos de otras secciones del curso. Cualquier indicio de plagio (reproducción
no autorizada de una publicación, palabra por palabra, incluyendo Internet) será castigado con una nota de
cero en el reporte. Cualquier indicio de copia (entrega de reportes idénticos por parte de dos o más
alumnos o grupos) será evaluado como un cero para todos aquellos estudiantes que tengan el reporte igual
o con similitudes evidentes, sin importar quién lo generó ni quién lo copió. Todo caso quedará
documentado, y una reincidencia puede significar el retiro definitivo del o los alumnos involucrados del
laboratorio del curso.
Evaluación de todo el trabajo del laboratorio
El trabajo de Laboratorio se evaluará de la siguiente manera:
Rubro por evaluar Puntaje
Pre-laboratorios 1 pt.
Exámenes cortos 4 pts.
Reportes de laboratorio 5 pts.
Hojas de trabajo 1 pt.
Casos clínicos 2 pts.
Actividad 1 pt.
Examen parcial de Laboratorio 2.5 pts.
Examen final de Laboratorio 3.5 pts.
Nota Total de Laboratorio 20 pts.
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Las actividades que se entreguen deberán de ir debidamente identificadas de la siguiente manera:
UNIVERSIDAD MARIANO GÁLVEZ

FACULTAD DE MEDICINA
BIOQUIMICA I
SECCIÓN
NOMBRE DE ALUMNO CARNÉ NÚMERO DE PUESTO
NUMERO DE LA PRACTICA
NOMBRE DE LA PRACTICA
---------------------------------------------------INFORMACIÓN SOLICITADA-------------------------------------------------
--
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2,023
FORMATO DE RESULTADOS Y ANOTACIONES
NOMBRE: CARNET:
SECCIÓN: FECHA:
NO. PRÁCTICA: TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
RESULTADOS Y ANOTACIONES
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REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

MODIFICADO POR: LICDA. NANCY DEL CID, LICDA. LUISA FERNANDA LEMUS
Práctica No. 1 -PRESENCIAL-

Manejo de Soluciones Fisiológicas
Introducción
Existe una gran variedad de formas de expresar la concentración de una solución. Sin embargo, las
formas comunes de hacerlo también cambian de una ciencia a otra. Es decir, las formas más comunes de
indicar concentraciones no son iguales en un laboratorio de análisis químico que en un laboratorio clínico.
El médico debe estar preparado para identificar estas diferencias en expresión para poder darle una
correcta interpretación a cualquier medición que se le presente, ya sea de un análisis químico (como un
análisis de algún fármaco) o de un análisis clínico (de un paciente).
Antecedentes
Una solución puede definirse como una mezcla homogénea de una o más sustancias dispersadas dentro
de un medio disolvente. El componente de mayor proporción es quien actúa como solvente (también
llamado disolvente), mientras que los que se encuentren en menores proporciones (puede ser uno o más)
son los llamados solutos. Las propiedades de la solución no dependen tanto del tamaño de las moléculas
sino de la cantidad de ellas presentes en una cantidad específica de la solución.
En el ámbito clínico médico se hace uso de diferentes tipos de soluciones, cuyos usos son tan diversos como
la rehidratación o suplementación de componentes bioquímicos de los cuales el paciente presente una
deficiencia. Algunas soluciones son necesarias para la adecuada administración de medicamentos.
Pre-laboratorio
1. Investigue la composición de la solución de Hartman.
2. Haga un cuadro comparativo sobre los diferentes tipos de sueros de rehidratación oral. Incluya:
a. el nombre del tipo de suero,
b. su composición
c. los casos en los que puede ser utilizado.
3. Investigue las diferentes formas de dosificación de medicamentos en cuanto a volumen,
especialmente para niños, y su conversión a mililitros (onzas, cucharaditas, gotas, etc.)
4. ¿Qué es una solución fisiológica y que se refieren con eso?
5. Calcule la normalidad de una solución de 1L con 0.7 g de NaCl
6. En Guatemala se expresa la concentración de glucosa en sangre como mg/dL, mientras que en otros
países es milimoles/L. ¿Cuál es el valor normal de glucosa en sangre en milimoles/L?
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PRÁCTICA DE LABORATORIO
Materiales
a. Reactivos
− Dextrosa (Glucosa), grado reactivo
− Agua destilada
b. Cristalería
− Probeta de 10mL y 50mL
− Beaker de 150 mL
− Varilla de vidrio
− Vidrio de reloj
− Balón aforado de 1L
c. Instrumentación
− Papel parafinado
− Espátula para pesar
− Pizeta con agua destilada
− Taza (dos tazas caseras por grupo, proporcionado por los estudiantes)
− Pacha de plástico con graduación (dos por grupo, proporcionado por los estudiantes)
− Cucharita de café de uso casero (dos por grupo, proporcionado por los estudiantes)
− Cuchara sopera de uso casero (dos por grupo, proporcionado por los estudiantes)
− Cuchara medidora para dosificación pediátrica (una por grupo, proporcionado por los
estudiantes)
Procedimiento
I. Preparación de soluciones: Dextrosa al 5%

- Calcule el peso de dextrosa que usará para preparar 50 mL de una solución de dextrosa al 5%.
- Prepare su vidrio de reloj, tárelo (¿qué significa tarar?) y obtenga la cantidad calculada de dextrosa.
- Disuélvala en el beaker de 100 mL, asegurándose de no sobrepasar los 50 mL.
- Transfiera la solución resultante al balón aforado de 50 mL y afórelo (llenar con agua destilada hasta
la marca en el cuello del balón).
- Determine cuantas calorías contiene esta solución.
II. Preparación de SRO

- Se seleccionará una taza de cada fila y se llenará el pichel o recipiente con 1L de agua del chorro.
- Adicionar el sobre y mezclar con varilla de vidrio
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2,023
- Transfiera la solución al balón aforado de 1L y determine si necesita más agua o tiene exceso.
- Realice el mismo procedimiento con la otra taza
- Anote sus observaciones
III. Comparación de utensilios caseros con no caseros

- Con agua destilada comparar los volúmenes de:
• 1 onza de la pacha de plástico y transfiérala a la probeta de 50mL, mida y reporte.
• 1 Cucharadita obtenida de la cucharita de uso casero y transfiérala a la probeta de 10 mL, mida
y reporte.
• 1 Cucharada obtenida de la cuchara de uso casero y transfiérala a la probeta de 50 mL, mida y
reporte.
• 1/2 Cucharadita obtenida de la cucharita de dosificación pediátrica y transfiérala a la probeta de
10 mL, mida y reporte.
• 1 Cucharadita obtenida de la cucharita de dosificación pediátrica y transfiérala a la probeta de
10 mL, mida y reporte.
Bibliografía de referencia
1. Burtis, C. A. y E. R. Ashwood. 2001. Fundamentals of Clinical Chemistry. 5ª. Edición. W. B.
Saunders Company. pág. 16-18
2. Kaplan, L. A. y A. J. Pesce, S. C. Kazmierczak. 2003 Clinical Chemistry. Theory, Analysis, Correlation.
4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 34-36
3. Nordmann, J. 1986. Análisis Cualitativo y Química Inorgánica. México. Compañía Editorial
Continental, S. A. de C. V. pág. 33-44
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MODIFICADO POR: LICDA. NANCY DEL CID
Practica No. 2
Uso del potenciómetro para medición del pH
Introducción
Las mediciones de pH en algunos fluidos corporales son de gran ayuda en el diagnóstico de
enfermedades. En algunos fluidos es normal y deseable poseer un pH ácido mientras que en otros, pH
neutro o hasta básico. Un médico debe comprender a cabalidad el significado del valor del pH no solamente
como herramienta de diagnóstico, sino para comprender el proceso metabólico que puede estar
provocando la alteración de este valor, así como la forma correcta de tratarlo y corregirlo. En esta práctica
se pretende reforzar el concepto de pH y de mostrar al alumno la forma como se determina el pH de una
solución y las causas de su desviación, usando un ejemplo similar al utilizado en el control del pH en sangre
a través del proceso de respiración.
Antecedentes
Debido a que el agua es el medio de los sistemas biológicos, es indispensable considerar el rol de esta
molécula en disociación de iones de las moléculas biológicas. Aunque el agua es en esencia una molécula
neutra, se ioniza en una pequeña proporción. Esta disociación puede describirse con una ecuación de
equilibrio simple:
H2O ↔ H+ + OH
Expresar la concentración de hidrógenos en una solución puede ser tediosa, ya que las concentraciones
posibles cubren un amplio rango. Una forma sencilla de hacerlo es expresando en forma de pH, el cual se
define como sigue:
pH = -log[H+]
Los ácidos pueden definirse como donadores de protones, mientras que las bases pueden considerarse
aceptores de protones. En términos de pH, los ácidos poseen valores de pH por debajo de 7.0, mientras
que las bases lo poseen por encima del mismo valor. Los ácidos y bases fuertes se disocian por completo
en medio acuoso, formando un grupo de átomos con carga positiva (cationes) y otro con carga negativa
(aniones); por el contrario, los ácidos y bases débiles se ionizan levemente produciendo un equilibrio entre
la especie molecular neutra y los iones producidos. Debe notarse que, al estar en este equilibrio, el pH de
la solución que contiene la especie no cambia, aunque se agreguen volúmenes relativamente grandes de
ácido o base. Este fenómeno se conoce como amortiguación y es de suma importancia en los sistemas
bioquímicos del cuerpo humano. En la mayoría de estudios bioquímicos, es importante realizar los
experimentos que requieren el consumo de iones H+ u OH- en una solución de un agente amortiguador que
posee un pH de equilibrio (también conocido como pK) muy cercano al pH óptimo para el experimento.
Un ejemplo: amortiguación en la sangre

El valor del pH en la sangre se mantiene dentro de un rango muy limitado alrededor de 7.4. Aún cambios
relativamente pequeños desde este valor pueden causar graves consecuencias metabólicas. Por lo tanto,
el organismo recurre a amortiguación para mantener la homeostasis. Aunque la sangre contiene muchos
tipos de cationes (Na+, K+, Ca2+ y Mg2+) y aniones (Cl-, PO43- y SO42-) que pueden actuar en la amortiguación,
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2,023
los principales amortiguadores de la sangre son la hemoglobina en los eritrocitos y el ion bicarbonato en el
plasma. En el caso de la hemoglobina, la amortiguación se logra por la ionización de los anillos imidazol de
las histidinas dentro de la proteína.
La formación del ion bicarbonato a partir de CO2 y H2O permite la transferencia del CO2 relativamente
insoluble de los tejidos a los pulmones, donde se expulsa. La principal fuente de CO2 en los tejidos es la
oxidación de los compuestos de carbono ingeridos. La relación entre el ácido carbónico y el ion bicarbonato
formado se muestra en las siguientes ecuaciones.
CO2 + H2O ↔ H2CO3 ↔ H2CO3 ↔ H+ + HCO3-
Estas reacciones ocurren principalmente dentro de los eritrocitos, ya que casi todo el CO 2 que deja los
tejidos por medio del endotelio capilar es atrapado por estas células. La primera reacción está catalizada
por la enzima anhidrasa carbónica. La ionización del ácido carbónico luego ocurre de forma espontánea,
produciendo el ion bicarbonato más un ión hidrógeno.
Potenciometría
Se conoce como potenciometría a la medición de una diferencia de potencial eléctrico entre dos
electrodos. Estas mediciones se hacen a través de un electrodo, el cual forma parte de un aparato mayor
llamado potenciómetro. Existen varias clases de electrodos, según el parámetro que desea medirse.
Usando un potenciómetro puede medirse, por ejemplo, la concentración de iones, tales como calcio, sodio,
potasio e hidrógeno. En el caso de las mediciones de pH, el electrodo que se utiliza es especial, ya que
detecta únicamente concentración de iones hidrógeno (H+).
Los electrodos sensibles a concentraciones de iones hidrógeno están fabricados de un tipo especial de
vidrio, con un grosor generalmente de 10 a 100 µm. La sensibilidad de este vidrio varía con la temperatura,
por lo cual es importante realizar las mediciones de pH a una temperatura constante. Usualmente, el vidrio
se fabrica en forma de bulbo para medir pH en soluciones y en forma plana para medir pH en superficies.
El caso especial de realizar mediciones de pH en sangre requiere electrodos especiales conocidos como
electrodos de capilar.
Pre-laboratorio
1. ¿Cuál es el pH normal en una muestra de orina? ¿De una muestra de sangre?
2. ¿De qué depende el valor del pH de una solución?
3. ¿Cómo ayuda la anhidrasa carbónica a mantener constante el pH de la sangre?
4. Investigue cuál es la importancia del control de pH tanto en orina como en sangre.
4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 110-112
3. King, M. W. 2004 “Ionic Equilibria Review” THE Medical Biochemistry Page. Indiana University
School of Medicine. Last Modified October 27, 2004.
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Practica No. 3 -PRESENCIAL-
Relación entre estructura y función en una proteína
Introducción
La relación entre la estructura de una proteína y la función que ejerce es directa. Cualquier alteración
que una proteína tenga en su estructura se traduce en una alteración en su función. Algunas alteraciones
son bastante evidentes, y otras más sutiles, pero siempre se da. En la presente práctica se pretende ilustrar
el efecto de la pérdida de estructura (mediante desnaturalización) en la actividad de dos enzimas bien
conocidas.
Antecedentes
Las proteínas son moléculas altamente complejas y difíciles de visualizar incluso en sus versiones más
simples. Se ha utilizado esquemas que resalten ciertas características para poder comprender mejor la
función de cada proteína. Una de las funciones más importantes de las proteínas en el organismo es el de
catalizar reacciones que mantienen el delicado equilibrio de la vida. Como es el caso de todas las proteínas,
un cambio en su estructura a cualquier nivel puede significar una alteración significativa en la función que
lleva a cabo dentro del organismo. En el caso específico de las enzimas, un cambio en cualquier nivel de la
estructura significa la incapacidad de catalizar una reacción, haciendo que la misma no se lleve a cabo a la
velocidad requerida.
Las enzimas son polímeros biológicos que catalizan múltiples procesos, haciendo posible la vida que
conocemos. Tienen una importante participación en la salud y la enfermedad, ya que determinan la
velocidad a la que se lleva a cabo las reacciones en el organismo y, por ende, los procesos fisiológicos.
Pre-laboratorio
1. Investigue la forma cómo actúa la catalasa y la amilasa en el organismo. Explique detalladamente
las reacciones que catalizan y su importancia para nosotros.
2. Indique claramente en qué tejidos humanos se encuentran y qué función cumplen dentro del tejido
mencionado.
3. ¿Qué medios físicos pueden alterar la función y la estructura de una proteína?
Materiales
a. Reactivos
− HCl grado reactivo
− Solución de NaOH 40%
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− Solución saturada de sal de mesa

− Solución de Almidón al 0.5%
− Solución de Lugol
− Peróxido de hidrógeno, 10 volúmenes
− Trozos de hígado (proveído por grupo de estudiantes)
b. Cristalería
− Pipetas pasteur
− Beakers de 250 mL
− Tubos de ensayo
c. Instrumentación
− Gradilla para tubos de ensayo
− Estufa
− Baño de María con gradilla y a 37 °C
Procedimiento
I. Función de la catalasa
- Numere en su gradilla tubos de ensayo de 1 a 8, y coloque en ellos las siguientes muestras:
Tubo de Muestra
Ensayo
1 Agua destilada
2 Trozo de hígado fresco
3 Trozo de hígado congelado
4 Trozo de hígado congelado y descongelado
5 Trozo de hígado fresco con 20 gotas de agua y calentado en Baño
María (5 min)
6 Trozo de hígado fresco con 20 gotas de HCl
7 Trozo de hígado fresco con 20 gotas de NaOH al 40%
8 Trozo de hígado fresco con 20 gotas de NaCl saturada
- Agregue a cada tubo alrededor de un mililitro de peróxido de hidrógeno (o agua oxigenada).

Asegúrese de agregar el peróxido tubo por tubo, observando uno a uno el resultado. Importante: Si
lo agrega a todos a la vez, no podrá observar todos los resultados.
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II. Función de la amilasa

- Numere en su gradilla tubos de ensayo de 1 a 7, y coloque en ellos las siguientes muestras (Consejo:
piense en un limón al momento de obtener su muestra):
Tubo de Muestra
Ensayo
1 Agua destilada
2 Muestra de saliva
3 Muestra de saliva calentada en Baño María durante cinco minutos
4 Muestra de saliva con 20 gotas de HCl
5 Muestra de saliva con 20 gotas de NaOH al 40%
6 Muestra de saliva con 20 gotas de NaCl saturada
7 Agua destilada con 20 gotas de NaOH al 40%
- Agregue a cada tubo alrededor de un mililitro de solución de almidón al 0.5% e incube durante cinco
minutos a 37°C.
- Agregue una gota de Lugol a cada tubo.
Observaciones importantes
Explique en su reporte los resultados que observó, incluyendo el significado de las pruebas cualitativas
del agua oxigenada y del Lugol.
Anexo
1. Explique la función que tiene en nuestro organismo la catalasa y la amilasa.
2. Explique detalladamente las reacciones que catalizan y su importancia para nosotros
1. McKee, T., McKee, J. R. 2003. Bioquímica. La Base Molecular de la Vida. 3ª Edición, traducida de la
3ª Edición en inglés.
2. Murray, R., Mayes, P., Granner, D., Rodwell, V. 2001. Bioquímica de Harper. 15ª Edición en
español, traducida de la 25ª Edición en inglés
19
2,023
Practica No. 4
Métodos de identificación de monosacáridos y almidón
Introducción
Los monosacáridos son la fuente de energía más importante e inmediata del ser humano, por lo que son
uno de los componentes más comunes dentro de los componentes de la dieta usual. Algunos se encuentran
como tales, en su forma libre, mientras que otros se encuentran formando disacáridos y hasta polisacáridos.
Uno de los polisacáridos más útiles para la nutrición humana es el almidón, ya que está formado
enteramente por unidades de glucosa y es posible digerirlo enteramente, a diferencia de la celulosa. El
almidón, además de ser un alimento, también es utilizado dentro de algunos procedimientos químicos
como indicador de titulación gracias a su interacción con el yodo molecular. En esta práctica se presenta al
alumno los principales métodos de identificación de monosacáridos y del almidón para determinar su
presencia en varios alimentos.
Antecedentes
Los carbohidratos, que son las biomoléculas más abundantes de la naturaleza, se definen como
polihidroxialdeídos (aldosas) o polihidroxiacetonas (cetosas). Los carbohidratos más simples son unidades
conocidas como monosacáridos, tales como la glucosa o la fructosa. La unión de dos monosacáridos unidos
por enlaces glucosídicos forma un disacárido, como la sacarosa y lactosa. Cuando se unen más de dos
monosacáridos en cadena por medio de los mismos enlaces glucosídicos, se forma un polisacárido, tal como
el almidón, el glucógeno y la celulosa.
Los carbohidratos son la fuente principal de energía para el organismo, contribuyendo con 50 a 60% del
total de calorías usadas por el mismo. Los carbohidratos complejos son una mejor fuente de energía que
los azúcares simples refinados. En el adulto sano, los carbohidratos se almacenan como glucógeno,
principalmente en músculo y en el hígado. Además de ello, se ha descubierto que los carbohidratos
intervienen en procesos celulares importantes, tales como la unión entre células, la transducción de señales
y la endocitosis. Los carbohidratos también se encuentran como partes integrales de otras biomoléculas,
como glucoproteínas y glucolípidos. Algunos monosacáridos se encuentran formando parte de las
moléculas informativas principales, el ADN y el ARN.
Los carbohidratos que reducen los reactivos de Fehling o de Benedict y el reactivo de Tollens se conocen
como azúcares reductores. Todos los monosacáridos y la mayoría de disacáridos son azúcares reductores,
con la importante excepción de la sacarosa (azúcar de mesa) y la threalosa que no son reductores.
20
2,023
Figura No. 1 Prueba de Benedict
Figura No. 2 Reacción de Molish
Pre-laboratorio
1. Diferencie entre azúcar reductor y azúcar no reductor.
2. Indique la base bioquímica de las pruebas de Benedict para monosacáridos y de Lugol para almidón.
3. Indique las bases bioquímicas para la prueba de Molish
4. Describa como vería una prueba positiva para carbohidratos si usara la prueba de Molish, Benedict y
Lugol
4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 583, 697
2. Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Walter, P. 2002. Molecular Biology of the
Cell. 4ª. Edición. Garland Science.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?call=bv.View..ShowTOC&rid=mboc4.TOC&depth=10
español, traducida de la 25ª Edición en inglés.
21
2,023
Practica No. 5
Propiedades físicas y químicas del almidón
Introducción
El almidón es uno de los compuestos más importantes para el ser humano, ya que es la principal forma
de almacenamiento de energía en el reino vegetal, y por ende, la principal fuente de carbohidratos en
nuestra dieta. Es especialmente abundante en papas, el maíz, en las semillas y en todos sus derivados
(harinas, especialmente). Además, es muy fácil de digerir y de aprovecharse.
Antecedentes
La digestión del almidón ocurre debido a enzimas de hidrólisis especiales en un proceso complejo. El
almidón es un material semi-cristalino que se fabrica en varias partes de una planta. Industrialmente, la
fuente más importante del almidón comercial es el maíz, aunque también puede obtenerse de otras fuentes
importantes, tales como trigo, arroz, papa, entre otros.
Aunque el almidón está enteramente formado por unidades de glucosa, posee dos estructuras
principales: amilosa y amilopectina. La amilosa es un compuesto lineal compuesto por unidades de
α-glucosa. Estas subunidades de glucosa están unidas por un enlace conocido como enlace glucosídico
α(1→4), indicando que la unión se da entre el carbono 1 de una α-glucosa y el carbono 4 de la siguiente. La
amilopectina, en cambio, está formada además de los enlaces α-(1→4) de la amilosa, por enlaces α(1→6),
formando ramificaciones.
La amilosa es hidrolizada mediante la acción de una enzima específica, conocida como amilasa, presente
en la saliva (conocida como ptialina). Esta enzima se especializa en romper los enlaces α-(1→4)
característicos de la amilosa y también los enlaces glucosídicos alfa-1,4 de la amilopectina y da como
productos diversos carbohidratos de diferentes tamaños, debido a que la alfa-amilasa producida en las
glándulas salivales así como la alfa-amilasa producida en el páncreas es una endoamilasa, eso quiere decir
que rompe el almidón en su interior y sus productos pueden ser: glucosa, maltosa, maltotriosa, isomaltosa
y dextrinas. La alfa-amilasa salival dispone de muy poco tiempo para romper el almidón y por eso su acción
es muy corta en cambio la alfa-amilasa pancreática dispone de más tiempo para actuar sobre el almidón y
sus productos pueden ser moléculas más pequeñas como glucosa, maltosa e isomaltosa.
22
2,023
Sin embargo, cuando el almidón se hidroliza por acción de ácidos, se rompe en una serie de compuestos
intermedios.
Almidón → Amilodextrina → Eritrodextrina → Acrodextrina → Maltosa → Glucosa
Estos compuestos se caracterizan por dar un color diferente cada uno a las reacciones de identificación
de carbohidratos.
Pre-laboratorio
1. ¿Cuál es la importancia principal del almidón para el ser humano?
2. ¿Qué fuentes de almidón conoce usted y utiliza a diario?
3. ¿Por qué los seres humanos no guardamos almidón como reserva de energía?
4. Dibuje la estructura de la glucosa y de la maltosa
5. Investigue los compuestos intermediarios que se forman en la degradación del almidón.
4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 583, 697
español, traducida de la 25ª Edición en inglés.
3. Tester, R.F. y J. Karkalas, X. Qi. 2004 Starch structure and digestibility Enzyme-Substrate
relationship. World’s Poultry Science Journal. Vol. 60.
23
2,023
REALIZADO POR: LICDA. NANCY DEL CID ALDANA
Identificación de Pentosas y Cetosas
Introducción
Los monosacáridos son la fuente de energía más importante e inmediata del ser humano, por lo que son
uno de los componentes más comunes dentro de los componentes de la dieta usual. Algunos se encuentran
como tales, en su forma libre, mientras que otros se encuentran unidos formando disacáridos y hasta
polisacáridos. En esta práctica se presenta al alumno los principales métodos de identificación de pentosas
y cetosas para determinar su presencia en varios alimentos y soluciones conocidas.
Antecedentes
Las pentosas son monosacáridos (glúcidos simples) formados por una cadena de cinco átomos de
carbono. Como en los demás monosacáridos aparecen en su estructura grupos hidroxilo (OH). Además,
también pueden llevar grupos cetónicos o aldehídicos. La fórmula general de las pentosas es C5H1005. A
continuación se citan algunas pentosas:
Aldopentosas: Como su nombre lo indica contienen la función aldehído. Una de las más importantes es la
ribosa, la cual hace parte de los nucleótidos que forman el ARN. A partir de la ribosa se puede obtener la
desoxirribosa la cual forma parte del ADN.
Cetopentosas: Contienen la función cetona.
Cetosas:
24
2,023
La D-fructosa, originalmente llamada levulosa, suele conocerse como el azúcar de la fruta por su
contenido elevada en ésta. Se encuentra también en algunos vegetales y en la miel. Esta molécula es
importante como miembro del grupo de la familia de las cetosas. Por gramo, la fructosa es doblemente
dulce que la sacarosa, por lo que puede usarse en cantidades menores. Por esa razón, la fructosa se usa
como edulcorante en muchos alimentos procesados. Por otro lado, la fructosa se usa en cantidades
importantes en el sistema reproductor masculino, ya que los espermatozoides la usan como fuente principal
de energía.
La lactosa, o el azúcar de la leche, es un disacárido formado por una molécula de galactosa unida a una
glucosa por medio de un enlace ß(1→4). La incapacidad de hidrolizar este enlace (deficiencia de lactasa) es
común entre los animales.
La sacarosa, o azúcar común de mesa (de caña o de remolacha), se produce en hojas y raíces de las
plantas. Es una fuente de energía que se transporta a través de toda la planta. La sacarosa contiene un
residuo α-glucosa y uno ß-fructosa unidos a través de sus carbonos anoméricos.
Pre-laboratorio
1. Investigue el uso y fundamento de las reacciones de Bial y Seliwanoff
2. ¿Qué tipo de alimentos cree usted que daría positivo para la prueba de pentosas?
3. Escriba la reacción de hidrólisis de la lactosa. ¿Qué enzima la cataliza?
4. ¿Qué tipo de alimentos cree usted que daría positivo para la prueba de cetosas?
5. Investigue sobre la intolerancia a la lactosa, o deficiencia de lactasa.
Materiales
a. Reactivos
− Solución de glucosa (dextrosa) al 5%
− Solución de fructosa al 5%
− Solución de xilosa al 5%
− Solución de sacarosa al 5%
− Leche entera (proveído por el estudiante)
− Leche Delactomy (proveído por el estudiante)
− Miel (proveído por el estudiante)
− Reactivo de Bial
− Reactivo de Benedict
− α-naftol al 1%
− Ácido sulfúrico concentrado
− Reactivo de Seliwanoff
25
2,023
b. Cristalería
− Pipetas Pasteur
− Tubos de ensayo
− Beakers de 250 mL
c. Instrumentación
− Estufa
− Pinza para tubos de ensayo
Procedimiento
I. Prueba de Molish para carbohidratos

- Poner 20 gotas de cada una de las muestras en tubos de ensayo
- Agregue 5 gotas de alfa naftol.
- Cuidadosamente, añada ácido sulfúrico concentrado deslizándolo por las paredes y sin agitar.
Observe cuidadosamente la interfase, buscando un anillo rojo o violeta.
TUBO MUESTRA RESULTADO (+/-)

1 GLUCOSA
2 FRUCTOSA
3 XILOSA
4 SACAROSA
5 LECHE ENTERA
6 LECHE DELACTOMY
7 SOL. MIEL
II. Prueba de Benedict para azucares reductores

- Agregue de dos a cuatro gotas de reactivo de Benedict y caliente en baño María durante cinco
minutos.
- Anote cualquier cambio de color.

1 GLUCOSA
2 FRUCTOSA
3 XILOSA
4 SACAROSA
5 LECHE ENTERA
6 LECHE DELACTOMY
7 SOL. MIEL
26
2,023
III. Prueba de pentosas

- Agregue 1.5 mL de reactivo de Bial y agite
- Colocar en agua hirviendo durante 3 minutos, si al cabo de ese tiempo se torna azul-verdoso indica
una prueba positiva.

1 GLUCOSA
2 FRUCTOSA
3 XILOSA
4 SACAROSA
5 LECHE ENTERA
6 LECHE DELACTOMY
7 SOL. MIEL
IV. Prueba de cetosas

- Agregue 20 gotas de reactivo de Seliwanoff (CUIDADO: es fuertemente ácido) y poner en baño María
durante quince minutos. Anote los colores obtenidos.

1 GLUCOSA
2 FRUCTOSA
3 XILOSA
4 SACAROSA
5 LECHE ENTERA
6 LECHE DELACTOMY
7 SOL. MIEL
Anexos
1. Explique en su reporte si logró la hidrólisis de su muestra de leche y de sacarosa o no. Indique las
posibles razones de porqué sí o no lo logró.
2. Investigue sobre la intolerancia a la lactosa, o deficiencia de lactasa.
1. McKee, T., McKee, J. R. 2003. Bioquímica. La Base Molecular de la Vida. 3ª Edición, traducida de la
3ª Edición en inglés.
español, traducida de la 25ª Edición en inglés
3. Villanueva de Bocaletti, Odette. Manual de Laboratorio Bioquímica 1 2005. Universidad del Valle
de Guatemala.
27
2,023
REALIZADO POR: LICDA. LUISA FERNANDA LEMUS
Introducción a la Espectrofotometría y Curvas de calibración
Antecedentes
La espectrofotometría es uno de los métodos de análisis más usados, y se basa en la relación

que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y su concentración. Cuando se hace
incidir luz monocromática (de una sola longitud de onda) sobre un medio homogéneo, una parte de la
luz incidente es absorbida por el medio y otra transmitida; como consecuencia, la intensidad del rayo
de luz será atenuada desde Po a P, siendo Po la intensidad de la luz incidente y P la intensidad del rayo
de luz transmitido. Dependiendo del compuesto y el tipo de absorción a medir, la muestra puede estar
en fase líquida, sólida o gaseosa. En las regiones visibles y ultravioleta del espectro electromagnético, la
muestra es generalmente disuelta para formar una solución.
Cada sustancia tiene su propio espectro de absorción, el cual es una curva que muestra la
cantidad de energía radiante absorbida, Absorbancia, por la sustancia en cada longitud de onda del
espectro electromagnético, es decir, a una determinada longitud de onda de la energía radiante, cada
sustancia absorbe una cantidad de radiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto (Fig. 1)
Absorbancia
(A)
Longitud de onda (nm)
Fig.1 Espectro de absorción de dos compuestos diferentes.
Ley de Lambert
Esta ley establece que cuando pasa luz monocromática por un medio homogéneo, la disminución de la
intensidad del haz de luz incidente es proporcional al espesor del medio, lo que equivale a decir que la
intensidad de la luz transmitida disminuye exponencialmente al aumentar aritméticamente el espesor
del medio absorbente (Fig. 2):
28
2,023
P0
B
Fig. 2. Ley de Lambert
Ley de Beer
La intensidad de un haz de luz monocromática disminuye exponencialmente al aumentar
aritméticamente la concentración de la sustancia absorbente, cuando este haz pasa a través de un
medio homogéneo (Fig. 3).
P0
Fig. 3. Ley de Beer
Mediciones de transmitancia y absorbancia.

Las mediciones de absorbancia o transmitancia se hacen por comparación entre la muestra problema y
un estándar arbitrario o referencia. Como la referencia debe poseer un porcentaje de transmitancia de
100%, esta es llamada referencia de 100%., o una absorbancia de cero.
Selección de longitud de onda de trabajo.

La longitud de onda de trabajo corresponde, generalmente, a la longitud de onda en la cual la
absorbancia del analito (sustancia a analizar) es máxima, y recibe la denominación de Lambda máximo
(max). Para seleccionar el max., se hace un espectro de absorción o curva espectral, y que consiste en
una gráfica de la absorbancia de una solución de la sustancia absorbente de concentración adecuada,
medida a distintas longitudes de onda y en ella se determina el max. (Fig.4).
En este caso
max =  
29
2,023
Las mediciones de absorbancia se hacen en la zona de longitudes de onda donde se espera que absorba
la sustancia problema. Si se trata de sustancias coloreadas, las mediciones se realizan en la zona visible
del espectro electromagnético (380 a 800nm). En el caso de sustancias no coloreadas, las mediciones
se realizan en la región ultravioleta del espectro electromagnético (200 a 380nm).
Curva de Calibración.
Uno de los métodos más utilizados para determinar la concentración de una muestra problema, es el
método de la curva de calibración. Esta curva de calibración es una gráfica que relaciona la
concentración de al menos cinco soluciones de estándar de concentraciones conocidas, con la
absorbancia de cada uno de ellos a la longitud de onda máxima (max) (Fig. 5).
Una vez obtenida la gráfica se determina la función matemática que presenta dicha recta a través del
tratamiento estadístico de regresión de los mínimos cuadrados, la cual relaciona la absorbancia y la
concentración de un analito. La siguiente ecuación matemática corresponde a dicha función:
A=mc+n (Ecuación 1)
A : Absorbancia. n : Intercepto de la recta

m : Pendiente de la recta y que corresponde al producto entre absortividad a de la muestra y el
espesor b de la cubeta.
Luego se mide la absorbancia de la solución problema y se interpola su valor en la gráfica o se

reemplaza en la ecuación (1), para obtener el valor de concentración del analito. La concentración de la
solución problema debe estar comprendida en el rango de concentración que comprende la curva de
calibración. Si la concentración de la solución problema es menor que la concentración del estándar
más diluido debe usarse el método de adición estándar, que consiste en adicionar un volumen
determinado de un estándar concentrado a la solución problema, antes de realizar la lectura y que
permite que esta lectura este dentro de las obtenidas para la curva de calibración. En el caso contrario,
si la concentración del analito es mayor que la concentración del estándar más concentrado la solución
problema deberá ser diluida.
30
2,023
Al hacer la curva de calibración, se debe emplear la longitud de onda de máxima absorbancia (max.),
para obtener una recta con la máxima pendiente y así tener mayor sensibilidad y precisión al hacer las
mediciones. La medición de la absorbancia de la solución problema debe hacerse a la misma longitud
de onda que fue hecha la curva de calibración.
Bibliografía
1. Skoog, D.A., West, D.M., Holler, F.J., Crouch, S.R. 2001 Química Analítica. 7ª. Edición. McGraw
Hill. pág. 166
ANEXO 1
EL ESPECTROFOTÓMETRO
Los principales componentes de un

espectrofotómetro de un haz se muestran en la
figura. En él puede identificarse los siete
componentes básicos: 1) una fuente de energía
radiante estable, 2) una rendija de entrada
(omitida en este dibujo), 3) un selector de
longitud de onda, 4) una rendija de salida para
enfocar la luz, 5) un dispositivo para sostener la
celda de la muestra (sample cuvette), 6) un
detector de energía radiante, y 7) un dispositivo
de lectura en la que pueda obtenerse el valor de la medición que se realiza (omitida en este dibujo).
Algunos instrumentos utilizan filtros como selectores de longitud de onda, haciendo que solamente
pase luz de una sola longitud de onda (o monocromática). Estos instrumentos se conocen como
fotómetros. Por el contrario, los espectrofotómetros utilizan un sistema de monocromador en prismas
o en rejillas, haciendo que pueda brindarse una luz monocromada en un rango de longitudes de onda.
31
2,023
El recipiente en el que se coloca la muestra a ser medida en un

espectrofotómetro se conoce como celda (en inglés, cuvette o cell). Este
recipiente es normalmente de vidrio cuando se usa en un rango de 320 a
950 nm, ya que este material es totalmente transparente a esas longitudes
de onda. Sin embargo, para longitudes por debajo de los 320 nm, es
indispensable utilizar celdas de cuarzo (o sílice), ya que el vidrio absorbe
luz de estas longitudes de onda. Las celdas pueden ser de forma cilíndrica
o cuadrada, aunque se prefieren las últimas, mostradas en la siguiente
figura. Independientemente de ello, las celdas deben cuidarse
extremadamente para evitar suciedad y rayones que puedan alterar los
resultados.
ANEXO 2
CÁLCULO DE REGRESIÓN LINEAL
Muchos métodos analíticos se basan en una curva de calibración en la que una cantidad medida
y se relaciona en proporción directa con la concentración conocida x de una serie de patrones (o
soluciones de concentración conocida). La ordenada (la variable dependiente, graficada en el eje y)
representa la característica medida (en este caso, absorbancia), mientras que la abscisa (la variable
independiente, graficada en el eje x) representa la concentración (en nuestro caso, partes por millón).
Como es común (y deseable), la gráfica tiende a una línea recta, aunque debe observarse que no todos
los datos caen sobre la línea recta, debido a errores aleatorios de la medición.
Para lograr obtener la recta que mejor se ajusta al grupo de datos que se ha obtenido, es necesario
avocarse a la técnica estadística conocida como análisis de regresión, el cual proporciona medios para
la elaboración objetiva de una ecuación para esta recta, a través del uso del método de los mínimos
cuadrados.
Al emplear este método para generar una curva de calibración, se debe partir de dos suposiciones:
primero, que existe una relación lineal entre la variable medida (y) y la concentración del compuesto
que se busca (x), y segundo, que cualquier desviación de los puntos individuales respecto a la recta
32
2,023
obtenida se debe a errores aleatorios de la medición. La ecuación que se obtiene es, entonces, en el
formato:
y = mx + b
donde b es la intersección en y (el valor de y cuando x es cero) y m es la pendiente.

Utilice los resultados del grupo, colocando en una tabla las concentraciones de estándar, de 0 a 10
mg/mL (sin tomar en cuenta el estándar 0.5mg/mL) y a la par de cada concentración, el valor de
absorbancia obtenido.
Procedimiento
I. Gráfica de Datos
a. En una hoja de Excel nueva, copie su tabla de resultados de la forma siguiente

(IMPORTANTE: Utilice sus propios resultados, no los mostrados aquí)
Promedio Sección A
Muestra Absorbancia
0 0.000
8 0.176
12 0.273
16 0.374
20 0.481
32 0.702
40 0.891
48 1.107
Seleccione tanto las concentraciones como las absorbancias (puede incluir los títulos si desea) y
accione el botón, correspondiente al Asistente de Gráficas.
b. Seleccione el tipo de gráfico adecuado, el de dispersión XY
33
2,023
c. Decida si quiere leyendas o no
d. Guarde en una hoja separada, poniéndole nombre

e. Modifique las propiedades de la Serie 1 para que solamente le aparezcan marcadores y no la
línea (que es la forma normal como se presenta en una serie nueva).
II. Gráfica de Recta de Regresión

a. Para graficar la recta de regresión, coloque el puntero sobre la gráfica, en cualquiera de los
puntos de la regresión. Haga click con el botón derecho del mouse y aparecerá la opción
Agregar línea de tendencia. Acepte.
b. Aparece un menú para especificar el tipo de regresión. Seleccione lineal. Vaya a la pestaña
que indica opciones y seleccione los cuadros de Presentar ecuación en el gráfico y Presentar
el valor R cuadrado en el gráfico. Acepte presionando enter.
c. Aparecerá en su gráfica la línea de regresión para los datos experimentales y la ecuación, en
la forma
d. y = 0.0466 x + 0.0558
e. r2= 0.9998
f. Calcule el coeficiente de correlación r: r es la raíz cuadrada del valor presentado como r2 .
Este valor le indica que tanto se acercan los datos experimentales a la recta de regresión. En
este caso le permite a usted evaluar que tan bien realizó sus diluciones, si hay algún punto
que tenga diferencia con el comportamiento general de los demás.. Mientras más cercano a
1.000, mejor fue el ajuste de los datos. Para una curva de calibración es espectrofotometría
se aceptan curvas de calibración con coeficiente de correlación por encima de 0.98 Algunos
métodos son más estrictos.
34
2,023
III. Cálculos
a. Suponga que una muestra del paciente 1, de concentración de proteína desconocida, le dio
una lectura de absorbancia de 0.100, y la muestra del paciente 2 tiene una absorbancia de
0.200. Calcule las concentraciones en las dos muestras, despejando de la ecuación de
regresión de la gráfica que obtuvo en el laboratorio.
Si
Y = mX + b,
m y b son los valores que usted obtuvo en la gráfica de regresión de Excel
En nuestro caso, Y es absorbancia y X es concentración

Absorbancia = m x (Concentración) + b
La concentración de una muestra desconocida se calcula simplemente como

Concentración= (Absorbancia - b) / m
ANEXO 3
CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE COMPUESTOS
Cuando se desea determinar la concentración de un compuesto en una solución mediante el uso

de un espectrofotómetro, en casi todas las técnicas de laboratorio debe procederse a la preparación de
tres tubos: un tubo blanco, un tubo estándar y un tubo muestra.
Tubo “blanco”: contiene diluyente, estabilizadores químicos del pH, reactivos colorantes y todos los
ingredientes que sean necesarios para la realización de la Técnica, pero no debe contener la sustancia
que se va a estudiar. El “blanco” sirve para hacer la calibración del espectrofotómetro, desechando la
absorbancia de todos los componentes diferentes de la sustancia de estudio, lo cual se logra haciendo
que en presencia de esta cubeta óptica en el recipiente respectivo del fotómetro, ajustemos la
absorbancia de la pantalla a “cero”. De tal forma que estas mismas sustancias en los otros tubos ya no
interfieran en las próximas lecturas de absorbancia.
Tubo “estándar”: contiene lo mismo que el blanco, y se le agrega la sustancia de estudio a una
concentración conocida. El objetivo que tiene la preparación de este tubo es que sirve para comparar
su absorbancia, la cual será en función de la concentración conocida, con la absorbancia de la
“muestra”.
Tubo “muestra”: contiene lo mismo que el blanco, pero en este no conocemos la cantidad de la
sustancia que estamos estudiando. Este se prepara a partir de fluidos biológicos (sangre, líquido
cefalorraquídeo, entre otros).
35
2,023
El haber puesto los componentes en los tres tubos nos permite tener un coeficiente de absorción
molar uniforme. En estas circunstancias y teniendo en cuenta que el espesor de la muestra absorbente
habrá de ser siempre de 1 cm, entonces nos queda que la absorbancia habrá de ser directamente
proporcional a la concentración del compuesto dado, según la siguiente formula.
CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA = CONCENTRACIÓN DEL ESTÁNDAR * ABSORBANCIA DE LA MUESTRA

ABSORBANCIA DEL ESTÁNDAR
Materiales
a. Reactivos
− Solución madre de azul de metileno, 80 ppm (mg/L)
b. Cristalería
− Balones aforados de 100 mL, 50 mL, 25 mL y 10 mL
− Pipetas volumétricas de 5 mL y 10 mL
− Tubos de ensayo
− Beaker 150 mL
− Pipetas Pasteur
c. Instrumentación
− Gradilla
− Espectrofotómetro UV-VIS
− Celdas para lectura
Procedimiento
I. Preparación de Curva de Calibración
- Se preparará una curva de calibración por mesa de estudiantes. La curva de calibración es de
siete puntos, desde cero a cuarenta partes por millón de azul de metileno.
- Prepare en los balones aforados, las concentraciones según la tabla siguiente:
Concentración en curva, mL solución madre, 80 ppm

Volumen final
ppm azul de metileno azul de metileno
0 (blanco) 0 ---
8 5 mL 50 mL
12 15 mL 100 mL
36
2,023
16 5 mL 25 mL
20 25 mL 100 mL
32 10 mL 25 mL
40 25 mL 50 mL
- Transfiera alrededor de 5 mL de cada solución a tubos de ensayo. Asegúrese que los tubos
de ensayo se encuentren limpios, secos y claramente identificados.
- Incluya un tubo con la solución de concentración desconocida que se le entregará durante el
laboratorio.
II. Lectura de Curva de calibración

- Al tener todos sus tubos listos, y llegar su turno, lea la absorbancia de cada una de las muestras
a 665 nm. No olvide leer también su muestra desconocida. Debe seguir todas las indicaciones
de su instructor de laboratorio.
Anote en su formato de resultados la absorbancia de cada punto de su curva de calibración y de
su muestra desconocida. Reporte la ecuación de su curva, la correlación entre sus puntos y la
concentración de su muestra desconocida.
Anexo
1. Investigue por lo menos cinco exámenes de laboratorio clínico de rutina, que se realicen por
medio de la espectrofotometría, indicando sus valores normales y su uso.
2. ¿Cuál es la importancia de la espectrofotometría?
Bibliografía
1. Skoog, D.A., West, D.M., Holler, F.J., Crouch, S.R. 2001 Química Analítica. 7ª. Edición. McGraw
Hill. pág. 166
37
2,023
REALIZADO POR: LICDA. GABRIELA CIFUENTES

MODIFICADO POR: LICDA. NANCY DEL CID
Determinación de glucosa en muestra sanguínea
Introducción
La glucosa es el azúcar principal de la sangre y una fuente muy importante de energía que las células
de nuestro organismo utilizan, por tal motivo esta ha sido objeto de muchos estudios y la literatura
ofrece diversas técnicas de análisis, las cuales varían de acuerdo con diferentes factores como la
naturaleza de la muestra, los contenidos de glucosa y la viabilidad experimental. Uno de los métodos
utilizados a nivel clínico y de investigación es el enzimático colorimétrico para la determinación de
glucosa en suero o plasma. Debido a que en la sangre hay células como los glóbulos blancos o glóbulos
rojos que pueden seguir consumiendo azúcar después de extraer la sangre, el valor de glucosa en sangre
completa es un 15 % menor que el valor de glucosa en suero o plasma.
Antecedentes
La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene
fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado en forma de
glucógeno. En esta última forma mantiene la concentración normal de glucosa en sangre. Para que esos
niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina,
una hormona sintetizada en las células beta del páncreas, la cual se libera cuando los niveles de glucosa
en sangre se elevan más de 70 mg/dL, la insulina recluta los transportadores de glucosa en el músculo
y tejido adiposo, llamados GLUT-4, lo que favorece el ingreso de glucosa a estas células.
Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el diagnóstico de numerosas
enfermedades metabólicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. También es necesaria esta
prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar
para tratarla.
La diabetes mellitus es una enfermedad que incapacita al cuerpo para metabolizar o usar
eficazmente los carbohidratos, las proteínas y las grasas. Cuando comemos, diversos carbohidratos
como los que comemos en cereales, tortillas, pan, verduras o frutas, todos ellos se digieren en el
intestino hasta convertirse en monosacáridos los cuales por vía porta llegan al hígado y allí todos los
monosacáridos absorbidos se convierten en GLUCOSA.
Fundamento del método
La glucosa oxidasa convierte la glucosa en peróxido de hidrógeno y ácido D-glucónico. La peroxidasa

cataliza la oxidación del peróxido de hidrógeno a 4-aminofenazona con la subsecuente unión con el p-
hidroxibencensulfonato. El producto final es un c hidroquinoleína el cual absorbe a 500 nm.
La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de la glucosa.
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GOD
Glucosa + O2 + H2O ------------------ > Acido glucónico + H2O2
POD
H2O2 + 4-aminofenazona + fenol ----------------- > quinoneimina + 4 H2O
Valores de referencia
Suero o plasma: 70 – 110 mg/dL
Pre-laboratorio
1. A que nos referimos cuando hablamos de:
- Hiperglicemia
- Hipoglicemia
- Diabetes mellitus
Materiales
a. Reactivos
− Reactivo de glucosa
− Muestras sanguíneas (Suero)
− Estándar de glucosa
− Alcohol al 70%
− Cloro al 5%
b. Cristalería
− Tubos de Ensayo
c. Instrumentación
− Micropipetas de 10-100µL, 100-1000µL
− Tips amarillos y azules
− Espectrofotómetro
− Celdas para espectrofotómetro
− Baño de María a 37 °C
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Procedimiento
- Identificar los tubos de ensayo como Blanco, estándar y muestra.
- Seguir el siguiente esquema de pipeteo
Blanco Estándar Muestra 1 Muestra 2

Estándar -- 10 µL -- --
Muestra de Suero -- -- 10 µL --
Muestra Orina -- -- -- 10 µL
Reactivo Glucosa 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Mezcle e incube por 5 min en baño a 37°C
Luego de la incubación leer el estándar y las muestras en el espectrofotómetro
a una longitud de onda de 505 nm. Llevando el equipo a cero con el Blanco
Cálculo de resultados
• Glucosa en suero (mg/dL)= Absorbancia de muestra * F

F = 100 mg/dl
Abs. Estándar
Valores de referencia
Suero o plasma: 70 – 110 mg/dL
En discusión, debe explicar claramente la base de cada prueba y aclarar o justificar cualquier
análisis que no hay concordado con sus expectativas de resultados.
1. Kaplan, L. A. y A. J. Pesce, S. C. Kazmierczak. 2003 Clinical Chemistry. Theory, Analysis,
Correlation. 4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 583, 697
2. Ficha técnica de Glucosa AA. Wiener Lab. Rosario - Argentina.
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REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA/ DRA. DORA INÉS MAZARIEGOS CORDERO
Práctica No. 9
Curva de tolerancia a La glucosa
Introducción
La prueba de tolerancia a la glucosa se utiliza para determinar el nivel de respuesta de un organismo

ante una carga fuerte de glucosa. Generalmente se usa en el diagnóstico de intolerancia a la glucosa
en personas que se sospeche diabetes mellitus (para estos casos se acostumbra hacer una curva de
tolerancia de 3 horas), también puede utilizarse esta prueba para investigar diversas causas de
hipoglicemia (en este caso se acostumbra hacer una curva de tolerancia de 5 horas).
Antecedentes
En ayunas la liberación de glucosa hepática está muy aumentada, lo cual determina el diagnóstico,
hiperglicemia en ayunas o diabetes. En la diabetes mellitus, las personas no pueden metabolizar
correctamente la glucosa, sobretodo en el músculo esquelético y en el tejido adiposo debido a la falta
de insulina (diabetes mellitus tipos 1), o debido a una insulina que no se une correctamente a su
receptor en la célula blanco (diabetes mellitus tipo 2). Por lo anterior la glucosa no se utiliza como
combustible en el músculo esquelético y tejido adiposo, los niveles de glucosa sanguínea aumentan
arriba de los valores normales causando hiperglicemia.
La prueba de tolerancia a la glucosa no es más que varias medidas del nivel de azúcar en la sangre
antes y después de la administración de una carga definida de glucosa. El principal propósito de la curva
de tolerancia a la glucosa es diferenciar entre pacientes con tolerancia normal a la glucosa, intolerantes
a la glucosa y diabéticos. En un paciente normal, la máxima elevación de glucosa sanguínea se observa
después de 30 minutos de ingerida la dosis de prueba y regresa a valores normales después de 3 horas.
En diabéticos, los niveles de glucosa sanguínea alcanzados son más altos y la vuelta a valores basales es
más tardada.
Es necesario cumplir con varios requisitos para realizar la prueba:

• Descontinuar, de ser posible, medicamentos que afecten la tolerancia a la glucosa
• Realizar en la mañana, posterior a tres días de dieta libre (con por lo menos 150 g de carbohidratos
por día) y con actividad normal
• Realizar la prueba luego de un ayuno de 10 a 16 horas solamente en pacientes ambulatorios
• El paciente debe permanecer sentado y no debe comer ni fumar durante la prueba
• La prueba no debe realizarse en personas muy enfermas u hospitalizadas
• Debe realizarse entre 7 y 9 de la mañana
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• Se recomienda una carga de 75g de glucosa para pacientes no embarazadas, la cual debe beberse
en menos de cinco minutos
La curva de tolerancia a la glucosa puede requerirse para diagnosticar un paciente con diabetes
mellitus tipo 2, siempre y cuando una medición de glucosa en ayunas haya dado un valor sérico menor
de 129 mg/dl. Sin embargo, la prueba es muy útil para el diagnóstico de diabetes mellitus gestacional,
de intolerancia a la glucosa y para estudios epidemiológicos. Una variante de esta prueba, llevada a
cabo en 5 horas, también puede servir para el diagnóstico de varios tipos de hipoglucemia, siempre y
cuando se acompañe de una curva de insulina que se hace con las mismas muestras séricas que con la
que se determina la glucosa. La curva de tolerancia a la glucosa y la curva de insulina también se indican
en cualquier persona que se investiga por “síndrome metabólico”.
1. Idema, Lars. Hypoglycemia Homepage Holland Glucose Tolerance Test Actualizado al 28 de abril,
1998. Consultado el 2 de noviembre, 2005.
http://hypoglykemie.nl/gtt.htm
2. Tschritter, Otto, et al. Assessing the Shape of the Glucosa Curve During an Oral Glucosa Tolerante
Test. Diabetes Care 26:1026–1033, 2003.
http://care.diabetesjournals.org/cgi/reprint/26/4/1026
Correlation. 4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 34-36
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REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA/DRA. DORA INÉS MAZARIEGOS CORDERO
Práctica No. 10
Prueba de la Hemoglobina Glucosilada (HbA1) como control del nivel de glucosa en sangre
Introducción
Uno de los parámetros más utilizados por los médicos para controlar el progreso y el manejo de la
diabetes en sus pacientes es la determinación de glucosa en sangre. Sin embargo, el parámetro de
glucosa en sangre refleja los niveles del momento en que se toma la muestra. En cambio, la
hemoglobina glucosilada se forma progresiva e irreversiblemente en los eritrocitos durante el período
normal de vida de éstos, de ciento veinte días. Debido a que la cantidad de hemoglobina glucosilada
presente en sangre refleja el nivel de glucosa en sangre manejado durante las 6 a 8 semanas previas al
día en que se hace el examen de laboratorio, el valor que este tiene es mucho mayor que la
determinación de glucosa en ayunas, el paciente no puede engañar al médico, aunque se ponga a dieta
de carbohidratos un par de días antes del examen.
El valor normal de la hemoglobina glucosilada es hasta 6 % en el adulto y 4 % en el niño. Por cada 1
% que aumenta la hemoglobina glucosilada (Hb A 1c), aumenta en 30 a 35 mg % la concentración de
glucosa sanguínea. Así como la glucosa se une a la GLOBINA de la hemoglobina, también puede unirse
a otras proteínas plasmáticas y proteínas de membrana, por eso la hiperglicemia causa muchos daños
secundarios a nivel celular. La unión de la proteína (globina u otra proteína) a la glucosa se produce sin
acción enzimática, a esto se le conoce con el nombre de GLUCACIÓN, en cambio cuando interviene una
enzima que cataliza la unión de la glucosa a la proteína como ocurre en la síntesis de las glucoproteínas
se conoce con el nombre de GLUCOSILACIÓN.
Antecedentes
Diabetes mellitus
Varias investigaciones han demostrado que la diabetes mellitus no es una enfermedad única, sino
un conjunto de enfermedades que manifiestan un síntoma en común: la inhabilidad del paciente de
regular su nivel de glucosa en sangre (es decir, intolerancia a la glucosa). Los principales síntomas de la
diabetes mellitus son niveles de glucosa anormalmente altos tanto en sangre como en orina
(hiperglucemia y glucosuria, respectivamente), poliuria, polidipsia (sed excesiva), hambre constante
(polifagia), pérdida de peso repentina y, durante los episodios agudos de la diabetes mellitus, exceso de
cuerpos cetónicos en sangre y en orina (cetonemia y cetonuria, respectivamente). Todos estos síntomas
son el resultado final de la falta de capacidad de metabolizar la glucosa y de mantener altos niveles de
glucosa en sangre.
43
2,023
Uso de proteínas glucosiladas como parámetros de control

La medición de proteínas glucosiladas, especialmente la hemoglobina, se usa ampliamente para el
monitoreo rutinario del estado glucémico a largo plazo de un paciente con diabetes mellitus. La
hemoglobina glucosilada se usa tanto como índice de glucemia promedio, así como índice de riesgo
para el desarrollo de complicaciones diabéticas. Más recientemente, esta prueba se usa en programas
de control de calidad para la evaluación del tratamiento del paciente diabético. Es posible usar otras
proteínas sanguíneas glucosiladas como indicador de glucemia promedio, pero en períodos más cortos
que la hemoglobina glucosilada. Sin embargo, su utilidad clínica no está tan bien establecida como en
el caso de la hemoglobina, y no hay evidencia convincente que relacione su concentración con las
complicaciones crónicas de la diabetes.
Debido a que la vida media de un eritrocito es de 120 días, el valor de la hemoglobina glucosilada
refleja la concentración promedio de glucosa durante entre 6 a 8 semanas precedentes al muestreo.
En detalle, el grupo hidroxilo de la glucosa se une a los grupos amino libres de la hemoglobina. Esta
hemoglobina glucosilada, denominada HbA1c puede separarse de la hemoglobina no glucosilada por
medio de cromatografía de intercambio iónico o electroforesis. La fracción de la hemoglobina
glucosilada se encuentra normalmente alrededor del 4 al 6 % de la hemoglobina total, cuando la
concentración de glucosa sanguínea se mantiene dentro de los parámetros normales. El aumento en
los valores de hemoglobina glucosilada es indicativo de un mal control de los niveles de glucosa en
sangre, guiando al médico en la selección del tratamiento adecuado (dieta más rigurosa, medicamento,
mayor dosis de insulina, etc.) para su paciente.
Interpretación clínica. En la siguiente tabla se muestran los valores útiles para la interpretación
clínica de un paciente. Tome la decisión sobre su paciente en base a los resultados obtenidos.
Pacientes %HbA1
Pacientes normales o pacientes diabéticos controlados o con metabolismo estabilizado 4.5 – 7.0
Pacientes diabéticos no controlados o con desbalances metabólicos 8.5
Pre-laboratorio
1. ¿Qué factores se toman en cuenta para el diagnóstico de Diabetes Mellitus, tanto tipo I como
tipo II en un paciente?
2. ¿Cuál es la incidencia de diabetes en Guatemala?
3. ¿Cuál es la importancia de realizar la prueba de hemoglobina glucosilada en los pacientes que ya
están diagnosticados como diabéticos?
4. Investigue qué factores pueden alterar los resultados de la prueba (Hemoglobina glucosilada,
HbA1)
5. Existen varios tipos de hemoglobina glucosilada, por lo que debe tenerse especial cuidado al
ordenar las pruebas de hemoglobina glucosilada. Investigue la diferencia entre hemoglobina
glucosilada total, GHb y la hemoglobina HbA1c. Indique los valores normales para cada una de
ellas y las diferencias en su interpretación clínica.
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2,023
1. Human Besellscharft für Biochemica und Diagnostica mbH. 2005. Glycohemoglobin HbA1-Test.
Fast Ion-Exchange Resin Separation Method. Inserto.
Correlation. 4ª. Edición. Mosby, Inc. pág. 580-600
español, traducida de la 25ª Edición en inglés. Págs. 83-84
4. Sacks, David B. et al. 2002. Guidelines and Recommendations For Laboratory Analysis in the
Diagnosis and Management of Diabetes Mellitus. The National Academy of Clinical
Biochemistry. Págs 27-33 (Disponible en
http://www.aacc.org/NR/rdonlyres/1B0F23CE-7458-442E-BDA4-
3096BD6E4C41/0/1_diabetes_overview.pdf ).
45

Manual Lab. Bqi - 2023

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LABORATORIO BIOQUÍMICA I

CALENDARIZACIÓN DE PRÁCTICAS DEL LABORATORIO

* PRÁCTICAS EN COLOR ROJO SON PRESENCIALES

Espíritu de Nuestros Valores

1. Conozca la responsabilidad que adquiere al trabajar en del laboratorio de Bioquímica I.

1. Conozca la forma de trabajo y evaluación dentro del laboratorio

Reglamento para el estudiante

1. Estar inscrito en el curso teórico de Bioquímica I.

• Trabajo antes de llegar al laboratorio: El Pre-Lab

Para la presentación del Pre-Lab se deberá incluir:

• Trabajo dentro del Laboratorio

o Formato de resultados y anotaciones (prácticas presenciales)

• Trabajo posterior al laboratorio

o Reporte del Laboratorio

El reporte debe contener las siguientes secciones:

Sección Contenido Valor1

Formato para entregar el REPORTE DE LABORATORIO:

• Hojas tamaño carta.

• Fuente de los datos obtenidos, Calibri 8.

El reporte o documento solicitado como evidencia de la realización de las actividades de laboratorio

Rubro por evaluar Puntaje

Exámenes cortos 4 pts.

Reportes de laboratorio 5 pts.

Hojas de trabajo 1 pt.

Casos clínicos 2 pts.

Examen parcial de Laboratorio 2.5 pts.

Examen final de Laboratorio 3.5 pts.

Nota Total de Laboratorio 20 pts.

Las actividades que se entreguen deberán de ir debidamente identificadas de la siguiente manera:

UNIVERSIDAD MARIANO GÁLVEZ

NOMBRE DE ALUMNO CARNÉ NÚMERO DE PUESTO

FORMATO DE RESULTADOS Y ANOTACIONES

NO. PRÁCTICA: TÍTULO DE LA PRÁCTICA:

REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

Práctica No. 1 -PRESENCIAL-

I. Preparación de soluciones: Dextrosa al 5%

II. Preparación de SRO

III. Comparación de utensilios caseros con no caseros

REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

Uso del potenciómetro para medición del pH

Un ejemplo: amortiguación en la sangre

CO2 + H2O ↔ H2CO3 ↔ H2CO3 ↔ H+ + HCO3-

REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

Practica No. 3 -PRESENCIAL-

Relación entre estructura y función en una proteína

− Solución saturada de sal de mesa

- Agregue a cada tubo alrededor de un mililitro de peróxido de hidrógeno (o agua oxigenada).

II. Función de la amilasa

REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

Métodos de identificación de monosacáridos y almidón

Figura No. 1 Prueba de Benedict

Figura No. 2 Reacción de Molish

REALIZADO POR: LICDA. SARA BEATRIZ MOLINA DE SAMAYOA

Propiedades físicas y químicas del almidón

REALIZADO POR: LICDA. NANCY DEL CID ALDANA

Practica No. 6 -PRESENCIAL-

Identificación de Pentosas y Cetosas

Cetopentosas: Contienen la función cetona.

I. Prueba de Molish para carbohidratos

TUBO MUESTRA RESULTADO (+/-)

II. Prueba de Benedict para azucares reductores

TUBO MUESTRA RESULTADO (+/-)