Bioquímica II QBP Ciclo del Ácido Cítrico

Ciclo del Ácido Cítrico

Visión Global:

• El ciclo del ácido cítrico (también conocido como ciclo de Krebs o ciclo del ácido
tricarboxílico, TCA) es el camino central para la recuperación de energía de los tres
principales combustibles metabólicos tales como carbohidratos, ácidos grasos y
aminoácidos.

• El TCA es una serie de reacciones en las cuales 2 moléculas de CO2 son liberadas
por cada Acetil-S-CoA que entra al ciclo, reformando el oxaloacetato. Así las
reacciones del TCA actúan catalíticamente procesando Acetil-S-CoA continuamente

• La oxidación de los esqueletos de acetilo en el TCA es acoplado a la reducción de

NAD+ y FAD. La oxidación del NADH y FADH2 resultantes por la cadena
transportadora de electrones (CTE) aporta la energía para la síntesis de ATP y
regenera NAD+ y FADH2 en la respiración aeróbica, O2 sirve como el aceptor
terminal de electrones. En la respiración anaeróbica, esta función es llevada al
cabo por moléculas tales como NO3-, SO42- y Fe3+ .
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Ciclo del Ácido Cítrico y Energética Celular

Ecuación Balanceada: Acetil-S-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O
2 CO2 + 3 NADH + 1 FADH2 + GTP + HS-CoA + 3 H+
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Conexión de la Glucólisis con el Ciclo del Ácido Cítrico

Reacción del Complejo de Piruvato Deshidrogenasa:

• El piruvato procedente de la glucólisis en el citosol es transportado al interior de la

mitocondria, donde es convertido en Acetil-S-CoA mediante la descarboxilación
oxidativa por el complejo de Piruvato deshidrogenasa (PDH)
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Acción del Complejo de Piruvato Deshidrogenasa

Componentes y Función de sistema de PDH

• El complejo de PDH está formado por tres componentes catalíticos: Piruvato

deshidrogenasa, Dihidrolipoil-transacetilasa y Dihidrolipoil-deshidrogenasa

• La función del complejo de PDH requiere de cinco coenzimas: tiamina pirofosfato

(TPP), ácido lipóico, coenzima A (HS-CoA), FAD y NAD+
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Reacciones del Ácido Cítrico

Formación de citrato:

• La citrato sintasa cataliza la condensación de acetil-CoA y oxaloacetato para formar

citrato
• La reacción es altamente exergónica y representa un punto de control del ciclo
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Reacción del Ciclo del Ácido Cítrico

Isomerización del citrato:

• La aconitasa cataliza la isomerización de citrato por una vía estereoespecífica de

deshidratación y rehidratación
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Transformación del Isocitrato en a- cetoglutarato

• La isocitrato deshidrogenasa cataliza la descarboxilación oxidativa de isocitrato

produciendo a- cetoglutarato (a-KG) y el primer CO2 y NADH del ciclo de Krebs

• La catálisis electrostática representa un elemento crucial en esta reacción

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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Conversión del a-cetoglutarato en succinil-S-CoA

• La a-cetoglutarato deshidrogenasa cataliza la descarboxilación oxidativa del a-KG

por un mecanismo idéntico al complejo PDH. Los productos son succinil-S-CoA, el
segundo CO2 y el segundo NADH del ciclo.
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Conversión del a-cetoglutarato en succinil-S-CoA

• La succinil-S-CoA sintetasa cataliza la reacción acoplada de hidrólisis de un tioéster y

la fosforilación de GDP. Esta reacción represente otra estrategia de conservación de
energía por fosforilación a nivel de sustrato. El GTP es fácilmente interconvertido
con ATP mediante la nucleósido difosfato quinasa
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Conversión de succinato en fumarato

• La succinato deshidrogenasa cataliza la deshidrogenación estereoespecífica de

succinato en fumarato. El grupo prostético de la enzima FAD es reducido en esta
reacción redox y es re-oxidado cuando entrega los electrones a la CTE.
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Hidratación del fumarato

• La fumarasa cataliza la hidratación de fumarato en malato

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Restitución de oxaloacetato a partir de malato

• La malato deshidrogenasa cataliza la oxidación de malato, lo cual regenera

oxaloacetato y produce el tercer NADH del ciclo. Esta reacción es altamente
endergónica y es conducida hacia adelante por la reacción exergónica subsecuente
mediada por la citrato sintasa, la cual inicia la ronda siguiente del TCA
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Reacción neta:
Acetil-S-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H20 ----->
3NADH + 3H+ + FADH2 + GTP + CoA + 2 CO2
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Reacciones de conservación de Energía:

* Calculations based on the 2.5 ATP/NADH and 1.5 ATP/FAD stoichiometry

+ These values depend on the shuttle used to transport electrons into mitochondria
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Regulación del flujo de metabolitos:

• El complejo PDH se inhibe

alostéricamente por ATP y los productos
acetil-S-CoA y NADH. La presencia de
ácidos grasos de cadena larga acentúa el
efecto inhibitorio

• EL complejo PDH se activa

alostéricamente por AMP, HS-CoA y
NAD+

• Así, el complejo PDH es inhibido cuando

existe exceso de combustible (ácidos
grasos y acetil-S-CoA) y cuando las
relaciones [ATP]/[ADP] y [NADH]/[NAD+]
son altas. Pero es activado cuando estas
relaciones decrecen produciendo un flujo
mayor de acetil-S-CoA ciclo
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Regulación del flujo de metabolitos

• Dentro del ciclo el flujo de metabolitos es

regulado principalmente en los pasos
catalizados por las tres enzimas que
catalizan reacciones altamente
exergónicas:

a) citrato sintasa
b) isocitrato deshidrogenasa
c) a-cetoglutarato deshidrogenasa

• Los mecanismos regulatorios incluyen:

a) Disponibilidad de sustrato,
b) Inhibición por producto
c) Retroinhibición competitiva
d) Regulación alostérica
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Regulación del flujo de metabolitos:

Disponibilidad de Sustrato:

• La tasa de flujo de intermediarios a

través del ciclo puede ser limitada por la
por la disponibilidad de los sustratos de
la citrato sintasa, acetil-S-CoA y
oxaloacetato, o NAD+ .

• El nivel de o NAD+ disminuye por su

conversión a NADH disminuyendo la
velocidad de las tres deshidrogenasas
dependientes de NAD+.
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Regulación del flujo de metabolitos:

Inhibición por Producto:

• El citrato compite con oxaloacetato en la

reacción de citrato sintasa

• El succinil-S-CoA y NADH inhiben la a-

cetoglutarato deshidrogenasa
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Regulación del flujo de metabolitos:

Retroinhibición competitiva:

• El succinil-S-CoA compite con el acetil-S-

CoA en la reacción de la citrato sintasa
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Ciclo del Ácido Cítrico

Regulación del flujo de metabolitos:

Regulación Alostérica:

• El ADP activa la isocitrato

deshidrogenasa, mientras que el ATP lo
inhibe alostéricamente

• El ion Ca2+ activa la piruvato

deshidrogenasa, isocitrato
deshidrogenasa y la a-cetoglutarato
deshidrogenasa.

• El efecto del Ca2+ en el tejido muscular

estimula el metabolismo energético para
remplazar el ATP consumido durante la
contracción.
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Naturaleza Anfibólica del Ciclo

Función catabólica:

• Como procesos catabólico permite completar la oxidación de carbohidratos, ácidos

grasos (acetil-S-CoA) y aminoácidos que son convertidos a fumarato, succinil-S-CoA, a-
cetoglutarato y oxaloacetato)

Función anabólica

• Como proceso anabólico en ciclo del ácido cítrico aporta intermediarios para la
gluconeogénesis (oxaloacetato), biosíntesis de aminoácidos (oxaloacatato, a-
cetoglutarato), porfirinas (succinil-S-CoA) y biosíntesis de lípidos (citrato)
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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Naturaleza Anfibólica del Ciclo

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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Naturaleza Anfibólica del Ciclo:

Reacciones de reabastecimiento de intermediarios o reacciones anapleróticas.

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Reacciones del Ciclo del Ácido Cítrico

Reacciones del Ciclo en Bacterias

Anaeróbicas

• Las Bacterias Anaeróbicas carecen

de la a-ceto-glutarato
deshidrogenasa y no pueden llevar
al cabo el ciclo completo

• El succinil-S-CoA y el a-ceto
glutarato sirven como precursores
en una variedad de procesos
biosintéticos