Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Visión Global:

• El transporte electrónico es un proceso que permite conservar la energía libre de

las reacciones de oxidación y usarla en la formación de ATP.

• Los cofactores reducidos NADH y FADH2 generados en las reacciones metabólicas,

son re-oxidados en la mitocondria por un conjunto de reacciones en las que los
electrones fluyen a través de una serie de acarreadores redox, reduciendo
finalmente oxígeno en agua

• Durante el transporte de electrones, se desarrolla un potencial electroquímico a

través de la membrana interna de la mitocondria por la transferencia vectorial de
protones. Este gradiente de protones es estable debido a que la membrana
interna es impermeable a iones.

• La energía libre del gradiente electroquímico de protones es utilizada por la ATP

sintasa para catalizar la reacción exergónica ADP + Pi ATP. El acople del
gradiente electroquímico es descrito por la hipótesis quimiosmótica.
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Conceptos Esenciales:

• La oxidación completa de los átomos de carbono de la glucosa por la glucolisis y el

ciclo del ácido cítrico se puede escribir como :

C6H12O6 + 6H2O ---------> 6 CO2 + 24 H++ 24 e-

• Los equivalentes reductores (electrones) son capturados en la forma de coenzimas

reducidas (NADH y FADH2), las que eventualmente transfieren los electrones al
oxígeno molecular

6 O2 + 24 H+ + 24 e- --------> 12 H2O

• Este proceso regenera NAD+ y FAD y genera un gradiente de concentración de

protones a través de la membrana interna de la mitocondria, cuya disipación
aporta la energía libre para la síntesis de ATP. Este proceso se conoce como la
Fosforilación oxidante
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

La mitocondria es un organelo que contiene dos

membranas:

• La membrana externa rodea la estructura y permite

el libre paso de iones y moléculas pequeñas.

• La membrana interna es impermeable a iones y

envuelve una matriz tipo-gel, que contiene las
enzimas del ciclo del ácido cítrico y la oxidación de
ácidos grasos, así como una maquinaria genética
(que refleja el origen bacteriano del organelo)

• Los pliegues (crestas) incrementan la superficie

activa de la membrana interna, donde se ubican las
enzimas del transporte electrónico y fosforilación
oxidante, así como las proteínas mediadoras del
transporte de iones, metabolitos e intermediarios
implicados en los procesos energéticos y
biosintéticos
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Entrega de Electrones a la Cadena Respiratoria

La Coenzima NADH como Acarreadora de Electrones

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Entrega de Electrones a la Cadena Respiratoria

FADH2/FMNH2 (Flavoproteínas ) como acarreadores de electrones

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Ubiquinona o Coenzima Q (CoQ)

• La CoQ as una quinona lipofílica

que transporta electrones desde los
complejos respiratorios I y II al
complejo respiratorio III

• La reducción completa de la CoQ

requiere dos electrones y dos
protones

CoQ + 2H+ + 2e- CoQH2

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Citocromos

• Los citocromos son proteínas que

absorben luz visible debido a sus
grupos prostéticos (hemo) que
contienen hierro

• Los citocromos transportan un

electron a la vez

Fe3+ + 1e- Fe2+

• Las mitocondrias contienen tras

clases de citocromos ( a, b y c) , que
se distinguen por sus diferencias en
los espectros de absorción
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Citocromos

• Los grupos hemo de los citocromos a

y b están firmemente asociados a la
proteína, pero no de forma covalente

• Los hemo de los citocromos tipo c

están enlazados a través de residuos
de cisteína
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Proteínas de Hierro y Azúfre

• Se caracterizan por la presencia de los grupos prostéticos conteniendo hierro no

hemo enlazado con átomos de azúfre (centros Fe-S)

• Los átomos de hierro en los centro Fe-S aparecen enlazados con átomos de
azúfre de grupos tiol de cisteínas y con azúfre inorgánico
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Los potenciales redox de los transportadores de electrones se determinan

experimentalmente
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

El orden de los transportadores de electrones se puede establecer

espectrofotométricamente por el efecto de inhibidores del transporte de
electrones sobre el estado redox de cada acarreador
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Los Transportadores de Electrones Funcionan como Complejos Multienzimáticos

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Los Componentes de la Cadena Respiratoria se Pueden Separar Funcionalmente

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Flujo de electrones desde el NADH,

Succinato, Ácidos Grasos y Glicerol-3-
fosfato (G3P) a la CoQ

• Los electrones del NADH pasan a

través de una flavoproteína y una
serie de centros Fe-S (Complejo I)
• Los electrones del Succinato pasan a
través de una flavoproteína y algunos
centros Fe-S (Complej II)
• El G3P dona sus electronea a una
flavoproteína (G3P deshidrogenasa)
• Las flavoproteínas Acil-CoA
deshidrogenasa, ETF y ETF-Q
oxidoreductasa pasa los electrones
desde el Acil-CoA (Acidos Grasos)
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

NADH: Ubiquinona Oxidoreductasa

Complejo I

• El Complejo I promueve dos

prosesos obligadamente
acoplados: La transferencia
exergónica de electrones del
NADH a la CoQ (NADH + H+ + Q
NAD+ + QH2), con la
transferencia endergónica de 4
protones desde la matriz de la
mitocondria (lado N) al espacio
intermembrana (lado P)

• Este proceso es vectorial y la reacción se puede escribir como sigue :

NADH + 5H +N + Q NAD+ + QH2 + 4H+p

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Succinato Deshidrogenas (Complejo II)

• La SDH es una flavoproteína que

enlaza directamente la actividad el
ciclo del ácido cítrico con el
proceso de transporte de electrones

• La acción consnte en la sustracción

estereoespecífica de dos átomos de
hidrógeno con la producción de
fumarato.

• El fumarato sirve para restituir el

oxaloacetato
• La acción del Complejo II se describe con la siguiente ecuación:

Succinato + Q Fumarato + QH2

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Ubiquinona: Citocromo c oxidoreductasa (Complejo III)

• La acción del Complejo III involucra el ciclo de la CoQ con la siguiente ecuación:

QH2 + 2 cytc1 (oxidado) + 2H+N Q + 2 cytc1 (reducido) + 4H+p

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Transportadores de electrones:

Citocromo c Oxidasa (Complejo IV)

• El Complejo IV promueve el paso

final de la cadena respiratoria de
la transferencia de electrones del
citocromo c al oxígeno molecular
formando H2O

• El proceso “consume” un protón

por y tamién usa la energía del
proceso redox para bombear un
protón al esapcio P por cada
electrón que fluye del complejo

• La reacción neta de la citocromo oxidas se puede escribir como sigue :

4 citc (reducido) + 8H +N + O2 4 citc (oxidado) + 4H +N + H2O

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Energética del Transporte de Electrones:

• Durante el proceso los electrones fluyen del NADH o Succinato al O2

• La ecuación redox del NADH es:

NADH + H+ ½ + O2 NAD+ + H2O

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Energética del Transporte de Electrones:

La transferencia de dos electrones desde el NADH a través de la cadena

respiratoria al oxígeno molecular se puede escribir así:

NADH + H+ + ½ O2 NAD+ + H2O

Estareacción neta es altamente exergónica (favorecida termodinámicamente).

Para el par redox NAD+ /NADH, E´° es – 0.320 V, y para el par O2 / H2O,
DE´° es – 0.816 V. El E´° es 0.816 V. El DE´° para esta reacción en por lo tanto
1.14 V, y el cambio de energía libre estándar es

DG´° = - n F DE´°
= - 2(96.5 kJ/V. mol)(1.14 V)
= -220 kJ/mol (de NADH)
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Energética del Transporte de Electrones:

• El Flujo de Electrones a través de los complejos I, III y IV es acompanado por el

flujo de protones de la matriz al espacio intermembrana

• La ecuación vectorial para el proceso es:

NADH + 11H +N + ½ + O2 NAD+ + 10H +N + H2O

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Modelo Quimiosmótico: Peter Mitchel 1961

El modelo quimiosmótico establece que la fuerza protonmotriz impulsa la síntesis de

ATP

Relación Estequiométrica Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

https://www.youtube.com/watch?v=gHX3kWHUuiU
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Energética del Transporte de Electrones:

• La energía de transferencia de electrones se conserva como una fuerza

protonmotriz
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

La energía de transferencia de electrones se conserva como una fuerza

protonmotriz
DG = -RT ln (C2/C1) + Z Dj (1)

Donde , C2 y C1 son las concentraciones del ión en las dos regiones , y C2 > C1 :
Z es el valor absoluto de su carga eléctrica (+1 para un protón), y es la
diferencia transmembrana en el potencial medido en volts (V).
Para Protones a 25 °C

ln (C2/C1) = 2.3 (log [H+] ext - log [H+] int )

= 2.3 (pH int - pH ext ) = 2.3 DpH
Y la ecuación 1 se reduce a:
DG = -2.3 RT DpH + Z Dj (2)
= (5.70 kJ/mol) DpH + 96.5 kJ/V . Mol) Dj
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Estructura de la ATP Sintasa

• La ATP sintasa tiene dos dominios funcionales (F1 y Fo)

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Sintesis del ATP

• La síntesis de ATP ocurre por un mecanismo de catálisis conformacional

 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

• Enlace a Animación sobre Gradiente de Protones y Síntesis de ATP

https://www.youtube.com/watch?v=LQmTKxI4Wn4
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

La fuerza protonmotriz también impulsa el transporte del ATP y precursores

Sistema de intercambio
(Antiportador) de ATP/ADP

Sistema de Sintasa del ATP

impulsado por el gradiente
electroquímco de H+

Sistema de Cotransporte
(Simportador) de Fosofato- H+
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

El sistema de vaivén (lanzadera) de Malato/Aspartato conduce indirectamente los
electrones del “pool” de NADH citosólico al “pool” de NADH de la mitocondria
 Bioquímica II QBP CTE/FO

Transporte Electrónico y Fosforilación Oxidante

Sistema de Vaiven de la Glicerol-3-fosfato Deshidrogenasa.
El sistema de vaivén de
la Glicerol-3-fosfato
Deshidrogenasa Incluye
dos isoformas de la
enzima: Una forma
citosólica que depende
de (NADH + H+) y una
forma mitocondrial,
ubicada en la monocapa
externa de la membrana
interna mitocondrial y
que depende de FAD.

Los electrones del NADH

citosólico son
transferidos a la cadena
respiratoria, como
equivalentes de FADH, a
través de la coenzima Q