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Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas


Carrera: Química y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio
Asignatura Inmunología
Número de la INVESTIGACIÓN DE PRUEBAS REUMÁTICAS POR TÉCNICA
Práctica AGLUTINACIÓN
#3
Docente Dra. Angie CastroVera MSc.
Grupo G3-B
Nombre Quintero Quintero Aldana
Objetivos de la práctica de laboratorio
1- Aprender el fundamento de la técnica de aglutinación o floculación.
2- Conocer la reacción antígeno y anticuerpo
3- Conocer la significación clínica de la prueba, que servirá como herramienta diagnóstica para el
tratamiento y curación de los pacientes afectados con la enfermedad .
Instrucciones o consideraciones previas
✓ Prueba de factor reumatoideo (FR)
Los factores reumatoideos son proteínas producidas por el sistema
inmunitario. Normalmente, su sistema inmunitario produce proteínas
llamadas anticuerpos para atacar gérmenes que podrían enfermarle. Sin
embargo, los factores reumatoideos son anticuerpos que en ocasiones atacan
células y tejidos sanos en su cuerpo por error. Cuando esto ocurre, usted tiene
un trastorno inmunitario.
No todos tienen factores reumatoideos en su sangre. Además, algunas
personas que los tienen están sanas. Pero, si usted tiene ciertos síntomas y
niveles más altos de factores reumatoideos, puede tener un trastorno
autoinmune u otro problema de salud relacionado con niveles altos de factores
reumatoideos.

Por lo general, la prueba de factores reumatoideos se utiliza en su mayoría con otros análisis para ayudar a
diagnosticar artritis reumatoide. La artritis reumatoide es un tipo de trastorno autoinmune que causa dolor,
hinchazón y rigidez. Es una afección crónica (de larga duración) que también afecta sus órganos y causa otros
síntomas.

Niveles altos de factores reumatoideos también pueden ser un signo de otros trastornos autoinmunitarios,
ciertas infeciones y algunos tipos de cáncer.
La prueba de factor reumatoideo se usa para el diagnóstico de la artritis reumatoide y otros trastornos
autoinmunes. La prueba de los factores reumatoideos también puede utilizarse para entender qué tan severa es
la artritis reumatoide y si es probable que afecte los órganos. Una prueba de factores reumatoideos no puede
diagnosticar otros problemas de salud.

Los síntomas de artritis reumatoide pueden incluir:


➢ Dolor en las articulaciones
➢ Sensibilidad, hinchazón y calor en las articulaciones
➢ Rigidez en las articulaciones que dura más de 30 minutos
➢ Fatiga
➢ Fiebre baja ocasional
➢ Pérdida del apetito
➢ Problemas más allá de las articulaciones que pueden incluir ojos o boca seca, bultos firmes debajo de
la piel o anemia

✓ ASTO (ASLO) Antiestreptolisina O


La antiestreptolisina O es un anticuerpo en respuesta al antígeno bacteriano
de naturaleza enzimática eliminado por el Estreptococo beta hemolítico del
grupo A, al medio extracelular durante los procesos infecciosos, que tienen la
capacidad de desarrollar serias complicaciones no purulentas como fiebre
reumática y glomerulonefritis, posterior a un período de latencia, durante el
cual el paciente es asintomático y tiene duración entre 10 y 20 días. La
determinación de títulos elevados de antiestreptolisina O, confirman infección
aguda reciente por Estreptococo beta hemolítico del grupo A como resultado
de amigdalitis, sepsis puerperal y erisipela por estreptococo A.

Los anticuerpos antiestreptolisina O (ASLO) están dirigidos frente a la estreptolisina O, una toxina producida
por la bacteria Streptococcus pyogenes (estreptococo del grupo A). Los ASLO y los anti-DNasa B son los
anticuerpos que el sistema inmunitario del organismo produce con más frecuencia, como respuesta a una
infección por el estreptococo del grupo A. Esta prueba mide la cantidad (título) de antiestreptolisina O en la
sangre.

El estreptococo del grupo A es el responsable de la mayoría de las faringoamigdalitis bacterianas y de


muchas infecciones de la piel (pioderma, impétigo, celulitis). En la mayoría de casos las infecciones por
estreptococo pueden identificarse y tratarse con antibióticos, resolviéndose satisfactoriamente.

Sin embargo, cuando la infección no causa signos o síntomas identificables y por lo tanto no recibe tratamiento
o este es inadecuado, pueden aparecer complicaciones post-estreptocócicas como la fiebre reumática y la
glomerulonefritis, especialmente en los niños. En la actualidad, la incidencia de estas complicaciones ha
disminuido sustancialmente. Sin embargo, todavía pueden observarse y pueden causar enfermedades
cardíacas, enfermedad renal, hinchazón de los tejidos por retención de líquido (edema) e hipertensión arterial.
Los ASLO permiten conocer si estas complicaciones son debidas a una infección reciente por el estreptococo
del grupo A.

✓ Prueba de proteína C reactiva (PCR)


La prueba de proteína C reactiva mide el nivel de proteína C reactiva (PCR) en
una muestra de sangre. La PCR es una proteína producida por el hígado.
Normalmente, usted tiene niveles bajos de proteína C reactiva en su sangre. Su
hígado libera más PCR en su torrente sanguíneo si usted tiene inflamación en
su cuerpo. Los niveles altos de PCR pueden significar que tiene un problema de salud serio que causa
inflamación.

La inflamación es la manera en que el cuerpo protege los tejidos y ayuda a sanar heridas, infección u otras
afecciones. La inflamación puede ser aguda (repentina) y temporal. Por lo general, este tipo de inflamación es
útil. Por ejemplo, si usted se corta la piel, puede tornarse roja, hinchada y causar dolor por unos días. Estos son
síntomas de inflamación. La inflamación también puede ocurrir dentro del cuerpo.
Si la inflamación dura demasiado, puede dañar tejidos sanos. A esto se le llama inflamación crónica (de larga
duración). Las infecciones crónicas, ciertos trastornos inmunitarios y otras afecciones pueden causar
inflamación crónica dañina. La inflamación crónica también puede suceder si sus tejidos se dañan o irritan
repetidamente, por ejemplo, por fumar o por químicos en el ambiente.
Una prueba de proteína C reactiva puede mostrar si usted tiene inflamación en su cuerpo y cuánta tiene. Sin
embargo, la prueba por sí misma no determina qué está causando la inflamación o que parte del cuerpo está
inflamada.

La prueba de proteína C reactiva se puede utilizarse para ayudar a encontrar o vigilar inflamación en afecciones
agudas o crónicas, incluyendo:

➢ Infecciones bacterianas o virus


➢ Enfermedad inflamatoria intestinal, trastorno de los intestinos que incluye enfermedad de
Crohn y colitis ulcerativa
➢ Trastornos autoinmunes, como lupus, artritis reumatoide y vasculitis
➢ Enfermedades pulmonares, como asma
Reactivos de laboratorio
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex-poliestireno sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR.
B. Control Negativo: dilución de suero negativo.
C. Control Positivo: dilución de suero positivo.
Materiales de laboratorio
1.-Pipetas automáticas
2.-tubos de ensayo
3.- Puntas descartables para pipetas automáticas.
4.-Placas de plástico o vidrio de fondo negro

Equipos de laboratorio
1.-Microscopio
2.- Centrifuga
3.- Estufa

Actividades por desarrollar/ técnica operatoria


PROCEDIMIENTO
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente antes de usar.
Agitar el Reactivo A antes de usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.
✓ TECNICA CUALITATIVA
Muestra 1 gota Reactivo A 1 gota PCR-látex C directo 870790000 / 02 p. 2/6
Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una suspensión uniforme en toda la superficie del
círculo.
Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar macroscópicamente
el resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos.
✓ TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en 8 tubos de Kahn.
a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo Nº 1 y mezclar.
c)Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo Nº 2 y mezclar, continuando así las diluciones hasta el último
tubo. Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.
d) Ensayar cada dilución según la TECNICA I.

Resultados obtenidos
Negativo: suspensión homogénea. Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos. Se califica de 1
a 4 +. Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente. La
concentración aproximada de PCR en la muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente: PCR (mg/l) =
Título x Sensibilidad de la reacción (6 mg/l) Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su concentración
de PCR es de 2 x 6 = 12 mg/l.

Conclusión:
Se pudo concluir que con ninguna reacción febriles se consigue realizar un diagnóstico definitivo de
cualquier enfermedad. Se debe tener en cuenta que el uso inadecuado de estas pruebas o su mal
interpretación generalmente derivan en el uso injustificado de antibióticos
Recomendaciones:
✓ Tener el área de trabajo libre
✓ Se debe utilizar guantes para no estar expuestos al que el virus quede en nuestro cuerpo sea el caso
deque sea una persona infectada
✓ Seguir la técnica paso a paso como lo indique el docente.
✓ Manipular los reactivos con prolijidad, para evitar su contaminación.
Bibliografía
✓ Prieto, M. F., Kilstein, J., Bagilet, D., & Pezzotto, S. M. (2008). Proteína C reactiva como factor
pronóstico de mortalidad en la unidad de cuidados intensivos. Medicina intensiva, 32(9), 424-430.
✓ Merlano, E. S. P., Gutiérrez, A. F., & Quiroz, R. N. (2022). Asociación entre biomarcadores
inmunológicos con el riesgo cardiovascular en adultos jóvenes. Ciencia e Innovación en Salud.
✓ Durán, Y., & Andrade-Vera, E. M. (2022). Factor reumatoide y antecedentes clínicos asociados a la
prevalencia de enfermedad reumática en adultos. Ciencia Latina Revista Científica
Multidisciplinar, 6(2), 597-611.

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