MICOLOGIA

Dirección de Calidad Educativa

 PROPÓSITO

Reconocer los diferentes

métodos de diagnóstico para
las micosis
 PROCEDIMIENTO DE DIAGNOSTICO
EN LAS MICOSIS

I. Epidemiológicos Edad
Sexo
Ocupación
Lugar de procedencia
Otros casos similares
Mecanismo de infección

II. Clínicos Aspectos de las lesiones

Tiempo de evolución
Organos afectados
Signos y síntomas
Factores de oportunismo
 PROCEDIMIENTO DE DIAGNOSTICO
EN LAS MICOSIS

Toma de la muestra
Examen microscópico directo
De aislamiento e Frotis
identificación Cultivo
Inoculación en animales

Inmunofluorescencia
Presipitación en capilar
Inmunodifusión
III. Laboratorio Inmunológicos Contrainmunoelectroforesis
R.F.C. Western Blott
ELISA
Intradermorreacciones

Requerimientos nutricionales
Asimilaciones
Fisiológicos Fermentaciones
Hidrólisis
Reducción de sales
 PROCEDIMIENTO DE DIAGNOSTICO
EN LAS MICOSIS

IV. Gabinete Radiografía

Tomografía axial computada
Ecograma
Luz de Wood

V. Histopatológicos
 Diagnóstico de las micosis
• La información que proporciona el laboratorio es esencial para el Dgco. De las
infecciones micóticas
*Examen directo(Dgco. presuntivo o preliminar)
*Cultivo (Dgco definitivo:aislamiento e identificación del agente etiológico)

• Depende de la adecuada toma de muestra:

• Selección apropiada de muestras clínicas.

• Rechazo de los productos inadecuados.
• Datos clínicos orientadores de las micosis.
• Cantidad de muestra.
• Tiempo
• Transporte y almacenamiento.
• Indicaciones para el paciente.
 Clases de Micosis

• Micosis superficiales: piel, pelos, uñas.

a) Dermatofitos
b) Levaduras
c) Otros (piedra)
• Micosis subcutánea : dermis, músculos, huesos.
• Micosis profunda o sistémica: inhalación de
esporas del hongo, llega a pulmón y puede
diseminarse a otros órganos.
 Clases de Micosis

• Micosis Profunda ó sistémica

a) Hongos patógenos verdaderos:

Paracoccidioides brasiliensis
Histoplasma capsulatum

b) Hongos oportunistas:
Cryptococcus neoformans
Aspergillus spp.
Candida spp.
Mucor,Fusarium y otros.
 Obtención de la muestra

• Es importante que el paciente esté sin terapia

antimicótica. De lo contrario suspender 5 días
antes.
• El tipo de muestra y la técnica de la toma de
muestra dependen de la sospecha del agente
micótico.
• En caso de utilizar hisopos de algodón estériles ,
deben ser colocados en tubos de vidrio con tapa
rosca conteniendo 1 mL de solución salina estéril.
Toma de muestra de piel
Toma de muestra de cuero cabelludo
 RELACION ENTRE TIPO DE MUESTRA Y MICOSIS
MICOSIS MUESTRAS
SUPERFICIALES
Dermatofitosis Escamas de piel, pelo, uñas
Pitiriasis versicolor Raspado directo de piel

OPORTUNISTAS
Candidiasis Exudado de mucosas, flujo vaginal, material purulento,
secreciones, orina, sangre, médula ósea, biopsias,
LCR, líquido pleural, líquido peritoneal, otros.
Criptococosis LCR, esputo, aspirado bronquial, orina, biopsias,
sangre, médula ósea, exudado de úlceras, material
purulento, secreción prostática.
Aspergilosis Esputo, aspirado bronquial, material purulento o
necrótico, biopsias, secreciones, sangre.
Fusariosis Raspado y secreción de córnea, esputo, aspirado
bronquial, material purulento, líquidos corporales,
sangre.
PROFUNDAS
Histoplasmosis Esputo, aspirado bronquial, médula ósea, sangre,
biopsias, exudado de lesiones mucosas y cutáneas,
material de ganglios linfáticos, LCR, otros líquidos
corporales.
Paracoccidioidomicosis Esputo, aspirado bronquial, secreción pulmonar,
exudades de mucosas y lesiones de piel, material
purulento, biopsias, orina, LCR, otros líquidos corporales
Diagnóstico de laboratorio
Examen directo:
–KOH al 10%
–Tinción Gram
–Tinta China
–H-E y/o MPG
–Wright-Giemsa
 Diagnóstico de Laboratorio:
EXAMEN DIRECTO
• Montaje con KOH al 10%.
• Es el más utilizado.
• En Mx.de piel, raspado de uñas y pelos infectados, disuelve el “cemento” que
mantiene pegadas a las células queratinizadas
• En Mx. De esputo limpia los restos del fondo que puedan confundirse con
elementos micóticos.
• Se puede añadir Glicerol al 20%, para evitar la precipitación del KOH.

Técnica:
• Colocar Mx. En una lámina limpia que contenga una gota de KOH al 10%.
• Calentar ligeramente en la llama del mechero p! Facilitar el aclaramiento (no
hervir)
• Colocar un cubreobjetos y dejar reposar a T.A. X 30’ si la Mx es gruesa o viscosa.
• Observar al microscopio
 DIAGNÓSTICO MICOLÓGICO:
CULTIVO
• MEDIOS DE CULTIVO
• AGAR SABOURAUD DEXTROSA
• Es el medio de cultivo más utilizado
• Se puede agregar cloramfenicol al 0.05%, para inhibir el desarrollo bacteriano
• Se siembra la muestra por duplicado
• Se incuba a 2 temperaturas (25ºC y 37ºC) para demostrar el dimorfismo en aquellos géneros que lo presenten.

• AGAR HARINA DE MAIZ: Prueba de clamidospora

• MEDIO BASE – CARBOHIDRATOS: Requerimientos nutricionales p’ desarrollo de lavaduras

• AGAR UREA BASE: Identificaciòn de C. neoformans y algunas especies de Candida.

• AGAR INFUSIÓN CEREBRO- CORAZÓN: Aislamiento y subcultivos de P. braziliensis e H. capsulatum

 IDENTIFICACIÓN DE PRICIPALES HONGOS
PATÓGENOS IDENTIFICACIÓN DE
CANDIDA
1.1. Identificación mediante criterios morfológicos
a) Criterios macroscópicos

Candida albicans
IDENTIFICACIÓN DE CANDIDA

1.1. Identificación mediante criterios morfológicos

b.1) Criterios microscópicos

•Prueba del tubo germinal o

filamentación precoz
Suero humano o conejo
 IDENTIFICACIÓN DE CANDIDA
1.1. Identificación mediante criterios morfológicos

b.2) Criterios microscópicos

• Formación de hifas, blastoconidias,clamidosporas:

• Agar Harina de Maíz, Leche diluida , Agar Arroz

Micelios y levaduras de Candida albicans teñidos con blanco de calcofluor.

Microscopio de fluorescencia, X 1000.
 IDENTIFICACIÓN DE
CANDIDA
1.2. Identificación mediante criterios bioquímicos

a) Mètodo convencional

09/10/2005 12 09/10/2005 12
 IDENTIFICACIÓN DE
CANDIDA
1.2. Identificación mediante criterios bioquímicos

b) Criterios bioquímicos enzimáticos

• Medios cromogénicos : aislamiento e identificación, en
base.
Aislamiento e identificación de algunas especies del género
Candida incubados a 30-37 °C durante 24 a 48 h.
CHROMagar Candida®
Agar Biggy
 IDENTIFICACIÓN DE Cryptococcus
neoformans
• DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO.
• CULTIVO.
• ASD.
• AGAR NIGER SEED.
• Guizotia abyssinica.
• TIPIFICACION.
• ASIMILACION DE
AZUCARES.
• UREA.
• CGB.
 IDENTIFICACIÓN DE Cryptococcus
neoformans
UREA

FENOLOXIDASA
IDENTIFICACIÓN DE Cryptococcus neoformans

GLU LAC SAC MAL GAL RAF

 Sistema semiautomáticos:
API 20 C AUX
• De 20 cúpulas con sustratos deshidratados
• Para 19 pruebas de asimilación
• Las levaduras se reproducen si son capaces de
utilizar el sustrato correspondiente
• Identifica aprox 34 especies de levaduras
• Lectura por comparación con el control de
crecimiento.
• La identificación es a partir de un código numérico
ingresando a u programa
 Sistema Automáticos

• Sistema vitek 2
• Sistemas Biolog YT MicroPlate
• Rapid Yeast Identification Panel MicroScan

Pruebas Bioquímicas enzimáticas

• RapIDYaest Plus System
• Fongiscreen 4H