DEPARTAMENTO DE CIENCIAS

GUÍA PARA LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER O CAMPO

DE LA VIDA

CÓDIGO: DCVI-GS-v3-2018-001

DEPARTAMENTO DE
CIENCIAS DE LA INGENIERIA EN
DEPARTAMENTO: CARRERA:
VIDA Y LA BIOTECNOLOGÍA
AGRICULTURA

Período Mayo-Septie
ASIGNATURA: Biología Animal NIVEL: 2
Lectivo: mbre 2021

DOCENTE: Sarah Martin Solano NRC: 5225-5221 PRÁCTICA N°: 3

LABORATORIO DONDE SE
Online
DESARROLLARÁ LA PRÁCTICA

TEMA DE LA Protozoarios y Platelmintos

PRÁCTICA:

INTRODUCCIÓN:

Los protozoos son organismos unicelulares con características en común con el reino protista y
presentan varias cualidades, Álvarez A, (2017) define las siguientes: son considerados heterótrofos ya que
realizan procesos como la fagocitosis y pinocitosis, poseen núcleo propio con formas diversas, se encuentran
individualmente o formando colonias, utilizan estructuras diferenciadas como cilios, flagelos, seudópodos
para su movilización, mientras que su reproducción puede ser asexual por medio de la fisión binaria, como
también sexual por medio de la formación de gametos, tienen la capacidad de formar quistes para lograr
sobrevivir en diversos medios y pueden parasitar a animales y seres humanos.

Los platelmintos son organismos aplanados, simétricos e invertebrados; pueden ser componentes
libres y encontrarse en su mayoría en medios acuáticos, al igual que en medios terrestres y cálidos; en cuanto
su estructura poseen sistemas como el digestivo con ausencia de ano y el nervioso altamente desarrollado ya
que trabaja en presencia de órganos y estímulos sensoriales, mientras que carecen de sistema circulatorio y
exoesqueleto o coraza, recubiertos únicamente de una capa simple (epitelio y músculos) usualmente con
cilios permitiéndoles adquirir distintas formas y moverse a través del sustrato, su reproducción se da a través
de la fertilización cruzada que consiste en la formación de espermas que luego se intercambian entre estos

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gusanos; pueden ser parasitarios (Neodermata) que con ayuda de su tegumento tienen la capacidad de robar
nutrientes de varios hospederos considerándose un éxito parasítico. (Collins, 2017).

Los parásitos son microorganismos que se encuentran en constante unión y dependes de varios
hospederos (intermediarios, definitivos) para su supervivencia, constituye la mayor causa de enfermedades
infecciosas y duraderas en los seres humanos, algunos ejemplos recalcables son: Leishmania, provoca
infección cutánea y visceral; Plasmodium, causante de fiebre, malestar, dificultad para respirar; Giardia
duodenalis, produce alergías, diarrea, fatiga, entre otros; se han desarrollado varios mecanismos como
barreras físicas e inmunológicas para evitar dicho contagio (Theel & Pritt, 2016).

OBJETIVOS:

Adquirir conocimiento básico de las formas de vida de los protozoarios y helmintos.

MATERIALES:

REACTIVOS:

Solución salina fisiológica/agua destilada INSUMOS:

Formaldehído 40% / formalina al 10% Internet

Éter/ diethyl ether

EQUIPOS:

Computadora

MUESTRA:

Heces fecales

INSTRUCCIONES:

Analizar bien los protocolos y los videos a disposición

ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

1) Lea el siguiente protocolo a detalle:

Protocolo de extracción de protozoarios y platelmintos

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Método de Ritchie modificado

Instituto de Salud Pública y Zoonosis - Proyecto Primates Ecuador

a) 1g de materia es diluido en 10ml de agua destilada y filtrada para remover los desechos

b) Agregar agua destilada al tubo de ensayo si hace falta para centrifugar.

c) La solución es centrifugada por 1 minuto a 2000 rpm.

d) Se descarta el sobre nadante

e) Agregar 5 ml de formalina al 10% y mezclar, esperar 10 minutos

f) Agregar 1.5 ml de diethyl ether y se agita por 1 minuto

g) Luego la suspensión se centrifuga por 2 minutos a 1500 rpm

h) Se remueve la grasa con un hisopo y el sobre nadante se quita

El sedimento que queda se mezcla con una pipeta Pasteur y se toma una muestra de una gota para
observar bajo el microscopio como se observa en la siguiente imagen.

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2) Vea el siguiente video:

https://www.youtube.com/watch?v=qBk3LtJf3vg

3) Responda a las siguientes preguntas:

a) ¿En que afecta a la técnica de Ritchie, el uso del formol al 10% (guía) y al 40% (video)?

b) ¿Cuál será la función de la solución salina fisiológica (video) en vez de agua destilada (guía),
influye su uso a que la técnica tenga mejores resultados?

c) ¿Qué ventajas y desventajas nos proporcionara el centrifugar a mayor tiempo y a mayor rpm
según el video en comparación a la técnica de la guía?

d) ¿Cuál es la función del Ether en la técnica de Ritchie?

e) ¿Que otras técnica coproparasitarias se pueden utilizar para identificar parásitos en heces?

f) ¿Qué tipos de protozoarios y helmintos ocurren en áreas con poca higiene y por qué?

g) ¿Por qué los niños son más propensos a tener infecciones con oxiuros?

h) ¿Por qué los Áscaris no son digeridos en el tracto digestivo de los hospedadores?

RESULTADOS OBTENIDOS:

a) ¿En que afecta a la técnica de Ritchie, el uso del formol al 10% (guía) y al 40% (video)?

El método de Ritchie fue fundamental para el diagnóstico de enfermedades parasitarias, con una sensibilidad
y especificidad del 100%, por lo que se debe complementar con el método convencional de coproparasitario
directo para tener un resultado más veraz y confiable. El uso de formol como desinfectante de nacedoras
tiene un efecto positivo para disminuir la carga microbiológica del ambiente, el método más efectivo en la
desinfección es la aplicación de Formol al 40% durante 10 minutos, en donde el porcentaje de
contaminación solo alcanzo el 23,33%; sin embargo, no se evidencio regeneración alguna de los
explantes.así también al realizarse la técnica de concentración de Ritchie, va a permitir utilizar una buena
cantidad de muestras, donde se busca eliminar las grasas de las heces para dejar visible a los parásitos y
poder ser identificados en el microscopio. (Villareal, 2020)

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b) ¿Cuál será la función de la solución salina fisiológica (video) en vez de agua destilada (guía),
influye su uso a que la técnica tenga mejores resultados?

El Cloruro de Sodio al 0,9% nos da mejores resultados ya que es el cristaloide no balanceado de amplio uso
en nuestro país. Es isotónica pero su composición dista mucho de ser fisiológico para el organismo humano.
El ion cloruro es el electrolito más abundante después del sodio con un rol clave en la regulación de los
fluidos corporales, balance electrolítico, la preservación de electro neutralidad, del estado ácido básico y es
un componente esencial de muchas condiciones patológicas. (Rojas, 2019)

c) ¿Qué ventajas y desventajas nos proporcionara el centrifugar a mayor tiempo y a mayor rpm
según el video en comparación a la técnica de la guía?

Las técnicas de sedimentación de Ritchie utilizan solución formolada al 10%, las técnicas de sedimentación,
se utilizan para la observación de quistes de protozoos, huevos y larvas de helmintos, pero la desventaja de
estas técnicas consiste en que los preparados contienen más residuos que los procesados por flotación. En
este caso, el acetato de etilo se usa para extraer los residuos y las grasas de las heces y llevar los parásitos al
fondo de la suspensión. Estas técnicas entonces son recomendadas por ser fáciles de realizar, tener baja
probabilidad de errores técnicos y recuperar un amplio rango de organismos.

Ellos consideraron que probablemente este parásito se deforme por la centrifugación y quede en el anillo de
residuos que resulta de la aplicación de esta técnica de sedimentación. Sin embargo, la frecuencia de
diagnóstico de B. hominis observada en el presente trabajo fue mayor utilizando esta técnica que los restantes
métodos de concentración. (Rojas, 2019)

d) ¿Cuál es la función del Ether en la técnica de Ritchie?

Siendo que la técnica de Ritchie permite diagnosticar parásitos intestinales, el éter participa en la misma
como un agente liberador de los parásitos de la grasa. En ese momento, las formas parásitas se disuelven por
acción del formol. Una vez hecha la centrifugación, se encuentra en la muestra quistes por sedimentación
que ya pueden ser analizados. Por este método, las formas parasitarias se conservan lo suficientemente
sólidas, mostrando 4 capas diferenciadas, de arriba hacia abajo: éter superficial, restos fecales, formaldehído
y elementos parasitarios asentados en el fondo (Garcés, 2020).

e) ¿Qué otras técnicas coproparasitarias se pueden utilizar para identificar parásitos en heces?

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Otra técnica que se puede usar para identificar parásitos en heces es la de Kato-Katz-Saf. Este método,
avalado por la OMS, permite analizar geohelmintiasis. Una de sus desventajas más significativas es que el
análisis del mismo solo puede ser hecho hasta 2 días después de que se tomó la muestra, por la degradación
de los huevos. Esta técnica usa el fijador SAF, compuesto por acetato de sodio, ácido acético y formaldehído.
Para realizar este procedimiento, se sumerge la muestra en SAF, para luego tomar 2 gramos de materia fecal.
Posteriormente, se coloca una malla de 200 micro poro encima de la muestra fecal, presionando con una
espátula hasta que filtre. Una vez que esta materia fecal haya filtrado, se coloca en una placa Kit-OMS, la
cual se instala en un portaobjetos y se cubre con papel celofán hidrofílico, el cual fue sumergido previamente
en glicerina verde por un día completo. Si la muestra está estirada totalmente en el portaobjetos, se debe
esperar 3 cuartos de hora para que se aclare la muestra. Finalmente, se puede observar la cantidad de huevos,
la cual representa 1/24 de la cantidad de huevos en gramo de heces. (Forero y Carreño, 2017).

f) ¿Qué tipos de protozoarios y helmintos ocurren en áreas con poca higiene y por qué?

Los protozoarios y helmintos ocasionan muchas infecciones intestinales, siendo que estos principalmente se
transmiten por el agua. Protozarios como los Cryptosporidium spp, Giardia spp, Entoamoeba spp o
Balantidium spp. se encuentran en varias fuentes de agua contaminada, pues son altamente resistentes.
(Castillo y Rovira, 2020). En el caso de los helmintos, causan enfermedades por el ingreso de sus larvas en el
suelo, a través de las heces contaminadas. Esto se da en zonas donde la higiene es deficiente. Los helmintos
más comunes de encontrar en estos casos son Ascaris lumbricoides (ascáride), Trichura trichura (tricocéfalo)
o Necator americanus (anquilostoma). Las condiciones de los ambientes no higiénicos permiten mayor
proliferación de estos parásitos. (Silva de la Cruz, 2021).

Esto se da porque la mayoría de parásitos intestinales, como los protozoarios y helmintos, se proliferan
mayoritariamente en zonas de bajo saneamiento; usando a fuentes de agua o alimento como vector. Por
ejemplo, lugares donde aún se practica la defecación en el ambiente, tiene mayor probabilidad de
transmitirlos. Mientras exista poca higiene, los protozoarios y helmintos tendrán mecanismos de
supervivencia. (Nichols, 2016).

g) ¿Por qué los niños son más propensos a tener infecciones con oxiuros?

Los niños son más propensos a desarrollar estas infecciones ya que estos paracitos se encuentran de manera
muy sencilla ya sea un agua no potable, en poblaciones de escasa pobreza y principalmente en el suelo, es

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por eso que los niños son más vulnerables ya que ellos se llevan la mano a la boca después de gatear o tocar
algo sucio y no existe un previo lavado de manos, así mismo los niños pasan alrededor de más niños ya sean
en parques, jardines, escuelas y también tienen la costumbre de compartir comida, así mismo los juegos y
hasta los baños y son exactamente lugares que se encuentran las larvas o huevos de estos parásitos llamados
oxiuros. Estos parásitos afectan a su digestión principalmente sufren de gran pérdida de hierro y no pueden
absorber todos los nutrientes necesarios para su buena alimentación. (Pérez, 2017).

h) ¿Por qué los Áscaris no son digeridos en el tracto digestivo de los hospedadores?

No son digeridos ya que ingresan las larvas o pequeños huevos los cuales luego se logran trasladar al
corazón o a los pulmones mediante el torrente sanguíneo o el sistema linfático después de unos 15 días
aproximadamente acabo su etapa de madurez por consiguiente pueden salir del cuerpo por medio de un
estornudo o al toser y hay otras que vuelven a ingresar aquellas se van al intestino a convertirse en gusanos.
(Wang y Davis, 2020).

CONCLUSIONES:

● Podemos concluir que aprendimos la manera en la cual los protozoarios y platelmintos se

desarrollan durante toda su vida. Mediante el método de sedimentación de Ritchie se logra ver
a estos protozoarios y platelmintos en las heces, o mejor dicho si el organismo está infectado
por esos parásitos. Con este método dice que al visualizar no es visible a simple vista, también
logramos aprender que estos parásitos son muy fáciles de adquirirlos ya que si no se
encuentran en condiciones favorables o que no exista una higiene correcta somos propensos a
adquirir estos parásitos.
● El nivel de sanidad es un factor muy importante para evitar la transmisión de formas parásitas,
tales como los helmintos y protozoarios. Estas formas parásitas pueden causar varias
afecciones a la salud, por lo que se debe procurar condiciones adecuadas de higiene.
Afortunadamente, técnicas coproparasitarias como la de Ritchie o Kato-Katz-Saf permiten
identificar a las formas parásitas, para ofrecer un oportuno tratamiento. Igualmente, la
visualización de las formas parásitas compactadas, en el método de Ritchie, permitió mayor
comprensión del nivel de quistes existente en las heces fecales, de acuerdo a la parasitosis.
● Adquirimos conocimientos básicos de los protozoarios, platelmintos y parásitos,
profundizamos previamente en cuanto sus características principales de cada uno como
taxonomía, ciclo de vida, hábitat, reproducción, especies relevantes, entre otras; para así
lograr su extracción e identificación gracias al método de Ritchie.
● Observamos que el método de Ritchie se puede realizar de varias maneras cambiando algunos
componentes o concentraciones de cada compuesto variando su porcentaje y así al momento

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de realizar la sedimentación, observarlo de mejor manera en el microscopio consiguiendo

mejores resultados al momento de observar los parásitos existentes en nuestro organismo.

RECOMENDACIONES:

Consultar el material disponible para la práctica antes de realizar el laboratorio.

FIRMAS

F: F: F:
………………………… ………………………… ……………………………
…………………. ……………………. ………………………

Nombre: Sarah Martin Nombre: Jakeline Torres Nombre: Patricia Jiménez

Solano COORDINADOR DE ÁREA JEFE DE LABORATORIOS
DOCENTE DE CONOCIMIENTO MULTIDISCIPLINARIOS

BIBLIOGRAFÍA

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