CÓDIGO DE

GUIA PARA LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER DOCUMENTO:

O CAMPO. DCIV-GUI-2019-V1-
008

DEPARTAMENTO: CIENCIAS DE LA VIDA CARRERA: ☒ Ing. Agropecuaria ☐ Ing. Biotecnología

MAYO 2020 -
TALLER DE CAMPO DE PERIODO
ASIGNATURA: SEPTIEMBRE 2020 (SI NIVEL: Octavo
BIOTECNOLOGÍA LECTIVO:
202050)
DOCENTE: ING. MAYRA RONQUILLO NRC: 6411 PRÁCTICA N°: 3

LABORATORIO DONDE SE DESARROLLARÁ LA PRÁCTICA LABORATORIO DE TALLER DE CAMPO

TEMA DE LA
Cultivo de yemas y meristemos (Siembra in vitro de yemas de especies de interés)
PRÁCTICA:
INTRODUCCIÓN:

Se define como la reproducción de una planta a partir de una célula, un tejido, un órgano (raíces, tallos, ramas, hojas), siendo así que cualquier
parte de una planta puede dar origen a otra de iguales características según sean las condiciones de crecimiento (luz, temperatura, nutrientes,
sanidad, etc.); las células no diferenciadas que los conforman tienen la información genética y las propiedades fisiológicas de producir una
nueva planta con iguales características de la planta madre, propiedad conocida como totipotencia

La técnica micropropagación in vitro de plantas expone importantes ventajas que se relaciona al incremento acelerado del número de plantas
por cada genotipo, la reducción del tiempo de multiplicación, producción permanente de material, la posibilidad de multiplicar grandes cantidades
de plantas en una superficie reducida simplificando costos, tener un mayor control sobre la sanidad del material propagado, facilidad para el
transporte del material, posibilidades de multiplicar con rapidez una variedad o ecotipo del cual se posean pocos individuos.

Cultivo de meristemos. Técnica de cultivo que consiste en aislar asépticamente la región meristemática con 1-3 de los primordios foliares más
jóvenes e implantarla en un medio de cultivo estéril, con el propósito de inducir la diferenciación de células y tejidos en plantas completas,
mediante la utilización de medios de cultivos adecuados.

El explante más usado para los procesos de propagación in vitro son las yemas vegetativas de las plantas. Los frascos que contienen las
plantas se ubican en estanterías con luz artificial dentro de la cámara de crecimiento, donde se fija la temperatura en valores que oscilan entre
los 21 y 23°C, además de controlar la cantidad de horas de luz.
OBJETIVOS:
Sembrar in vitro las yemas y meristemos de diversas especies forestales
MATERIALES:
INSUMOS:
Frascos con medio de cultivo MS
REACTIVOS: Pinzas
Alcohol antiséptico Cajas Petri
Agua destilada Algodón
Hipoclorito de Sodio Bisturí
Papel parafilm
Cajas Petri
EQUIPOS:
Microscopio compuesto
Cámara de flujo laminar
Cámara de crecimiento
MUESTRA:
Especies forestales, ornamentales, medicinales y comerciales
INSTRUCCIONES:
Se deberá conocer la ubicación de los elementos de seguridad en el lugar de trabajo, tales como: Extintor, salidas de emergencia, mantas
ignífugas, lavaojos, gabinete para contener derrames, accionamiento de alarmas, etc.
No se debe comer, beber, fumar o maquillarse en el laboratorio.

No se debe guardar alimentos en heladeras que contengan drogas o preparados.

Se debe utilizar vestimenta apropiada para realizar trabajos de laboratorio, mandil (preferentemente de algodón y de mangas largas) y zapatos
cerrados. Evitar el uso de accesorios colgantes (aros, pulseras, collares, etc.). y cabello recogido.
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Se debe utilizar cobertores de zapatos, guantes y mascarilla.

Las mesas de trabajo, deben estar limpios.

Cuando se vierta cualquier producto químico debe actuarse con rapidez, pero sin precipitación.

Si se vierte sobre una persona cualquier ácido o producto corrosivo, lavarse inmediatamente con mucha agua y avisa al profesor.

Al preparar cualquier disolución, se colocará en un frasco limpio y rotulado convenientemente. Normas referentes a la utilización del material de
vidrio.

Cuidado con los bordes y puntas cortantes de tubos u objetos de vidrio. Alisarlos al fuego. Mantenerlos siempre lejos de los ojos y de la boca.

El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frío. Para evitar quemaduras, dejarlo enfriar antes de tocarlo (sobre ladrillo, arena,
planchas de material aislante.

Las manos se protegerán con guantes o trapos cuando se introduzca un tapón en un tubo de vidrio.

El material de vidrio roto no se depositará con los residuos comunes. Será conveniente envolverlo en papel y ubicarlo en cajas resistentes.
ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
- Aislamiento y desinfección del material vegetal (yemas y meristemos). Corte en secciones el material vegetal, lávelos con agua y jabón
azul. Colóquelos en una solución de cloro al 2% y agite en una plancha magnética por 15 a 20 minutos. En la cámara de flujo laminar,
lave el material vegetal con agua destilada estéril
- Corte los extremos del material vegetal que se encuentra necrosado, y siembre en el medio de cultivo preparado con anterioridad,
tome en cuenta la polaridad.
- Selle los frascos e incube en la cámara de crecimiento.

Cuestionario

1. ¿Qué medidas tomaría usted para evitar la contaminación del medio del cultivo y del explante sembrado?
2. Defina micropropagación
3. Porque se debe considerar la polaridad cuando se siembra el explante?
4. Qué objetivo tiene la desinfección del explante dentro y fuera de la cámara de flujo laminar?
5. Cuál es la importancia de utilizar hormonas de regulación en el medio de cultivo? Explique.
6. Cuáles son las variantes de la propagación vegetativa?
RESULTADOS OBTENIDOS:
Cumplir las medidas de prevención de accidentes del personal y estudiantes que acuden al laboratorio. Realizar el proceso de estilizar de una
forma adecuada.
CONCLUSIONES:
Cumplir con las normas de bioseguridad evitará sufrir accidentes, procesos infecciosos, riesgos a la salud.
Un proceso adecuado de esterilización disminuirá la contaminación en medios de cultivo y prácticas de laboratorio en general.
RECOMENDACIONES:
Siempre se ha de llevar el mandil de laboratorio abrochado.
Está totalmente prohibido trabajar en el laboratorio con lentes de contacto.
Utilizar calzado que cubra totalmente los pies.
Mantener el orden y la disciplina.
FIRMAS

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Nombre: ING. MAYRA RONQUILLO Nombre: DR. IVAN NARANJO Nombre: DRA. SANDRA NARANJO
COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR/JEFE DE LABORATORIO
DOCENTE CONOCIMIENTO