(CAMPUS SUR)

DEPARTAMENTO: INGENIERÍA BIOMÉDICA (CCI)

MATERIA: LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

MAESTRA: CLAUDIA MONTSERRAT VALLE RODRÍGUEZ

SEMESTRE: 2 GRUPO: B

PRACTICA NO.4

“EXTRACCIÓN, SEPARACIÓN E PRÁCTICA IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS”

GUTIÉRREZ RAMÍREZ MARÍA REGINA 284813

MIRANDA GAONA MIRIAM MONTSERRAT 243605

RODRÍGUEZ DE LA FUENTE JENNIFER ABRIL 316388

Jueves 10 de marzo del 2022

 Introducción

Los lípidos son un grupo heterogéneo de biomoléculas. A causa de su diversidad, el término

lípido tiene una definición más operativa que estructural. Los lípidos se definen como
aquellas sustancias de los seres vivos que se disuelven en solventes apolares, como el éter, el
cloroformo y la acetona, y que no lo hacen de manera perceptible en el agua. Las funciones
de los lípidos también son variadas. Diversas clases de moléculas lipídicas son componentes
estructurales importantes de las membranas celulares. Otro tipo, las grasas y los aceites son
almacenes de energía eficientes. Otras clases de moléculas lipídicas son utilizadas como
señales químicas, vitaminas o pigmentos.

La mayoría de los lípidos se clasifican en tres categorías: triglicéridos, esteroles y

fosfolípidos. El componente más importante de los verdaderos grupos de grasas es el
triglicérido o triacilglicéridos, una molécula de glicerol y ácidos grasos de tres grasas.
Ocupando la mayoría de los lípidos en alimentos y productos casi integrales; Además, a
menudo forman una mezcla de diferentes ácidos grasos con la proporción determinada por la
grasa. Los ácidos grasos son carbono lineal e hidrógeno con un grupo carboxilo en un
extremo. En la naturaleza, se presentan principalmente en el número de pares de carbono que
van desde 4 a 20; El más común es de 16 a 20. La cadena de ácidos grasos puede estar
saturada, esto es, con ligadura sencilla entre carbono y carbono; monoinsaturada si
presenta doble ligadura, y poliinsaturada cuando la cadena incluye dos o más
enlaces dobles. Las propiedades de los ácidos grasos y de los triglicéridos varían de
acuerdo a la longitud de la cadena, así como del grado de saturación que
presentan. Un ejemplo de ácido graso es el butírico.El ácido graso monoinsaturado es el
principal constituyente del aceite de oliva. La instauración del ácido graso confiere la
propiedad de ser líquido. El organismo sintetiza los ácidos grasos mencionados cuando
dispone de cantidades de nutrimentos energéticos, mayores a las que el cuerpo requiere; de
este modo constituye una reserva energética. La función de estas reservas es proteger órganos
importantes e impedir la pérdida excesiva de calor, es decir,actúan como aislante y en
los mecanismos de termorregulación. Los ácidos grasos poliinsaturados que más a
menudo figuran en los alimentos son: el ácido linoleico (18 átomos de carbono y 2 enlaces
dobles), el ácido linolénico (18 átomos de carbono y 3 enlaces dobles) y el araquidónico (20
átomos de carbono y 4 dobles enlaces). El ácido linolénico es la base de los conocidos ácidos
grasos omega 3, recomendados para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares y el
funcionamiento cerebral, entre otros.

Objetivo

El alumno será capaz de extraer lípidos de tejidos vegetales e identificarlos, por medio de una
separación de sustancias en dos fases una etérea y otra acuosa.

Material

Material Reactivos

Vaso de precipitado Sudan III

Mortero Mezcla de Folch (2:1 Cloroformo - Metanol)
Recipiente para Baño María
Parrilla eléctrica
5 matrices de 50 ml
Embudo
Pinzas para tubo de ensaye
Papel filtro
Aplicador de madera

Material de origen vegetal

Cacahuates
Almendras
Pistache
Aguacate
Nuez

Metodología
1.- Se tomó una muestra del tejido (Cacahuates, Almendras, Pistaches, Aguacate y Nuez) y se
homogeneizó en el mortero.
2.- Se colocó la muestra en el vaso de precipitado y posteriormente se agregó un poco de mezcla
de Folch (se cubrió en exceso la muestra), se agitó vigorosamente con un aplicador de madera,
hasta que se disolvió la grasa en la mezcla.
3.- Se colocó el papel filtro sobre el embudo y éste se colocó sobre el matraz en donde
posteriormente se filtró la mezcla. En el papel filtro se quedó las proteínas y otras substancias
insolubles en la mezcla y en el filtrado se quedó las grasas disueltas
en la mezcla de cloroformo-metanol, para ello se necesitó evaporar en donde de esta manera se
consiguió un extracto puro.
4.- La evaporación se efectuó con precaución (los disolventes son flamables y se requirió
precauciones extremas) en un baño maría; se evaporó a sequedad y se dejó enfriar.
5.- Se agregaron unas gotas de Sudán III a la muestra obtenida y se observó resultados.

Resultados

Fig. 1
Se observa la nuez posterior a evaporarla
y colocar el Sudán III, observamos una
coloración roja intensa.
Fig. 2
Se observa la almendra posterior a la
evaporación y sometida a Sudán III, hay
una coloración roja no tan intensa y quedó
muy poca cantidad.
Fig. 3 Fig. 4
Se muestra el pistache posterior a Se muestra el tejido de aguacate posterior
evaporarlo y colocar el Sudán III, se a la evaporación y al colocado de la
muestra una coloración café muy clara. muestra Sudán III, se observa un color
café intenso.
 Fig. 4
En la foto podemos ver los materiales ya evaporados y secos junto al reactivo Sudan III
él cual se agregó a las muestras y se dejó en reposo para ver el cambio.

Almendra (fig. 2) Nuez (fig. 1)

Ácido palmítico 2 – 6% Ácido 40 - 70%

monoinsaturados

Ácido esteárico 1 – 3% Ácidos saturados 7%

Ácido oléico 60 – 78% Aguacate (fig. 4)

Ácido linoleico 10 – 30% Ácidos grasos 10 - 19%

Pistache (fig. 3) Ácido oleico 80%

Ácido 40 - 70% Ácidos grasos 11 - 15%

monoinsaturados poliinsaturados

Ácidos saturados 7%

Discusiones
“la muestra se extrae con una solución de coloroformo:metanol 2:1, se debe tratar para eliminar
el agua extraída en un embudo de decantación para separar la fase orgánica que se recoge, se
lava con una solución salina y a continuación se evapora para proceder a calcular el contenido
total de grasa y con una alícuota determinar los ácidos grasos.” propuesta por Folch et al. (1957)
teniendo esto en cuenta, podemos asociarlo a un buen manejo del método propuesto,
verificando que este método propuesto realmente funcionar, como primera parte del
proceso, se tiene la homogeneización, con el fin de sacar los lípidos desde la matriz, y
posteriormente se adiciona la solución de cloroformo-metanol que también menciona por esto
podemos observar que para determinar los ácidos grasos de la grasa o del tejido muscular, los
métodos más usados son los de Folch et al (1957) como se muestra en las figuras (1-4)
“La separación de las fases no es completa y los lípidos quedan en la capa clorofórmica con
algunos componentes no lipídicos, existen varias proteínas hidrofóbicas, en la membrana que
son soluble en el cloroformo” (Zhukov y Vereshchagin, 1981). Comprobando que al realizar la
filtración de nuestros estados líquidos y sólidos queda una mezcla conjunta de lípidos y proteínas
así como también con el baño María logramos obtener un extracto puro, evaporando a sequedad
y dejando enfriar.
El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque es
lipofílico, es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de
color rojo anaranjado.(Porras B. 2017) con esto podemos observar que en la (figura 4) los
colores cambiaron por lo que este reactivo reacciona por colorimetría marcando una
tonalidad rosa en la mayoría de los casos, a excepción del pistache que pasó a tomar un color
café claro o naranja y el aguacate en donde el color pasa a tornar un café muy intenso.

Conclusión
Se logró separar e identificar los lípidos de manera efectiva. Se cumplió el objetivo de la
práctica, conociendo los ácidos grasos presentes en los tejidos de vegetales, tales como la nuez y
la almendra, pistache y aguacate. En base con lo realizado en esta práctica se conocieron las
propiedades de algunos tipos de lípidos y también se comprendió las diferencias que
se encuentran en cada uno de ellos.
 Bibliografía

● Moreno-Aliaga, M. J. (2011, 29 julio). DADUN: El tejido adiposo: órgano de

almacenamiento y órgano secretor. EL TEJIDO ADIPOSO: ÓRGANO DE
ALMACENAMIENTO Y ÓRGANO SECRETOR.
https://dadun.unav.edu/handle/10171/18785
● Neira, L. S. H., & Nutricionista-Dietista, P. U. J. La importancia de las grasas en
la alimentación infantil
https://lapalmaesvida.com/wp-content/uploads/2019/07/Grasas_en_la_alimentaci
on_infantil.pdf
● Núñez, C. E. (2008). Extracciones con equipo Soxhlet. Obtenido el, 15.
● HERRERA, M. D., NÁJERA, M. D. J. F., CARRASCO, G. A. P., BUGARÍN, O.
G. R., & GONZÁLEZ, J. A. P. (2015). Metodología para la extracción,
identificación y cuantificación de ácidos grasos en la dieta y leche de cabras.
https://www.academia.edu/download/51823135/Folleto_INIFAP_-_metoAcidosG
Leche.pdf
● DE LABORATORIO, G. D. P., & JEREZ, A. G. UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA YA
DISTANCIA.
● D.E.A. (2018, 7 octubre).

http://dea.unsj.edu.ar/quimica2/LABORATORIO%203%20LIPIDOS.pdf.

http://dea.unsj.edu.ar

Cuestionario
1. ¿Qué es un solvente?

Aquel líquido (en mayor cantidad en una mezcla) que propicia la separación de las
moléculas o las partículas de un gas, un sólido u otro fluído, solventando las moléculas
del soluto (sustancia que se disuelve en menor cantidad).

2. ¿Qué es el tejido adiposo? ¿Cuál es su función y su importancia en los mamíferos?

El tejido adiposo es un reservorio de grasa y juega un papel fundamental en el

mantenimiento del balance energético en mamíferos, pero es algo más que un reservorio
de energía, algunas de sus funciones más importantes es el almacenamiento ya que en los
periodos de ingesta calórica las células del tejido adiposo almacena la energía en forma
de grasa(lipogénesis) y la utilizan degradando en los periodos de ingesta calórica
reducida(lipolisis), pero también cuenta con otras funciones como metabolismo y
distribución lipídico, aislamiento térmico, amortiguadora, regulación de la ingesta, entre
otras

3. ¿Qué importancia tienen los vegetales que contienen grasas en la alimentación?

Las grasas de los alimentos constituyen una importante fuente de energía y un aporte de
ácidos grasos esenciales y de vitaminas liposolubles, logrando proteger los órganos o
bien regulando la temperatura corporal.

4. Investigue cual es el fundamento teórico que explica la coloración que se obtiene con el
Sudan III al unirse a los lípidos presentes en las diferentes semillas utilizadas en la
practica

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo,
cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
5. Investigue otra técnica para determinar o extraer ácidos grasos.

Extracción de ácidos grasos de la grasa láctea. La extracción de ácidos grasos de la

grasa láctea se realizó siguiendo el método propuesto por Hara y Radin (1978), que
consistió en usar una solución de hexano:isopropanol a razón de 18 mL/ g de grasa,
seguido de una solución de sulfato de sodio a una proporción de 12 mL/ g de grasa.
Después de agregar la mezcla de solventes en la proporción correspondiente al peso de la
muestra, se dejó reposar por espacio de 2 horas para alcanzar su completa disolución. Los
ácidos grasos disueltos en hexano (sobrenadante) fueron removidos con una pipeta
Pasteur y colocados en un nuevo tubo previamente pesado y rotulado. Los ácidos grasos
se recuperaron evaporando el hexano por medio de un baño de agua a 80°C. Una vez
evaporado el hexano se pesaron nuevamente los tubos en una balanza analítica y por
diferencia de peso se obtuvo el peso de los ácidos grasos.