Sistema ABO

1665-1666 Wilkins & Lower transfunden de un perro a otro. En 1667 Jean-Baptiste Denis realiza la 1ª transfusión de
animales a humanos. En 1818 James Blundell realiza la primera transfusión entre humanos. Estas se hacían
directamente de donante a receptor y se producían reacciones hemolíticas que muchas veces mataban al receptor.

En 1900 Karl Landsteiner estableció la existencia de grupos sanguíneos, los cuales eran responsables de esta
intolerancia a las transfusiones. En sus experimentos utilizó muestras de sus colaboradores y realizó cruzamientos
entre el suero de estas personas y GR de otras, obteniendo distintos patrones de aglutinación. Así llegó a establecer
los grupos sanguíneos ABO y se le considera como el padre de la inmunohematología.

Ley de Landsteiner: existen 2 antígenos (A y B) y 2 anticuerpos (anti-A y anti-B). Asumió la presencia de Ac en el suero
de individuos que no expresan dichos antígenos, es decir, si una persona no expresa el antígeno A y B, va a tener
anticuerpo anti-A y anti-B, y si una persona expresa el antígeno A va a tener anticuerpos anti-B.

Herencia Sistema ABO

Controlado por las leyes de Mendel. Están los alelos comunes A1, A2, B y O, y otros menos frecuentes (A3, Ax, Am…).
Berstein en 1924 propone el modelo de los 3 alelos (A, B y O) como otras formas de un único locus. Cada individuo
hereda 2 genes ABO, (uno de los 3 alelos de cada padre) los que determinan la presencia de los antígenos ABO.

Existen 6 posibles genotipos AA, AO, BB, BO, AB y OO. A y B son dominantes sobre el O, si está presente en forma
heterocigota el AO se expresa solo el antígeno A. Por lo tanto, hay 4 fenotipos A, B, AB y O. El gen O es silente, su
existencia se deduce por la ausencia de los Ag A y B en la membrana, es decir, el gen O no se expresa a menos que
sea homocigoto.

Los antígenos A y B son azúcares que se expresan en la membrana del GR. Son glicoproteínas (80-90% HC y 10-20%
AAs) de PM entre 300k a 1M. Cada molécula consta de 40 a 100 HC unidos a una base peptídica de 15 aminoácidos.
Azucares comunes son L-fucosa, D-galactosa, N-acetilglucosamina, N-acetilgalactosamina y ácido siálico.

Los antígenos ABH se presentan como glicoproteínas, glicolípidos o como oligosacáridos libres. Esto quiere decir que
podemos encontrar antígenos A B H presenten en la saliva, suero u orina (solubles)

ANTÍGENOS ABO

Los antígenos A y B se desarrollan de una sustancia

precursora o sustancia H. Los genes de tres locus (ABO,
Hh y Se) originan y controlan la aparición y ubicación
de los antígenos A y B.

- Los genes de los loci Hh y Se, se encuentran ligados

en el cromosoma 19.
- Cada locus tiene dos alelos, uno de los cuales no
revela ningún producto y se considera amorfo.
- El alelo activo H del locus H sintetiza una
glucosiltransferasa que actúa a nivel celular para
formar los antígenos sobre los que se construyen
los A y B.

En la imagen se ven los genes H y el gen secretor,

ubicados en el cromosoma 19. El locus secretor codifica la fucosiltransferasa 2 y el locus H codifica la
fucosiltransferasa 1, unas transferasas de fucosa fundamentales para la síntesis de los grupos sanguíneos.
Antígeno H

La L-Fucosa es el azúcar responsable de la especificidad de la sustancia H. El antígeno

H es un residuo de fucosa terminal en una unión a-1,2- en la cadena precursora de
carbohidratos de dos diferentes tipos.

✔ La enzima a-1,2-fucosiltransferasa 1 (a2FucT1) forma el antígeno H en las

cadenas precursoras tipo 2 en tejidos eritroides y endotelial.
✔ La cadena de carbohidratos que incluye el antígeno H es el substrato para
producir los antígenos A y B.
✔ El antígeno H es el precursor tipo 1, producido por la enzima a-1,2-
fucosyltransferasa 2 presente en células secretoras del tracto digestivo y
respiratorio. Hay actividad de grupo sanguíneo en estas células y en secreciones.

En la membrana del GR, como elemento fundamental para la síntesis de los

antígenos de grupos sanguíneos, debemos tener una sustancia precursora a la cual
la fucosiltransferasa1 añade el antígeno fucosa, generando el antígeno H. Este
antígeno H ayuda al ensamble de los antígenos A o B, por lo tanto, si no existe
sustancia H previamente en el GR no es posible sintetizarlos. Indirectamente el gen
en el cromosoma 19 y su producto (fucosiltransferasa) va a incidir en la síntesis de
los grupos sanguíneos.

En la imagen se puede ver la sustancia precursora sin el antígeno H (sin la fucosa

adicionada), luego la fucosiltransferasa1 transfiere esa fucosa y genera el Ag H.

El gen ABO está ubicado en el cromosoma 9, en la locación 9q341-q342 y este dará origen a otras transferasas que
permiten la síntesis de los grupos sanguíneos.

El alelo O presenta un codón de término por lo que no se sintetice un producto de este, es silente.
Para el alelo A y B, el producto que se genera es una transferasa. Estos alelos no codifican directamente para el Ag A y
el B, sino que para dos transferasas que participa en la síntesis del Ag A y del B.

Glicosiltransferasas A y B

A-2-L fucosil transferasa (producida por el gen H) sintetiza la sustancia H.

Sobre esa sustancia H existente en el GR va a actuar la a-N-acetilgalactosaminil
transferasa producida por el gen A o la a-D-galactosil transferasa producida
por el gen B. Entonces el gen A y el B producen transferasas para que se
agregue N-acetilgalactosamina o D-galactosa sobre la fucosa de la sustancia H
produciendo el antígeno A o B.

El alelo O es no funcional debido a que el gen no puede producir enzimas

glicosiltransferasas funcionales. Por lo tanto, en su superficie solo tienen
sustancia H sin otra enzima que genere un nuevo antígeno. Entonces el alelo O
es no funcional y los sujetos solo portan en sus GR sustancia H.

Las transferasas A, B y H han sido encontradas en varios fluidos orgánicos y

tejidos, como leche, saliva, mucosa gástrica y plasma. Por lo que existe
actividad de grupo sanguíneo en otros fluidos.
DESARROLLO

Los recién nacidos expresan menos (25-50%) antígenos A/B en los GR que los adultos, por eso las clasificaciones de
grupos sanguíneos de los niños pueden sufrir variaciones en el tiempo.

- Pueden presentar o no substratos aceptores, afectando la expresión, tales como UDP-GalNac o UDP-galactosa
- Carencia del substrato (sustancia H)
- Existe competencia entre las diferentes glicosiltransferasas por los mismos sustratos
- Entre los 2 y 4 años se completa la expresión de los antígenos

Cambios a nivel upstream van a generar mutaciones en la estructura génica, transcripción del mRNA o modificaciones
post-traduccionales que pueden afectar la expresión de los antígenos.

Es importante señalar que los antígenos ABO van a variar de acuerdo con la edad, raza, interacción de alelos y
enfermedades o procesos patológicos. Carcinogénesis va a impactar en una menor expresión de antígenos de grupos
sanguíneos y pérdida de expresión, asociado a disminución en la actividad de las transferasas, por lo tanto, una
persona con algún proceso patológico puede ver alterada la expresión de su grupo sanguíneo y en las
determinaciones podría costar dar con el grupo real del paciente.

Gen secretor (Se): cuando está presente, las secreciones acuosas como saliva, lágrimas y leche contienen
glicoproteínas solubles con actividad de grupo sanguíneo A, B y H. Estas poseen los mismos azúcares que determinan
la actividad antigénica. SeSe o Sese tienen en la saliva glicoproteínas con actividad H, A y/o B dependiendo de los
genes. Los sese no son secretores (20%); grupo O solo secretan sustancia H.

ANTICUERPOS SISTEMA ABO

Tienen importancia en las determinaciones de grupos sanguíneos y en las reacciones post-transfusionales. Todos los
individuos poseen Ac contra los correspondientes antígenos A y B que no presentan en sus células. Es la base para la
determinación del grupo ABO, pues se realiza mediante 2 pruebas simultáneas (prueba globular y prueba sérica o de
grupo inverso), donde por un lado se determinan los antígenos presentes en los GR y por otro los anticuerpos que
porta esa persona.

El origen de anti-A y anti-B

Individuos del grupo O tienen Ac anti-A y anti-B de manera natural, sin haberse expuesto a transfusiones o embarazos
incompatibles. Los Ag de los grupos sanguíneos son azúcares y su composición puede ser similar a la que hay en otros
elementos como plantas y bacterias. Un RN no tiene anticuerpos anti-A ni anti-B, pero el polvo, los alimentos y otros
agentes estimulan el desarrollo de Ac.

- Los Ac naturales son preferentemente IgM, mientras que Ac inmunes son IgG
- Estos anticuerpos pueden cambiar
- Los anticuerpos del sist ABO son en su mayoría IgM, también podría haber anticuerpos de tipo IgG desarrollados
de una transfusión o embarazo incompatible

La sustancia H se encuentra en la estructura de muchos individuos por lo que el anticuerpo anti-H es bastante raro,
pero puede darse en algunos grupos como el A1 y A1B. El anti-A posee dos actividades anti-A y anti A1

IgM anti-A y anti-B no se detectan en el RN, se sintetiza entre los 3 y 6 meses con títulos más altos entre los 5 a 10
años. En ancianos los títulos son más bajos que en jóvenes
Provocan aglutinación o hemólisis dependiente de complemento, se detecta observando una coloración rosada en el
sobrenadante tras centrifugar en la prueba de clasificación. No se produce si los GR testigos (usados para detectar Ac)
se suspenden en EDTA

Anti-A y anti-B pueden ser:

o IgM: naturales o aglutinantes; inmunización ambiental

o IgG: inmunes; secundario a embarazo ABO o transfusión
incompatibles, también plasma conteniendo sustancias de
grupo sanguíneo (teórico, no ocurre en la práctica),
inyección de sustancias A y B purificadas, inoculación con
productos virales o bacterianos que contienen sustancias
activas de grupo sanguíneo (casos excepcionales)

Suero anti-A, B: Ac anti-A y anti-B que pueden ser separados

de la mezcla y que atraviesan la placenta (IgG EHRN). Detecta
variantes débiles de A y de B como el subgrupo Ax

Anticuerpo anti-H: es muy poco frecuente. El fenotipo Bombay desarrolla Ac anti-H muy potentes. Existe un Ac anti-H
como aglutinina fría en personas de grupo A1 o A1B, pero no alcanza la potencia del Bombay debido a que en ellos
toda la sustancia H ha sido utilizada.

TIPIFICACIÓN ABO/Rh

Debe ser en base a clasificaciones en tubo o en soporte de geles.

- En la técnica convencional en tubo se pueden ver los distintos grados

de aglutinación.
- El soporte de gel tiene la ventaja de que es reproducible y permite almacenar fotos
de las clasificaciones. Es más sensible que el tubo (detecta aglutinaciones más
débiles), pero no lo reemplaza, pues el tubo permite salir de dudas respecto a las
clasificaciones

Análisis genético del sistema ABO

- PCR-RFLP: restricción de fragmentos de longitud polimórfica

- PCR-SSCP: primer secuencia específico permite detectar porción blanco que se quiera
medir en el gen ABO
- PASA: amplificación alelo específica

Se puede utilizar PCR o qPCR.Se puede hacer PCR múltiple utilizando diferentes partidores que flanquean zonas del
gen ABO. Así se obtiene un bandeo característico de los diferentes grupos.

En gel se ve la presencia o no de los productos de PCR y se determina el

genotipo, permitiendo el análisis ante discrepancia en la clasificación y
cuando los test convencionales no son capaces de revelar el grupo de la
persona. No se hace de rutina, solo para muestras complicadas en lab de
referencia.