Guía de Laboratorio

Laboratorio de Biología II
Biología celular

Tema: Hemoclasificación

Objetivo general

Conocer los grupos sanguíneos existentes.

Objetivos específicos

Identificar tipos de sangre y el factor Rh

Demostrar las relaciones que establecen antígenos y anticuerpos

Comprender las reacciones de aglutinación producidas por la interacción antígeno-

anticuerpo

Introducción

El descubrimiento del grupo sanguíneo ABO en el año 1900 por el científico Austríaco Karl
Landsteiner, causó gran entusiasmo en la comunidad científica de la época. Hasta
entonces, toda la sangre se consideraba igual en todas las personas, y no se entendían las
consecuencias a menudo trágicas de las transfusiones de sangre. Con los descubrimientos
realizados en el grupo sanguíneo ABO, no sólo la transfusión de sangre en el mundo se
hizo más segura, sino que permitió el estudio de una de las primeras características
hereditarias humanas descubiertas más importantes en medicina. El grupo sanguíneo ABO
ha sido también utilizado para la confirmación de pruebas de paternidad, para el estudio de
las víctimas en medicina forense, y por los antropólogos en el estudio de diversas
poblaciones. Los antígenos de grupo sanguíneo ABO son de gran importancia en medicina
transfusional; son los más inmunogénicos de todos los antígenos de los grupos sanguíneos,
convirtiendo la transfusión de sangre ABO incompatible en la causa más común de muerte
por este procedimiento. A pesar de su importancia clínica, las funciones fisiológicas de los
antígenos del grupo sanguíneo ABO siguen siendo un misterio. Se han realizado
numerosas asociaciones entre algunos fenotipos ABO y una mayor susceptibilidad a
determinadas enfermedades; por ejemplo, el grupo sanguíneo O se ha asociado con mayor
riesgo de desarrollar úlcera gástrica, en tanto que el grupo sanguíneo A se ha asociado con
mayor riesgo de cáncer gástrico 1.

ANTÍGENOS DEL SISTEMA ABO

Se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta semana y sexta semana del embrión y no
se desarrollan completamente hasta después del nacimiento. Durante el crecimiento, se van
adicionando los azucares terminales sobre la cadena de oligosacáridos en la
membrana de los eritrocitos dando origen a cada uno de los antígenos de forma específica.
Hay 3 genes que controlan la expresión de los antígenos ABO: 1. El gen H: ubicado en el
cromosoma 19, codifica para la producción de una enzima transferasa (transferasa H), que
une una molécula de L-Fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un precursor común unido a
los lípidos o proteínas de membrana del eritrocito, dando origen al antígeno H, el cual es el
paso anterior en la formación de los antígenos de los grupos sanguíneos ABO 1. El
sistema ABO es de gran importancia en el campo médico por su aplicación en transfusión
de sangre y trasplante de tejidos; en genética, para identificación personal y pruebas de
paternidad y en el campo antropológico para hallar diferencias étnicas según
su distribución; es, además, el único sistema en el cual se presentan anticuerpos en el suero
de forma natural, desarrollados contra monosacáridos de la flora intestinal, los cuales
también están presentes en los grupos sanguíneos 2.

Fenotipo Bombay: Se caracteriza por la ausencia de los antígenos A, B y H tanto sobre los
eritrocitos como en las secreciones, debido a la herencia de dos genes hh en el locus H.
Individuos q son homocigotos para el gen nulo (h/h) no produce antígeno H y desarrollan
anticuerpos anti H; Debido a que estas personas son deficientes en los antígenos A, B y H,
ellos producen antiH, anti -A y anti-B de origen natural. 2. El gen ABO: Ubicado en
el cromosoma 9 posee tres alelos1.

Alelo A: Codifica para la enzima transferasa A que cataliza la adición de un residuo de N-

acetilgalactosamina (GalNAc) al antígeno H, generándose así el antígeno A.

Alelo B: Codifica para la enzima transferasa B que cataliza la adición de un residuo de D-

galactosa (Gal) al antígeno H, generándose el antígeno B.

Alelo O: Sólo difiere del alelo A en la deleción de un nucleótido (guanina G en la posición

261), lo que tiene como consecuencia un cambio en el marco de lectura y la producción de
una proteína sin actividad de transferasa. 3. El gen Se: ubicado en el cromosoma
19, codifica para una enzima (fucosiltransferasa) que se expresa en el epitelio de
tejidos secretores, incluidas las glándulas salivares, el tracto respiratorio y gastrointestinal.

ANTICUERPOS SANGUÍNEOS: La mayoría de las pruebas serológicas en inmuno-

hematología dependen de reacciones entre antígenos en los glóbulos rojos y anticuerpos
en el suero. Los anticuerpos sanguíneos son usualmente Ig G y/o IgM y en casos raros IgA.
La capacidad de fijar complemento por algunos de estos anticuerpos es también importante
para el entendimiento de algunos fenómenos en vitro y en vivo. Usualmente los anticuerpos
IgG tienen mayor significado clínico y en enfermedad Hemolítica del recién nacido son los
anticuerpos IgG los responsables de la enfermedad. Por otro lado, reacciones hemolíticas
transfusionales causadas por anticuerpos IgM con fijación de complemento pueden causar
hemolisis intravascular severa y reacciones transfusionales hemolíticas causadas por
anticuerpos IgG pueden causar hemolisis extravascular y reacción menos severa 1.

REACCIONES ANTIGENO ANTICUERPO. En la combinación de un anticuerpo con su

antígeno específico en los eritrocitos, el azúcar terminal del antígeno se combina con el
anticuerpo. Esta combinación es específica así por ejemplo los anticuerpos anti A solo
reaccionarán con el antígeno A. En inmunohematología la respuesta inmunológica de
importancia es la humoral o mediada por linfocitos B, caracterizada por producción
de anticuerpos por células plasmáticas como respuesta a estímulo antígeno específico.
Existen dos tipos de respuesta inmune 1:

a) Respuesta primaria a la primera exposición al antígeno, caracterizada por elevación

transitoria de anticuerpos AgM. En tal reacción el antígeno proporciona la información
necesaria para la "memoria" a dichos anticuerpos, de tal forma que la nueva exposición a
dicho antígeno produciría reconocimiento y rechazo al mismo. b) Respuesta secundaria que
ocurre con segunda exposición al antígeno, usualmente es una respuesta inmune severa
con aparición principalmente de IgG que una vez producido pueden persistir en la
circulación en niveles detectables por muchos años, incluso toda la vida o en algunos casos
desaparecer rápidamente después de su aparición. No todas las personas responden a
determinados antígenos, algunos no responden aún con exposición repetida y prolongada
a determinados antígenos y son incapaces de formar anticuerpos (Ej. 30o/o de personas
Rho (D) negativo, aún con múltiples exposiciones a eritrocitos no producen anti-D)1.

EL SISTEMA RH. Fue descubierto por Landsteiner y Wiener en 1937, inyectando eritrocitos
lavados del mono macacus rhesus en conejos por lo que se demostró la existencia de otro
aglutinógeno denominado factor Rh, este sistema de clasificación sanguínea consiste en la
existencia o no de diversos aglutinógenos (factores Rh) en los glóbulos rojos. El termino Rh
positivo significa que está presente el antígeno Rh en sus hematíes ,por el contrario si
carece de este se dice que es Rh negativo, hay 6 tipos de Rh C,D,E,c,d,e, pero solo los
tipos C, D Y E, so antígenos bastante fuertes, como para originar una reacción anticuerpo
Rh, de este modo una persona que contenga estos antígenos a la combinación de éstos
será Rh positiva y la persona que solo tenga los antígenos c, d y e serán Rh negativo, Se
puede desencadenar una respuesta inmune cuando se hace una transfusión de sangre de
un individuo Rh+ a uno Rh 1.

1. Aguirre E. et al. Alelismo Múltiple “Hemoclasificación”. 2014. Fuente: Google Scholar

2. Arbeláez Carlos. Sistema de grupo sanguíneo ABO. Módulo 22, numero 3. Editorial médica Colombiana S.A, 2009.
MATERIALES Y EQUIPOS

Microscopio
Portaobjetos
Palillos
Guantes
Alcohol
Algodón
Lancetas
Muestra sanguínea

REACTIVOS
Antisueros sanguíneos: anti A, anti B, y anti Rh.

PROCEDIMIENTO
Con ayuda de un algodón previamente empapado de alcohol, realice asepsia y antisepsia
en el dedo índice del voluntario (compañero), posterior a ello tome una lanceta y puncione
el dedo dejando salir sangre del dedo pinchado, la primera gota no se utiliza. Luego en un
portaobjetos limpio, deje caer 3 gotas de sangre separadas, en la primera gota adicione
suero anti A, en la segunda agregue suero anti B, y en la tercera suero anti D(Rh). Mueva
suave el portaobjeto, o mezcle con un palillo y espere un corto tiempo hasta que aprecie
alguna reacción. Anote y describa sus observaciones con sus explicaciones. Observe en el
microscopio tanto la fracción aglutinada y la no aglutinada. Anote sus apreciaciones
y explique desde el punto de vista de receptores la razón de lo acontecido.

Figura 1. Toma de muestra sanguínea, tomado de Google

Figura 2. Agregación de sueros anti ABO, tomado de Google

 Figura 3. Reacción de aglutinación ABO, tomado de Google

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
¿Plasme un cuadro en donde describa los diferentes grupos sanguíneos, sus
donantes y donadores? ¿Además, indique la presencia o ausencia de antígenos en
cada tipo sanguíneo?
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¿Investigue sobre otros grupos sanguíneos y su fundamento?

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¿Por qué si hay otros grupos sanguíneos solo se utiliza el sistema ABO y Rh?
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¿Describa la estructura para la parte glucosídica de cada una de las glicoproteínas

que se encuentran en la membrana de los glóbulos rojos?
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¿Qué son las aglutininas y aglutinógenos?

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¿Qué es la eritroblastosis fetal? ¿Cuándo y porque se presenta, cuál es su

tratamiento?
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