INVESTIGACIÓN DEL ALCOHOL ETÍLICO

Integrantes: Diana Barros. Docente: BQF. Mónica Narvaez. Universidad de Cuenca,

Facultad de Ciencias Químicas, Carrera de Bioquímica y Farmacia. Asignatura:
Toxicología, Cuenca – Ecuador, Fecha de entrega:30/10/2022.
1. Título: Investigación del Alcohol Etílico
2. Objetivos:
● Realizar la cuantificación de etanol en una muestra sanguínea mediantes el
método de Microdifusión y Destilación.
● Comparar el resultado obtenido con la tabla de ebriedad por alcohol etílico y
determinar su grado de alcoholemia,
● Comparar el resultado cualitativo y valorar la alcoholemia.
3. Introducción.
El etanol es un líquido claro, incoloro, muy inflamable, de olor característico, muy
hidrosoluble, el cual presenta un punto de ebullición de 78 ºC. El proceso para obtener
esta sustancia es mediante la fermentación anaerobia de carbohidratos. Las bebidas
alcohólicas tienen como compuesto principal el alcohol etílico, se clasifican en: bebidas
fermentadas (contenido alcohólico 4-20% v/v), como el vino, sidra y cerveza; y bebidas
destiladas (contenido alcohólico >43% v/v ), como el ron, coñac, etc. Cabe mencionar
que se lo considera como medicina (en casos de usarlo como antídoto por intoxicación
con etanol) o droga de abuso (Velasco, 2014).
3.3 Toxicocinética
Su absorción se da principalmente en el intestino delgado, sin embargo el vaciamiento
gástrico y el ritmo de absorción intestinal son dependientes de diversos factores. El ritmo
de absorción se acelera proporcionalmente al aumento de [alcohol] ingerido, (hasta 40%
max), después hay retraso en el vaciamiento gástrico con la consecuente lentificación de
la absorción, este efecto también ocurre en ingesta de alcohol acompañado de alimentos
(Velasco, 2014).
Se distribuye por todo el organismo, la concentración máxima es en tejidos ricos en
lípidos, sufre metabolismo hepático y sólo el 2% es eliminado por la orina y pulmones
sin ser biotransformado. En la eliminación renal el alcohol se difunde a través del
glomérulo y no sufre proceso de reabsorción tubular ( [alcohol] en orina depende de la
alcoholemia) (Moreyra, 2019). La excreción pulmonar del etanol como mecanismo de
eliminación es de gran importancia desde el punto de vista analítico y judicial, ya que el
análisis se fundamenta en determinar etanol presente en el aire espirado (etanol presente
en 2000 ml de aire espirado equivale al que hay en 1 ml de sangre arterial) (Velasco,
2014). La vía principal del metabolismo hepático del etanol es mediante la ADH. El
etanol pierde su hidrógeno, genera equivalentes reducidos (NADH) y es oxidado a
acetaldehído. Cada uno de los metabolitos es responsable de una variedad de alteraciones
que incluyen disfunciones del metabolismo proteico y lipídico (Moreyra, 2019).

3.4 Toxicodinamia
El etanol es un depresor no selectivo del SNC. Inhibe el transporte activo de Na+, K+,
aminoácidos, catecolaminas, etc.; además disminuye la actividad ATP-asa de membrana
sodio-potasio dependiente, disminuye la utilización de ATP y el consumo de oxígeno.
Potencia los efectos inhibitorios del GABA en el SNC e inhibe al receptor NMDA de
aspartato-glutamato y por ende, reduce la actividad glutamatérgica. El alcohol etílico
tiene acciones farmacológicas como producción de un fenómeno de inhibición de
inhibiciones con: euforia, elevación del tono vital, mejora superficial de la asociación de
ideas, disminución del autocontrol y de la autocrítica, reducción de la visión,
incoordinación muscular y alteraciones de los reflejos, disminución de la sensación de
fatiga, disminución del umbral convulsivo. Potenciación de fármacos depresores
centrales, cierto efecto hipnótico y analgésico, en dosis más altas se produce depresión
del SNC que pueden llegar al coma y depresión respiratoria (Velasco, 2014),

3.5 Dosis tóxica.

La dosis tóxica del etanol es variable con las circunstancias individuales del sujeto. La
graduación alcohólica se expresa en mililitros de alcohol por 100 mililitros de líquido
(%v/v) (Moreyra, 2019)

DOSIS TÓXICA DE ALCOHOL ETÍLICO

<30 mg/100 ml sangre Sobrio

30-50 mg/100 ml sangre Intoxicación ligera

50-100 mg/100 ml sangre Euforia

100-150 mg/100 ml sangre Excitación, embriaguez

150-200 mg/100 ml sangre Confusión, borrachera

200-300 mg/100 ml sangre Estupor

300-400 mg/100 ml sangre Intoxicación severa, coma

>400 mg/100 ml sangre Posible muerte

>500 mg/100 ml sangre Muerte segura

Tabla 1: Datos toxicocinéticos del etanol. Referencia: (Velasco, 2014).

El etanol puede dar lugar a una intoxicaciones:

● Intoxicación común: por ingestión de bebidas alcohólicas en cantidad variable,
puede ocasionar accidentes tóxicos agudos o crónicos.
● Intoxicaciones agudas: embriaguez, de escaso interés clínico, pero gran
importancia criminalística y médico-legal.
● Intoxicaciones crónicas: de interés clínico y psiquiátrico, origina síntomas
somáticos de gran trascendencia (gastritis, dispepsias, miocarditis, cirrosis, etc.),
 así como a cuadros psíquicos de variada entidad (delirium tremens, alucinosis
alcohólica, celotipia, demencia, etc.).
● Intoxicación profesional: debida a inhalación de vapores de alcohol en ambientes
de trabajo (refinerías, bodegas y fábricas de sombreros de fieltro, de seda artificial
y de pólvora) (Paniagua, 2020).

3.6 Métodos empleados.

MICRODIFUSIÓN: se realiza en cámara de Conway, la cual posee un C.E en el que se
coloca la muestra de sangre a analizar y el agente liberador carbonato de potasio (𝐾2𝐶𝑂3
), y un C.I donde se coloca el agente atrapante una disolución sulfúrica de dicromato de
potasio. En este caso, el etanol presente en la muestra, es liberado y difunde en el seno de
la celda de Conway, donde se produce la captación y la reacción de oxido-reducción entre
el etanol y el dicromato, ocurriendo la remoción completa del primer compuesto al cabo
de una hora. La reacción de reducción del dicromato a cromo III en el C.I de la cámara de
Conway, conduce a un fenómeno físico-químico que se observa por la desaparición del
color amarillo de la disolución inicial y aparición de un color verde azulado debido al
producto formado, dicho fenómeno nos indica la presencia del etanol en la muestra de
sangre (Caporal, 2015).
Reacción:
2𝐾2𝐶𝑟2𝑂7 + 8𝐻2𝑆𝑂4 + 3𝐶𝐻3𝐶𝐻2𝑂𝐻 ⇒ 2𝐾2𝑆𝑂4 + 2𝐶𝑟2(𝑆𝑂4)3 + 3𝐶𝐻3𝐶𝑂𝑂𝐻 + 11 𝐻2𝑂

Amarillo Verde Azulado

Muestra: sangre entera, plasma, suero, orina u homogeneizado de tejido. Para sangre,
usar sangre entera, de preferencia con fluoruro de sodio como anticoagulante. También se
emplea heparina o EDTA. Puede usarse suero o plasma, pero sus valores representarán
1,18 veces los valores de la sangre total (Flanagan et al., 1996).
Observaciones: La presencia de acetaldehído o alcohol isopropílico da lugar a reacciones
similares con formación de ácido acético y acetona respectivamente, con la consiguiente
reducción del dicromato de potasio. La posibilidad de que ocurran estas reacciones le
restan especificidad al método, siendo por ello conveniente informar los resultados de las
determinaciones como “contenido en sustancias reductoras volátiles”. Ante la sospecha
de estar frente a una intoxicación por otro alcohol o sustancias reductoras deben
efectuarse previamente reacciones de identificación de estos compuestos mediante
reacciones específicas (Flanagan et al., 1996).
Interpretación: La coloración del C.I es un indicador de la presencia o ausencia de
alcohol en la muestra analizada y así mismo puede otorgarnos la concentración.
Color del reactivo de Anties Concentración en g% Grados de positividad

Amarillo canario 0.0 Negativo

Amarillo verde amarillento 0.08 Positivo +

Verde amarillento 0.15 Positivo ++

Verde amarillento verde 0.23 Positivo +++

Verde 0.30 Positivo ++++

Azul 0.40 Positivo (puede ocasionar muerte)

Tabla 2: Interpretación de la concentración de etanol en sangre. Referencia: (Bello et al., 2022).

DESTILACIÓN: Técnica empleada en la separación de sustancias miscibles, se

fundamenta en hervir una disolución, y condensar después los vapores que se han
producido por enfriamiento. El componente más volátil se recoge por condensación del
vapor y el compuesto no volátil quedará en el matraz de destilación (Área Binaria, 2018).
MÉTODO DE TRUHAUT BOUDENE: Es un semi-micrométodo basado en la
reducción de un reactivo nitrocrómico por el alcohol destilado de la sangre; la reducción
tiene lugar en frío, lo que permite que se desarrolle de manera uniforme (González,
2008).
Ilustración 1: Determinación de etanol en sangre total: Referencia: (Área Binaria, 2018).
4. Procedimiento.
Ilustración 2: Flujograma del procedimiento de la práctica: Determinación del Etanol
por microdifusión y titulación. Referencia: Autor.
Ilustración 3: Flujograma del procedimiento de la práctica: Determinación del Etanol
por destilación y titulación. Referencia: Autor.
5. Datos y resultados.
 TIPO DE MUESTRA

Muestra de sangre entera de un individuo que ha ingerido alcohol etílico

PRUEBAS CUALITATIVAS

PRUEBA MUESTRA BLANCO

Microdifusión AMARILLO-NEGATIVO NEGATIVO

Destilación AMARILLO-NEGATIVO -

TITULACIÓN DE LA MUESTRA EXTRAÍDA POR MICRODIFUSIÓN

Datos 𝑉𝑜𝑙1𝑡𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 (𝑛1) = 0, 6 𝑚𝑙

𝑉𝑜𝑙2𝑡𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 (𝑛2) = 0, 9 𝑚𝑙
𝑛 = 𝑛1 + 𝑛2 = 1, 5 𝑚𝑙
𝑁 = 2 𝑚𝑙
𝑚𝑙 𝐾2𝐶𝑟2𝑂7 (𝑁)
2 𝑚𝑙
𝐾= 𝑚𝑙 𝑇𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 (𝑛)
= 1,5 𝑚𝑙
= 1, 33
𝐹𝑐 = 0, 9 𝑚𝑔 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 0, 5 𝑚𝑙

Cálculo 𝑁−𝑛𝐾𝑇𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜

𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = 𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 𝐹𝑐
2 𝑚𝑙−(1,5 𝑚𝑙 𝑥 1,33)
𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = [ 0,5 𝑚𝑙
]𝑥 0, 9 𝑚𝑔
𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = 0, 009

𝐾2𝐶𝑟2𝑂7 0, 0869 𝑁 = 1 𝑚𝑔 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙

294,16
𝑚𝐸𝑞𝐾 𝐶𝑟 𝑂 = 6
= 49, 026
2 2 7

1𝑁 49, 026 𝑔𝐾 𝐶𝑟 𝑂 1000 𝑚𝑙

2 2 7

0, 086 𝑁 𝑥1 = 4, 216 𝑔𝐾 𝐶𝑟 𝑂 1000 𝑚𝑙

2 2 7

0, 086 𝑁 𝑥2 = 0, 00426 𝑔𝐾 𝐶𝑟 𝑂 1 𝑚𝑙
2 2 7

1 ml 𝐾2𝐶𝑟2𝑂7 = 1 𝑚𝑔 𝐸𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
2(294, 16) = 3(𝐸𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙)
588, 33 𝑔 = 3(46𝑔) = 138 𝑔
0, 0042 𝑔 = 0, 0009 𝑔

0,0009 g = 0,9 mg etanol

TITULACIÓN DE LA MUESTRA EXTRAÍDA POR DESTILACIÓN

 Datos 𝑉𝑜𝑙1𝑡𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 (𝑛1) = 6, 6 𝑚𝑙
𝑉𝑜𝑙2𝑡𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 (𝑛2) = 1, 7 𝑚𝑙
𝑛 = 𝑛1 + 𝑛2 = 8, 3 𝑚𝑙
𝑁 = 10 𝑚𝑙
𝑚𝑙 𝐾2𝐶𝑟2𝑂7 (𝑁)
10 𝑚𝑙
𝐾= 𝑚𝑙 𝑇𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜 (𝑛)
= 8,3 𝑚𝑙
= 1, 2048
𝐹𝑐 = 0, 9 𝑚𝑔 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 2 𝑚𝑙

Cálculos 𝑁−𝑛𝐾𝑇𝑖𝑜𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑑𝑖𝑜

𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = 𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 𝐹𝑐
10 𝑚𝑙−(8,3 𝑚𝑙 𝑥 1,2048)
𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = [ 2 𝑚𝑙
]𝑥 0, 9 𝑚𝑔
𝑚𝑔𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙/𝑚𝑙 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 = 0, 000072
Tabla 2: Datos y resultados. Referencia: Autor.
6. Discusiones.
El etanol es la principal droga de consumo social, dos tercios de todos los abusos de
sustancias están relacionados con el alcohol, siendo la sustancia psicoactiva de mayor
consumo en el mundo. El informe mundial sobre el consumo de drogas de la ONU,
menciona que en el mundo aproximadamente 2.600 millones de personas consumen
alcohol ya sea ocasionalmente, habitualmente, como abusivo o adicción. El diagnóstico
de estado de embriaguez es un problema médico-legal, más aún si está ligado a hechos
delictivos, los métodos para establecer dicho estado de ebriedad son: clínicos, estudios
colorimétricos, cromatografía de gases, cabe mencionar que dos de estos métodos, si bien
son de alta sensibilidad, también son costosos y requieren de alta capacitación para su
manejo. Por ello en esta práctica se utilizó el método de microdifusión de Conway, que
basa en un sistema cerrado en el cual el etanol es separado de la matriz biológica,
mediante la acción de calor y un agente liberador, para ser absorbido, en otro
compartimento de la cámara de Conway, donde el etanol reacciona con el reactivo de
Antiés mediante un proceso de oxido-reducción, dando una serie de colores que van del
amarillo (no hay reacción), al azul, dependiendo de la cantidad del etanol que se
encuentre en la muestra. También se empleó la técnica de extracción de etanol por
destilación simple la cual se basa en la reducción del reactivo nitrocrómico por el etanol,
y se compara con la tabla de embriaguez. Posteriormente se procede a titular el reactivo
nitrocrómico sobrante con tiosulfato mediante yodometría.
7. Conclusión.
Se realizó la extracción del alcohol etílico de una muestra de sangre obtenida de un
paciente que presentó sospecha de consumo de alcohol mediante el método de
microdifusión y destilación, al comparar los resultados obtenidos en cada procedimiento
y compararlos con la tabla de ebriedad, se determinó que: a)Muestra extraída por
microdifusión fue amarillo indicando resultado negativo: y b)Muestra extraída por
destilación: negativa también. Posteriormente mediante titulación se cuantificó la
concentración de alcohol en sangre (alcoholemia), para la muestra a y b. Se concluye
indicando el analisis realizado se considera como negativo para la determinación de
alcohol en sangre, al mantener una coloración amarillo, y la posterior cuantificaión por
yodometría, lo que indica que nuestro paciente no presenta intoxicación de etanol en
sangre, mostrando así una concentración de 0,009 mg/ml y 0, 000072 mg/ml
respectivamente , de acuerdo con la tasa de alcoholemia permitida en sangre que debe
estar por debajo de 0,5 g/L, sin embargo, la determinación de etanol por esta técnica debe
considerarse como una prueba presuntiva, debido a su baja especificidad.

8. Bibliografía.

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wnload/farmacologia-y-toxicologia-del-alcohol-etilico-o-etanol-ing-yessenia-mal
donado.pdf

9. Anexos.

Anexo 1: Resultados de la Microdifusión: Blanco y Muestra (Negativo-Amarillo).

Referencia: Autor.
 Anexo 2: Resultados de Destilación, negativo-amarillo . Referencia: Autor.

Anexo 3: Resultados de la titulación de la muestra extraída por destilación. Referencia:

Autor.
Anexo 5: Resultados de la titulación de la muestra extraída por microdifusión..
Referencia: Autor.

Anexo 5: Equipo de destilación. Referencia: Autor.