DETERMINACIÓN DE ETANOL EN MUESTRAS DE SANGRE

El alcohol es la principal droga de consumo por parte de la sociedad. Dos

tercios de todos los abusos de substancias están relacionadas con el alcohol.
(Giannuzzi, 2006) El alcohol etílico es la sustancia psicoactiva de mayor
consumo en el mundo. De acuerdo con el informe mundial sobre el consumo de
drogas de la ONU del 2009, se estima que en el mundo cerca de 2.600 millones
de personas lo consumen ya sea en forma ocasional, habitual, abusiva o
adictiva. En Ecuador, se estima que el 80.7% de los estudiantes universitarios
son consumidores habituales de alcohol etílico. El etanol es un alcohol de gran
importancia toxicológica dada su acción farmacológica depresora del sistema
nervioso central, que cuando se consume en forma continuada y frecuente
produce efectos adversos agudos y crónicos en la salud humana. En
intoxicación aguda se pueden presentar alteraciones en el sistema
gastrointestinal, endocrino y en el equilibrio ácido básico. (uría 2004) El
consumo de etanol también se ha asociado con la presentación de varias
alteraciones sociales como incremento en los índices de violencia intrafamiliar,
violencia general, actos delictivos y accidentes de tránsito.

Las vías de penetración posibles de los alcoholes son la digestiva, la

respiratoria, y la absorción a través de la piel, es absorbido a partir de los 30 a
60 minutos y hasta 180 minutos, mediante un mecanismo de difusión pasiva,
pasando al torrente sanguíneo. En ayunas, la absorción es más rápida en
duodeno y yeyuno. Con el estómago lleno, la absorción se retarda. El alcohol,
una vez en el torrente sanguíneo, pasa por el hígado, alcanzando su mayor
concentración alrededor de los 30 minutos en la circulación sistémica
(Epetto 2002). Durante la absorción y la distribución se va produciendo también
la biotransformación para luego producirse la biotransformación como tal y
finalmente la eliminación. En el organismo, el alcohol sufre un proceso de
oxidación, que se desarrolla exclusivamente en el hígado, transformándose el
etanol en acetaldehído y posteriormente en acetato por medio de la cadena
enzimática. Los metabolitos se excretan por vía pulmonar, vía urinaria, por la
saliva y por la leche en época de lactancia. (Campos, 2005) Existen varios
métodos para determinar la concentración de alcohol en un individuo como
pruebas en sangre, orina y aliento, el utilizado en nuestra practica fue la
determinación de alcohol en sangre por el método de microdifusión que se
realiza en cámaras de Conway, las cuales poseen, en el compartimiento
externo, muestra y agente liberador (CO3K2) y, en el interno, el agente
atrapante Cr2O7K2 + H2SO4 0,01N. En este caso, se produce la captación y
oxidación del etanol hacia ácido acético, forzándose la remoción completa del
primer compuesto al cabo de un tiempo y temperatura previamente
determinados, donde el dicromato, de color rojo anaranjado, oxida el etanol a
acetaldehído y es reducido, a su vez, a cromo (III), de color verde, para luego
poder ser medida la absorbancia en un espectrofotómetro UV.

Dentro de los tóxicos volátiles, los alcoholes etanol (alcohol etílico) y metanol
son sustancias de importancia toxicológica, dada su acción farmacológica
depresora del sistema nervioso central (SNC) y el abuso creciente del consumo
de bebidas alcohólicas. Esto último presenta importancia médico - legal debido
a que los individuos alcoholizados pueden ser causantes de trastornos y
accidentes de los cuales son imputables. Las vías de penetración posibles de
los alcoholes son la digestiva, la respiratoria, y la absorción a través de la piel.
En el caso del etanol, la intoxicación más frecuente ocurre cuando el individuo
ingiere cantidades excesivas de esta sustancia por el consumo de bebidas
alcohólicas fermentadas y/o destiladas. Los tipos de muestras generalmente
 usados para estas determinaciones son: sangre (alcoholemia), orina, otros
fluidos biológicos, vísceras, alimentos, etc.

ALCOHOL ETÍLICO

es un alcohol que en condiciones normales de presión y temperatura se

presenta como un líquido incoloro e inflamable con una temperatura de
ebullición de 78,4 °C.

Es una sustancia psicoactiva y es el principal tipo de alcohol presente en

las bebidas alcohólicas, como el vino (alrededor de un 13 %), la cerveza (5 %),
los licores (hasta un 50 %) o los aguardientes (hasta un 70 %)

 FARMACOCINÉTICA

Después de consumir el alcohol la absorción tiene lugar sobre todo en el

intestino delgado, pero el vaciamiento del estómago y el ritmo de absorción
intestinal dependen de varios factores. El ritmo de absorción se acelera
proporcionalmente al aumento de la concentración alcohol ingerido, hasta un
máximo del 40%, a partir del cual aparece un retardo en el vaciamiento gástrico
con la consecuente
identificación de la absorción, efecto que también aparece en la ingestión de
alcohol acompañado de alimentos.
Una vez absorbido se distribuye por todo el organismo siendo máxima la
concentración en tejidos ricos en lípidos, sufre un metabolismo hepático y solo
el 2% es eliminado sin biotransformarse por la orina y por los pulmones. La
excreción pulmonar del etanol como mecanismo de eliminación tiene escaso
interés. Pero desde el punto de vista analítico y judicial es de gran importancia,
pues los métodos de análisis incruento se basan en la determinación del etanol
presente en el aire espirado. Se ha calculado que el etanol presente en 2000 ml
de aire espirado equivale al que hay en 1 ml de sangre arterial.
El etanol se metaboliza por oxidación no microsómica en el citosol y por vía
microsómica. La enzima alcohol deshidrogenasa transforma el etanol en
acetaldehído y es inhibida por el 4-metilpirazol o fomepizol. La enzima
acetaldehído deshidrogenasa transforma el acetaldehído en ácido acético que
en forma de acetil CoA entra en el ciclo de Krebs, sirve para la formación de
cuerpos cetónicos, síntesis de colesterol y derivados (hormonas
corticosuprarrenales y sexuales, vitamina D, ácidos biliares), síntesis de ácidos
grasos y reacciones de conjugación de fármacos (N-acetilación de
sulfonamidas, isoniacida, ácido p-aminosalicílico, etc.). El acetaldehído
deshidrogenasa es inhibida por el desulfuran, el dietilditiocarbamato, la
carbimida cálcica citratada, el metronidazol, los nitrofuranos, las sulfonilureas y
algunas cefaloesporinas. La cinética de desaparición plasmática del etanol es
de orden cero y es de 8 a 12 ml por hora.

Se ha sugerido que dosis elevadas de fructosa aumentan el catabolismo del

alcohol.

Las concentraciones sanguíneas de alcohol logradas en situaciones usuales de

la vida social, oscilan entre 50 y 75 mg por 100 ml de sangre. Con esta
concentración el estado subjetivo suele ser de tranquilidad agradable y un ligero
grado de sedación.

Suelen aparecer signos de borrachera por concentraciones de 100 a 200 mg

por 100 ml y se observan intoxicaciones intensas con niveles superiores a 200
mg por 100 ml; con concentraciones de 400 mg por 100 mililitros se produce
estupor, coma o ambos; y las concentraciones superiores a 500 mg por 100 ml.
de sangre suelen causar la muerte.

 FARMACODINAMIA
El etanol es un fármaco depresor no selectivo del Sistema Nervioso Central,
prácticamente se comporta como un anestésico general inhalatorio, produce el
fenómeno de la parálisis descendente de acuerdo con la ley de Hughlings-
Jackson, como es una sustancia mucho más hidrosoluble que los anestésicos
inhalatorios, el periodo de inducción de la narcosis se prolonga mucho y el
periodo quirúrgico propiamente dicho prácticamente coincide con la fase de
parálisis respiratoria, por ello el etanol no se ha utilizado como fármaco
anestésico.
El etanol es el fármaco estabilizador de membrana, disolviéndose en un
componente lipoideo, inhibe el transporte activo de sodio, potasio, aminoácidos,
catecolaminas,
etc.; además disminuye la actividad ATP-asa de membrana sodio-potasio
dependiente, disminuye la utilización de ATP y el consumo de oxígeno. Al igual
que otros depresores no selectivos del Sistema Nervioso Central como
barbitúricos y la fenitoína, el etanol potencia los efectos inhibitorios del ácido
gamma amino butírico (GABA) en el Sistema Nervioso Central e inhibe al
receptor NMDA de aspartatoglutamato y reduce por lo tanto la actividad
glutamatérgica, las interacciones con otros neurotransmisores como serotonina,
catecolaminas y péptidos están menos estudiadas.

 TOXICIDAD

Las cantidades moderadas de alcohol producen efectos bien conocidos:

reducción de la normal inhibición que se suele ejercer sobre la conducta y el
lenguaje, euforia, sentimiento de confianza en sí mismo y hacia los demás,
disminución de la sensación de fatiga. Son estos efectos, en un grado más o
menos variable, los que hacen que el alcohol sea un elemento apetecible y
aceptado dentro de la sociedad.
Fácilmente se pasa de la incoordinación muscular y del lenguaje, a la reducción
de la ideación y capacidad mental. Al aumentar el grado de intoxicación puede
desarrollarse un tipo de conducta incontrolada cuyas manifestaciones pueden
no ser previsibles, aunque a veces depende de la personalidad individual.
Aunque los síntomas y signos de la intoxicación aguda son bien conocidos y se
descubren fácilmente;
reacción de soledad, compasión de sí mismo, o de confidencia, frente a
reacciones violentas o depresivas con la aparición de disartria, ataxia, y
labilidad emocional.

 INTERACCIONES

El etanol potencia a los fármacos depresores del Sistema Nervioso

Central (benzodiacepinas, barbitúricos, neurolépticos, hidrato de cloral, etc.),
antihistáminicos H-1, antiepilépticos, etc.

ALCOHOLEMIA

representa el volumen de alcohol que hay en la sangre y se mide en gramos de

alcohol por cada litro de sangre (g/l) o su equivalente en aire espirado.

DETERMINACION DE ALCOHOLEMIA

 MÉTODOS ANALÍTICOS

Los métodos analíticos empleados para determinar la alcoholemia pueden

clasificarse en dos grupos:

1. LOS MÉTODOS TRADICIONALES

 se basan en reacciones químicas de oxidación o formación de
alcohoxiderivados. Entre ellos están aquellos que utilizan la oxidación
cuantitativa del alcohol por medio del dicromato, permanganato o ácido
ósmico. Tienen el inconveniente de no ser específicos. Las sustancias que
interfieren pueden ser eliminadas o su efecto minimizado

2. LOS MÉTODOS INSTRUMENTALES

tienen la ventaja de su mayor especificidad y sensibilidad. Entre ellos están los

métodos cromatográficos, y los métodos enzimáticos, entre los principales. Los
métodos cromatográficos no requieren tratamiento previo de la muestra, aparte de
una precipitación de las proteínas. En algunos casos, puede utilizarse
directamente la sangre diluida. La gran sensibilidad de los detectores permite
emplear la técnica "head-space", en la cual se determina el etanol que haya pasa·
do de la sangre entera a la fase gaseosa de un recipiente sellado con un seplum,
después de un tiempo de estabilización. Los métodos enzimáticos se basan en la
oxidación del etanol a acetaldehído, en presencia de la enzima alcohol·
deshidrogenasa y la coenzima nicotinamida (NAD+), con la consiguiente reducción
a NADH, que se determina por espectrofotometría.

MUESTREO ADECUADO PARA ANÁLISIS DE ALCOHOL

El énfasis dado a la adecuada forma de recolectar muestras para análisis de

laboratorio es escaso, sin embargo, esto puede ser solventado si nos volcamos a
recabar la información correcta de las fuentes apropiadas a nuestra disposición.
Como se consigna en la mayoría de la literatura, la principal muestra a obtener la
constituye la sanguínea, la cual debe ser preferentemente tomada de la vena
femoral hecho que se explicará con más detalle al avanzar la lectura.
Adicionalmente es preferible tomar muestras de otros sitios que servirán como
 control, tales como orina y humor vítreo.3,7,8 Los tubos utilizados para la
recolección de estas muestras deben ser preparados con anterioridad y deben
contener fluoruro de sodio o potasio al 1-2% en adecuada cantidad como
preservante e inhibidor enzimático de la fermentación a alcohol.

BIBLIOGRAFÍA

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https://www.academia.edu/9599327/DETERMINACION_DE_ALCOHOL_
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http://www.binasss.sa.cr/revistas/mlcr/v2n3/art6.pdf